桂枝甘草汤提取物组分对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的影响

目的 探讨桂枝甘草汤提取物组分对心肌缺血再灌注心律失常的作用.方法 结扎大鼠冠状动脉左前降支15 min再灌注1 h,监测心电变化,并检测心肌组织ATP酶活性及NO含量.结果 桂枝甘草汤提取物水组分、30醇组分有对抗心肌缺血再灌注损伤所致心律失常的作用,并且可提高大鼠心肌组织ATP酶活性和NO含量,与模型组比较有显著差异(P<0.05或P<0.01).结论 桂枝甘草汤有效组分可能是通过提高ATP酶的活性、增加NO的含量减轻缺血再灌注对心肌的损伤.     

β-细辛醚对缺血再灌注损伤心肌细胞线粒体膜电位的影响

目的观察石菖蒲有效成分β-细辛醚对缺血再灌注损伤(MIRI)心肌细胞线粒体膜电位(MMP)的影响。方法采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)建立心肌细胞MIRI模型,将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞分6组:正常对照组、MIRI模型组、β-细辛醚高、中、低剂量组(25,12.5,6.25μg/mL)、基质组。利用流式细胞术(FCM)检测MMP平均荧光强度。结果MIRI模型组心肌细胞MMP明显降低,与正常对照组比较有统计学意义(P<0.05);β-细辛醚能不同程度升高MMP,与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。结论β-细辛醚能有效抑制MIRI心肌细胞线粒体的损伤,稳定MMP。     

参龙宁心胶囊对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的影响

目的探索参龙宁心胶囊对心肌缺血再灌注损伤所致大鼠心律失常模型的作用。方法将大鼠分为假手术组、模型组、普罗帕酮组及参龙宁心颗粒高、中、低剂量6组,每组10只,除假手术组和模型组外,其余各组分别灌胃给予相应药物。末次给药1 h后采用结扎大鼠冠状动脉前降支引起心肌缺血再灌注致心律失常,记录各组大鼠Ⅱ导联心电图。实验结束后,取心肌组织行HE染色,并测定心肌组织中Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶,Mg2+-ATP酶的活性,观察各组心律失常发生率及病死率。结果参龙宁心胶囊有稳定QRS间期、PR间期的作用,对抬高的ST段有降低作用;还能显著提高线粒体膜Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶活性,显著降低缺血再灌注心律失常的发生率及病死率,减轻心肌缺血水肿。结论参龙宁心胶囊可能是通过保持缺血-再灌注心肌细胞膜稳定性,改善缺血心肌能量代谢障碍以发挥其抗心律失常作用。     

黄龙通络胶囊对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的影响

目的探索黄龙通络胶囊对心肌缺血再灌注所致大鼠心律失常模型的保护作用。方法采用结扎大鼠冠状动脉前降支,引起心肌缺血再灌注所致心律失常模型,记录各组大鼠Ⅱ导联心电图,并测定心肌组织中Na＋-K＋-ATPase、Ca2＋-Mg2＋-ATPase的活性。结果黄龙通络胶囊有稳定QRS间期、PR间期的作用,能降低抬高的ST段;能显著提高线粒体膜Na＋-K＋-ATPase、Ca2＋-Mg2＋-ATPase活性。结论黄龙通络胶囊可能是通过保持缺血-再灌注心肌细胞膜的稳定性,改善缺血心肌能量代谢障碍,而发挥其抗心律失常的作用。     

龙牙楤木总皂苷对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞线粒体细胞色素C和膜电位的影响及其作用机制

