缺氧诱导因子1α和Ki67在三阴性乳腺癌中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和细胞增殖抗原Ki67在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测HIF-1α及Ki67在70例三阴性乳腺癌(A组)及382例非三阴性乳腺癌组织(B组)的表达,分析其与临床病理特征的相关性.结果 HIF-1α及Ki67在三阴性乳腺癌组织中阳性表达率分别为75.7％和87.1％,均高于非三阴性乳腺癌的60.2％和72.3％(P＜0.05).HIF-1α及Ki67的表达与其淋巴结转移和临床分期相关(P＜0.01或P＜0.05),而与患者绝经状况和肿瘤大小无关(P＞0.05).三阴性乳腺癌中HIF-1α的表达与Ki67呈正相关(r=0.479,P＜0.01).结论 HIF-1α及Ki67在三阴性乳腺癌中高表达,可作为判断三阴性乳腺癌预后的指标.     

肿瘤乏氧放射增敏剂的研究进展

摘 要 改善肿瘤细胞的乏氧,可有效减少其对放疗的抵抗,从而提高治愈率。目前用于改善肿瘤细胞缺氧减少放射抵抗的化合物已经不仅仅局限于原有的亲电性放射增敏剂,许多具有靶向性的乏氧放射增敏剂也成为研究重点。本文在介绍肿瘤乏氧机制的基础上,对新型靶向制剂、亲电性乏氧细胞放射增敏剂、生物还原剂与植物天然提取物这四类乏氧细胞放射增敏剂的研究进展进行了综述。     

无机活性元素对大鼠慢性溃疡组织乏氧诱导因子-1α及细胞因子的影响及机制

目的检测无机活性元素(德莫林)对大鼠皮肤慢性溃疡组织的影响,并对其作用机制进行分析。方法制备SD大鼠慢性溃疡模型,实验组应用无机活性元素,对照组常规消毒换药,另设空白组。观察3组溃疡的愈合时间。应用RT-PCR技术对3组溃疡组织乏氧诱导因子(HIF)-1α、表皮细胞生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞因子(bFGF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达进行检测,并对其差异进行比较分析。结果与对照组比较,实验组创面面积缩小更为明显(P<0.05);实验组、对照组的HIF-1α、EGF、bFGF和VEGF表达均明显高于正常皮肤(P<0.05),实验组EGF、bFGF和VEGF表达高于对照组,而HIF-1α表达低于对照组(P<0.05)。结论无机活性元素对慢性溃疡的治疗效果优于传统换药方法,其机制与该药物能促进EGF、bFGF和VEGF表达、抑制HIF-1α表达有关。     

姜黄素调控乳腺癌细胞增殖与转移机制研究

目的研究姜黄素对人乳腺癌细胞MDA MB 453中缺氧诱导因子 1α（HIF 1α）的影响及其对肿瘤细胞增殖和转移的作用。方法采用噻唑蓝（MTT）法和细胞计数观察姜黄素抑制MDA MB 453细胞增生作用;采用transwell侵袭小室测定姜黄素对MDA MB 453转移的影响;采用Real time PCR和Western blot印迹法检测常氧和乏氧状态下姜黄素对MDA MB 453细胞系中HIF 1α的mRNA和蛋白表达水平的影响,同时采用Real time PCR和ELISA法检测姜黄素对HIF 1α下游靶基因血管内皮生长因子（VEGF）mRNA水平和蛋白表达水平的影响。结果姜黄素对MDA MB 453细胞体外生长和转移具有抑制作用;常氧、乏氧状态下加入姜黄素后,MDA MB 453细胞系中HIF 1α的mRNA水平无变化,但蛋白水平明显降低,VEGF mRNA水平和蛋白水平均明显降低。结论姜黄素通过HIF 1α调控MDA MB 453细胞系增殖和转移。     

乏氧诱导因子-1α与膀胱癌上皮-间质化的关系及其意义

目的研究膀胱癌及正常膀胱组织中E-钙粘素（E—cad）、波形蛋白（Vimentin）及乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达及其相关性,探讨膀胱癌侵袭、转移的分子机制。方法选取经病理诊断的76例膀胱癌组织标本,采用免疫组织化学法检测E-cad、Vimentin、HIF-1d的表达,分析三者的相关性及其与膀胱癌病理分级、临床分期的关系。15例正常膀胱组织作为对照组。结果膀胱癌中E—cad的异常表达、Vim—entin和HIF-1α的阳性率较正常膀胱黏膜组织增高,且随着膀胱癌恶性程度的增高逐渐增高,各级、各期之间比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。E-cad的表达与Vimentin的表达有关联性（P〈0．05,C=0．377）。HIF-1α的表达与E—cad、Vimentin的表达有关联性（P〈0．05,C=0．368）。结论膀胱癌的发生、发展过程中存在上皮-间质化现象;HIF-1α的表达可能与膀胱癌上皮．间质化的发生有关。     

