人肝癌裸鼠皮下-肝原位移植瘤模型的建立

目的：使用α-氰基丙烯酸烷基酯建立人肝癌-裸鼠皮下肝原位移植瘤模型。方法：培养对数生长期的BEL-7402人肝癌细胞,接种于裸鼠皮下,形成皮下移植瘤后再移植于裸鼠肝内,利用α-氰基丙烯酸烷基酯建立肝原位移植瘤模型（间接肝原位移植瘤模型）。结果：成功的利用α-氰基丙烯酸烷基酯建立了间接肝原位移植瘤模型。移植瘤成功率达93．3％。结论：与传统的肝原位移植瘤模型制作方法比较,利用α-氰基丙烯酸烷基酯建立间接肝原位移植瘤模型方法简便,成功率高,便于推广使用。     

裸鼠人肝癌原位移植瘤模型的建立

目的 探讨利用人肝癌细胞系,建立裸鼠人肝癌原位移植瘤模型,在肝细胞癌自杀基因治疗的应用价值.方法 取人肝癌细胞系Be17402和HepG2,制备皮下移植瘤,后将肿瘤组织接种于裸鼠肝内,建立裸鼠肝原位移植瘤模型.HE染色进行病理形态学观察.结果 裸鼠皮下成瘤率为100.0％(4/4).肝内接种肿瘤,裸鼠存活率100.0％(32/32),成瘤率81.3％(26/32);镜下观察肿瘤细胞成浸润性生长;肺、肠系膜淋巴结等组织器官未见肿瘤转移灶.结论 应用人肝癌细胞系建立的裸鼠肝原位移植瘤模型可以很好地模拟人肝癌的解剖学特征,但肝癌转移模型的建立方法尚需探讨.     

人胃癌裸鼠胃原位移植转移模型的建立

目的 :建立人胃癌裸鼠原位移植转移模型 .方法 :用人胃癌细胞悬殊液接种于裸鼠皮下 ,形成稳定传代的皮下移植瘤 ,将皮下移植瘤组织再接种于裸鼠胃浆膜下 ,称为间接胃原位移植模型 ,并与直接用细胞悬液接种于裸鼠胃浆膜下、皮下、腹腔、尾静脉的移植瘤模型比较 ,观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率及组织学变化及细胞动力学改变等生物学特性 .结果 :肿瘤组织块保留了人胃腺癌的组织学特片 ,尾静脉注射与直接原位接种成瘤率均为6 0 % ,间接原位接种模型移植成瘤率为 80 % ,皮下与腹腔接种成瘤率均为 10 0 % .间接胃原位移植模型肝脏转移率为6 0 % ,直接胃原位移植模型肝脏转移率为 33.3% (P <0 .0 5 )尾静脉移植瘤模型仅见肝脏转移 ,实验过程中裸鼠衰竭处死后的肺脏经连续组织切片未见瘤细胞侵袭 .移植瘤细胞具有分泌CEA的功能 ,细胞动力学检测显示以五倍体细胞为主 .结论 :人胃癌裸鼠皮下 -胃原位移植瘤模型的生物学行学与人胃癌自然生长和转移过程相似 ,为研究人胃癌转移机制提供了理想的模型 .     

裸大鼠人高转移肝癌皮下和原位移植模型的建立

目的探讨建立裸大鼠人高转移肝癌的皮下和原位移植模型的可行性,并观察其生物学特性。方法体外培养人高转移肝癌株HCCLM3接种于裸大鼠皮下,建立皮下移植模型,然后用此移植瘤组织再接种于裸大鼠肝内,建立肝原位移植瘤模型。皮下移植的裸大鼠每周称重、测量瘤径,原位移植的裸大鼠每周称重,两组裸大鼠分别于移植8周后处死,通过巨检、镜检等观察移植肿瘤的生物学特性。结果裸大鼠皮下均成瘤,未见肺转移,裸大鼠原位移植成瘤率90％,肺转移70％,腹水发生率50％,自发消退率0％。结论裸大鼠人高转移肝癌HCCLM3移植瘤模型成功率高,原位移植有高转移,无自发消退现象,可作为研究肝癌转移和药物筛选的理想模型。     

戊巴比妥钠用于雄性裸鼠皮下-肝原位移植人肝细胞癌模型麻醉的方法

目的:研究戊巴比妥钠在裸鼠皮下-肝间接原位移植人肝细胞肝癌模型建立中的合适剂量.方法:共30例接种肝癌细胞株的皮下瘤雄性裸鼠取瘤后,对共150只雄性裸鼠行皮下-肝包膜下瘤体原位移植,观察供受体麻醉过程、药物剂量和效果.结果:供体手术戊巴比妥钠麻醉的剂量以80 mg/kg合适,受体手术戊巴比妥钠麻醉剂量以70 mg/kg合适.结论:在裸鼠皮下-肝脏原位肝癌模型建立的手术中,戊巴比妥钠是一种理想的麻醉药品.     

