大鼠面神经高位损伤后面神经核区磁共振波谱成像

目的：探讨质子磁共振波谱成像（1 H-MRS）对大鼠面神经高位损伤后面神经元细胞凋亡检测的价值。方法20只正常 SD大鼠（对照组）和20只面神经高位损伤 SD 大鼠（实验组）分别行1 H-MRS 并测量面神经核区 N-乙酰天门冬氨酸（NAA）、肌酸（Cr）和胆碱（Cho）的峰下面积,比较两组间 NAA、Cho、NAA/Cr 及Cho/Cr 的差异。1 H-MRS检查后取对照组2只与实验组4只行面神经核苏木素-伊红（HE）、甲胺苯蓝（TB）和末端脱氧核苷酸转移酶介导的 dUTP 原位切口末端标记（TUNEL）染色。结果与对照组相比,实验组 NAA（t＝3．159,P＜0．05）及 NAA/Cr（t＝3．782,P＜0．05）明显降低,同时实验组面神经核区 HE、TB和TUNEL染色显示有大量凋亡细胞。结论1 H-MRS可以作为一种无创性评价面神经损伤后面神经核区神经元细胞凋亡的方法。     

Cholinergic agonists increase intracellular calcium concentration in guinea pig vestibular hair cells

Objective To better understand the cholinergic receptors in vestibular hair cells (VHC) an d their subtypes, and to investigate the effects of cholinergic agonists on intr acellular calcium concentration (［Ca(2+)］(i) ) in guinea pig VHCs.Methods VHCs were isolated from guinea pig crista ampullaris by enzymatic and mechanical methods. The effect of cholinergic agonists on ［Ca(2+)］(i) was examined using laser scanning confocal microscopy and the Ca［2+］ sensitive dye Fluo -3.Results The results showed that the addition of acetylcholine (ACh) and carbachol (CCh), muscarnic and nicotinic agonists, induced ［Ca(2+)］(i) increases in all th e VHCs, whereas acetylcholine bromide (ACh-Br), a nicotinic agonist, induced th e ［Ca(2+)］(i) increase in only a small percentage of VHCs. The ACh or CC h-induced Ca［2+］ response could be partially suppressed by atropine. In th e presence of 0.1 mmol/L atropine, the amplitudes of ACh or CCh-induced ［Ca(2+)］(i) responses became significantly smaller than those in atropine free medium (P<0.01). Conclusions The results suggest the existence of cholinergic receptors in guinea pig VHCs. It is the muscarnic agonists rather than nicontic receptors that dominate ［Ca(2+)］(i) variation. Atropine can suppress muscarnic agonist-induced Ca［2 +］ responses.     

大鼠面神经切断及修复对面神经核磷酸化的影响

目的：探讨面神经损伤及修复对面神经核蛋白磷酸化的影响。方法：采用免疫组化染色法，观察成年大鼠面神经切断和即刻端端吻合后面神经核磷酸苏氨酸和磷酸酪氨酸的时程变化。结果：面神经切断后，损伤侧面神经核于损伤早期即出现磷酸苏氨酸和磷酸酪氨酸免疫染色强度的明显增加，术后14d已基本降至正常水平。磷酸苏氨酸免疫染色部位主要位于面神经核运动神经元，而磷酸酪氨酸免疫染色阳性细胞为小胶质细胞，面神经切断后吻合组面神经核磷酸苏氨酸和磷酸酪氨酸免疫染色强度的变化趋势同面神经单纯切断组。结论：面神经损伤所诱导的细胞信号转导的变化主要出现在损伤早期。     

大鼠心房与心室胆碱能神经和M2受体的分布比较

目的 探讨大鼠心房,心室以及左室游离壁3层组织胆碱能神经分布及其主要靶受体-M2受体的整体表达模式和特点。方法 实验应用Kamovsky-Roots组化染色结合点计数法,免疫组化SABC法结合图像分析技术,检测胆碱能神经和M2受体的分布,并比较各部位之间神经和受体的密度差异。结果 （1）大鼠心房和心室均有胆碱能神经和M2受体的阳性染色产物,心房的胆碱能神经点计数为心室的4．6倍,M2受体免疫阳性产物面积为心室的3倍;（2）左室游离壁3层组织分析发现：中层心肌组织胆碱能神经纤维点计数明显少于心内膜层和心外膜层：左室游离壁3层心肌组织M2受体密度无显著统计学差异。结论 大鼠心房、心室肌均有胆碱能神经和M2受体,并存在明显的密度差异：左心室游离壁3层之间胆碱能神经分布有跨室壁不均一性,而M2受体密度没有明显差异。     