目的:观察龙牙楤木总皂苷、Mito KATP激活剂二氮嗪(DZ)、Mito KATP抑制剂5-羟基癸酸(5-HD)、龙牙+5-HD对大鼠缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)心肌线粒体细胞色素C和膜电位的影响,并探讨龙牙楤木总皂苷在减轻MIRI中的作用及其机制。方法:将60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(假手术组)、模型组、DZ组、5-HD组、龙牙组和龙牙+5-HD组,每组10只,建立Langendorff离体心脏灌流模型。对照组只穿线不结扎,以改良K-H液持续平衡灌流105分钟;其余5组均穿线结扎冠状动脉停灌30分钟,再分别以改良K-H液、DZ、5-HD、龙牙楤木总皂苷、龙牙+5-HD复灌75分钟(其中龙牙+5-HD组以5-HD复灌15分钟继以龙牙楤木总皂苷复灌60分钟)。提取线粒体,western-blot半定量测定线粒体内细胞色素C水平,荧光酶标仪测线粒体膜电位。结果:龙牙组线粒体细胞色素C释放减少,膜电位较高,与模型组、5-HD组、龙牙+5-HD组相比差异有统计学意义(P0.05),与DZ组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论:龙牙楤木总皂苷在MIRI时起到保护作用,能减少MIRI时细胞色素C的释放,稳定线粒体膜电位,其作用可能与mito KATP的开放有关。     

蒺藜皂苷预适应对心肌缺血再灌注损伤大鼠心功能的影响

目的建立Langendorff离体心脏灌流系统,制备缺血再灌注实验模型,观察蒺藜皂苷(gross saponinsfromTribulus terrestris,GSTT)预适应对大鼠心肌缺血再灌注损伤心功能的影响。方法 56只大鼠随机分为7组,正常对照组、缺血/再灌组(I/R)、心肌缺血预适应组(IPC)、阳性药腺苷组、GSTT 200、100、50 mg/L组,缺血30 min,再灌40 min,记录给药前、再灌后5、10、15、20、30 min心率(HR)、左室收缩压(LVSP)等心功能指标,并同步记录冠脉流量(CF),同时测定心肌组织ATP水平。结果 I/R组再灌注后5、10、15、20、30 min HR、LVSP明显下降(P0.001);IPC组,GSTT 200、100 mg/L预适应组和腺苷预适应组再灌注后5、10、15、20、30 min HR、LVSP均明显升高(P0.05、0.01);I/R组再灌注后各时间点(5、10、15、20、30 min)CF明显减少(P0.001);与I/R组相比,IPC组,GSTT 200、100 mg/L预适应组和腺苷预适应组再灌注后各时间点(5、10、15、20、30 min)CF均增加(P0.05、0.01、0.001);I/R组Na+-K+ATP酶活力明显降低(P0.001)。与I/R组相比,IPC组,GSTT 200、100 mg/L预适应组和腺苷预适应组Na+-K+ATP酶活力明显升高(P0.05、0.01)。I/R组的Ca2+-Mg2+ATP酶活力有增高趋势,与I/R组相比,IPC组,GSTT 200、100 mg/L预适应组和腺苷预适应组Ca2+-Mg2+ATP酶活力明显升高(P0.05、0.01)。结论 GSTT可抑制心功能低下,舒张冠状动脉,增加冠脉血流量而改善心肌的供血、供氧;GSTT还可增加心肌组织ATP酶活性,通过抑制Na+/Ca2+交换,使得细胞摄取的Ca2+减少。     

电针对脑缺血再灌注大鼠脑组织细胞线粒体膜电位及凋亡的影响

目的:探讨针刺对脑缺血再灌注大鼠神经元保护作用的机制。方法:雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组(Sham)、脑缺血再灌注组(CI/R)及脑缺血再灌注+电针组(CI/R+EA),每组12只。采用改良线栓法制备局灶性脑缺血(MCAO)再灌注模型。于再灌流开始后,CI/R+EA组电针"水沟"百会"穴,电针参数:频率2~15 Hz,间断疏密波,电流强度1 mA,以局部肌肉轻微震颤为度,时间30 min。以罗丹明123和Annexin V-FITC进行荧光染色,通过流式细胞仪检测细胞内荧光强度,分析脑组织细胞线粒体膜电位及凋亡发生率的变化。结果:CI/R组大鼠大脑皮层细胞线粒体膜电位明显低于假手术组(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01);电针治疗后,线粒体膜电位升高,细胞凋亡率受到抑制,与CI/R组比较差异有显著性意义(P<0.01)。结论:针刺治疗可明显减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,上调神经细胞线粒体膜电位水平可能是针刺抑制大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的机制之一。     

