大鼠脊髓组织CNTFRα mRNA的表达及其坐骨神经损伤后表达的变化

目的：通过对大鼠脊髓组织中睫状神经营养因子受体α（ＣＮＴＦＲα）的分布与细胞定位及其在坐骨神经损伤后表达变化的研究，来探讨ＣＮＴＦ在脊髓组织中的可能作用。方法：利用原位杂交和点杂交的方法，对ＣＮＴＦＲα在大鼠脊髓组织中的分布与坐骨神经损伤后的表达变化进行研究。结果：ＣＮＴＦＲαｍＲＮＡ几乎存在于所有脊髓神经元与胶质细胞中；坐骨神经损伤后１ｄ表达增加，以后降到较低水平，到１４ｄ再次升高，但第２峰较第１峰为低。结论：ＣＮＴＦＲαｍＲＮＡ在大鼠脊髓组织中的广泛分布，表明ＣＮＴＦ对脊髓组织各类神经元与胶质细胞均有神经营养作用。坐骨神经损伤后１ｄ，ＣＮＴＦＲαｍＲＮＡ表达的增加，可能与损伤应激相关；１４ｄ的再次升高是否由于再生过程中，雪旺细胞大量增殖，ＣＮＴＦ大量表达所诱导，还有待进一步的研究；ＣＮＴＦＲα表达的改变，可能是损伤神经元在损伤与再生修复过程中，神经元本身代谢适应性改变的一部分     

纤维型和原浆型星形胶质细胞的分离培养及睫状神经营养因子对其增殖的影响

目的和方法：建立纤维型及原浆型星形胶质细胞体外分离培养的方法,并观察在体外睫状神经营养因子（ｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ,ＣＮＴＦ）对这两种细胞的增殖作用。结果和结论：经免疫组织化学鉴定,本方法分离培养的星形胶质细胞,纤维型纯度达９５％,原浆型纯度达９９％。ＣＮＴＦ可以促进纤维型星形胶质细胞的增殖,而对原浆型星形胶质细胞的促增殖作用不明显。     

睫状神经营养因子的研究进展

１　ＣＮＴＦ的研究背景及现状睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）是分子量为２２－２６ＫＤ的酸性蛋白质。早在１９７９年，美国的Ａｄｌｅｒ等从鸡胚的睫状神经节中分离出一种能支持睫状神经元生长的物质叫ＣＮＴＦ［１］。这种物质的发现立即吸引了很多科学家的注意。Ｂａｒｂｉｎ等于１９８４年首次从鸡胚的睫状神经元中分离并纯化了ＣＮＴＦ。接着Ｍａｎｔｈｏｒｐｅ等（１９８６）也成功地从鼠的坐骨神经中纯化了这种活性大分子。其后在体外培养中观察到ＣＮＴＦ实际上能促进交感，副交感和感觉神经元的生长，作用甚至涉及神经胶质细胞。近…     

人睫状神经营养因子的原核表达及其初步纯化

目的：优化条件实现人睫状神经营养因子（ｈｕｍａｎｃｉｌｉａｒｙｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｆａｃｔｏｒ,ｈＣＮＴＦ）ｃＤＮＡ在大肠杆菌中的高效表达。方法：ＣＮＴＦ克隆进ｐＢＶ２２０后,表达,凝胶过滤纯化,１０日龄鸡背根神经节（Ｅ１０ＤＲＧｓ）测定其生物活性。结果：ＣＮＴＦ在ＨＢ１０１中高效表达,并具有生物活性。结论：ＳＤＳ－ＰＡＧＥ观察到相对分子质量约为２４×１０３的预期表达产物,优化表达条件后发现其在ＨＢ１０１中的表达状况最好,用凝胶过滤纯化的重组蛋白能促进Ｅ１０ＤＲＧｓ的生长     

人睫状神经营养因子基因克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

人睫状神经营养因子（ＣｉｌｉａｒＮｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃＦａｃｔｏｒ，ＣＮＴＦ）是一种能促进包括交感神经、副交感神经及感觉神经元在内的各种外周神经元和中枢神经元生长及分化的神经生长营养因子，它能特异地促进有丝分裂后的神经元的分化，并具有支持神经元存活的营养作用，因而它有可能成为治疗帕金森氏病、早老性痴呆和肌萎缩性侧索硬化等神经性疾病的有效药物［１］。本文通过反转录ＰＣＲ获得ＣＮＴＦ的ｃＤＮＡ基因，并构建了重组表达质粒，在大肠杆菌中获得了高效表达，为临床应用奠定了基础。１　材料和方法１．１　菌株和…     

