氯沙坦片对糖尿病肾病大鼠转化生长因子-β1及结缔组织生长因子的影响

目的 观察糖尿病肾病（DN）大鼠转化生长因子-β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）在肾组织中的表达，检测尿液中两者的水平。观察氯沙坦片对肾组织TGF-β1、CTGF蛋白的表达及尿液中水平的影响。方法 Wistar大鼠摘除右肾后，注射链脲菌素制造DN大鼠模型。随机分为糖尿病肾病实验组和氯沙坦治疗组。于第6、12周用免疫组织化学法检测肾组织TGF-β1、CTGF蛋白质的表达，ELISA法检测尿液中两者水平。结果 与治疗组相比，实验组12周时尿液TGF-β1、CTGF水平、肾间质纤维组织相对面积显著增加，肾组织TGF-β1、CTGF蛋白质的表达显著升高（P均〈0．01）；肾小球系膜基底膜相对面积扩大（P〈0．05）。与6周相比，实验组12周时尿液TGF-β1、CTGF水平，肾间质纤维组织相对面积显著增加。肾组织内TGF-β1、CTGF蛋白质的表达亦明显升高（P均〈0．01）；治疗组12周肾小球TGF-β1蛋白质的表达升高（P〈0．05），肾小管TGF-β1蛋白质的表达明显升高（P〈0．01）。肾组织内TGF-β1蛋白与CTGF蛋白的表达呈显著正相关（r=0．85P〈0．01），尿液中两者排泄量亦呈明显正相关（r=0．76P〈0．01）。结论 TGF-β1、CTGF蛋白在DN大鼠肾组织表达及尿液中的排泄显著升高。氯沙坦可减轻肾组织TGF-β1、CTGF蛋白的表达，减少两者尿液中的排泄，具有肾保护作用。     

洛沙坦延缓阿霉素肾病鼠慢性病理进展的实验研究

目的探讨肾素-血管紧张素系统(RAS)在肾病综合征的慢性病理进程中的作用和洛沙坦对肾素-血管紧张素系统(RAS)的长期阻断效应,阐明肾病慢性病理进展的部分机制.方法 72只SD大鼠随机分为3组(1)正常对照组;(2)肾病组;(3)治疗组.分2次(间隔20 d)自其尾静脉注射阿霉素(每次2 mg/kg)构建肾病慢性病理进展模型.第1次注药后1周,予以治疗组大鼠洛沙坦10 mg/(kg*d)灌胃,动物实验时间27周.7周后每4周每组杀鼠4只观察大鼠尿蛋白、血清肌酐、肾脏重量/体重比值、肾脏病理,免疫组化法检测肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和胶原蛋白Ⅳ(Collagen Ⅳ)的蛋白质表达水平,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测肾组织TGF-β1和血管紧张素原(Ang)的mRNA表达水平.结果 (1)整个实验期间,大鼠24 h尿蛋白量、血清肌酐及肾重/体重比值,均是肾病组＞治疗组＞对照组(P＜0.01);(2)27周末,肾小球硬化分数对照组为29±5,肾病组为261±39,治疗组为109±12;小管间质病理损害分数对照组为1.8±0.5,肾病组为13.0±1.4,治疗组为8.5±1.3.(3)11周末后,大鼠肾组织TGF-β1、Collagen Ⅳ的免疫组化染色阳性细胞计数百分率,均以肾病组＞治疗组＞对照组(P＜0.01).(4)7周末,肾病组肾组织Ang mRNA的表达水平开始显著升高,27周末对照组为0.64±0.07,肾病组为1.43±0.06,治疗组为1.07±0.10,差异有显著意义;11周末,肾病组TGF-β1的mRNA水平开始升高,27周末,对照组为0.71±0.07,肾病组为1.42±0.12,治疗组为0.94±0.09.结论洛沙坦通过阻断RAS而低调阿霉素肾病鼠肾脏TGF-β1基因和蛋白质的表达,延缓肾病的慢性病理进展.     