豚鼠面神经核团内心钠素的免疫组化定位观察

利用免疫组化(ABC)方法观察ANP在6只正常豚鼠的面神经核团内分布,发现呈均匀性分布广泛。提示ANP在正常豚鼠的面神经核内可能具有一定维持其正常功能的作用。     

豚鼠面神经损伤后运动终板及面神经核AchE含量的变化

研究面神经挤压损伤后运动张板，面神经核乙酰胆碱酯酶含量变化。方法：利用组织化学染色和图象分析技术，对ＭＥＰ和ＦＮ的ＡｈｃＥ进行量化分析。结果：正常口轮匝肌ＡｃｈＥ染色的ＭＥＰ在光镜下呈葡萄状或斑块状的椭圆形结构，锯齿状分布。     

Rapid Inhibition of the Glutamate-induced Increase of Intracellular Free Calcium by Magnesium in Rat Hippocampal Neurons

Inrecentyears ,largenumbersofrelativestud iesonthemagnesium (Mg2 )andneurologicaldis easesverifiedinmanyneurologicaldiseases ,suchascerebrovasculardiseases,chronicalcoholpoisoning ,Wilsondiseaseetc .,wererelatedwiththeMg2 defi ciency .Magnesiumreagentsc…     

面神经挫伤大鼠面肌酶组化定量及超微结构研究

目的探讨正常及神经挫伤后面肌酶组化及超微结构变化规律。方法成熟雄性ＳＤ大鼠如５０只随机分为正常组及面神经挫伤组。定位定量挫伤试验组动物左侧面神经，并于７、２１、３５及５６ｄ取面肌切片，进行琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）染色、电镜观察及多功能显微图像分析仪定量分析。结果大鼠面神经挫伤ｄ７，三型肌纤维直径最小，其中白肌纤维仅为对照组的６０％，电镜显示变性改变；３ｗｋ时光电镜证实同型化肌纤维存在；ｄ３５中间型及红肌纤维直径大于对照组；ｄ５６三型肌纤维直径、ＳＤＨ染色反应及超微结构同对照组有明显差别。结论面肌中白肌纤维对神经挫伤反应最剧烈，挫伤ｄ２１发现肌纤维同型化现象，ｄ５６神经再生后面肌酶组化、肌纤维直径、超微结构均恢复正常。     

大鼠腰神经根损伤后乙酰胆碱斑的实验研究

目的 观察大鼠腰神经根损伤后乙酰胆碱斑的变化。方法 采用α-bungarotoxin(α-BTX）荧光结合剂染色和激光共聚焦扫描图片分析技术,观察了大鼠L5神经根挤压后,比目鱼肌神经肉接头的变性及再生修复过程。结果 神经根受压后20天,乙酰胆碱斑明显地发生卷缩,密度降低,结构紊乱,甚至崩解成碎片,60天后,乙酰胆碱斑的大小及形态逐又恢复正常,但仍留有一些异常的小球状或梭状的乙酰胆碱分支。结论 乙酰胆碱受体的形态功能与神经支配状况有密切的关系。     

超声微泡对碱性成纤维生长因子转染大鼠损伤面神经的修复作用研究

目的 应用超声微泡介导碱性成纤维生长因子(bFGF)基因进行受损面神经(大鼠模型)修复,研究其可行性及有效性.方法 将40只SD大鼠制作面神经损伤模型,并分成4组,每组10只;A组:bFGF+超声+微泡组;B组:bFGF+微泡组;C组:bFGF+超声组;D组:单纯手术组(PBS).于bFGF基因转染后第1、10、20、28天,观察各组大鼠一般状况,检测损伤面神经传导速度、潜伏期及动作电位波幅.提取损伤处面神经组织后采用RT-PCR检测mRNA的表达,Western blot检测bFGF蛋白表达.结果 转染后第20天,A组大鼠术侧有少量胡须可观察到细微摆动;转染后第28天,A组大鼠一般状况较B、C、D3组恢复得更好.A组面神经损伤后修复的神经电生理表现优于B、C、D3组;A组bFGF mRNA和蛋白表达量明显高于B、C、D3纽(P＜0.05).结论 超声微泡介导bFGF有助于面神经损伤的修复.     