MTHFR基因多态性及血浆HCY水平与深部脑白质缺血的关系

近年来 ,随着血浆同型半胱氨酸 (ＨＣＹ)浓度检测水平的提高和分子生物学技术的进展 ,越来越多的研究表明 ,由ＨＣＹ的代谢异常导致的高同型半胱氨酸血症是动脉粥样硬化和血栓形成等心脑血管疾病发病的独立危险因子。同型半胱氨酸的代谢约 5 0 %的ＨＣＹ的甲基供体 ,由 5 ,10 亚甲基四氢叶酸还原酶 (ＭＴＨＦＲ)催化 5 ,10 亚甲基四氢叶酸而产生[1] 。血浆ＨＣＹ水平升高主要与ＭＴＨＦＲＣ677Ｔ突变有关 ,而ＭＴＨＦＲ基因多态性与皮层下梗死综合征相关[2 ] 。本文就ＭＴＨＦＲ基因多态性及血浆ＨＣＹ与深部脑白质缺血的关系作一简述。同…     

纤维型和原浆型星形胶质细胞的分离培养及睫状神经营养因 …

目的和方法：建立纤维型及原浆型星形胶质细胞体外分离培养的方法，并观察在体外睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）对这两种细胞的增殖作用。结果和结论：经免疫组织化学鉴定，本方法分离培养的星形胶质细胞，纤维型纯度达９５％，原浆型纯度达９９％。ＣＮＴＦ可以促进纤维型星形胶质细胞的增殖，而对原浆型星形胶质细胞的促增殖作用不明显。     

激光诱导自体荧光技术与大肠癌的早期诊断

自从 1984年Ａｌｆａｎｏ等[1 ] 报道利用低功率激光诱导乳腺、肺组织的自体荧光 ,Ｒｉｃｈａｒｄｓ等[2 ] 用 2 90～ 6 0 0ｎｍ波长范围的激光诱发结肠粘膜组织产生自体荧光以来 ,很多学者开始研究利用激光诱导荧光 (ｌａｓｅｒｉｎｄｕｃｅｄｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ,ＬＩＦ)技术进行光谱分析 ,早期诊断大肠恶性肿瘤。国内学者张阳德等[3 ] ,早在 80年代末就将ＬＩＦ技术用于大肠癌及癌前病变的诊断 ,取得了较大的进展 ,突破了传统的凭肉眼和经验在普通内镜下诊断判别的模式 ,为早期诊疗大肠癌提供了新的手段。一、ＬＩＦ的基本原理发光…     

1,6-二磷酸果糖的功能与运动

1,6-二磷酸果糖(Ｆｒｕｃｔｏｓｅ-1,6-ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ,ＦＤＰ)是细胞内糖酵解的中间产物,能直接调节某些代谢或作为底物直接参与供能。目前ＦＤＰ已经作为药物广泛应用于临床,医学文献已证实ＦＤＰ可作为冠心病、急性心肌梗塞[1]、肾功能衰竭[2]等多种代谢性疾病的辅助药物。与此同时,ＦＤＰ的这种细胞强壮剂的功效也应用于人体运动[3],其改善缺氧环境下运动机能、提高抗疲劳能力的功能越来越受到重视。本文就ＦＤＰ的基础研究及其在运动中的应用作一综述。1　ＦＤＰ的基础研究11　ＦＤＰ与糖酵解　ＦＤＰ是糖酵解过程中由6-磷酸果…     

核转录因子NF-kB与中枢神经系统疾病

核转录因子 -ｋａｐｐａＢ(Ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ -ｋａｐｐａＢ ,ＮＦ -ｋＢ)是一种具有多向转录调节作用的蛋白质。ＮＦ -ｋＢ是作为Ｂ细胞核转录因子被发现的 ,因其结合位点在免疫球蛋白Ｋａｐ ｐａ轻链基因中而得名。此后发现它分布广泛 ,并参与多种基因的转录调控 ,与炎症反应、免疫应答 ,以及细胞的增生、转化和凋亡等重要的生理病理过程密切相关。研究表明 ,ＮＦ -ｋＢ在中枢神经系统的神经塑型、神经发育及神经变性等过程中具有重要的作用[1] 。1　ＮＦ -ｋＢ的生物学特性1 1　ＮＦ -ｋＢ/Ｒｅｌ与ＩＫＢ家族成员　ＮＦ -ｋＢ…     