丹参素调节FoxO1与稳定缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞线粒体膜电位的实验研究

目的探讨丹参素改善缺血再灌注损伤大鼠的具体作用机制。方法将18只SD大鼠随机分为正常组、模型组、丹参素组,利用离体灌流系统操作,正常组持续灌注KH液90 min;模型组停灌30 min,复灌KH液60 min;丹参素组停灌30 min,复灌含有浓度为10μmol/L丹参素的KH液60 min。采用ELISA法检测大鼠心肌ROS的含量以及灌流液中LDH的活性;荧光探针法检测线粒体膜通透性转换孔(mPTP)的状态及线粒体膜电位;采用RT-PCR法在基因水平检测FoxO1 mRNA的表达。结果与正常组相比较,模型组大鼠LDH酶活性增高,线粒体膜电位下降,mPTP开放,心肌组织ROS含量增加,FoxO1 mRNA过表达;差异具有显著性(P0.01);与模型组相比较,丹参素组大鼠LDH酶活性降低,线粒体膜电位升高,mPTP开放受到抑制,心肌组织ROS含量减少,FoxO1 mRNA表达下调,具有统计学差异(P0.05)。结论 10μmol/L丹参素具有调节FoxO1 mRNA表达,削减ROS含量,抑制mPTP过度开放,稳定线粒体膜电位的作用,这可能是减轻IRI及发挥心肌保护作用的机制之一。     

冠通方对兔心肌缺血再灌注心肌细胞超微结构的影响

目的:观察冠通方对兔心肌缺血再灌注后心肌细胞超微结构的影响。方法:将48只新西兰大白兔按随机数字表法随机分为假手术组、模型对照组、复方丹参滴丸对照组、冠通方大剂量组、冠通方中剂量组、冠通方小剂量组,每组各8只,分别灌胃给药14 d。实验结束后取心肌标本行透射电镜观察心肌细胞超微结构。结果:缺血再灌注模型组心肌细胞超微结构受到破坏,肌原纤维断裂、溶解,肌原纤维排列混乱;线粒体水肿、线粒体内嵴断裂紊乱,线粒体肿胀呈近似圆形。复方丹参滴丸组,冠通方大、中剂量组心肌细胞超微结构形态较好,肌丝排列整齐,肌节明暗带清晰可见,大部分线粒体外膜清晰完整,线粒体内嵴排列较规整,基质颗粒较多,部分肌丝出现断裂,但多数肌原纤维条纹清晰,核仁明显。结论:冠通方大、中剂量组可以明显减轻缺血再灌注时心肌细胞结构的损害,可以有效防止缺血再灌注后心肌细胞的凋亡,从而达到保护心肌细胞的作用。     

螺内酯对大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨螺内酯对大鼠心肌缺血再灌注损伤时细胞凋亡的影响。方法:选择30只健康SD大鼠,采用结扎冠状动脉左前降支后再通的方法复制心肌缺血再灌注的动物模型,随机分为三组:假手术组(n=10)、缺血再灌注(MI/RI)组(n=10)和药物组(n=10)。光镜及电镜观察标本病理形态改变,检测各组再灌注3h后心肌局部凋亡相关因子bcl-2、fas的表达,比较各组间差异。结果:与假手术组比较,MI/RI组中Fas含量升高(P>0.01),Bcl-2含量明显减少(P>0.05);药物组较MI/RI组Fas含量明显降低(P>0.05),Bcl-2含量明显增加(P>0.05)。结论:螺内酯减轻MI/RI中心肌细胞凋亡程度。     

