粗壮女贞不同萃取部位抑菌活性成分研究

目的 研究粗壮女贞不同萃取部位总黄酮和粗多糖含量差异,分析该差异与其抑菌活性差异的关系,为研究粗壮女贞的主要抑菌成分提供依据。方法 不同极性溶剂对粗壮女贞水提物进行萃取,分光光度法分别测定不同萃取物的总黄酮和粗多糖的含量,通过微量肉汤稀释法测定提取物对不同细菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果 粗壮女贞水提物正丁醇萃取层对副溶血性弧菌、产气荚膜梭菌及拟杆菌的抑菌效果较好,最小抑菌浓度分别为:6.15g/L、13.2g/L、13.2g/L,剩余水层对副溶血性弧菌、嗜水气单胞菌及产气荚膜梭菌抑菌效果较好,最小抑菌浓度依次为:4.49g/L、10.7g/L和15.6g/L,三氯甲烷萃取层和乙酸乙酯萃取层对常见革兰阳性菌和革兰阴性菌几乎不抑制;正丁醇萃取层中的总黄酮含量最多,约占总水提物的85.6%,剩余水层中粗多糖的含量最多,约占总水提物的47.1%。结论 粗壮女贞水提物对实验选择的几种致病菌有较好的抑制作用,对两种益生菌没有抑菌作用,抑菌活性物质可能主要为极性较大的物质,正丁醇萃取层和剩余水层的黄酮含量和粗多糖含量较高可能与其抑菌活性有关。     

食品中咖啡因,可可碱和茶碱含量的调查

食品中咖啡因、可可碱和茶碱含量的调查中国科学院生态环境研究中心（北京１０００８５）陈青川，牟世芬，侯小平咖啡因、可可碱和茶碱作为一类具有显著生理作用的生物碱，普遍存在于茶叶、咖啡、可可等各种食品当中，其制品近年来在食品工业中得到了日益广泛的应用，国标...     

普洱茶水提物体外抑菌效果研究

目的研究普洱茶提取物对几种常见细菌的体外抑菌效果。方法热水浸提法制备普洱茶总水提物,连续萃取获得氯仿提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物以及剩余水提物。采用微量肉汤稀释法测定5种普洱茶提取物对金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌等12种常见细菌的最小抑菌浓度,对其抑菌效果进行比较。结果普洱茶总水提物对金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌及产气荚膜梭菌的抑菌效果较佳,最小抑菌浓度分别为:0.83 g/L、0.42 g/L、0.83 g/L;剩余水提物抑菌效果明显优于氯仿、乙酸乙酯及正丁醇提取物,对以上3种细菌的最小抑菌浓度分别为:0.83 g/L、0.83 g/L、0.83 g/L;普洱茶水提物对婴儿双歧杆菌和德氏乳杆菌均无抑菌作用。结论普洱茶水提物对试验用的10种致病菌均有不同程度抑菌效果,对2种益生菌没有抑菌作用;剩余水提物抑菌效果略差于总水提物,但优于3种有机溶剂萃取物。     

固相萃取-气相色谱质谱联用法测定尿中邻苯二甲酸酯类代谢物

目的建立固相萃取-气相色谱质谱联用法测定尿液中邻苯二甲酸单甲酯、邻苯二甲酸单乙酯、邻苯二甲酸单丁酯、邻苯二甲酸单2-乙基己酯、邻苯二甲酸单苄酯等5种邻苯二甲酸酯类代谢物的方法。方法尿液通过β-葡萄糖苷酶酶解,固相萃取小柱净化,三氟化硼乙醚甲醇溶液衍生,最后通过DB-5毛细管色谱柱(30m×0.25 mm,0.25μm),气相色谱质谱联用法测定。结果该方法在25.0~1000μg/L浓度范围内,5种邻苯二甲酸酯的浓度与峰面积的线性关系良好,相关系数为0.9989~0.9996,方法检出限为10.0~15.0μg/L;在空白样品中添加15.0、200和500μg/L三个浓度水平,平均回收率为80.2%~97.8%,相对标准偏差为4.2%~10.2%(n=6)。采用该方法对81位孕妇的尿液进行了检测,检出率为98.7%。结论固相萃取-气相色谱质谱联用法适用于尿液中5种邻苯二甲酸酯类代谢物的同时检测。     