人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型的建立和改进

目的：建立人胃癌裸鼠胃原位种植转移模型。方法：用人胃癌细胞SGC-7901悬液接种于裸鼠皮下，形成稳定传代的皮下移植瘤。将皮下移植瘤组织再接种于裸鼠胃浆肌层，观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率及组织学变化等生物学特性。结果：肿瘤组织块保留了人胃腺癌的组织学特点，人胃癌裸鼠原位移植模型成瘤率为100％(20／20)，肝脏转移率为45％(9／20)。结论：人胃癌裸鼠原位移植瘤模型的生物学行学与人胃癌自然生长和转移过程相似，为研究人胃癌转移机制提供了理想的模型。     

人卵巢癌组织移植裸鼠实体瘤肝脾转移癌模型的建立

目的建立人卵巢癌组织移植裸鼠实体瘤肝脾转移癌模型。方法将1例人卵巢癌组织移植裸鼠，建立人卵巢癌裸鼠原代移植实体瘤模型的基础上，再将实体瘤腋下、背部皮下移植，实体瘤原位移植，实体瘤细胞移植裸鼠。观察裸鼠实体瘤生长和转移情况，称量其体重、肝、脾、子宫卵巢、瘤重及瘤的大小，并作病理、电镜检查。结果成功地建立人卵巢癌组织移植裸鼠实体瘤肝脾转移癌模型。组织学和超微结构形态均证明该实体瘤保留了原人卵巢癌、肝癌、脾癌特征。已传至第18代，传代移植成功率100％，肝脾转移100％。结论建立了人卵巢癌组织移植裸鼠实体瘤肝脾转移癌模型。通过18代传代和实验观察，肝脾转移100％。为人卵巢癌肝脾转移的研究提供了理想的动物模型。     

人胰腺癌裸小鼠胰腺原位移植模型的建立

目的：建立人胰腺癌高转移裸小鼠胰腺原位移植模型。方法：将人胰腺癌细胞株SW1990分别接种于裸鼠皮下和裸鼠胰腺,比较两组移植瘤的生长和侵袭转移情况。结果：胰腺癌皮下移植模型与胰腺原位移植模型的体内成瘤率、生长率和形态学上均无显著不同,但前者呈局限性生长,后者的9周转移率为93．8％,其中淋巴结转移、腹膜播散和肝转移发生率各占93．3％、73．3％和53．3％,且肝肿瘤结节CEA阳性,AFP阴性。结论：胰腺癌细胞SW1990的胰腺原位移植模型明显优于皮下移植模型,为一较理想的“拟人”胰腺癌转移模型。     

“纤维蛋白原-凝血酶”法建立人胃癌组织块裸鼠胃癌原位移植模型

目的：采用“纤维蛋白原-凝血酶”法建立人胃癌组织块裸鼠胃癌原位移植模型,为研究胃癌的发病机制及实验治疗提供理想的动物模型。方法：以人胃癌细胞株SGC-7901反复接种传代于BALB／C裸鼠皮下形成的皮下移植瘤组织块为材料,采用“纤维蛋白原-凝血酶”法将其粘贴于裸鼠胃壁,观察原位移植瘤的生长情况,移植成功率及转移情况。结果：“纤维蛋白原-凝血酶”法人胃癌组织块原位移植成功率为100％,局部淋巴结转移率为100％,肝脏及其他脏器转移发生率为83％,腹腔积液形成率为50％。结论：“纤维蛋白原-凝血酶”法能成功地建立人胃癌组织块裸鼠原位移植模型,并能很好地重现胃癌患者的临床转移过程,可为胃癌的临床研究提供一种简便、易行的实验模型。     

裸鼠原位肝癌移植模型的建立及其生物学观察

目的 探讨采用HepG2细胞株建立裸鼠人肝癌原位模型的方法,评价其生物学特性.方法 取人肝癌细胞株HepG2制备皮下移植瘤,然后将瘤块植入裸鼠肝左叶,建立原位移植模型,观察荷瘤鼠生存状态.裸鼠全身衰竭时处死、取瘤,HE染色及免疫组化法观察瘤组织的病理特点、血管生长及肿瘤细胞凋亡情况.结果 种瘤成功率90％,荷瘤鼠中位生存期76.7d,肿瘤直径(16.8土2.2)mm,体积(965.3±333.3)mm3,重量(1.1±0.4)g.瘤组织早期具有旺盛的增殖能力,晚期癌组织中Caspase3、TUNEL呈强阳性表达.结论 由原位移植法建立的裸鼠人肝癌模型,造模时间短、成瘤率高,生物学行为与临床肝癌相似,是基因药物筛选研究的理想模型.     