扶正补虚活血中药对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞保护作用的研究

目的：观察具有扶正补虚活血作用的中药对急性缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞的保护作用。方法：制备含药血清,将培养好的心肌细胞随机分为正常对照组、缺氧复氧（AR）组和麦贞花＋AR组,采用自动化分析仪检测LDH活性,RT-PCR检测AE3的表达。结果：与正常对照组比较,AR组细胞悬液中LDH增加3倍;麦贞花＋AR组与AR组比较细胞悬液中的LDH活性降低65.8%。AR组AE3mRNA表达较正常对照组增加,有显著性差异。麦贞花＋AR组心肌细胞AE3mRNA不仅均较正常对照组表达显著增加,且较AR组也显著上调。结论：本研究结果提示麦贞花颗粒对急性缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞有明显的保护作用,其作用机制可能与诱导内源性心肌保护物质AE3生成有关。     

定心方对缺血再灌注心律失常大鼠心肌细胞凋亡的影响

定心方(Dingxin Recipe,DXR)是我校附属南方医院心律失常专科经验方,临床研究表明其对多种心律失常有显著疗效[1]。心肌缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury,IRI)后发生的严重心律失常是阻碍缺血心肌从再灌注疗法中获得最佳疗效的主要原因,心肌细胞的凋亡参与了心肌IRI     

丹参对大鼠肾缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

1　材料　动物 :雄性健康ＳＤ大鼠 ,由本校动物实验中心提供。药品 :丹参注射液由正大青春宝药业有限公司生产 ;主要仪器 :显微镜-计算机真彩色图像分析系统 (ＣＭＩＡＳ)由北京航天航空大学研制。岛津ＣＬ -730 0全自动生化分析仪。电动匀桨机 (宁波新芝科器研究所 )。 76 0ＣＲＴ双光束紫外可见分光光度计。2　方法2 1　模型制作　大鼠 2 0 %乌拉坦 ( 5 0ｍｇ/ｋｇ)麻醉 ,腹部正中 5ｃｍ左右切口 ,钝性分离肾周组织 ,暴露双侧肾脏 ,每组均切除右肾 ,随后作以下处理 :对照组 :游离左肾不钳夹肾蒂 ;缺血再灌注组 :用无损伤动脉夹夹闭肾蒂 4…     

二仙汤对去卵巢大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的探讨二仙汤对去卵巢大鼠离体心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用及初步机制。方法36只雌性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、戊酸雌二醇组(戊酸雌二醇,8×10^-4g·kg^-1)、二仙汤低剂量组(4 g生药·kg^-1)、二仙汤中剂量组(8 g生药·kg^-1)、二仙汤高剂量组(12 g生药·kg^-1)。除假手术组外,各组动物均摘除卵巢复制更年期综合征大鼠模型,每日给药1次,连续90 d,通过Langdroff心脏灌流系统进行离体心脏灌注,生理信号采集系统记录心率,生化方法检测冠状动脉流出液乳酸脱氢酶(LDH)、谷草转氨酶(AST),心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肌酸激酶(CK-MB)、Ca^2+-ATP酶和Na^+-K^+-ATP酶活力。结果与模型组相比,二仙汤给药组能改善去卵巢大鼠MIRI的心率变化,减少冠状动脉流出液LDH、AST的含量,减少心肌组织MDA的含量,增加心肌组织SOD、Ca^2+-ATP酶和Na^+-K^+-ATP酶活力。结论二仙汤可防治去卵巢大鼠离体MIRI,其机制可能与抗氧化有关。     

三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注海马细胞Ca~(2 )及线粒体膜电位的影响

目的:观察缺血再灌注后海马区细胞内游离钙离子(Ca2 )、线粒体跨膜电位(Δψm)的变化以及三七总皂苷的保护作用。方法:用大脑中动脉栓塞(MCAO)再通法建立大鼠脑缺血再灌注模型,以荧光染色流式细胞仪检测各实验组海马区细胞内游离Ca2 浓度和线粒体Δψm的变化。结果:与假手术组相比,模型组海马区细胞内游离Ca2 浓度显著升高(P<0.01)、线粒体Δψm显著降低(P<0.01),与模型组相比,三七总皂苷组海马细胞内游离Ca2 浓度显著降低(P<0.01)、线粒体Δψm显著升高(P<0.05)。结论:三七总皂苷能抑制缺血再灌注引起的海马区细胞内Ca2 浓度升高,抑制线粒体Δψm下降,保护海马区细胞线粒体功能,这可能是其抗脑缺血再灌注损伤作用机制之一。     