城市回用水有机提取物的雌激素效应

目的检测郑州市某污水处理厂进水及出水中有机提取物的雌激素样效应。方法利用固相萃取技术提取进水及不同工艺出水中的有机物,应用环境雌激素基因重组酵母,通过测定酵母经类雌激素化合物质激活后产生的β-半乳糖苷酶活性来判断各水样有机污染物的雌激素样活性。结果进水、二级和三级出水的有机提取物在1/2、1/4、1/8三个稀释浓度及新工艺出水的有机提取物在1/2、1/4两个稀释浓度下,酵母菌表现出β-半乳糖苷酶活性;相同染毒浓度下,二级出水和进水的β-半乳糖苷酶活性明显升高。结论郑州市城市污水及出水中所含有机物在一定浓度下表现出雌激素样活性,具有潜在的环境与健康风险。     

断肠草提取物对小鼠的急性毒杀研究

目的探讨断肠草提取物对小鼠的毒力作用。方法灌胃法。结果断肠草提取物对小鼠具有很强的毒杀作用。一次性注射0.5 ml、浓度为0.003、0.004、0.005 g/ml的断肠草提取物时,小鼠在30 min内的死亡率分别为8.33%、41.67%、100%。同时,断肠草提取物对小鼠的毒杀作用迅速。当浓度为0.005 g/ml时,小鼠在20 min内全部死亡,平均致死时间为12.8 min;浓度为0.004 g/ml时,试鼠在28 min内死亡了5只,剩余的2 d内未见死亡;浓度为0.003 g/ml,试鼠在16 min时死亡1只,剩余的2 d内仍未见死亡。中毒小鼠均表现出活动迟缓,步伐不稳,身体抽搐,肤色变黑等一些症状。结论断肠草提取物对小鼠毒杀作用显著,所需剂量少,致死时间短,为开发植物性灭鼠剂提供了技术参考。     

米糠提取物对PC12细胞保护作用的体外实验研究

目的探讨富含γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的米糠提取物(rice bran extracts,RBE)对Aβ_(25-35)致PC12细胞损伤的影响。方法 (1)将细胞分为对照组和不同浓度RBE处理组,RBE的浓度分别为50、100、200、400、800、1600和3200(μg/ml),用CCK-8法检测RBE对PC12细胞活性的影响。(2)将细胞分为对照组(不加任何处理因素)、Aβ_(25-35)处理组(20μmol/L)、不同浓度RBE干预+Aβ_(25-35)处理组,RBE浓度分别为100、200、400、500、800、1000和1600(μg/ml)。RBE干预采用预孵育和共孵育2种方式,用CCK-8法检测RBE对PC12细胞的保护作用;并比较2种不同孵育方式的保护效果。结果 (1)一定浓度范围内的RBE可提高PC12细胞的活性。(2)RBE预孵育的浓度为200~1000μg/ml时,对Aβ_(25-35)损伤的PC12细胞具有显著保护作用(P0.05),其最佳浓度为800μg/ml;RBE共孵育的浓度为400~1000μg/ml时,对Aβ_(25-35)损伤的PC12细胞具有显著保护作用(P0.01),其最佳浓度为1000μg/ml。结论适宜浓度的米糠提取物干预对Aβ_(25-35)损伤的PC12细胞具有保护作用。     

气相色谱-质谱法测定动物组织中的β_2-兴奋剂含量

应用气相色谱-质谱(GC MS)联用技术建立动物组织中β2 兴奋剂的测定方法。动物组织加1%的高氯酸溶液匀浆,用乙酸乙酯:异丙醇(6∶4 )萃取,经固相萃取柱净化,BSTFA +1%TMCS衍生后进行GC MS测定。样品中最低检出浓度分别为特布他林0 . 5 μg kg、克伦特罗1 0 μg kg、沙丁胺醇0 . 2 μg kg。     