体内连续筛选法建立自发性肺转移人肝癌细胞系

目的　从人肝癌裸鼠肺转移灶中建立人肝癌细胞系 ,为探索肝癌转移的分子机制提供模型。方法　用高转移性人肝癌克隆细胞株MHCC97 H接种裸鼠 ,进行 3次肺转移筛选 ,取肺转移瘤建成皮下接种后自发性肺转移的细胞系。检测下列指标 :形态学、生长曲线、克隆形成率、运动速度、核型分析、流式细胞分析、免疫细胞化学检查、HBVDNA、成瘤性和转移性。结果　从裸鼠肺转移灶中培养出人肝癌细胞系HCCLM3,为多边形上皮性癌细胞 ,亚三倍体核型 ,染色体众数范围 5 5～ 5 8条 ;细胞倍增时间 34 9h ;克隆形成率 32 4 %± 3 2 % ;细胞运动速度 (2 0± 2 ) μm/h ;免疫细胞化学显示甲胎蛋白、白蛋白、细胞角质蛋白 8、P16阳性 ,P5 3、nm2 3、HBsAg阴性 ;细胞基因组中有HBVDNA整合。裸鼠皮下接种成瘤率 10 0 % ,5周后自发性肺转移率为 10 0 % ,肺转移灶中位数 12 1个 /裸鼠。瘤组织原位接种于裸鼠肝脏 ,5周后腹壁转移 10 0 %、腹腔内转移 80 %、肝内转移 10 0 %、膈肌转移 70 %、肺转移10 0 % ,肺转移灶中位数 2 6 8个 /裸鼠。结论　建成一个皮下和原位接种均出现自发性高转移的人肝癌细胞系 ,为研究肝癌转移提供了新的实验模型     

小鼠肝癌原位移植模型的建立及生物学特性

目的:探讨建立小鼠肝癌原位移植模型的可行性,并观察其生物学特性.方法:用肝癌细胞株H22接种于ICR小鼠皮下,建立异位移植模型,然后用此移植瘤组织再接种于小鼠肝内,建立肝原位移植瘤模型.结果:小鼠肝癌原位移植模型成功率为95.6%,自发转移率为81.8%;大量腹水发生率为40.9%,自发消退率为0%.模型平均自然生存期为28 d,约移植14 d后进入快速增殖期.结论:小鼠肝癌原位移植模型成功率高,有高转移、无自发消退现象,可作为研究肝癌转移机制和药物筛选的理想模型.     

原位移植体内连续筛选法建立人胃恶性淋巴瘤裸小鼠高转移模型系统

目的 建立侵袭和转移潜能不同的人胃恶性淋巴瘤裸鼠原位移植高转移模型系统.方法 将外科手术切除的人原发性胃恶性淋巴瘤原发灶和肝转移灶新鲜瘤组织块分别植入裸小鼠胃壁黏膜下层内,通过鼠间连续原位传代技术筛选高转移和特异器官转移瘤株.观察原位移植的成瘤率、移植瘤的侵袭、转移特性,并进行形态学(光镜、电镜、免疫组织化学)、染色体核型和流式细胞分析.结果 人胃恶性淋巴瘤原发灶和肝转移灶新鲜组织均移植成功,建立了两株转移生物学特性不同的人胃(肝转移灶)恶性淋巴瘤裸鼠原位移植肝转移模型(HGBL-0304)和人胃(原发灶)恶性淋巴瘤裸鼠原位移植高转移模型(HGBL-0305).移植瘤组织病理学为胃弥漫大B细胞淋巴瘤.两株模型分别传至45代,共移植裸鼠419只,其中肿瘤移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100%.在转移时间、器官转移率、肝转移程度和宿主生存期上两株模型差异有统计学意义.HGBL-0304和HGBL-0305模型肝转移率为100%和69.5%,脾转移率为94.3%和55.6%,淋巴结转移率为62.6%和45.7%,腹腔种植转移率为43.5%和30.5%;肝、脾、淋巴结和腹腔种植转移出现时间分别为移植后2周和5周,3周和6周,2周和3周,3周和6周.HGBL-0304和HGBL-0305模型肝转移分别以弥漫累及肝左右叶为主和肝右叶累及为主.HGBL-0304和HGBL-0305模型荷瘤鼠平均生存期分别为54.3 d和106.9 d.结论 外科原位移植体内筛选法是一种建立人恶性淋巴瘤裸鼠高转移模型和特异器官转移模型的有效方法.HGBL-0304和HGBL-0305模型是首次成功建立的来自同一瘤源的两株侵袭和转移潜能不同的人胃恶性淋巴瘤裸鼠原位移植肝转移模型和高转移模型.     