三氧治疗联合调强适形放疗治疗鼻咽癌及对患者血清乏氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子的影响

目的研究分析三氧治疗联合调强适形放疗治疗鼻咽癌的疗效及对患者血清乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法选取我院2010年1月~2013年12月收治的鼻咽癌放疗患者50例进行治疗观察,随机分为两组,每组各25例。对照组行调强放疗,观察组在对照组治疗基础上行三氧联合治疗。结果治疗后,观察组鼻咽癌患者血清HIF-1α水平显著下降,对照组则显著升高,差异均有统计学意义(P0.01~0.05)。治疗后,观察组鼻咽癌患者血清HIF-1α水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。治疗后,观察组鼻咽癌患者血清VEGF水平显著下降,对照组则显著升高,差异均有统计学意义(P0.01)。治疗后,观察组鼻咽癌患者血清VEGF水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.01)。结论三氧治疗联合调强适形放疗治疗鼻咽癌的疗效显著,能改善患者的血清乏氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子水平。     

99mTc-HL91心肌乏氧显像评价急性心肌梗死患者缺血/存活心肌的可行性

目的探讨急性心肌梗死（AMI）患者^99mTcHL91乏氧心肌显像的可行性及其临床应用价值。方法15例AMI患者行Tl-201和^99mTc-HL91双核素心肌显像,比较和描述两种核素心肌显像、缺血／存活心肌检测能力以及匹配方式。结果^99mTc-HL91可以提供较清晰的乏氧心肌图像并用于心肌节段分析;15例AMI患者行双核素显像,共255个节段,即刻Tl-201显像示异常节段109个,占43％;^99mTc-HL91显像示阳性节段160个,占63％。即刻Tl-201显像判断为异常的109个节段中,24hTl-201延迟显像示40个（部分）可逆性节段（缺血／存活心肌）,占37％;^99mTc-HL91显像示73个阳性节段,占67％,其中40个（部分）可逆节段均呈乏氧阳性显像。^99mTc-HL91显像检测缺血／存活心肌能力显著高于TF201（P〈0．01）。结论^99mTc-HL91可以用于AMI患者缺血／存活心肌乏氧成像并用于心肌节段分析。乏氧显像可为研究冠心病提供新手段。     

乏氧和低糖条件下低表达ESE3促进胰腺癌细胞的侵袭

目的 观察乏氧和低糖条件下胰腺癌细胞中上皮特异性ETS转录因子3（ESE3）表达的变化及其对胰腺癌细胞侵袭能力的影响。方法 收集在天津医科大学肿瘤医院2005年1月—2014年10月期间行根治性手术治疗的99例胰腺癌患者的胰腺癌组织和16例邻近正常胰腺组织标本。采用免疫组化法分析癌组织和邻近正常胰腺组织中ESE3的表达水平,探究其表达水平与胰腺癌患者生存预后间的关系;进一步在TCGA数据库中分析ESE3的mRNA 表达水平与147例胰腺癌患者的临床病理学特征间的关系;构建胰腺癌细胞PANC-1过表达ESE3稳定转染细胞系并验证;Transwell法探究过表达ESE3的胰腺癌细胞侵袭能力的变化;利用蛋白质免疫印迹法检测乏氧和低糖条件下胰腺癌细胞中乏氧诱导因子1α（HIF-1α）、葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和ESE3蛋白表达水平的变化。结果 胰腺癌组织中ESE3的表达量明显低于正常胰腺组织,ESE3的低表达与患者总生存期（OS）和无复发生存期（DFS）缩短密切相关（均P＜0.05）。TCGA数据库分析表明ESE3表达高低与肿瘤转移相关（P＜0.05）;在乏氧和低糖条件下胰腺癌细胞侵袭能力增强,ESE3的表达降低,HIF-1α与GRP78的表达增加（P＜0.05）。结论 在乏氧和低糖条件下,胰腺癌细胞中ESE3的表达降低,促进胰腺癌细胞的侵袭。     

