甲型H1N1流感病毒临床实验室诊断策略

目的 探讨用于甲型H1N1流感患者临床实验室诊断的策略.方法 采用Dot-ELISA法检测流感患者中的甲型流感病毒的抗原,初步明确为甲型流感或排除非甲型流感;采用real-time RT-PCR法检测甲型流感病毒抗原阳性患者中的甲型H1N1流感病毒特异性核酸,进一步确定甲型H1N1流感病毒.结果 对44 448例在西安地区就诊的发热伴有流感样症状者的鼻咽腔取分泌物进行甲型流感病毒抗原筛查,其阳性筛检率为28.25%;对甲型流感病毒抗原筛查阳性的17 714例患者进行甲型H1N1流感病毒核酸检测,其阳性检出率为41.92%.结论 首先用甲型流感病毒抗原筛查,排除非甲型流感病毒;进而在甲型流感病毒的范围内进行甲型H1N1流感病毒的检测,即加快了甲型流感病毒的排查效率,又减轻了甲型H1N1流感病毒核酸检测的压力;进而又减轻了大部分非甲型H1N1流感患者核酸检测的经济负担.该文认为该检测策略为甲型H1N1流感病毒的临床实验室诊断提供了参考,可为甲型H1N1流感病毒感染的控制、诊断,以及合理用药和针对性治疗提供依据.     

荧光定量PCR反应监测发热患者甲型H1N1流感病毒感染

目的通过荧光定量PCR反应监测发热患者甲型H1N1流感病毒感染情况,探讨该方法在流行性感冒检测诊断中的意义。方法采用WHO推荐的荧光定量PCR方法对3361例发热患者咽拭子标本进行病毒核酸检测,确定甲型H1N1流感感染患者。结果共检测有流感样症状患者2156例,甲型流感病毒核酸阳性1176例,阳性率35.0%,其中甲型H1N1流感病毒核酸阳性599例,阳性率17.8%。14岁以下儿童甲型H1N1流感病毒核酸阳性283例,占甲型H1N1流感病毒核酸阳性总数的47.2%。结论实时荧光定量PCR反应快速、准确,适用于H1N1流感病毒感染的早期诊断并可作为监测手段在临床广泛开展,为控制疫情的蔓延发挥了重要作用。     

分析甲型H1N1流感患者体内单核细胞的临床意义

目的探讨甲型H1N1患者单核细胞检测的临床意义,分析其对甲型H1N1流感起到的辅助诊断作用。方法90例健康人作对照,对90例甲型H1N1流感患者血常规单核细胞及单核细胞百分率进行定量检测,并对结果进行统计学分析。结果90例H1N1流感患者单核细胞计数及单核细胞百分率均高于健康对照组,P0.05或P0.01。结论单核细胞数及百分率的增高对甲型H1N1流感可提供辅助诊断依据,是临床医生观察病情的有效指标。     

实时荧光RT-PCR检测不同标本中甲型H1N1流感病毒核酸的临床意义

目的通过检测甲型H1N1流感感染患者不同标本中甲型H1N1流感病毒核酸,了解其对甲型H1N1流感的快速诊断及病程进展的关系。方法 118例甲型H1N1流感患者,采用实时荧光逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)分别检测发病48 h后和(或)恢复期咽拭子、血浆及下呼吸道分泌物中甲型H1N1流感病毒核酸。结果 118例甲型H1N1流感患者发病48 h后咽拭子甲型H1N1流感病毒核酸阳性;23例(23/40)重症患者下呼吸道分泌物中甲型H1N1流感病毒核酸阳性;15例(15/40)重症患者血浆中检测到甲型H1N1流感病毒核酸。结论实时荧光RT-PCR方法可以快速检测甲型H1N1流感病毒感染,血浆中甲型H1N1流感病毒核酸阳性可能是重症患者的标志。     