闭合性颅脑损伤后组织因子、组织因子途径抑制物的动态变化及其意义

目前 ,有关颅脑损伤后凝血功能改变规律的研究较少 ,并且大都停留在凝血谱和纤溶产物的探讨上。组织因子(ｔｉｓｓｕｅｆａｃｔｏｒ,ＴＦ)即因子Ⅲ能激活结合因子Ⅶ使其成为因子Ⅶａ ,形成生理性止血、凝血过程惟一的启动物Ⅶａ ＴＦ[1 ] 。组织因子途径抑制物 (ｔｉｓｓｕｅｆａｃｔｏｒｐａｔｈ ｗａｙｉｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＴＦＰＩ)通过形成四聚体Ｘａ ＴＦＰＩ Ⅶａ ＴＦ ,抑制Ⅶａ ＴＦ的催化活性 ,调节ＴＦ的活性。ＴＦＰＩ是目前所知的惟一能抑制ＴＦ活性的生理性物质[2 ] 。ＴＦ和ＴＦＰＩ在凝血过程中至关重要。为此 ,笔者希望通过…     

功率最大化的力量训练方法及效果研究进展

<正>肌肉力量的大小是决定运动成绩的主要因素之一[1],增强肌肉收缩时产生的力量是提高运动成绩最直接和有效的途径[2]。因此,力量训练在竞技体育领域非常受重视,而专项力量的训练尤其成为近期研究的关注点[2,3]。对于一些需要在很短的时间内爆发出很大的力量,以产生尽可能高的动作速度的运动项目,如短跑、跳跃和投掷等,根据专门     

EGF对增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成的影响

增生性瘢痕是皮肤损伤后遗留的高出于周围皮肤、发红、坚硬的病理结构。如何预防增生性瘢痕一直是整形外科医生面临的一个主要问题。以往的研究发现表皮细胞生长因子 (ＥｐｉｄｅｒｍａｌＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ,ＥＧＦ)可以促进上皮再生 ,加快创伤愈合 ,而新生的上皮组织具有防止增生性瘢痕形成的作用[1] 。ＥＧＦ还可以直接抑制创面肉芽组织成纤维细胞合成胶原蛋白的能力[2 ] 。单纯应用ＥＧＦ对鼠的ＮＲＫ细胞 (一种成纤维细胞 )合成胶原蛋白的能力没有明显的影响 ,但ＥＧＦ可以拮抗ＴＧＦ- β使ＮＲＫ细胞合成胶原能力增加的作用[3] …     

脊柱手法治疗改善运动员本体感觉缺陷机制探讨

<正>运动员本体感觉缺陷(Proprioception Deficit)与运动损伤、运动表现都有着十分紧密的关系[1-4]。研究显示,运动员全身性本体感觉缺陷的普遍性为63%~92%[5]。近年来,运动员受伤后单关节出现神经肌肉控制水平下降的问题逐渐受到国外研究学者们的高度重视[6-8]。神经肌肉控制的缺失会增加女性膝关节损伤的几率[9]。此外还有文献表明,检测运动员的本体感觉能够预测其     

胶质细胞源性神经营养因子基因的克隆及其在大肠杆菌中 …

目的;分离胶质细胞源性神经营养因子（ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ,ＧＤＮＦ）基因,并在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得表达。方法：从人多形性成胶质细胞瘤细胞株ＢＴ３２５中提取总ＲＮＡ,利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分离ＧＤＮＦ基因,构建表达载体ｐＢＶ－ＧＤＮＦ,转化大肠杆菌,温控诱导ＧＤＮＦ的表达。结果与结论;分离得到的人ＧＤＮＦ基因,在大肠杆菌中得到高效表达,表     