己酮可可碱对冷冻前后精子的影响

目的 分析不同浓度的己酮可可碱对体外精液中精子的活力、活率、运动功能等的影响,为体外受精技术提供依据。方法 将30例精液标本进行分组,添加不同浓度的己酮可可碱,终浓度分别为0、0.6、1.2、2.4、3.6 mmol/L,通过程序降温仪冷冻精子后转移到液氮中保存24 h,然后进行复苏操作。用计算机辅助精子分析仪检测精子冷冻前和复苏后的各项参数。结果 添加己酮可可碱后不会对精液的浓度产生影响,能够显著提高精子复苏率、精子活力、活率、运动功能,并且各项的增幅随着己酮可可碱浓度的增加而逐渐提高。这种提高作用在精子冷冻前后均有体现。结论 己酮可可碱的终浓度为3.6 mmol/L时,改善精液各项参数作用效果最好,临床应用时可以此浓度作为参考依据。     

基于Triton X-114的浊点法萃取富集环境水样中的双酚A

目的探讨TX-114浊点萃取体系应用于环境水样中萃取双酚A的实验过程,影响萃取的因素（如TX-114的浓度、平衡时间和温度、pH值等）。方法通过高效液相色谱测定样品的含量。结果在最佳实验条件下,双酚A的检测限达到了0.05μg/L。在0.4~100μg/L浓度范围内,该方法具有良好的线性关系,相关系数为0.9987,加样回收率为97.96%~100.42%。结论该法具有高效、绿色环保以及成本低等特点,是一种萃取水样中双酚A的好方法。     

分散液-液微萃取-高效液相色谱法测定尿中邻甲酚

目的建立尿中邻甲酚的正辛醇分散液-液微萃取-高效液相色谱测定方法。方法在自制的萃取离心装置中,以正辛醇为萃取剂,乙醇为分散剂,对尿中邻甲酚进行分散液-液微萃取。对分散剂的种类、分散剂用量、萃取时间、p H值、盐析量等条件进行优化与探讨。结果邻甲酚在1.0~50.0μg/L浓度范围内线性相关系数大于0.999,方法检出限为0.075μg/L,加标回收率为81.9%~106.7%,日内精密度范围为5.57%~7.47%,日间精密度范围为5.33%~8.18%。结论该法操作简便,使用有机溶剂少,富集倍数高,前处理时间短,适用于职业接触甲苯人群尿中代谢产物邻甲酚的测定。     

搅拌棒吸附萃取-热脱附-气相色谱-质谱联用法测定水中54种挥发性有机物

目的采用搅拌棒吸附萃取(SBSE)-热脱附-气相色谱-质谱联用法测定水样中54种挥发性有机物(VOCs)。方法涂有聚二甲基硅氧烷(PDMS)的搅拌棒置于20 ml水样中,以1 500 r/min萃取20 min后热脱附-气相色谱-质谱联用仪检测。研究了萃取体积、不同浓度Na Cl、不同浓度甲醇、搅拌棒转速和萃取时间对萃取效率的影响;分别对影响SBSE萃取效率的条件进行了优化,同时也对热脱附的时间、温度和冷阱温度等条件进行优化。结果 54种VOCs的浓度为0.5μg/L~100μg/L时,线性关系良好,相关系数(r)为0.994 3~0.999 9,检出限为0.03μg/L~6μg/L,相对标准偏差(RSD)为1.09%~5.02%,平均加标回收率为81.6%~99.6%(n=10)。结论本法简便、快速,准确度和灵敏度高,检出限低,稳定性好,干扰小,线性范围宽,无有机溶剂污染,可满足多种水样中54种VOCs的测定。     

