骨保护素系统与动脉粥样硬化的研究进展

自最初发现骨保护素（osteoprotegefin,OPG）对骨骼新陈代谢有重要的调节功能以来,OPG在血管性疾病和钙化中发挥的重要作用已经引起了人们广泛关注。研究发现,OPG与动脉粥样硬化（AS）具有相关性,OPG不仅能抑制动脉粥样硬化,而且其血清水平随着血管钙化、冠状动脉疾病、脑卒中和未来的心血管事件进展而升高。虽然这一特点的确切机制和意义尚不明确,但在临床应用中的价值不可忽视。本文将对近年来OPG与AS关系的研究进展进行综述。     

护骨素和护骨素基因在类风湿关节炎及其骨质疏松中的研究进展

护骨素(osteoprotegerin,OPG)是Simonet等[1]于1997年发现的一种具有调节骨吸收功能的分泌型糖蛋白,该蛋白基因过度表达会导致小鼠出现骨质硬化,早期小鼠即可出现严重的骨质疏松.卵巢切除术后的小鼠,给予重组OPG cDNA腺病毒载体注射可以产生高表达的OPG且破骨细胞数量减少,骨量大大增加,能有效地预防骨质疏松,给绝经后妇女皮下注射OPG可以快速、有效地抑制骨转换,故认为其在调节骨代谢、预防骨质疏松方面有重要作用.     

护骨素和护骨素基因在类风湿关节炎及其骨质疏松中的研究进展

护骨素(osteoprotegerin,OPG)是Simonet等[1]于1997年发现的一种具有调节骨吸收功能的分泌型糖蛋白,该蛋白基因过度表达会导致小鼠出现骨质硬化,早期小鼠即可出现严重的骨质疏松.卵巢切除术后的小鼠,给予重组OPG cDNA腺病毒载体注射可以产生高表达的OPG且破骨细胞数量减少,骨量大大增加,能有效地预防骨质疏松,给绝经后妇女皮下注射OPG可以快速、有效地抑制骨转换,故认为其在调节骨代谢、预防骨质疏松方面有重要作用.     

护骨素和护骨素基因在类风湿关节炎及其骨质疏松中的研究进展

护骨素(osteoprotegerin,OPG)是Simonet等[1]于1997年发现的一种具有调节骨吸收功能的分泌型糖蛋白,该蛋白基因过度表达会导致小鼠出现骨质硬化,早期小鼠即可出现严重的骨质疏松.卵巢切除术后的小鼠,给予重组OPG cDNA腺病毒载体注射可以产生高表达的OPG且破骨细胞数量减少,骨量大大增加,能有效地预防骨质疏松,给绝经后妇女皮下注射OPG可以快速、有效地抑制骨转换,故认为其在调节骨代谢、预防骨质疏松方面有重要作用.     

核因子κB受体活化因子配体/骨保护素在骨髓瘤中的表达

目的研究核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)在多发性骨髓瘤(MM)中的表达情况。方法运用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测人骨髓瘤细胞系(8226、XG1、XG7细胞)、患者MM细胞及MM患者骨髓基质细胞对RANKL/OPG的表达。结果 MM细胞系(8226、XG1、XG7细胞)及患者MM细胞均不表达RANKL及OPG m RNA;伴有骨病的MM患者骨髓基质细胞RANKL表达明显增加,OPG表达减低。结论 MM细胞不直接表达RANKL/OPG,可能通过调节RANKL/OPG的平衡间接参与MM骨病的发生。     

噻唑烷二酮类药物干预糖尿病大鼠动脉粥样硬化的作用研究

<正>糖尿病(DM)大血管病变的主要病理基础是动脉粥样硬化,在动脉粥样硬化病变过程中,钙盐沉积与其有密切关系。使骨骼中钙向动脉壁转移的最重要的影响因素是体内的骨保护素(osteoprotegerin,OPG),小鼠的OPG基因敲除后存在全身骨密度下降和骨折发生率增高,还存在主动脉和肾动脉钙化[1],用基因重组OPG治疗可防止骨质疏松症和动脉钙化     

护骨素及其配体在兔下颌骨牵引成骨过程中的表达

目的 研究护骨素(OPG)及其配体(OPGL)在不同时期下颌骨牵引成骨过程中表达水平的变化.方法 25只成年兔的一侧下颌骨前部行骨切开术,用牵引器延长下颌骨4mm,另一侧下颌骨行骨切开作为对照组.于牵引完成后的第1、7、14、21、28天各处死一组动物,取牵引区新生骨痂行OPG、OPGL免疫组化染色,细胞图像分析仪测量牵引区新骨中OPG、OPGL表达情况.结果 下颌牵引延长后牵引间隙均有新骨形成,免疫组化染色OPG、OPGL主要定位于骨髓基质细胞的胞浆中.与对照组比较,实验组在第7、14天OPG表达的阳性细胞率及阳性面积百分比升高(P＜0.05或P＜0.01),以后逐渐下降;第1、14天OPGL表达的阳性细胞率及阳性面积百分比升高(P＜0.05或P＜0.01),以后逐渐下降;第28天OPG、OPGL仅有微弱表达.结论 在牵引成骨过程中OPG、OPGL共同调节骨细胞活性,对骨的修复重建起重要作用.     