双环醇对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的 探讨双环醇对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管上皮细胞转分化的作用.方法 采用UUO 致肾间质纤维化大鼠模型.将81只大鼠随机均分为假手术组、模型组和治疗组.从制模后当天起,给予治疗组200 mg·kg-1·d-1双环醇灌胃.给予假手术组和模型组等量9 g·L-1盐水灌胃处理.术后第7、14、21天各随机处死大鼠9只,留取其肾组织标本备用.用苏木精-伊红(HE)、Masson 染色光镜下观察其肾间质的病理学改变、评定其小管间质损伤及肾间质纤维化的程度;用免疫组织化学方法检测其肾组织内转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;用反转录-PCR方法检测其肾组织TGF-β1 mRNA的表达水平.结果 随着输尿管梗阻时间延长,模型组肾间质可见有较多炎性细胞浸润,弥散性肾小管空泡变性,部分小管灶状扩张、萎缩、坏死,甚至间质纤维化;治疗组肾小管间质损伤及肾间质纤维化改变程度在各时间点均较模型组减轻(Pa<0.05).与假手术组比较,模型组大鼠肾间质纤维组织相对面积显著扩大(P<0.05),肾组织内TGF-β1、α-SMA及TGF-β1 mRNA的表达均显著上调(Pa<0.01).双环醇干预后,上述上调指标均被显著抑制(Pa<0.01).结论 双环醇可能通过抑制UUO大鼠肾小管上皮细胞转分化而减轻肾间质纤维化.     

桂枝茯苓胶囊对肾小管间质纤维化大鼠α-平滑肌肌动蛋白、Ⅳ型胶原和转化因子-β1表达的影响

目的观察桂枝茯苓胶囊对单侧输尿管梗阻(UUO)诱导大鼠小管间质纤维化(TIF)过程中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原(collagenⅣ)和转化因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法利用SD大鼠行UUO诱导建立TIF动物模型。72只SD大鼠随机分为假手术组(n=24)、模型组(n=24)和治疗组(n=24)。治疗组给予桂枝茯苓胶囊+生理盐水灌胃,250 mg/(kg d),每日2次;模型组和假手术组大鼠则在同一时间点以等体积生理盐水灌胃作对照。分别于实验第7、14、21天,3个时间点,三组各处死8只大鼠,检测肾小管损伤、间质炎症细胞浸润和纤维化等肾脏组织病理学变化,采用免疫组化观察和评价α-SMA、collagenⅣ和TGF-β1表达变化。结果 UUO模型建立后,梗阻肾小管间质损伤和纤维化呈进行性加重。在同一时间点,治疗组的肾小管间质纤维化程度比模型组大鼠明显减轻,差异有统计学意义(P<0.01)。梗阻肾小管间质α-SMA、collagenⅣ和TGF-β1的表达则呈逐渐上调趋势,且肾小管间质损害与α-SMA、collagenⅣ和TGF-β1表达量呈正相关(r=0.722~0.903,P均<0.01)。结论桂枝茯苓胶囊可能通过下调α-SMA、collagenⅣ和TGF-β1表达,减轻肾小管上皮间充质转分化和细胞外基质在间质区域的过度沉积,从而达到延缓TIF进展的作用。     