我国实验用豚鼠面神经核的立体定位坐标值

目的：确定我国实验用豚鼠面神经核（ＦＮ）中心的立体定位坐标值．方法：Ｎｉｓｓｌ染色、ＨＲＰ逆行追踪方法及立体定位仪确定ＦＮ立体定位坐标值;利用Ｎｉｓｓｌ染色在连续切片上确定豚鼠面神经核的外径．结果：体重３００ｇ～６５０ｇ豚鼠的ＦＮ中心坐标值为Ｐ：（２．４±０．１）ｍｍ,ＬＬ／ＲＬ：（２．０±０．０７）ｍｍ,Ｈ：（－１．９±０．０８）ｍｍ;ＦＮ的前后径：（１．５±０．０９）ｍｍ,左右径：（１．３±０．０７）ｍｍ,上下径：（１．４±０．０６）ｍｍ结论：确定了我国实验用豚鼠ＦＮ的立体定位坐标值,为面神经的研究提供了便利条件．     

大黄对慢传输型便秘大鼠结肠肌间神经丛胆碱能神经的影响

目的 研究大黄治疗慢传输型便秘大鼠结肠肌间神经丛内胆碱能(AchE) 神经的变化,从神经病理学角度初步探讨大黄治疗慢传输型便秘的机制.方法 建立大鼠慢传输型便秘模型,大黄治疗后利用铺片技术制作结肠肌间神经丛标本,采用组织化学技术行结肠肌间神经丛内AchE神经染色.结果 结肠肌间神经丛铺片组化染色发现便秘大鼠结肠肌间神经丛内胆碱能神经分布较稀疏,数量较少,但胞体增大,染色加深.大黄治疗组大鼠结肠肌间神经丛中的胆碱能神经分布趋于正常,胆碱能阳性神经元较多(阳性细胞数25.71±5.36与便秘组14.32±4.60,P<0.01;核浆比例0.71±0.21与便秘组0.58±0.19,P<0.01).结论 慢传输型便秘大鼠结肠传输功能障碍与肠壁内胆碱能的病理改变和(或) 功能障碍有关.大黄使便秘大鼠结肠肌间神经丛中的胆碱能神经分布趋于正常,可能是其调节结肠功能、治疗慢传输型便秘的机制之一.     

Plastic Changes of Synapses and Excitatory Neurotransmitter Receptors in Facial Nucleus Following Facial-facial Anastomosis

The remodeling process of synapses and neurotransmitter receptors of facial nucleus were observed. Models were set up by facial-facial anastomosis in rat. At post-surgery day （PSD） 0,7,21and 60, synaptophysin （p38）, NMDA receptor subunit 2A and AMPA receptor subunit 2 （GluR2） were observed by immunohistochemical method and semi-quantitative RT-PCR, respectively. Mean-while, the synaptic structure of the facial motorneurons was observed under a transmission electron microscope （TEM）. The intensity of p38 immunoreactivity was decreased, reaching the lowest value at PSD day 7, and then increased slightly at PSD 21. Ultrastructurally, the number of synapses in nucleus of the operational side decreased, which was consistent with the change in P38 immunoreactivity. NMDAR2A mRNA was down-regulated significantly in facial nucleus after the operation （P〈0.05）, whereas AMPAR2 mRNA levels remained unchanged （P〉0.05）. The synapses innervation and the expression of NMDAR2A and AMPAR2 mRNA in facial nucleus might be modified to suit for the new motor tasks following facial-facial anastomosis, and influenced facial nerve regeneration and recovery.     