大蒜素纳米粒抑制原位移植性肝癌生长的实验研究

目的：探讨大蒜素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒（DATS-PBCA-NP）对人肝癌裸鼠原位移植瘤生长的影响及其可能的分子机制。方法：采用在裸鼠肝包膜下接种肝细胞HepG2移植物的方法构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型,并将其分为空白对照组、空白纳米粒组、大蒜素（DATS）注射液组和DATS纳米粒组(DATS-PBCA-NP)进行实验;用药2周后处死实验动物,观察肿瘤体积的变化,计算抑瘤率,采用免疫组化法检测肿瘤组织中的增殖细胞核抗原（PCNA）,Western blot检测原位肝癌移植物组织中细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达。结果：人肝癌裸鼠原位移植瘤模型构建成功率为100％,DATS纳米粒组平均肿瘤体积明显缩小（P＜0.05),免疫组化法和Western blot检测显示,DATS纳米粒组PCNA蛋白表达明显降低（P＜0.05）,而Fas和FasL蛋白的表达各组差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：DATS-PBCA-NP对肝脏具有明显的靶向性,能显著抑制肝癌体内生长,其机制可能是抑制肿瘤细胞的恶性增殖。     

溶血磷脂酸诱导人卵巢上皮癌裸鼠腹腔移植瘤生长研究

目的 观察溶血磷脂酸(LPA)对卵巢上皮性癌裸鼠腹腔移植瘤生长及转移的作用.方法 建立人卵巢上皮性癌腹腔移植瘤模型,16只裸鼠随机分为2组即对照组和LPA处理组,将6×106个未经处理的卵巢上皮癌细胞株SKOV3和用LPA刺激后的SKOV3细胞分别注入2组裸鼠腹腔,待裸鼠自然死亡后,观察移植瘤大小、重量、腹腔转移灶的数目及腹腔脏器转移情况.结果 两组成瘤率均为100%,但LPA组移植瘤生长速度、重量和腹腔转移灶数目均高于对照组(P＜0.01).结论 LPA具有促进卵巢癌细胞在腹腔内增生和浸润转移的作用.     

Anti-tumor effect of bufalin on the orthotopic transplantation tumor model of human hepatocellular carcinoma in nude mice

Objective: To investigate anti-tumor effect of bufalin on the orthotopic transplantation tumor model of human hepatocellular carcinoma in nude mice. Methods: BEL-7402 cells of human hepatocellular carcinoma were inoculated to form subcutaneous tumors in nude mice by subcutaneous injection. Then the subcutaneous tumors were implanted into the liver of nude mice, and the orthotopic transplantation tumor models of human hepatocellular carcinoma were established. Seventy-five models were randomized into 5 groups ( n = 15) . Bufalin was injected intraperitoneally into the 3 groups at dose of 1.5,1 and 0.5 mg/kg for day 15 - 24, respectively. NS group were injected equal volume saline as above and adriamycin were injected intraperitoneally into ADM group at dose of 8.0 mg/kg for day 15. Ten mice in each group were killed at day 25 and detected on morphological and ultrastructural changes in myocardium, brain, liver, kidney and tumor tissues by pathology and electron microscope. The survival time in each group     