肾小管间质纤维化大鼠肾脏转化生长因子-β1和纤溶酶原激活物抑制剂-1的定量分析

目的 观察肾小管间质纤维化(TIF)大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)mRNA及其蛋白的定量表达,探讨TGF-β1、PAI-1在TIF中的作用及二者之间的相互影响机制.方法 SD大鼠60只,随机分为假手术(SOR)组和单侧输尿管梗阻手术(UUO)组.输尿管结扎后剪断制备UUO模型.分别于手术后第7、14、21天,每组各处死10只大鼠,留取手术侧.肾脏标本,采用病理、实时定量PCR、Western blotting等方法动态观察二组大鼠第7、14、21天梗阻侧肾脏组织学变化和TGF-β、PAI-1在梗阻侧肾脏中的表达情况.采用SPSS 10.0软件进行统计学分析.结果 1.HE、Masson染色结果:SOR组术后第7、14、21天.肾脏未见纤维化改变.UUO组术后第7天肾小管上皮细胞宅泡变性,肾间质炎性反应细胞浸润,术后第14天肾脏纤维化程度加重,术后第21天呈重度纤维化.2.术后第7天开始UUO组TGF-β1 mRNA和蛋白表达量显著高于SOR组(P<0.05,0.01);术后第14天开始UUO组PAI-1 mRNA和蛋白表达量显著高于SOR组(P<0.05,0.01).3.相关性分析:肾小管间质损害与TGF-β1、PAI-1蛋白表达量均呈显著正相关(r=0.975 P<0.01;r=0.801 P<0.05);肾脏TGF-β1表达量与PAI-1呈显著正相关(r=0.937 P<0.01).结论 TGF-β1、PAI-1足肾间质纤维化形成促进因素之一.TGF-β1诱导PAI-1过度表达,PAI-1是TGF-β1的下游靶基因之一,PAI-1也可影响TGF-β1的表达,二者共同促进肾脏纤维化形成.     

心力衰竭幼鼠心肌结缔组织生长因子的表达及药物干预研究

目的研究心力衰竭(heartfailure,HF;简称心衰)幼鼠心肌结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)表达及苯那普利的调节作用。方法采用腹主动脉缩窄术建立幼鼠HF模型,术后6周经高频超声筛查将符合心衰标准的幼鼠随机分为HF组和苯那普利治疗组,另设假手术组。苯那普利治疗组灌胃给药4周,术后10周时行高频超声、心肌重量分析、免疫组化和逆转录-聚合酶链反应分别检测心肌功能、心室重构程度、心肌CTGF表达。结果10周时于3组中各随机抓取15只幼鼠进行检测。与假手术组比较,HF组左室舒张末期内径(LYEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、室间隔舒张末期内径(IVSTd)、室间隔收缩末期内径(IVSTs)、左室后壁舒张末期厚度(LVPWTd)、左室后壁收缩末期厚度(LVPWTs)、左心室相对质量(LVRW)、右心室相对质量(RVRW)均升高(P<0.01),而短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)降低(P<0.01).CTGF免疫阳性细胞增多,CTGFmRNA表达亦高[(0.609±0.065)vs(0.117±0.011),P<0.01]。苯那普利组与HF组相比LVESD,IVSTd,IVSTs,LVPWTd,LVPWTs,LVRW,RVRW降低(P<0.01),FS、EF升高(P<0.01),CTGF免疫阳性细胞减少,CTGFmRNA表达下降[(0.441±0.053)vs(0.609±0.065),P<0.01]。结论HF幼鼠心肌CTGF表达明显上调,苯那普利可部分抑制HF心肌CTGF的表达,从而抑制HF时心室重构的发生,改善心脏功能。     

TGF-β与肝细胞生长因子在儿童原发性局灶节段性肾小球硬化肾组织中的表达

目的：通过检测转化生长因子β(TGF-β)和肝细胞生长因子(HGF)在儿童原发性局灶节段性肾小球硬化（FSGS）肾组织中的表达,了解它们在FSGS中的作用。方法：选择肾活检明确诊断为原发性FSGS肾组织标本共33 例,其中FSGS不伴肾小管间质病变6 例,为实验1 组;FSGS伴肾小管间质病变27 例,为实验2 组;同期因孤立性血尿入院肾活检,病理证实无显著异常改变的肾组织标本共7 例,为对照组。采用免疫组化法检测TGF-β和HGF在3 组肾组织中的表达。结果：TGF-β和HGF在3 组中均有表达,但组间差异有统计学意义（P＜0.01）。其中两个实验组的TGF-β和HGF的表达均较对照组明显增加（P<0.01）,实验2组TGF-β的表达量高于实验1组,HGF的表达量却低于实验1组。肾小管间质指数与TGF-β的表达呈正相关,相关系数是0.763,P<0.01;与HGF的表达呈负相关,相关系数是-0.461,P<0.05。TGF-β和HGF在FSGS肾组织中表达呈负相关,相关系数-0.425,P<0.05。结论：TGF-β和HGF在儿童原发性FSGS肾组织中的表达增加;TGF-β随着 FSGS病变进展,在肾组织中表达量增加,与肾小管间质向纤维化发展相关;HGF的表达相反,与抑制肾小管间质纤维化的作用有关。［中国当代儿科杂志,2010,12（8）：630-633］     