破骨细胞分化因子及信号转导通路与中医药对其分化的干预抑制作用

破骨细胞(osteoclast,OC)源于造血干细胞的单核-巨噬细胞前体分支,是完成骨吸收的主要细胞。其分化成熟过程是一个复杂的多级调控过程。OPG/RANK/RANKL系统在破骨细胞分化成熟过程中起着枢纽作用,一些细胞因子通过调节RANKL和OPG表达影响OC分化增殖。几条关键信号转导通路参与这一过程。中医药在干预抑制破骨细胞活性及调控其分化成熟过程方面有一定的优势。祖国医学在此方面发挥了很大作用,中医药治疗有着重要研究价值。该文就影响破骨细胞分化成熟因子及其信号转导通路和中医药对其的干预抑制作用做一综述。     

帕米磷酸钠对大鼠成骨细胞RANKL/OPGmRNA表达的影响

目的观察帕米膦酸钠对新生大鼠成骨细胞核因子κβ受体活化受体配体（RANKL）／护骨素（OPG）mRNA表达的影响。方法 体外分离培养新生大鼠成骨细胞,分别观察不同浓度帕米膦酸钠或用帕米膦酸钠处理不同时间对成骨细胞RANKL／OPG mRNA表达的影响。采用半定量RT-PCR方法检测RANKL／OPG mRNA表达。结果帕米膦酸钠呈浓度依赖性降低RANKL mRNA的表达,干预24h,10^-5M抑制作用最大,约为对照组表达量的40％（P〈0．01）。同时帕米膦酸钠呈浓度依赖性增加OPG mRNA表达,10^-6M时增加最明显,约为对照组表达量的2．2倍（P〈0．01）,而在10^-5M时又明显降低。10^-6M帕米膦酸钠呈时间依赖性抑制RANKL mRNA和促进OPG mRNA表达,分别于24h抑制RANKL mRNA表达、48h促进OPG mRNA表达且达最大效应（P〈0．01）。结论帕米膦酸钠可能通过调节成骨细胞RANKL／OPG的基因表达,而抑制破骨细胞介导的骨吸收。     

破骨细胞和RANKL在幼年特发性关节炎中的作用机制

目的：探讨不同时期幼年特发性关节炎（JIA）患儿血清中RANKL和破骨细胞的水平变化,并进一步研究其临床意义。方法研究分为初发活动期、疾病缓解期和正常健康儿童3组,每组20例。采用ELISA方法检测血清中RANKL的表达水平,细胞爬片法检测患儿血液中破骨细胞的数量,统计学分析处理数据。结果 RANKL和OPG在初发活动期组(423.12±62.19)pg/ml、(510.72±58.07)pg/ml和疾病缓解期组(434.26±78.68)pg/ml患儿血清中的表达均高于正常健康对照组(360.47±48.60)pg/ml,差异有统计学意义（均P＜0.05）;破骨细胞在JIA初发活动期患儿体内的表达水平高于健康对照组儿童体内表达水平,差异有统计学意义（P＜0.05）,而疾病缓解期组患儿体内破骨细胞表达水平略高于健康对照组儿童,差异无统计学意义（P＞0.05）。OPG表达水平与DAS28负相关（P＜0.05）;而RANKL/OPG抗CCP抗体正相关（P＜0.05）。结论 RANKL在初发活动期组JIA患儿血清中表达显著升高,与之相应的,破骨细胞子在JIA初发活动期患儿体内水平也显著上升,提示RANKL可能促进破骨细胞的分化和成熟。     