甲型H1N1流感C反应蛋白动态变化分析

目的探讨甲型H1N1流感不同临床类型及不同阶段C反应蛋白(CRP)动态变化特征。方法回顾性分析2009年5月10日-2010年1月18日实验室确诊的271例甲型H1N1流感住院患者不同临床类型、疾病不同阶段CRP动态变化情况。结果甲型H1N1流感患者感染初期CRP较正常升高,且升高程度随着病情的加重而更明显;CRP在治疗第3天即明显下降或接近正常,其动态改变在不同疾病严重程度组间无明显差异;有脏器功能损害者CRP较无脏器功能损害者明显升高;多个脏器损害CRP较单一脏器损害组明显升高。结论甲型H1N1流感CRP升高程度可间接反映其疾病严重程度和脏器功能损害多少。     

甲型(H1N1)流感患者外周血细胞免疫水平的相关性研究

目的探讨甲型(H1N1)流感患者外周血细胞免疫水平。方法应用流式细胞仪检测30例确诊甲型(H1N1)流感抗体阳性患者外周血T淋巴亚群及自然杀伤(NK)细胞,并以45例普通感冒患者的检测结果作为对照,比较2组之间的差异。结果甲型(H1N1)流感患者外周血CD3+细胞百分比与对照组比较差异无统计学意义(P0.05),CD4+细胞、NK细胞百分比及CD4/CD8低于对照组(P0.05),CD8+细胞百分比高于对照组(P0.05)。结论甲型(H1N1)流感患者存在细胞免疫功能异常,可能为甲型(H1N1)流感病毒变异株造成患者体内免疫功能改变的原因之一。     

双重荧光定量RT-PCR快速检测甲型和甲型H1N1流感病毒

目的建立双重荧光RT-PCR快速检测方法,用于甲型和甲型H1N1流感病毒的同时检测和鉴别诊断。方法针对甲型流感病毒M基因和甲型H1N1流感病毒NA基因的保守区序列分别设计特异性引物和Taqman探针,建立优化双重荧光RT-PCR反应体系,评价所建双重RT-PCR反应体系的特异性、敏感性和稳定性,并应用于疑似流感或甲型H1N1流感含漱液标本检测。结果该方法对甲型、甲型H1N1流感病毒检测具有高度特异性,检出限分别为0.01 TCID50和0.1 TCID50,具有较好的稳定性。可从疑似流感或甲型H1N1流感患者含漱液中直接检测到流感病毒核酸。结论本研究建立的双重荧光定量RT-PCR可以同时准确检测甲型和甲型H1N1流感病毒,灵敏度高,稳定性好,是一种快速检测流感病毒的新方法。     

285例甲型H1N1流感患者白细胞总数及分类结果分析

目的探讨外周血白细胞总数及分类计数在甲型H1N1流感患者临床诊断中的价值。方法对285例临床确诊为甲型H1N1流感患者的外周血白细胞总数及分类计数进行统计、分析。结果 285例甲型H1N1流感患者中,白细胞总数正常及降低者273例（95.8%）,中性粒细胞分类计数正常者250例（87.7%）,淋巴细胞分类计数降低者171例（60%）,单核细胞分类计数增高者242例（84.9%）。结论甲型H1N1流感患者外周血白细胞总数一般正常或降低,同时以淋巴细胞计数降低,单核细胞计数增高为多见。外周血白细胞总数及分类计数的变化对辅助诊断甲型H1N1流感具有一定意义。     