缺血后处理对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 观察在体条件下缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用及可能的途径.方法 建立大鼠在体缺血再灌注模型,将30只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组、缺血预适应组.于再灌注末测定心肌酶,超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的含量,并测定心肌组织梗死面积.结果 与缺血再灌注组相比,缺血后处理组与缺血预适应组心肌梗死面积明显减小,血浆肌钙蛋白I及MDA的含量均降低（P〈0.05）,血浆SOD活性升高（P〈0.05）.结论 缺血后处理可减轻心肌缺血再灌注损伤,具有心肌保护效应.     

御风胶囊对缺血再灌注大鼠脑组织ATPase活性保护作用的研究

目的：观察御风胶囊（黄芪，丹参，天麻等）对缺血再灌注大鼠脑组织含水量、Na^ ,K^ -ATPase和Ca^2 -ATPase活性的影响。方法：采用线栓法造成大鼠脑缺血再灌注模型，分别观察脑缺血2h再灌注1h及24h脑组织含水量和ATPase活性。结果：御风胶囊能显著降低缺血再灌注大鼠脑组织含水量，保护脑组织Na^ ,K^ -ATPase和Ca^2 -ATPase活性。结论：御风胶囊能防治缺血再灌注所致脑水肿，其机理可能与其改善脑缺血再灌注后细胞膜离子转运有关。     

芍药甘草汤对脑缺血再灌注偏瘫大鼠痉挛状态和氨基酸水平的影响

目的观察芍药甘草汤对脑缺血再灌注(CI/RP)后大鼠兴奋性/抑制性氨基酸的影响,以探讨该方改善CI/RP后痉挛的作用机制。方法将94只CI/RP偏瘫大鼠随机分为模型组、芍药甘草组、芍药组、甘草组、巴氯芬组和假手术组。以右侧大脑中动脉栓塞术后2 h后再灌注制备动物模型,选取有明显偏瘫且伴有痉挛的大鼠为研究对象。各组在CI/RP后24 h给予相应干预,连续用药9天。观察干预前后大鼠姿势反射、肌张力变化,及其血清和脑组织谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)水平变化。结果 1芍药甘草组和芍药组可以明显提高大鼠姿势反射评分(P0.05,P0.01)。2芍药甘草组和巴氯芬组可以明显缓解肌张力(P0.05)。3芍药甘草组Gly含量明显低于甘草组(P0.05)。4巴氯芬组大鼠脑组织GABA含量明显降低于模型组(P0.01)。5芍药甘草组、芍药组、巴氯芬组血清Glu、Asp含量均明显低于模型组(P0.05,P0.01)。6甘草组血清Gly含量明显高于芍药甘草组和芍药组(P0.05)。结论芍药甘草汤可改善CI/RP后大鼠的痉挛程度和姿势反射,其机制可能与降低血清兴奋性氨基酸及下调脑组织甘氨酸有关。     

中药抗缺血再灌注心律失常实验研究进展

缺血再灌注心律失常指冠状动脉在某种因素作用下短时间内血流中断，因自然开放、药物作用或机械再通等原因，血流重新灌注心肌，使心肌的生理、生化发生改变而出现的心律失常，是缺血再灌注损伤最常见的表现之一。再灌注心律失常以室性心律失常最常见，包括室性早搏（PVB）、室性心动过速（VT）以及室性纤颤（VF）。室性心律失常常会导致患者的血流动力学改变，是缺血再灌注期患者猝死的最主要原因之一。随着心血管病介入诊断治疗的广泛开展，再灌注心律失常的发生率有增加趋势。近年来对本症的研究逐渐增多，其中中医药防治心肌缺血再灌注心律失常机制及疗效的实验研究发展很快。现结合相关文献综述如下。