人气道平滑肌细胞在TGF-β1刺激下细胞表型转换标志物——基质Gla蛋白mRNA和主要纤维化蛋白表达研究

目的平滑肌细胞表型具有可塑性,在哮喘气道重建中,平滑肌细胞表型由收缩型向合成型转化.本研究探讨气道平滑肌细胞在转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激下细胞表型转换的特异性标志物基质Gla蛋白(MGP)mRNA和主要纤维化蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ的表达.方法人气道平滑肌细胞体外原代培养,传2～3代后重新接种,实验组10组,给予TGF-β1100μg/ml刺激,每组均设未予TGF-β1复管作为对照,其余培养条件相同,7 d后90%的细胞融合,收获.RT-PCR方法研究平滑肌细胞MPG mRNA的表达,Western blot法分析胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ的表达水平.结果经TGF-β1刺激后,气道平滑肌细胞表达MGP mRNA为(62.3±13.1)%,对照组MGP mRNA为(27.4±11.4)%,两组差异有统计学意义(P＜0.01),TGF-β1刺激后的平滑肌细胞表达胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ分别为(灰度值)67.6±10.0,94.5±9.8,83.8±16.2,高于对照组的平滑肌细胞,差异有统计学意义(P＜0.01).结论TGF-β1促进气道平滑肌细胞表达MGP mRNA和胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ,后两者作为气道平滑肌细胞表型转化的早期标志物,表明平滑肌细胞存在由收缩型向合成型转化的趋势.可以认为TGF-β1与平滑肌细胞的相互作用促进了气道重建过程.     

核心蛋白聚糖抑制转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化机制研究

目的 研究核心蛋白聚糖抑制转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞-间充质细胞-转分化(EMT)的机制.方法 将体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2)分为4组:(1)阴性对照组;(2)100 ng/ml核心蛋白聚糖组;(3)10 ng/ml TGF-β1组;(4)100 ng/ml核心蛋白聚糖和10ng/ml TGF-β1组.Western blot法检测信号通路ERK、PI3K、Smad_3的磷酸化水平和β-catenin的蛋白水平;实时定量-PCR检测snail mRNA的表达情况,逆转录-PCR检测淋巴细胞增长因子1(LEF-1)mRNA的表达情况.结果 (1)与对照组相比,TGF-β1诱导组ERK(1.11 ±0.09:0.47 ±0.07)、PI3K(14.79 ±1.02:2.48 ±0.06)、Smad_3(0.95 ±0.02:0.08 ±0.01)的磷酸化水平明显增高,snail(2.59±0.70:1.02±0.13)、LEF-1(1.85 ±0.08:0.30 ±0.11)的mRNA的表达量明显增高,β-catenin(1.46 ±0.20:0.49±0.05)的最明显增高;(2)单纯核心蛋白聚糖组与对照组相比,所得结果 差异均无统计学意义.核心蛋白聚糖和TGF-β1共同刺激组与TGF-β1组相比,ERK(0.58 ±0.08)的磷酸化水平及snail mRNA(1.24 ±0.03)的表达量明显降低而PI3K(15.84 ±1.64),Smad_3(0.90 ±0.04)的磷酸化水平,LEF-1的mRNA(1.64 ±0.07)、β-catenin(1.42±0.09)的量差异无统计学意义.结论 核心蛋白聚糖抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞EMT可能是通过阻止ERK信号转导通路实现的.     