部分胃癌PET-CT显像与HIF-1α等指标的相关分析

目的 探讨胃癌正电子发射体层显像(PET-CT)中18F-氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)摄取水平与相应组织中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的关系.方法 对14例胃癌患者术前进行PET-CT检查,测定肿瘤最大标准摄取值(standard uptake value,SUVmax),并对手术切除标本进行病理检查,应用免疫组织化学法检测肿瘤组织HIF-1α、COX-2和VEGF的表达,分析PET-CT的SUVmax与HIF-1α、COX-2和VEGF表达的相关性.结果 SUVmax与HIF-1α、COX-2和VEGF表达的相关系数(r)分别为0.499、0.686、0.279,均呈正相关(P＜0.05).结论 胃癌组织HIF-1α、COX-2和VEGF表达量越大,PET-CT显像中18F-FDG摄取越多,浓聚越明显.     

部分胃癌PET-CT显像与HIF-1α等指标的相关分析

目的探讨胃癌正电子发射体层显像(PET-CT)中18F-氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)摄取水平与相应组织中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的关系。方法对14例胃癌患者术前进行PET-CT检查,测定肿瘤最大标准摄取值(standard uptake value,SUVmax),并对手术切除标本进行病理检查,应用免疫组织化学法检测肿瘤组织HIF-1α、COX-2和VEGF的表达,分析PET-CT的SUVmax与HIF-1α、COX-2和VEGF表达的相关性。结果 SUVmax与HIF-1α、COX-2和VEGF表达的相关系数(r)分别为0.499、0.686、0.279,均呈正相关(P<0.05)。结论胃癌组织HIF-1α、COX-2和VEGF表达量越大,PET-CT显像中18F-FDG摄取越多,浓聚越明显。     

Improved synthesis of 6-epi-dictyostatin and antitumor efficacy in mice bearing MDA-MB231 human breast cancer xenografts

Structure-activity studies centered on the naturally occurring antitumor agent dictyostatin have recently identified several highly active epimers and analogues. From these compounds, 6- epi-dictyostatin was selected for scaleup preparation and evaluation in animals. Here we describe a new total synthesis that produced more than 30 mg of 6- epi-dictyostatin. The compound was found to have potent antitumor activity in SCID mice bearing MDA-MB231 human breast cancer xenografts.     

双氢青蒿素抗乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤作用实验研究

目的 研究双氢青蒿素（alpha-Dihydroartemisinin,DHA）对人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤的抗瘤作用.方法 将裸鼠随机分为阴性对照组、DHA低剂量组（DHA给药剂量为50 mg·kg-1·d-1）、DHA中剂量组（DHA给药剂量为100 mg·kg-1·d-1）和DHA高剂量组（DHA给药剂量为200 mg·kg-1·d-1）,建立人乳腺癌MDA-MB-231细胞裸鼠移植瘤模型,测定不同浓度的DHA对裸鼠的体重、抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数的影响,免疫组化检测移植瘤P53蛋白的表达.结果 DHA可明显抑制移植瘤的生长,DHA低剂量、中剂量和高剂量对移植瘤的抑制率分别为20.25%、31.01%和46.20%,DHA各组胸腺指数和脾脏指数较阴性对照组均有不同的的提高,与阴性对照组比较,DHA高、中剂量组小鼠胸腺指数和脾脏指数均有显著性差异（P〈0.05）;免疫组化结果显示DHA可下调移植瘤细胞P53蛋白的表达.结论 DHA对人乳腺癌MDA-MB-231细胞移植瘤有显著的抑制作用,其抗癌机理可能是调节机体免疫和下调P53蛋白的表达.     