类流感(H1N1、H3N2、乙型)患者的血常规结果分析

目的:分析3种流感病毒(H1N1、H3N2、乙型)的流行病学特点及其感染患者的血常规结果,为类流感患者的临床预防、诊断和治疗提供新的思路和依据。方法:统计2010年1月至2012年12月在本院发热门诊就诊,且经病毒核酸检测证实的421例H1N1、H3N2及乙型流感患者,同时采集其手指末梢血进行血常规检查,用SPSS 19.0统计软件对其流感病毒流行趋势进行分析。结果:H1N1、H3N2、乙型流感病毒的暴发没有特定规律,但有阶段性。421例类流感患者的血常规分析中,白细胞总数正常者311例(73.87%)、增高者86例(20.43%);中性粒细胞百分比增高者313例(74.35%);淋巴细胞百分比降低者274例(20.43%)。3种流感患者的血常规结果经t检验后提示,H1N1与H3N2流感患者的白细胞总数、中性粒细胞百分比及淋巴细胞百分比间均无统计学差异(P>0.05),而H1N1及H3N2与乙型流感患者间的白细胞总数、中性粒细胞百分比及淋巴细胞百分比都存在统计学差异(P<0.01)。结论:H1N1、H3N2、乙型流感病毒的爆发无规律,但可在一定阶段流行,因此对类流感患者的监测要坚持全年并严密防范。流感病毒阳性患者主要以白细胞总数正常、中性粒细胞百分比增高及淋巴细胞百分比降低为主,但H1N1、H3N2流感患者比乙型流感患者的白细胞总数、中性粒细胞百分比要高,而其淋巴细胞百分比则相对乙型流感患者要低。故对于血常规检测结果与流感病毒感染的通常血象变化不符,但临床高度怀疑为流感病毒感染者,在抗菌治疗效果不明显时,应考虑作咽、鼻拭子病毒核酸检测,以进一步确诊。     

2010年广州市甲型H1N1流感病毒分离株NA基因变异分析

目的比较2010年从广州市分离到的甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)基因与2009年中国大陆甲型H1N1流感病毒NA基因的变异情况,为甲型H1N1流感的监测和防控提供参考资料。方法收集2010年广州市有发热和呼吸道症状患者的咽拭子标本,用甲型H1N1流感病毒特异性引物进行聚合酶链反应(PCR)检测,扩增分离到的甲型H1N1流感病毒NA基因片段,测序后与2009年的H1N1毒株进行比对和进化分析,并用生物信息学方法对耐药位点和糖基化位点进行分析。结果共收集1 194份咽拭子标本,检测到甲型流感病毒阳性327份,其中H1N1流感病毒6株,与2009年分离的甲型H1N1流感病毒相比,有16个位点发生了有义突变,3个位点和NA活性相关,其中222位氨基酸的变异位于NA活性位点上。结论成功扩增了2010年广州市6株甲型H1N1流感病毒株NA基因并测序,未发现H275Y耐药位点的变异。3毒株在NA活性位点222位、228位和425位等氨基酸位点处发生了变异,需继续加强监测。     

Influenza A (H1N1) vs non-H1N1 ARDS: Analysis of clinical course

Purpose

The purpose of the study is to compare H1N1-induced acute respiratory distress syndrome (ARDS) with ARDS due to other causes of severe community-acquired pneumonia focusing on pulmonary function.

Materials and methods

This is a retrospective data analysis of adult ARDS patients between January 2009 and December 2010 in an ARDS referral center. Patient characteristics, severity of illness scores, modalities, and duration of extracorporeal lung support were evaluated as well as intensive care unit stay and survival. Parameters of mechanical ventilation and pulmonary function were analyzed on day of admission and over the consecutive 10 days using a nonparametric analysis of longitudinal data in a 2-factorial design. In a logistic regression analysis, risk factors for extracorporeal lung support were investigated.

Results

Twenty-one patients with H1N1-ARDS and 41 with non-H1N1-ARDS were identified. Gas exchange was more severely impaired in patients with H1N1-ARDS over course of time. Extracorporeal membrane oxygenation was more frequently needed in H1N1-ARDS. Despite significantly prolonged weaning off extracorporeal lung support and intensive care unit stay in H1N1 patients, the proportion of survivors did not differ significantly. Only Sepsis-Related Organ Failure Assessment score could be identified as an independent predictor of extracorporeal lung support.

Conclusions

Clinical course of H1N1-ARDS is substantially different from non-H1N1-ARDS. Affected patients may require extensive therapy including extracorporeal lung support in ARDS referral centers.     