非神经材料(干热变性骨骼肌)修复面神经缺损:附一例报告

目的探讨骨骼肌作为一种非神经材料在修复面神经缺损方面的临床应用价值。方法经动物实验证实,经微波变性处理后的骨骼肌作为桥接材料修复面神经缺损,具有较好的效果。在此基础上,对一例较大面神经瘤患者采取经乳突进路面神经鞘膜瘤切除术,同时采用经微波干热变性骨骼肌移植修复面神经缺损。结果术后随访一年,面肌功能恢复满意。结论提示干热变性骨骼肌作为一种非神经材料,在修复面神经缺损方面,具有较好疗效,值得进一步研究和应用。     

胆碱能抗炎通路对内毒素复合油酸致大鼠急性肺损伤的影响

目的研究胆碱能抗炎通路(cholinergic anti-inflammatory pathway,CAP)对内毒素复合油酸2次打击致大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响及其可能的作用机制。方法 24只雄性Wistar大鼠,体质量250±20g。按数字表法将大鼠随机分为4组,每组6只。①对照组(control group,C组):腹腔注射生理盐水10 mL.kg-1;②急性肺损伤(ALI)组:腹腔注射1%内毒素(lipopolysaccharide,LPS)10 mg.kg-1,30 min后静脉注射油酸(oleic acid,OA)0.15 mL.kg-1;③电刺激(stimulation,ST)组:右颈迷走神经干连接刺激电极,以5 V、2 ms、1 Hz强度持续刺激神经10 min,腹腔注射1%LPS 10 mg.kg-1,再持续刺激神经10 min,20min后静脉注射OA 0.15 mL.kg-1;④他克林(tetrahydroaminoacridine,THA)组:静脉注射胆碱酯酶抑制剂THA 1.5 mg.kg-1,10min后行急性肺损伤操作。各组动物均于130 min后从颈总动脉采血1 mL行血气分析,处死动物采集标本,分别检测肺组织Toll-样受体-2(Toll-like receptor-2,TLR2)和TLR4 mRNA、核转录因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)p65、血清白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肺组织髓过氧化物酶(mycloperoxidase,MPO)含量和肺组织湿质量-干质量比(wet weight/dry weight,W/D),HE染色观察左肺组织病理学改变。结果 ALI组与C组比较,pH和动脉氧分压(partial pressure of oxygen,PaO2)均显著下降,二氧化碳分压(partial pressure of carbon dioxide,PaCO2)显著升高;肺泡破坏严重,有大量组织液渗出;肺组织W/D及MPO活性均显著增高;肺组织NF-κB p65蛋白表达明显增强;血清IL-6浓度显著升高;与C组相比,其余3个实验组肺组织TLR2和TLR4mRNA表达均显著增加,组间比较差异无统计学意义;ST组和THA组与ALI组比较,pH和PaO2均显著升高,PaCO2显著下降;肺组织病理改变明显改善;肺组织W/D及MPO活性均显著降低;肺组织NF-κB p65蛋白表达及血清IL-6浓度显著下降。结论电刺激迷走神经或者静脉注射他克林可通过激活CAP,减轻LPS复合油酸2次打击致大鼠ALI时的炎性反应;其可能的机制是抑制NF-κB途径活化,在转录前水平发挥抗炎作用,但是不影响ALI时TLR2和TLR4mRNA的活化。     

大鼠面神经损伤后面运动神经元存活情况和脑源性神经营养因子代谢改变

目的：研究面神经损伤后，大鼠面运动神经元（facial motoneuron,FNM）存活情况和脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF)代谢改变。方法：制造大鼠右面神经损伤模型，应用Cresyl Violet染色、原位杂交和免疫组化方法，观察计数FMN细胞，检测BDNF mRNA及其蛋白在FMN的表达，并结合计算机图像分析技术测定双侧FMN数目之比及其反应产物的阳性细胞数比和灰度值百分比。结果：BDNF mRNA及其蛋白阳性细胞分布于正常面神经核各亚核，除神经元细胞外其周围胶质细胞也染色，面神经损伤后1d，损伤侧面神经核BDNF mRNA及其蛋白阳性神经元细胞和胶质细胞数量及染色强度均快速增高；面神经损伤后不同时间组FMN细胞存活率与正常组比较差异均无显著性（P＞0.05）。结论：正常FMN可能存在BDNF的自分泌和旁分泌作用，面神经损伤后这种作用迅速增强；面神经外周损伤后，未发现损伤导致的面运动神经元数目发生改变。     