白藜芦醇诱导人乳腺癌MDA-MB231细胞凋亡及自噬

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)诱导人乳腺癌MDA-MB231细胞凋亡及自噬蛋白表达的作用与机制。方法以人乳腺癌MDA-MB231细胞为研究对象,MTT法检测Res(0、1、5、10、20、50、100、200 mg·L~(-1))抑制MDA-MB231细胞增殖情况; Res(0、5、20、60 mg·L~(-1))处理MDA-MB231细胞,划痕实验检测细胞迁移能力,Annexin V/PI双染法检测细胞早期凋亡率,免疫荧光法检测细胞LC3Ⅰ/Ⅱ的表达;Res(0、20、60 mg·L~(-1))处理MDA-MB231细胞,蛋白免疫印迹法检测细胞中自噬相关蛋白p62及Beclin-1的表达。结果Res在体外可明显抑制MDA-MB231细胞增殖,且呈浓度依赖关系。随着Res浓度的增高,乳腺癌细胞迁移能力较对照组分别下降了(8. 7±1. 1)%、(16. 5±2. 9)%和(32. 2±3. 6)%。流式细胞仪检测结果表明,早期凋亡细胞数增加;激光共聚焦检查显示,细胞质中LC3Ⅰ/Ⅱ绿色荧光增加;蛋白免疫印迹法检测出MDA-MB231细胞p62蛋白表达下降,Beclin-1蛋白表达升高。结论 Res可抑制人乳腺癌MDA-MB231细胞增殖,其机制可能与Res诱导细胞凋亡和自噬有关。     

Magnolia dealbata seeds extract exert cytotoxic and chemopreventive effects on MDA-MB231 breast cancer cells

Context: Cancer prevention remains a high priority for the scientific world. Magnolia dealbata Zucc (Magnoliaceae), a Mexican endemic species, is used for the empirical treatment of cancer.

Objective: To evaluate the cytotoxic and cancer chemopreventive effects of an ethanol extract of Magnolia dealbata seeds (MDE).

Materials and methods: The cytotoxic effect of MDE, at concentrations ranging from 1 to 200?µg/ml, on human cancer cells and human nontumorigenic cells was evaluated using the MTT assay for 48?h. The apoptotic activities of MDE 25?μg/ml on MDA-MB231 breast cancer cells were evaluated using the TUNEL assay and the detection of caspase 3 using immunofluorescence analysis for 48?h, each. The chemopreventive effect was evaluated by administrating different doses of MDE, between 1 and 50?mg/kg, injected intraperitoneally daily into athymic mice which were implanted with MDA-MB231 cells during 28 days. The growth and weight of tumors were measured.

Results: MDE showed cytotoxic effects on MDA-MB231 cells (IC₅₀?=?25?µg/ml) and exerted pro-apoptotic activities as determined by DNA fragmentation in MDA-MB231 cells. MDE 25?µg/ml also induces the activation of caspase 3 in MDA-MB231 cells. These results suggest that Magnolia dealbata may be an optimal source of the bioactive compounds: honokiol (HK) and magnolol (MG). MDE 50?mg/kg i.p. exerted chemopreventive effects by inhibiting the growth of MDA-MB231 tumor by 75% in athymic mice, compared to the control group.

Conclusions: MDE exerts cytotoxic, apoptotic and chemopreventive activities on MDA-MB231 human cancer cells.     

阳和汤含药血清对缺氧乳腺癌干细胞MDA-MB-231增殖的抑制作用及其机制

目的研究阳和汤含药血清对缺氧乳腺癌干细胞MDA-MB-231增殖的抑制作用及其机制。方法体外培养缺氧乳腺癌干细胞MDA-MB-231,采用阳和汤高、中、低浓度含药血清,顺铂,单药或联合HIF-1α抑制剂处理。MTT法检测细胞增殖活性,Real-time PCR法检测HIF-1α、IGF-II、L-Selectin的m RNA表达变化,Western blot检测HIF-1α、IGF-II、L-Selectin的蛋白表达变化。结果阳和汤含药血清能抑制细胞生长,而且呈浓度依赖性,阳和汤含药血清能下调HIF-1α、IGF-II、L-Selectin的m RNA及蛋白表达,且呈浓度依赖性,联合HIF-1α抑制剂效果更明显。结论阳和汤含药血清能抑制缺氧乳腺癌干细胞的增殖,可能通过调节HIF-1α/IGF-II信号通路及L-Selectin的表达抑制乳腺癌细胞的增殖转移。     

山药提取物联合树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞对荷MDA-MB-231乳腺癌干细胞瘤裸鼠的治疗作用研究