β雌激素受体介导脱氢表雄酮对OPG/RANKL的升调节

目的探讨β雌激素受体(ERβ)介导脱氢表雄酮(DHEA)对成骨细胞骨保护素/细胞核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)的调节作用。方法构建ERβ沉默表达(pLVTHM-GFP/ERβ-shRNA)和ERβ高表达(pWPT-ERβ)重组质粒,并转染人成骨细胞系hMG63,使hMG63的ERβ沉默表达(hMG63-shERβ)和高表达(hMG63-ERβ)。有或无U0126(丝裂原活化蛋白激酶信号途径中特异抑制分子)作用后,给予生理浓度(10-7mol.L-1)的DHEA作用24、48和72 h,ELISA和Western blot法分别检测hMG63培养上清中OPG和细胞中RANKL蛋白表达;Western blot法检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径中pERK1/2、JNK和p38分子的表达。结果给予DHEA作用48和72 h后,hMG63分泌的OPG明显增高(P<0.01),而RANKL表达无明显变化;与hMG63细胞相比较,在DHEA作用下hMG63-shERβ和hMG63-ERβ组的ERα表达无明显改变;而hMG63-ERβ细胞中ERβ表达增高,伴随着pERK1/2和OPG的升高(P<0.05,P<0.01);相反,hMG63-shERβ组ERβ表达减少并伴随pERK1/2和OPG分泌的降低(P<0.05)。另外,DHEA对pERK1/2和OPG的升调节可部分被U0126阻断。结论 ERβ可能通过激活pERK1/2-MAPK途径介导了DHEA对成骨细胞OPG/RANKL的调节。     

骨改建的分子机制研究进展

骨改建整个过程中具体的分子机制还不十分明确,本文综述了在骨改建的分子机理研究中,新发现的破骨细胞调节因子--护骨素(OPG)及其配体破骨细胞分化因子(OPGL)的结构功能及其相关因素.OPG是一种肝素结合型分泌性糖蛋白,它通过与成骨细胞/基质细胞结合,阻断原始破骨细胞与成骨细胞/基质细胞间的信号传导,从而抑制其分化、成熟与激活,达到抑制骨吸收的目的.OPGL是促破骨细胞分化因子,其效应可被OPG断.机械力可以破坏骨细胞的完整性,从而分泌某些因子来启动骨改建.     

转移性骨肿瘤治疗新突破

骨骼是恶性肿瘤最常见的转移部位之一,对转移性骨肿瘤的治疗已成为当今肿瘤学研究的热点之一.骨保护素(OPG)、核因子kB受体活化因子配体(RANKL)及核因子kB受体活化因子(RANK)的骨调节轴即OPG/RANKL/RANK,是影响破骨细胞分化、成熟的重要途径.安进公司丌发的完全人源化RANKL抗体denosumab,可通过阻止RANKL和RANK结合抑制破骨细胞形成,从而实现肿瘤骨转移治疗的新突破.本文详细介绍OPG/RANKL/RANK及denosumab的作用机制以及相关大规模临床研究.     

吴茱萸次碱抗骨质疏松作用研究

骨保护素(osteoprotegerin,OPG)是骨转换的标志物,由成骨细胞等分泌.OPG与核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)结合发挥抑制破骨细胞作用.本研究发现吴茱萸次碱(rutaecarpine,RUT)具有上调...     

壮骨止痛方调节OPG/RANKL平衡抗绝经后骨质疏松作用

目的：研究壮骨止痛方对去卵巢骨质疏松大鼠OPG和RANKL的影响,探讨其抗骨质疏松的作用机制。方法：72只200g左右的SD大鼠按体质量随机抽出假手术组12只,造模组60只,造模组采用双侧去卵巢法造模,假手术组只切除卵巢周围相应质量的脂肪。造模成功后,造模组大鼠按体质量随机分为模型组壮骨止痛方高剂量组(13.2g/kg)、中剂量组(6.6g/kg)、低剂量组(3.3g/kg)和戊酸雌二醇组,每组12只。术后第5天开始药物干预,模型组和假手术组给予相应体积的纯净水,持续13周。给药结束后,酶联免疫法检测大鼠血清和骨组织OPG、RANKL含量,免疫组化法检测大鼠骨组织OPG、RANKL蛋白表达。结果：去卵巢后,大鼠血清和骨组织OPG含量显著下降,RANKL含量显著增加;骨组织OPG蛋白表达显著下调,RANKL蛋白表达显著增强。壮骨止痛方组大鼠血清和骨组织OPG含量显著增加,RANKL含量显著下降;骨组织OPG蛋白表达显著增强,RANKL蛋白表达显著下调。与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论：调节OPG/RANKL平衡可能是壮骨止痛方抗绝经后骨质疏松的作用机制之一。     

