全国首例输入性基孔肯雅病的实验室诊断

目的:通过系统的实验室检测发现并确认全国首例输人性基孔肯雅病例.方法:利用实时荧光RT-PCR、RT-PCR检测方法,并对RT-PCR扩增产物进行核苷酸序列测定.结果:实时荧光RT-PCR、RT-PCR两种实验方法,在同一病例不同时间采集的多份标本中,都检测到基孑L肯雅病毒核酸;对RT-PCR扩增产物进行测序,测出的521个碱基与基孔肯雅病毒核酸序列比对,结果同源性高达99%.结论:该病例为全国首例输入性基孔肯雅病实验室确诊病例.     

1例输入性基孔肯雅病例的实验室检测

目的通过系统的实验室检测发现并确认1例输入性基孔肯雅病例。方法根据基孔肯雅病毒基因序列设计引物和荧光标记探针,利用实时荧光RT-PCR和常规RT-PCR检测方法对广东出入境检验检疫局发现的1例入境发热患者的血清样本进行检测,并对RT-PCR扩增产物进行核苷酸序列测定。结果通过实时荧光RT-PCR和常规RT-PCR 2种实验方法在该病例标本中检出基孔肯雅病毒核酸;对RT-PCR扩增产物进行序列测定,测出的521个碱基与GeneBank数据库公布的基孔肯雅病毒核酸序列进行比对,结果显示同源性高达99%。结论结合该患者临床症状、实验室检测结果及流行病学调查结果,判断该病例为输入性基孔肯雅病例。     

阜阳市手足口病病例巢式RT-PCR诊断与结果分析

目的明确阜阳市手足口病暴发的病原体,并对RT-PCR结果进行分析。方法利用巢式RT-PCR方法,分别采用肠道通用引物、EV71特异引物和CoxA16特异引物对这起暴发中156例病人的176份病例标本进行检测。结果156例病例的176份标本中,肠道通用引物、EV71特异引物和CoxA16特异引物检测阳性率分别为73.30%、63.07%、0%。咽拭子、气管吸痰液、肛拭子肠道通用引物检测阳性率分别为75.71%、54.54%、78.57%,χ2=4.57,P>0.05;EV71特异引物检测阳性率分别为65.00%、45.45%、71.43%,χ2=3.57,P>0.05,两种引物检测的三类标本阳性率比较均无统计学意义。156例病例中,有22人采集了双份或多份标本共计50份,其中标本阳性率和病例阳性率比较,肠道通用引物检测分别为56.00%、81.82%,χ2=4.41,P<0.05;EV71特异引物检测分别为54.00%、81.82%,χ2=5.04,P<0.05,两种引物检测结果均有统计学意义。结论巢式RT-PCR技术是肠道病毒快速诊断的重要手段,阜阳市手足口病暴...     

阜阳市手足口病病例巢式RT—PCR诊断与结果分析

目的明确阜阳市手足151病暴发的病原体,并对RT,PCR结果进行分析。方法利用巢式RT—PCR方法,分别采用肠道通用引物、EV71特异引物和CoxA16特异引物对这起暴发中156例病人的176份病例标本进行检测。结果156例病例的176份标本中,肠道通用引物、EV71特异引物和CoxA16特异引物检测阳性率分别为73．30％、63．07％、0％。咽拭子、气管吸痰液、肛拭子肠道通用引物检测阳性率分别为75．71％、54．54％、78．57％,χ^2=4．57,P〉0．05;EV71特异引物检测阳性率分别为65．00％、45．45％、71．43％,χ^2=3．57,P〉0．05,两种引物检测的三类标本阳性率比较均无统计学意义。156例病例中,有22人采集了双份或多份标本共计50份,其中标本阳性率和病例阳性率比较,肠道通用引物检测分别为56．00％、81．82％,χ^2=4．41,P〈0．05;EV71特异引物检测分别为54．00％、81．82％,χ^2=5．04,P〈0．05,两种引物检测结果均有统计学意义。结论巢式RT—PCR技术是肠道病毒快速诊断的重要手段,阜阳市手足口病暴发的病原体为肠道病毒EV71型。多次多样本采样能够提高病例阳性诊断率。     