地塞米松对人α1(Ⅰ)胶原基因及转化生长因子β1基因启动子活性的影响

细胞外基质特别是Ⅰ型胶原蛋白的异常沉积是增殖性瘢痕、肝、肺纤维化等疾病的主要病理改变。研究表明 :转化生长因子 β1(ＴＧＦβ1)是一个目前较为重要且作用明确的致纤维化细胞因子 ,它可增加胶原基因的转录及胶原合成[1 ] 。糖皮质激素中地塞米松则是一个临床作用明确的抗纤维化药物 ,它可通过多种途经 ,在不同的水平抑制胶原基因的转录和蛋白合成[2 ] 。但有关地塞米松作用的确切分子生物学机制及与ＴＧＦβ1之间的相互关系仍不明确。笔者拟在基因的转录调控水平 ,探讨地塞米松对人成纤维细胞α1(Ⅰ )胶原基因及ＴＧＦβ1基因启动活性…     

周围神经损伤对脊髓运动神经元睫状神经营养因子表达的影响

目的 探讨周围神经损伤后脊髓运动神经元素达睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）水平的变化规律及其与神经元病理变化的相关性。方法 选用出生后３ｄ和成年大鼠各３０只,均分为对照组、伤后３,７,１４,２１,２８ｄ６组。切断不同鼠龄Ｗｉｓｔａｒ大鼠坐骨神经复制周围神经损伤模型,行免疫组织化学染色ＣＮＴＦ阳性脊髓运动神经元,利用图像分析系统计算脊髓ＣＮＴＦ阳性运动神经元的吸光度值,从而间接反映脊髓运动神经元ＣＮＴＦ     

影响光动力疗法的几个主要因素

光动力疗法 (ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃｔｈｅｒａｐｙ ,ＰＤＴ)是正在研究发展中的一种新型医疗技术 ,自 2 0世纪 70年代进入临床研究以来 ,ＰＤＴ在恶性肿瘤和各种良性疾病的治疗中取得了令人瞩目的成就[1～ 3] 。国内外研究最多的是它在治疗肿瘤方面的应用 ,现在ＰＤＴ治疗肿瘤已经得到许多国家的批准和认可[4 ] ,人们对ＰＤＴ的机制也做了深入的研究[5] 。ＰＤＴ在治疗良性疾病方面也引起了大家的广泛重视 ,例如在我科开展了近十年的鲜红斑痣治疗的研究 ,已经取得了肯定的疗效[6 ] 。同时 ,在应用ＰＤＴ治疗年龄相关性黄斑变性病[7] 、…     

脊髓损伤的细胞凋亡及其调控

脊髓损伤后 ,除神经细胞坏死外 ,还存在细胞凋亡 ,并在继发性脊髓损伤中起重要作用。笔者对近年来脊髓损伤后细胞凋亡及其分子调控机制作如下综述。一、细胞凋亡在继发性脊髓损伤中起重要作用脊髓损伤包括原发性损伤和继发性损伤 ,而神经细胞的凋亡是继发性脊髓损伤的重要组成部分。在不同脊髓损伤模型中的许多研究证实 ,继发性脊髓损伤广泛存在着神经细胞凋亡[1～ 1 0 ] 。Ｌｉ等[1 ,4] 观察大鼠脊髓压迫损伤后 4～ 9ｄ ,在损伤部位 (Ｔ8,9)及相邻节段 (Ｔ7、Ｔ1 0 )白质有大量的胶质细胞凋亡 ,细胞主要是少突胶质细胞 ,而灰质的神经元不表…     

肿瘤的射频灭活

ｄ’Ａｒｓｏｎｖａｌ[1] 于 1968年对生物组织进行了首次射频热灭活 (ｒａｄｉｏｆｒｅｑｕｅｎｃｙｔｈｅｒｍａｌａｂｌａｔｉｏｎ ,ＲＦ ＴＡ)实验 ,表明 10ｋＨｚ以上的交流电能通过生物组织而对神经肌肉不产生兴奋作用。 1977年Ｓｔｏｒｍ等[2 ] 首次通过磁力线圈导入射频高温对肿瘤进行试验性治疗。 1983年ＧａＢｒｉｅｌｅ等[3] 开始在临床上以微波或射频高温热疗来单独治疗恶性肿瘤。此后 ,射频单独或配合其他方法治疗肿瘤的技术不断被研究并应用于临床 ,取得了显著疗效 ,本文综述如下。一、射频灭活 (Ｒａｄｉｏｆｒｅｑｕｅｎｃ…