骨保护素参与高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞钙化调节的机制初探 #br#

摘要：目的 以β-磷酸甘油诱导大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）钙化模型为研究对象，初步探讨骨保护素（OPG）干 预对VSMC钙化的影响及机制。方法 体外分离培养大鼠主动脉VSMC。PBS为对照组，以10 mmol/L β-磷酸甘油诱 导钙化10 d为钙化对照组，β-磷酸甘油诱导钙化同时予以剂量梯度（1、4、8 μg/L）的OPG干预为OPG干预组。茜素红 染色检测各组钙化结节形成情况。邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙沉积含量。比色法测定碱性磷酸酶（ALP）活性。 免疫蛋白印迹（Western blot）检测各组Notch1/RBP-JK通路蛋白的表达。结果 茜素红染色显示，与钙化对照组比较， OPG干预组大鼠VSMC钙化结节明显减少，OPG干预组的钙含量、ALP活性均明显下降（均P＜0.05），且有剂量依赖性。 Western blot结果显示，与钙化对照组比较，OPG干预组的Notch1、RBP-JK、Jagged1、Msx2蛋白表达水平明显下降（均P＜ 0.05）。结论 OPG可能通过下调Notch1/RBP-JK通路蛋白表达，参与大鼠VSMC钙化过程调节。     

珠子参提取物促进大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化及调节OPG/RANKL表达的作用

目的探讨珠子参对原代大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化及对骨保护蛋白(OPG)和核因子-κβ受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法离体培养大鼠原代成骨细胞;采用MTT法、Ed U染色法、测定碱性磷酸酶法、矿化结节染色法考察不同浓度珠子参提取物对成骨细胞活力、增殖、分化和矿化等作用的影响;采用Real time PCR法和Western blot法检测珠子参提取物对成骨细胞OPG及RANKL mRNA和蛋白表达的调节作用。结果珠子参提取物浓度在500μg·mL~(-1)时可提高成骨细胞活力;在300、400和500μg·mL~(-1)时可显著提高成骨细胞增殖、分化和矿化能力,提高OPG mRNA和蛋白的表达,降低RANKL mRNA和蛋白表达,且呈现剂量依赖性。结论珠子参提取物可在一定浓度范围内提高大鼠成骨细胞的活力、增殖、分化和矿化,同时可调节OPG/RANKL表达,这可能是其防治骨质疏松症的作用机制。     

动物生理节律影响药物代谢过程的分子基础及其调节机制的研究进展

实验动物在药物研究与开发领域中发挥着不可替代的作用。药物在体内吸收、分布、代谢及排泄(ADME)过程是其药效或毒性作用产生的前提。国内外研究表明,机体参与药物体内过程各个环节的生理功能状态具有不同程度的时间节律性。肠道转运体、肝脏药物代谢酶及肾脏在药物ADME过程中发挥着重要作用。本文综述了肠道药物转运体、肝脏药物代谢酶及肾脏排泄等环节的生理节律性现象及其分子基础和调节机制。     

RANK/RANKL/OPG系统及其相关疾病和抗RANKL疗法的研究进展

骨骼是一个动态组织,在生物的整个生命周期中不断地进行构建、吸收、重建,核因子(nuclear factor,NF)κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB,RANK)/NF-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)/护骨素(osteoprotegerin,OPG)系统是调控这一过程的关键系统.RANK/RANKL/OPG属于肿瘤坏死因子及其受体超家族,三者通过调控破骨细胞的分化和活化来影响骨吸收和重建的过程.另外,免疫细胞也参与和调节RANK/RANKL的表达和分泌,而免疫细胞本身亦受到该系统的影响,因此,RANK/RANKL/OPG系统成为骨和免疫之间的重要关联.RANK/RANKL/OPG系统的失衡与多种骨代谢性疾病及免疫系统疾病引发的继发性骨病密切相关,该系统的发现为研究相关疾病的病理机制和治疗方法提供了基础.由此建立的抗RANKL疗法已经开始应用于临床试验和研究.此文对RANK/RANKL/OPG系统、系统相关疾病以及抗RANKL治疗的进展做一综述.     

1,25(OH)2D3在牙乳头干细胞成骨分化期的作用研究

摘要 目的：研究1,25(OH)2D3在牙乳头干细胞向成骨细胞分化过程中的作用角色。方法：分离培养牙乳头干细胞,培养基中添加不同浓度1,25(OH)2D3,MTT法检测细胞生长速度,流式细胞术检测细胞增殖周期变化,western blot方法检测核因子-k B受体活化剂配体（RANKL）、骨保护素（OPG）和维生素D受体（VDR）的蛋白质表达水平;siRNA技术沉默VDR表达后,检测其对RANKL和OPG蛋白质表达的影响。结果：MTT和流式细胞术检测结果显示1,25(OH)2D3对牙乳头干细胞的增殖没有明显作用;western blot结果显示RANKL、OPG和VDR的蛋白质表达与1,25(OH)2D3浓度具有剂量相关性;siRNA沉默VDR表达后,RANKL和OPG的蛋白质表达水平均有不同程度下降。结论：1,25(OH)2D3通过调节VDR水平影响牙乳头干细胞向成骨细胞方向的分化过程。