2例马来西亚籍输入性基孔肯雅热病例的实验室诊断

[目的]通过系统的实验室检测发现并确认2例输入性基孔肯雅病例。[方法]采用实时荧光逆转录（Realtime RT-PCR）、逆转录PCR（RT—PCR）检测方法对病人血清进行检测,并对RT-PGR扩增产物进行核苷酸序列测定。[结果]通过实时荧光RT—PCR、RT—PCR 2种实验方法在该病例标本中检出基孔肯雅病毒核酸;对RT-PCR扩增产物进行测序,测出的521个碱基与基孔肯雅病毒核酸序列比对,结果同源性高达99％。[结论]2病例为输入性基孔肯雅实验室确诊病例。     

广州市自然界白纹伊蚊携带登革热病毒情况分析

目的通过对广州地区登革热媒介白纹伊蚊进行携带登革热病毒情况的调查，从传播媒介的角度探索该地区登革热流行的来源和特点。方法采集广州市各区新旧疫点附近的白纹伊蚊幼虫标本，饲养为成蚊后提取蚊虫总RNA，用登革热病毒特异引物经实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）进行病毒核酸检测，并对阳性结果反应产物进行序列测定。结果在荔湾区逢源街（2006年8月）、从化市邓村（2007年4月）和白云区云溪（2007年5月）各检出1宗登革热病毒核酸阳性蚊虫标本。其中荔湾区逢源街和从化邓村标本的RT—PCR产物经过序列测定证实为登革热病毒I型。结论广州地区登革热病毒可能在自然界白纹伊蚊种群中长期存在。     

湖北省首例输入性疟疾混合感染的实验室诊断分析

目的应用多重巢式PCR技术对一例输入性疟疾混合感染病例进行诊断和鉴定。方法采集镜检初诊为输入性卵形疟患者血样,进行疟疾快速诊断试剂检测、显微镜镜检复核、多重巢式PCR检测及测序分析。结果该患者经快速诊断试剂检测结果为非恶性疟原虫阳性;镜检复核查见寄生于红细胞内的疟原虫环状体、大滋养体和配子体,根据形态鉴定为卵形疟;多重巢式PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,在760bp和205bp处有特异性扩增条带,测序后经Blast比对,分别与Gen Bank数据库中卵形疟原虫变异亚种和恶性疟原虫部分序列的一致性为99.00%。结论该患者经多重巢式PCR和序列分析确诊为湖北省首例输入性卵形疟原虫变异亚种与恶性疟原虫混合感染病例。     

埃及伊蚊抗凝血因子Xa基因片段的克隆测序

目的：探讨我国登革热的重要媒介蚊种埃及伊蚊唾液中的抗凝血因子Xa基因。方法：用兼并引物PCR方法从我国的埃及伊蚊基因组DNA扩增抗凝血因子Xa基因片段,克隆入测序T载体进行测序。结果：扩增出抗凝血因子Xa基因片段长度约300bp,测序后发现与报道的埃及伊蚊的cDNA基因相应序列多了一段63bp内含子,并有几个碱基和氨基酸序列变化。结论：我国海南岛的埃及伊蚊抗凝血因子Xa基因有一定差异,可能对应的是一个新的基因型。     

巢式PCR诊断儿科患者鼻病毒感染的探讨

目的了解儿科急性呼吸道感染的病毒病原,建立快速、敏感、特异的检测鼻病毒（HRV）的方法.方法根据已发表的HRV的核苷酸序列设计巢式PCR引物,并用多种呼吸道病毒的标准毒株确定方法的特异性.收集2002年11月至2003年10月的急性呼吸道感染患儿标本771例,应用巢式PCR方法检测标本中有无HRV基因片段.结果特异性检测结果显示仅HRV cDNA有预期大小的片段扩增.771例标本中HRV总检出例数为148例（148/771）,占19.2%;HRV阳性检出率在咽炎患儿中达到53.3%（8/15）,喉炎患儿43.8%（7/16）,支气管炎患儿为28.7%（29/101）,其他如急性扁桃体炎、急性肺炎等患儿也有较高的HRV阳性检出率.在2002年11月以及2003年8-10月HRV检测阳性率较高（21.6%～32.6%）,尤其在2003年9月份HRV检测阳性率最高,达到32.6%;2003年3-7月HRV阳性标本所占百分率较平稳,在16.0%～19.1%之间.结论建立的巢式RT-PCR可以检测到儿科呼吸道感染患儿标本中的鼻病毒基因片段;HRV是北京婴幼儿急性呼吸道感染的重要病毒病原之一.     