48例儿童甲型H1N1流感病例临床分析

目的探讨儿童甲型H1N1流感患者的临床特征和治疗特点。方法回顾分析广东省人民医院2009年9月19日～12月30日收治的48例住院儿童甲型H1N1流感病例的临床资料,总结其临床特征及治疗经验。结果 14例为轻症患儿,30例为重症患儿,4例为危重症患儿。48例确诊病例均为本地发病者,其中10例有明确的甲型H1N1流感患者接触史。表现为发热（100%）,咳嗽（93.8%）,气促（35.4%）,喘息（25%）,呼吸困难（4.16%）,腹泻（12.5%）;50%患儿合并肺炎,2例并发心肌炎,5例患儿合并胸腔积液,其中2例出现呼吸衰竭;75%患儿白细胞正常或减低,45.8%患儿有肌酸激酶（CK）增高。按照卫生部《甲型H1N1流感诊疗方案（2009年第三版）》给予奥司他韦抗病毒、预防感染、吸氧、营养心肌及对症支持治疗,积极治疗基础疾病,必要时给予呼吸机支持、胸腔穿刺引流,所有患儿均痊愈。结论甲型H1N1流感患儿临床表现以呼吸系统症状为主,肺炎是常见并发症,少数患儿合并胸腔积液,甚至出现呼吸衰竭;接近半数患儿伴有不同程度心肌酶损害,少数并发心肌炎;尚未发现神经系统并发症;奥司他韦治疗敏感,采取综合治疗预后良好。     

甲型H1N1肺炎胸部CT随访研究

目的 探讨甲型H1N1肺炎患者的转归并随访其恢复期胸部CT表现.方法 回顾性分析32例甲型H1N1肺炎的转归,随访观察32例甲型H1N1肺炎患者恢复期的CT表现.结果 32例甲型H1N1炎患者,随访50-90d,CT表现阴性的有25例（78.1%）,4例有肺间质增生（12.5%）,3例有少许纤维化改变（9.4%）.结论 大部分甲型H1N1肺炎患者经积极治疗后可完全治愈,极少数重型肺炎患者可有肺间质增生及纤维化改变.     

甲型H1N1流感患者外周血NK细胞和T细胞亚群的变化情况分析

目的了解甲型H1N1流感患者外周血NK细胞和T细胞亚群的变化情况。方法采用美国BD公司生产的FACSCalibur流式细胞仪检测30例甲型H1N1流感患者及22例健康人外周血NK细胞和T细胞亚群,并进行统计分析。结果甲型H1N1流感患者的NK细胞百分数,CD4+T淋巴细胞绝对数及CD8+T淋巴细胞绝对数与健康组相比有明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);而CD4+/CD8+比值与健康组相比基本无变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论甲型H1N1流感患者外周血NK细胞和淋巴细胞亚群水平存在异常,提示甲型H1N1流感患者免疫功能下降。     

Thrombotic thrombocytopenic purpura triggered by influenza A virus subtype H1N1 infection

We report a case of acquired thrombotic thrombocytopenic purpura (TTP) triggered by influenza A virus subtype H1N1 infection. In December 2010, a 27-year-old man was diagnosed with pneumonia from influenza A virus infection at a local clinic. Two days later, he was admitted to our hospital because of a worsening condition and unexplained thrombocytopenia. The influenza A virus subtype H1N1 real-time polymerase chain reaction test was positive. The patient had typical clinical signs of TTP, thus he was diagnosed with TTP. He received treatment with oseltamivir and high dose methylprednisolone. Plasma exchange therapy was started daily at a 1.5 dose volume of his whole blood. After the 17th plasma exchange therapy, the symptoms and abnormal laboratory results had recovered to normal. Finally, 47 days after admission, the patient had recovered completely and was discharged. This case suggests that the influenza A virus subtype H1N1 infection may have triggered acquired TTP.     