幼年大鼠阿霉素肾病早期肾组织核转录因子κB与血管紧张素Ⅱ1型受体表达的相关性及干预治疗

目的　探讨阿霉素肾病幼年大鼠肾损伤早期 ,肾组织血管紧张素Ⅱ 1型受体 (AT1)与核转录因子 (NF)κB(P65/Rel A)表达的趋势、相关性及其潜在的病理意义 ,及给予血管紧张素转换酶抑制剂苯那普利和血管紧张素受体阻断剂氯沙坦的干预影响。方法　以阿霉素肾病幼年大鼠为实验性肾病模型 ,于肾病早期第 1、2、3周观察大鼠蛋白尿、血生化各指标的变化。用免疫组化方法检测大鼠肾组织AT1蛋白表达 ,用原位杂交方法检测大鼠肾组织P65/Rel AmRNA表达的情况 ,并从时相和组织定位表达的趋势上评价AT1和P65/Rel A表达的相关性。结果　 ( 1)阿霉素注射后第 1周大鼠即出现明显蛋白尿 ,于第 3周即达大量蛋白尿程度 ( 12 3 2± 7 7)mg/ 2 4h ,同时血生化各指标趋于增高。肾小管中可见大量蛋白管型 ,肾间质中可见大量炎性细胞浸润。 ( 2 )肾小管间质区AT1蛋白和P65/Rel AmRNA表达趋势明显上调 ,第 1、2、3周AT1组化半定量分别为 ( 19 8± 1 1) %、( 2 5 0±2 6 ) %、( 37 1± 1 0 ) % ,假手术组 :( 10 3± 0 8) %、( 10 4± 1 6 ) %、( 10 2± 1 5 ) % ,AT1蛋白主要分布于各级肾小管上皮细胞胞浆和核膜 ,P65/Rel AmRNA表达于小管上皮细胞胞浆 ,随病变的进展 ,其核转位趋势明显增加 ,阳染信号由胞浆转至细胞核 ,P65/R     

核心蛋白聚糖对转化生长因子β1诱导人近端肾小管上皮细胞转分化的影响

目的探讨核心蛋白聚糖对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的人。肾小管上皮细胞（HK-2）转分化的影响。方法将体外培养的HK-2细胞分为6组：阴性对照组（A组）;10ng／ml TGF-β1组（B组）;10ng／ml核心蛋白聚糖组（C组）;100ng／ml核心蛋白聚糖组（D组）;10ng／ml TGF-β1＋10ng／ml核心蛋白聚糖组（E组）;10ng／ml TGF-β1＋100ng／ml核心蛋白聚糖组（F组）。倒置显微镜下观察加入刺激因子48h后,各组细胞形态学变化;应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测核心蛋白聚糖对TGF-β1诱导的HK-2细胞内α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白、角蛋白mRNA表达的影响。结果B组与A组相比较,细胞形态发生明显变化,大部分细胞拉长呈梭形,似成纤维细胞;E组和F组比B组梭形样细胞明显减少,尤其是F组梭形样细胞减少更明显;C组和D组与A组细胞形态无明显区别,为椭圆形;B组与A组比较,波形蛋白、α-SMAmRNA表达明显提高,角蛋白mRNA表达减少。B组平均值分别为（0.828±0.297）、（0.332±0.025）、（0.075±0.040）,A组平均值分别为（0.033±0.060）、（0.003±0.000）、（0.348±0.012）,差异有统计学意义（P〈0.05）;E组和F组与B组相比,波形蛋白、α-SMA的表达有所下降,角蛋白的表达呈上升趋势（P〈0.05）,平均值分别为E组（0.234±0.313）、（0.214±0.196）、（0.098±0.056）,F组（0.155±0.053）、（0.122±0.130）、（0.215±0.122）。C组和D组与A组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论TGF-β1能诱导正常人肾小管上皮细胞发生转分化;核心蛋白聚糖对TGF-β1诱导的HK-2细胞转分化具有抑制作用,且呈剂量依赖性。     