目的 研究山药Dioscorea opposita提取物联合树突细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞（DC-CIK）对荷MDA-MB-231乳腺癌干细胞瘤裸鼠的治疗效果。方法 制备荷MDA-MB-231乳腺癌干细胞Balb/c裸鼠模型,随机分为4组,每组8只：对照组裸鼠尾iv生理盐水,0.2 mL/次,2次/周;DC-CIK组裸鼠在肿瘤干细胞接种4 d后尾iv 1×10⁶个DC-CIK细胞,2次/周,给药3周;山药提取物组裸鼠ig山药提取物125 mg/kg,0.2 mL/d,给药3周;山药提取物联合DC-CIK组裸鼠ig山药提取物125 mg/kg,0.2 mL/d,同时尾iv 1×10⁶个DC-CIK细胞,2次/周,给药3周。各组裸鼠在治疗3周期间每2天测量瘤体大小及裸鼠体质量,治疗结束后处死裸鼠,取出瘤体称质量;qRT-PCR法检测瘤组织中Akt信号通路中关键原癌基因c-Myc表达水平。结果 治疗结束后,各组裸鼠瘤体生长速率为山药提取物联合DC-CIK组结论 对荷MDA-MB-231乳腺癌干细胞瘤裸鼠治疗效果中,各给药组裸鼠肿瘤生长均受到明显抑制,其中以山药提取物联合DC-CIK组效果最佳。     

Proline analogue of melphalan as a prodrug susceptible to the action of prolidase in breast cancer MDA-MB 231 cells

Proline analogue of melphalan (Mel-pro) was synthesized as a prodrug susceptible to the action of ubiquitously distributed, cytosolic imidodipeptidase-prolidase [E.C.3.4.13.9]. Conjugation of melphalan (Mel) with proline (Pro) through imido-bond resulted in formation of a good substrate for prolidase. Cytosolic location of prolidase in neoplastic cell suggests that proline analogue of melphalan (Mel-pro) may serve as a prolidase convertible prodrug. We have compared several aspects of pharmacologic actions of Mel and Mel-pro in estrogen-independent breast cancer MDA-MB 231 cells. It has been found that Mel-pro is more effectively transported into the MDA-MB 231 cells, evokes higher cytotoxicity, similar inhibitory effect on DNA synthesis, lower inhibitory effect on collagen biosynthesis and reduces IGF-I receptor and MAPkinase expression in MDA-MB 231 cells, compared to Mel. The results suggest that targeting of prolidase as a Mel-pro-converting enzyme may serve as a potential strategy in pharmacotherapy of breast cancer.     

三氧化二砷及顺铂对乳腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 了解三氧化二砷(As2O3)、顺铂(DDP)单独及联合应用对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用. 方法 建立裸鼠人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤动物模型,成瘤后动物随机分为4组,每组4只:(1)阴性对照组,(2)As2O3组,(3)DDP组,(4)As2O3 DDP组.疗程结束后,观察3 d,处死裸鼠.治疗期间观察并记录各组裸鼠移植瘤的生长情况及肿瘤体积和裸鼠体重的变化,计算肿瘤生长抑制率,用流式细胞仪法、透射电镜观察体内瘤体的细胞凋亡情况. 结果 As2O3组、DDP组和As2O3 DDP组治疗后肿瘤体积减少,与对照组相比,差异均有显著性(P＜0.01);与As2O3及DDP组单独用药组比较,As2O3 DDP联合用药组肿瘤体积明显减少(P＜0.01),抑瘤率明显增高(P＜0.01);而阴性对照组肿瘤体积增加.各组裸鼠体重无明显变化.As2O3 DDP联合用药组细胞凋亡率为36.9%,明显高于其他2组,差异有显著性(P＜0.01). 结论 As2O3与DDP联合用药比2药单独应用抑制肿瘤生长的作用更强,二者具有协同抗癌作用.     

黄连碱对人乳腺癌MDA-MB-231细胞周期和增殖的作用及其机制

目的 探讨黄连碱对人乳腺癌细胞株MDA-MB231细胞周期和增殖的作用及相关机制.方法 MTT法和瑞-姬氏染色法分别检测黄连碱对MDA-MB-231细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR检测细胞周期相关基因包括细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、CDK6、p21及p27mRNA的表达变化.结果 黄连碱可明显抑制MDA-MB-231细胞的增殖;黄连碱处理细胞后G0/G1期细胞比例减少,而S期和G2/M期细胞比例增高(P＜0.05或P＜0.01);黄连碱可上调p21 mRNA的表达、下调CDK4 mRNA和CDK6 mRNA的表达(P＜0.01),而对p27 mRNA水平无显著影响.结论 黄连碱在体外能通过诱导S期及G2/M期周期阻滞来抑制MDA-MB-231细胞的增殖;其机制可能与p21mRNA表达上调导致CDK4 mRNA及CDK6 mRNA减少有关.