广州地区无偿献血人群中H1N1和H3N2流感病毒中和抗体的分布及水平

目的 探讨H1N1和H3N2流感病毒中和抗体在广州地区无偿献血人群中的分布及水平,为研究广州地区流感流行病学特征提供参考.方法 于2015年10～11月,采用年龄分层随机抽样法选择广州血液中心无偿献血的498例健康献血者为研究对象.按年龄将其分为18～20岁组(n=150)、21～30岁组(n=210)、31～60岁组(n=138).采用微量病毒中和实验法测定献血者血浆中H1N1和H3N2流感病毒中和抗体滴度,并分别对不同性别及年龄段H1N1和H3N2流感病毒中和抗体阳性率及滴度进行统计学分析.结果 498例健康献血者中,H1N1流感病毒中和抗体阳性率为3.6％ (18/480);H3N2流感病毒中和抗体阳性率为4.6％ (23/498),2种流感病毒中和抗体阳性率比较,差异无统计学意义(x2=0.636,P=0.425).156例男性献血者中,H1N1和H3N2流感病毒中和抗体阳性率分别为3.8％(6/156)和4.5％(7/156);342例女性献血者中H1N1和H3N2流感病毒中和抗体阳性的率分别为3.2％(11/342)和4.4％(15/342).不同性别献血者H1N1和H3N2流感病毒中和抗体阳性率比较,差异均无统计学意义(x2 =0.129、0.003,P＞0.05).18～20岁组、21～30岁组和31～60岁组献血者H1N1流感病毒中和抗体阳性率分别为4.0％、5.2％和0.7％;H3N2流感病毒中和抗体阳性率分别为6.0％、5.2％和2.2％.不同年龄组献血者H1N1和H3N2流感病毒中和抗体阳性率比较,差异均无统计学意义(x2=4.961、2.705,P＞0.05).18～20岁组、21～30岁组和31～60岁献血者H1N1流感病毒中和抗体几何平均滴度(GMT)分别为1∶1.38、1∶1.48和1∶1.05,平均为1∶1.32;H3N2流感病毒中和抗体GMT分别为1∶1.62、1∶1.51和1∶1.19,平均为1∶1.44.3组献血者H1N1和H3N2流感病毒中和抗体滴度比较,差异均无统计学意义(x2 =4.887、2.702,P＞0.05).结论 广州地区无偿献血人群中H1N1和H3N2流感病毒中和抗体水平较低,不同性别和年龄人群对流感病毒普遍易感.     

免疫层析法用于甲型H1N1流感病毒抗原筛查的初步评价

目的 评估免疫层析法检测甲型H1N1流感病毒抗原的准确性,推广免疫层析法在甲流H1N1抗原检测中的临床应用.方法 收集2009年8至12月广东省中医院356例甲型H1N1流感疑似患者的鼻拭子标本,采用免疫层析法进行甲型H1N1流感病毒抗原的快速检测,同时将患者咽拭子送往广州市疾病预防控制中心(CDC)进行甲型H1N1流...     

Clinical characteristics and outcomes of patients with 2009 influenza A(H1N1) virus infection with respiratory failure requiring mechanical ventilation

Purpose

The purpose of the study was to describe the clinical characteristics and outcomes of critically ill patients with 2009 influenza A(H1N1).

Methods

An observational study of patients with confirmed or probable 2009 influenza A(H1N1) and respiratory failure requiring mechanical ventilation was performed.

Results

We studied 96 patients (mean age, 45 [14] years [mean, SD]; 44% female). Shock and acute respiratory distress syndrome were diagnosed during the first 72 hours of admission in 43% and 72% of patients, respectively. Noninvasive positive pressure ventilation was used in 45% of the patients, but failed in 77% of them. Bacterial pneumonia was diagnosed in 33% of cases, 8% during the first week (due to community-acquired microorganisms) and 25% after the first week (due to gram-negative bacilli and resistant gram-positive cocci). Intensive care unit mortality was 50%. Nonsurvivors differed from survivors in the prevalence of cardiovascular, respiratory, and hematologic failure on admission and late pneumonia. Reported causes of death were refractory hypoxia, multiorgan failure, and shock (50%, 38%, and 12% of all causes of death, respectively).

Conclusions

Patients with 2009 influenza A(H1N1) and respiratory failure requiring mechanical ventilation often present with clinical criteria of acute respiratory distress syndrome and shock. Bacterial pneumonia is a frequent complication. Mortality is high and is primarily due to refractory hypoxia.