十种清热解毒中药提取物抗泛耐药鲍曼不动杆菌感染的研究

目的 研究金果榄、矮脚苦蒿和姜黄等十种清热解毒中药抗泛耐药鲍曼不动杆菌(XDR-AB)感染的活性,筛选出具有体内抗感染活性的中药提取物,为发现新型抗XDR-AB感染的抗菌药物提供研究基础。方法 分别采用水、50%乙醇、95%乙醇提取十种清热解毒中药并制成不同浓度的药物浸膏,与课题组前期优化的XDR-AB感染秀丽隐杆线虫模型共孵育,通过线虫的存活率判断中药提取物的体内抗XDR-AB活性。结果 随着姜黄和土荆皮提取物浓度的增大,XDR-AB感染的线虫存活率不断提高。姜黄的水提取物、50%乙醇提取物和95%乙醇提取物在浓度1 000μg/mL时,可使XDR-AB感染的秀丽隐杆线虫存活率分别提高至54.2%(与阴性对照组比较,P<0.001)、18.8%、13.3%;土荆皮的水提取物、50%乙醇提取物和95%乙醇提取物在浓度1 000μg/mL时,可使XDR-AB感染的秀丽隐杆线虫存活率分别提高至47.4%(与阴性对照组比较,P<0.001)、23.8%、15.8%。结论 姜黄和土荆皮水提取物具有较好的抗XDR-AB感染活性,可对其主要化学成分进行体外抗菌药效验证,以期发现新型抗X...     

β-环糊精/壳聚糖复合物-管尖固相萃取-高效液相色谱法测定饮料中柠檬黄

目的 建立饮料中痕量柠檬黄的检测方法。方法 以β-环糊精/壳聚糖复合物(CDCS)为固相萃取吸附剂，联用高效液相色谱仪进行检测。考察样品pH、萃取时间、吸附剂用量和洗脱剂等条件对萃取柠檬黄效率的影响。结果 CDCS对柠檬黄最大吸附容量为39.1 mg/g,在多次循环使用后吸附容量为最大时的93.0%。在样品溶液pH=6、萃取时间为14 min、CDCS吸附剂用量为15 mg、1 mL 5%盐酸-甲醇作为洗脱剂条件下，饮料中柠檬黄在10～150μg/L范围内线性关系良好，线性方程y=90.57x-4.393,相关系数r为0.999 9,检出限为2μg/L,实际样品的回收率为88.9%～110%,相对标准差(RSD)为0.67%。结论 建立的方法操作简便，绿色环保，可应用于实际样品的检测。     

超声辅助乳化液液微萃取-高效液相色谱法测定水中邻苯二甲酸酯

目的:将超声辅助萃取与液液微萃取技术结合,建立水中邻苯二甲酸酯的高效液相色谱测定方法。方法:对水样的超声萃取条件和液液微萃取条件进行优化,采用高效液相色谱测定。结果:在0μg/ml～6.0μg/ml范围内线性关系良好r,>0.999;三种邻苯二甲酸酯检出限为0.2μg/L;水样中加标回收率为88.4%～105.4%,相对标准偏差在3.1%～6.8%。结论:本方法快速、准确适用于水中邻苯二甲酸酯的浓度测定。     

气相色谱-质谱法检测血液中15种农药残留

目的建立血液中15种农药的气相色谱-质谱检测方法(GC-MS)。方法取2ml全血,用二氯甲烷萃取浓缩,以古洛糖酸内酯甲醇溶液定容,供装有DB-35MS(30m×0.25mm×0.25μm)毛细管柱的GC-MS定性定量测定。结果二嗪农、阿特拉津、扑草净、丁草胺、联苯菊酯在4～80μg/L浓度范围内,甲拌磷、2,4-D丁酯、甲基对硫磷、马拉硫磷、氯丹、甲氰菊酯在10～200μg/L浓度范围内,α-硫丹、β-硫丹、三氟氯氰菊酯在20～400μg/L浓度范围内,乐果在40～800μg/L浓度范围内,具有良好的线性响应,相关系数(r2)在0.998～1.000之间,各待测物的方法加标回收率为51.3%～113.1%,方法的检出限为0.05～1.00μg/L,方法的定量限为0.20～3.00μg/L,批内精密度在3.17%～22.79%,批间精密度在5.58%～26.13%。结论该方法适用于血液样品中15种农药的含量检测。     

人尿中多环芳烃代谢物的液相色谱-质谱测定法

目的 建立用于检测尿液中痕量多环芳烃(PAHs)代谢产物[1-羟基萘酚(1-N)、2-羟基萘酚(2-N)、2-羟基芴(2-F)、1-羟基芘(1-P)]的高灵敏度的液相色谱-串联质谱联用分析方法.方法 尿液经β-葡糖苷酸酶水解、固相萃取处理后,用高效液相色谱-串联质谱联用仪分析.结果 尿液中4种PAHs代谢产物在1～100 μg/L浓度范围内呈良好的线性关系,线性相关系数r均大于0.99;加标回收率80.8%～122.7%;2-F的最低检出浓度为1 μg/L,1-N、2-N、1-P的最低检出浓度为0.5 μg/L;日间精密度为9.59%～21.35%,日内精密度为3.28%～12.34%.结论 该方法回收率稳定、重现性好、检出限低,可以检测人体尿液中PAHs代谢产物的含量.     