健脾中药复方胃肠安对人胃癌裸小鼠原位移植瘤生长和转移的影响

目的:观察以健脾为基础的中药复方胃肠安对人胃癌裸小鼠原位移植瘤生长和转移的抑制作用.方法:采用人胃癌细胞SGC-7901,裸小鼠66只,其中41只制作原位移植瘤模型,另25只制作皮下移植瘤模型.两种模型的裸小鼠分别随机分为3组:胃肠安组,5-FU组和生理盐水对照组.胃肠安组予以含生药0.12 g/ml的胃肠安煎剂0.5 ml灌胃,1次/d;5-FU组以5-FU 50 mg/kg行腹腔化疗,1次/周;生理盐水对照组予以生理盐水0.5 ml/d灌胃.原位移植瘤裸小鼠于造模后第64天处死;皮下移植瘤裸小鼠于造模后第41天处死.观察各组的抑瘤率,原位移植瘤各组肿瘤的转移情况,皮下移植瘤各组增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和细胞凋亡情况.结果:原位移植瘤模型中,胃肠安组和5-FU组抑瘤率分别为40.82%和37.92%;皮下移植瘤模型中两组的抑瘤率则分别为48.70%和60.10%.原位移植瘤模型中,胃肠安组和5-FU组裸小鼠胃周淋巴结转移、肝转移、肝门淋巴结转移、横膈转移和腹膜转移比生理盐水对照组明显减少,3组的总转移率分别为30.77%、28.57%和71.43%(P ＜0.05).皮下移植瘤模型中,胃肠安组和5-FU组的PCNA总阳性率低于生理盐水对照组,细胞凋亡指数高于生理盐水对照组,差异有统计学意义(P ＜0.05或P ＜0.01).胃肠安组和5-FU组瘤重、总转移率和PCNA总阳性率比较,差异无统计学意义,但胃肠安组细胞凋亡指数明显高于5-FU组(P＜0.05).结论:健脾中药复方胃肠安具有抑制人胃癌裸小鼠原位移植瘤生长和转移的作用.胃肠安对胃癌细胞的体内抑制作用可能通过抑制增殖、诱导肿瘤细胞凋亡而实现,对其抑制转移的机制尚需作进一步的研究.     

Anti-tumor effects of polybutylcyanoacrylate nanoparticles of diallyl trisulfide on orthotopic transplantation tumor model of hepatocellular carcinoma in BALB/c nude mice

Background Hepatocellular carcinoma (HCC) ranked the second among the causes of cancer mortality in China since the 1990s. Up to now, medication still plays an important role in the treatment of HCC. The therapies based on the allicin as a potential chemopreventive analog although is in its infancy at the present time, may have a significant role in the future management of HCC. Diallyl trisulfide (DATS) is a natural compound derived from garlic. In this study, we investigated the inhibitory effects of hepatic targeted polybutylcyanoacrylate nanoparticles of diallyl trisulfide (DATS-PBCA-NP) on orthotopic transplanted HepG2 hepatocellular carcinoma in nude mice. Methods DATS-PBCA-NP were detected by transmission electron microscope (TEM) and high-performance liquid chromatography (HPLC). The orthotopic transplantation HCC models were established by implanting HCC HepG2 xenograft bits under the envelope of the mice liver. Successful models (n＝29) were divided into 4 groups: normal saline (NS), empty nanoparticles (EN), DATS and DATS-PBCA-NP were intravenously administered to the mice respectively for 2 weeks. In vivo antitumor efficacy was evaluated by the measurement of tumor volume. Terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) assay and protein levels of apoptosis and cell proliferation proteins by immunoblotting in tumor tissues were performed to elucidate the possible mechanism.Results DATS-PBCA-NP possessed smooth and round appearance, dispersed well, and released in vitro in accord with double phase kinetics model. DATS-PBCA-NP changed the tissue/organ distribution of DATS in vivo. The successful rate of tumor implantation was 100%. Intravenous administration of DATS-PBCA-NP significantly retarded the growth of orthotopically transplanted hepatoma in BALB/c nude mice (compared with the other three groups, all P&lt;0.05) without causing weight loss (P&gt;0.05). TUNEL staining showed that the tumors from DATS-PBCA-NP treated mice exhibited a markedly higher apoptotic index compared with control tumors. Western blot analysis of tumor tissue revealed that the down-regulated expression of proliferation cell nuclear antigen (PCNA) and Bcl-2 proteins in DATS-PBCA-NP group, and there were no significant differences in the expression of Fas, FasL and Bax proteins among the four groups (P&gt;0.05).Conclusions DATS-PBCA-NP has good prolonged release effect in vivo and hepatic-targeted activity, and significant anti-tumor effect on the orthotopic transplantation HCC model in mice in association with the suppression of proliferation and the induction of apoptosis of tumor cells. These advantages are probably due to their liver targeting characteristics and consequently bring a higher anti-tumor activity.