兔咬肌原位移植状态下面神经吻合与植入的比较研究

目的探讨失神经支配的咬肌瓣获得面神经再支配后的生理和结构特性变化。方法取24只新西兰大白兔,平均分为两组:A组行面神经———咬肌神经端端移植吻合;B组行面神经咬肌内植入。术后分别在第1、3、6个月进行大体观察及肌湿重测定、电生理检查、酶组织化学检查及超微结构观察。结果失神经咬肌可重获面神经再支配,并在面神经支配下行使收缩功能,肌纤维的组化型别发生改变,从而使咬肌的肌纤维类似于表情肌。两种方法在术后3个月时肌肉传导速度的恢复率有显著差异(P<0.01);术后6个月时两者无显著差异(P>0.05)。结论两种方法结果相似,均能使移植肌重获神经支配,恢复收缩功能。一期手术时,神经肌内植入法与吻合法无显著差异(P>0.05),但该方法简单、损伤小,对临床手术治疗面瘫有一定的借鉴作用。     

放射自显影技术研究老年大鼠不同脑区M胆碱受体的变化

目的： 观察自然衰老大鼠不同脑区Ｍ 胆碱受体包括Ｍ１ 亚型受体的变化。方法： 采用放射自显影技术显示大鼠脑Ｍ 受体,并用图像分析仪进行灰度分析,以反映Ｍ 受体在不同脑区的相对定量分布。结果： 所得脑切片自显影灰度层次清晰,主要分布在大脑皮质,海马,纹状体等部位,非特异结合灰度很低,图像分析仪分别给出不同脑区的平均灰度值,老年鼠皮质,海马,纹状体部位的灰度显著低于青年鼠,Ｍ 受体分别降低２４８７ ％ ,１４１２ ％ ,１２７６ ％ （ Ｐ＜ ００５） ,Ｍ１ 亚型受体分别降低１５７８ ％ ,８６９ ％ ,１２３６ ％ （ Ｐ＜ ００１） 。结论： 以上３ 个重要脑区Ｍ 胆碱受体密度的改变可能是脑衰老的一个重要机制     

酮替芬对新生大鼠心肌细胞内游离钙的影响

观察了酮替芬（Ｋｅｔ）对新生鼠心肌细胞内游离钙的影响,以酶法制备新生大鼠心肌细胞悬液,用荧光探针Ｆｕｒａ－２／ＡＭ检测心肌细胞内游离钙浓度的变化。结果表明：Ｋｅｔ对静息状态下「Ｃａ＾２＋」ｉ无影响,Ｋｅｔ（１０￣５００μｍｏｌ／Ｌ）剂量依赖性抑制高钾去经及ＮＥ所致的「Ｃａ＾２＋」ｉ升高。提示：Ｋｅｔ对心肌细胞膜下坟依赖性钙通道有抑制作用,也可能抑制受体操纵型钙通道。     

老年性痴呆大鼠M型乙酰胆碱受体功能变化的研究

目的 :探讨老年性痴呆大鼠M型乙酰胆碱受体功能变化。方法 :建立老年性痴呆 (Alzheimer’sdisease,AD)大鼠模型 ,抽提AD大鼠脑半球基底团多聚腺嘌呤mRNA ,注射到非洲爪蟾卵母细胞上表达有功能的大鼠脑乙酰胆碱受体 ,利用电压钳技术记录电压依赖性的离子通道电流。比较AD大鼠组与正常对照组乙酰胆碱 (ACh)引起的M型乙酰胆碱受体电流变化。结果 :①AD组和对照组每克脑组织提取的poly(A) +mRNA分别为 (18± 6 .2 ) μg ,(19± 5 .8) μg ,两者无统计学差异 ;②Cl-是表达的M型ACh电流的主要载流离子 ;③注射老年大鼠海马组织mRNA后 ,ACh诱发的电流幅度 (8.12± 2 .2 1)nA下降 ,比对照组 (2 1.32nA)约下降 (37± 2 .77) % ,差异有极显著性 (P <0 .0 0 1)。结论 :AD大鼠M型乙酰胆碱受体功能呈减弱趋势 ,其原因可能是受体蛋白遗传信息发生了改变。