QuEChERS-分散液液微萃取-气相色谱串联质谱技术检测果蔬中31种农药残留

目的建立蔬菜水果中31种不同类别农药残留的QuEChERS-分散液液微萃取-气相色谱串联质谱检测方法。方法蔬菜水果中的农药残留经QuEChERS萃取及净化后,使用分散液液快速微萃取浓缩,用气相色谱串联质谱仪检测。对分散液液微萃取相关的影响因素,如萃取溶剂种类与体积、分散溶剂的体积、盐的浓度等进行了优化。结果在香蕉和西红柿2个基质中开展基质加标实验,添加水平为1. 0μg/kg、5. 0μg/kg、10. 0μg/kg。本方法的最大线性范围为0. 1μg/kg～20. 0μg/kg,方法回收率为73. 3%～126. 8%,相对标准偏差为3. 6%～23. 6%,方法的检出限为0. 001μg/kg～0. 22μg/kg,定量限为0. 002μg/kg～0. 73μg/kg。结论本方法结合了Qu ECh ERS的快速萃取、净化能力与分散液液微萃取的快速、高倍浓缩能力。方法前处理过程简单、快速、灵敏度极高、定量结果准确,适合于蔬菜水果中31种农药残留的检测与确证。     

固相微萃取气质联用同时测定饮用水中的卤乙腈、卤代硝基甲烷及含碘三卤甲烷消毒副产物

目的建立固相微萃取气相色谱质谱联用测定饮用水中6个卤乙腈、7个卤代硝基甲烷及5个含碘三卤甲烷消毒副产物的方法,并了解本市饮用水中目标消毒副产物的浓度水平。方法优化固相微萃取参数,建立检测方法,并对100个饮用水样品进行检测。结果选择DVB/PDMS萃取头,以氯化钠为盐析试剂且加入浓度为40%(W/V),在萃取温度40℃萃取时间20 min、解吸温度170℃解吸时间2 min的操作条件下,目标消毒副产物具有良好的检测灵敏度,检出限为0.14 ng/L～18.00 ng/L,方法的线性相关系数0.99,加标回收率为70%～121%,相对标准偏差为1%～15%。对本市100个饮用水进行检测,结果卤乙腈、含碘三卤甲烷、卤代硝基甲烷的中位值浓度分别为0.86μg/L、0.36μg/L、0.07μg/L,检出率分别为99%、89%、89%。结论本方法灵敏、简便、无干扰,适合饮用水中痕量浓度水平的卤乙腈、卤代硝基甲烷、含碘三卤甲烷的检测。     

全自动固相萃取免疫亲和柱净化—HPLC法测定乳制品中黄曲霉毒素M1

目的 建立全自动固相萃取免疫亲和柱净化—液相色谱—荧光检测法测定乳制品中黄曲霉毒素M1。方法 牛奶和奶粉样品中的黄曲霉毒素M1经GILSON GX-274全自动固相萃取仪萃取、净化后,用Welch Ultimate AQ-C18液相色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,荧光检测器检测。结果 本法在0.5μg/L~10.0μg/L浓度内线性相关系数为0.999 7。牛奶的最低检出浓度为0.004μg/kg,奶粉最低检出浓度为0.04μg/kg。牛奶的回收率为90.0%~95.3%,奶粉的回收率为88.0%~95.6%,相对标准偏差均5.0%。从广州市12区随机购买不同品牌牛奶和奶粉共120份样品依此方法测定,其中牛奶的阳性率为18.0%,奶粉的阳性率为4.2%,但所检测样品黄曲霉毒素M1含量均小于我国国家标准规定的限量标准。结论 本法操作简单,灵敏度高,重现性好,适合批量乳制品中黄曲霉毒素M1的检测。