郴州市2008年17例临床诊断手足病病例病原学分析

[目的]了解2008年郴州市手足口病的病原体类型及分布特征。[方法]采集17例临床诊断手足口病病例的咽拭子、疱疹液等样本,采用RT-PCR及Real-Time法检测样本中的肠道病毒通用型(EV)、肠道病毒71型(EV71)、肠道病毒科萨奇A16型(CoxA16)这3种核酸。[结果]共检测17例临床诊断手足口病样本,其中通用型3例、CoxA16型3例、EV71型2例,总阳性率为47.00%。[结论]引起郴州市手足口病的病原体主要为CoxA16型及其他肠道病毒。     

输入性三日疟原虫的实验室诊断

目的 分析输入性三日疟疾的实验室诊断,减少三日疟的误诊与漏诊。 方法 采用厚薄血膜涂片形态学检查、巢氏PCR对疟原虫18S rRNA基因进行扩增等方法确诊输入性三日疟疾病例。 结果 经过形态学和巢氏PCR检测发现首诊结果为未检出、检出未分型和诊断为恶性疟的7例患者感染三日疟原虫,有一例为间日疟原虫和三日疟原虫混合感染。 结论 在消除疟疾的地区,应当持续的进行疟原虫显微镜镜检技术的培训和分子生物学技术的推广应用,以满足现阶段输入性疟疾病例正确诊断和分型要求,尤其是罕见和少见虫种鉴定要求。     

深圳口岸首例输入性基孔肯雅热病例应急处置及防控

目的防止输入性传染病在境内传播。方法口岸查验、实验室检测、快速联控三位一体的口岸传染病防控模式。结果从来自马来西亚的中国籍游客中各查获1例基孔肯雅热病例,成功地阻断了可能造成的基孔肯雅热疫情境内传播。结论口岸查验、实验室检测、快速联控三位一体是口岸传染病防控的有效模式。     

Identification and genetic characterization of Zika virus isolated from an imported case in China

Zika virus (ZIKV) is a reemerging flavivirus that stroke Brazil in 2015 and appeared in China for the first time in 2016. Sequencing and genomic analysis are essential for Zika virus study. However, the complete genome length of Zika virus is still a disputable issue. In this study, we reported the complete genomic sequence of Zika virus strain ZKC2/2016 from an imported case in China, in February 2016. The virus was isolated and virus characteristics were identified by cytopathic effect, quantitative real time-PCR, immunofluorescence assay and electronic microscopy. Next generation sequencing (NGS) technique and 5′ and 3′ Rapid Amplification cDNA Ends (RACE) PCR were used to sequence the complete genome. The genome length of this newly obtained Zika virus strain is 10,807 base pairs (bp). Genetic analysis showed that ZKC2/2016, along with other Chinese Zika virus strains in 2016, formed three clusters within Asian linage. Multiple sequence alignment and prediction of RNA secondary structure of untranslated regions (UTRs) of ZKC2/2016 and several other ZIKV strains indicated that the difference of ZIKV genome length mainly laid in UTRs. Besides, those genomes shorter than 10,790 bp were probably incomplete due to lacking conserved secondary RNA structures in untranslated regions which were playing important roles in flavivirus replication. Our findings benefited the disease control of Zika fever in China and the study of Zika virus genome.     

Gnathostomiasis: an emerging imported disease

As the scope of international travel expands, an increasing number of travelers are coming into contact with helminthic parasites rarely seen outside the tropics. As a result, the occurrence of Gnathostoma spinigerum infection leading to the clinical syndrome gnathostomiasis is increasing. In areas where Gnathostoma is not endemic, few clinicians are familiar with this disease. To highlight this underdiagnosed parasitic infection, we describe a case series of patients with gnathostomiasis who were treated during a 12-month period at the Hospital for Tropical Diseases, London.     

中国首例输入性黄热病病例的流行病学调查

目的 描述中国首例输入性黄热病病例的发病就诊过程和流行病学特征,为今后黄热病输入性病例的管理提供依据。方法 通过传染病监测系统及时发现病例并对病例进行流行病学调查,采集病例血液和唾液标本,应用实时荧光PCR方法进行黄热病核酸检测。结果 患者为男性,32岁,2016年3月8日在安哥拉突发寒颤高热,10日凌晨抵京,下午入院治疗,11日北京市CDC实验室检测患者血液标本黄热病毒核酸阳性。患者症状持续加重,肝肾衰竭,肝性脑病,多器官功能衰竭,后于16日死亡。患者在发病前6日内有明确蚊虫叮咬史。结论 该病例为我国首例输入性黄热病确诊病例。对此例病例开展的流行病学调查、实验室检测和疫情处置措施,为今后对输入性黄热病疫情的规范处置提供了科学依据。