苦参碱对大鼠肾小球硬化早期防护作用的实验研究

目的　探讨苦参碱对大鼠肾小球硬化的早期防护作用。方法　用单侧肾切除加 1周后尾静脉注射阿霉素 (5mg/kg)的方法建立肾小球硬化大鼠模型 ,分模型对照组、苯那普利治疗组、苦参碱 10 0mg/kg治疗组和苦参碱 5 0mg/kg治疗组 ,设假手术组为正常对照组。检测各组术后第 2、4、6周的尿蛋白及第 6周的血清尿素氮、肌酐、总蛋白、白蛋白及肾组织病理改变 ,并应用免疫组织化学方法检测肾组织内纤维连接蛋白 (FN)、层黏蛋白 (LN)在肾小球的沉积和转化生长因子 β1(TGF β1)、结缔组织生长因子 (CTGF)蛋白质的表达。结果　苦参碱 5 0mg/kg治疗组、苦参碱 10 0mg/kg治疗组和苯那普利治疗组的尿蛋白排泄量、血肌酐和尿素氮水平均低于模型对照组 ,肾小球增生、硬化程度轻于模型对照组 (P <0 0 5 ) ,肾小球内FN和LN沉积、肾皮质TGF β1蛋白表达也轻于模型对照组(P <0 0 5 ) ,CTGF仅模型对照组有少量表达 ,正常对照组和各治疗组均无表达 (P <0 0 1)。苯那普利治疗组、苦参碱 10 0mg/kg治疗组以上作用均优于苦参碱 5 0mg/kg治疗组 (P <0 0 5 ) ,但二者间差异无显著意义 (P >0 0 5 )。结论　苦参碱对肾小球硬化大鼠模型肾脏病变有部分防护作用。     

外源性结缔组织生长因子对人肾小管上皮细胞胶原Ⅲ合成的影响

目的：结缔组织生长因子（CTGF）是一种重要的参与肾纤维化的细胞因子，为了进一步阐明外源性CTGF的作用机制，该文探讨了外源性CTGF对人肾小管上皮细胞胶原Ⅲ合成中的作用。方法：将体外培养的人肾小管上皮细胞HK2 分为3组：①对照组；②CTGF小剂量组（终浓度为2.5 ng/mL）；③CTGF大剂量组（终浓度为20 ng/mL）。用倒置显微镜观察细胞形态变化，RT-PCR检测HK2细胞胶原Ⅲα mRNA水平的变化，免疫组织化学方法观察HK2 细胞胶原Ⅲα的表达。结果：不同浓度的CTGF作用于HK2 细胞48 h后，均可使HK2 细胞由椭圆形变为梭形。大剂量CTGF刺激HK2 细胞48 h后胶原Ⅲα mRNA水平显著升高（P<0.05），大剂量CTGF组HK2 细胞胞浆表达胶原Ⅲα也显著增加（P<0.05）。结论：CTGF在体外能够诱导人肾小管上皮细胞发生形态改变，大剂量的CTGF刺激可以增加人肾小管上皮细胞胶原Ⅲ的合成。     

高氧诱导早产鼠肺纤维化中结缔组织生长因子的表达及其意义

目的：结缔组织生长因子（CTGF）是新近发现与纤维化发生密切相关的一种因子，但其与早产儿慢性肺疾病（CLD）的肺纤维化有何关系，迄今未见报道。该文旨在阐明CTGF在高氧致早产鼠CLD发生、发展的表达规律，并探讨其在纤维化中表达及意义。方法：采用高浓度氧诱导早产鼠CLD模型，应用酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫组织化学及反转录聚合酶链反应（RT-PCR）等技术，动态观察CTGF mRNA表达，并同时测定肺成纤维细胞的增殖性细胞核抗原（PCNA）指数及肺组织 Ⅰ 型胶原的含量和TGF-β1蛋白表达水平。结果：生后1 d，3 d，两组 Ⅰ 型胶原、PCNA指数、TGF-β1蛋白及CTGF mRNA表达水平无差异（P>0.05）；实验组肺组织TGF-β1蛋白表达7 d升高（P<0.05），Ⅰ 型胶原、PCNA指数及CTGF mRNA表达14 d升高（P<0.05），21 d均达高峰（P<0.01）；肺组织CTGF mRNA表达与 Ⅰ 型胶原呈明显正相关（γ=0.89, P<0.01）。结论： 高氧致CLD早产鼠肺组织CTGF mRNA表达水平与肺组织纤维化的程度相一致，CTGF与CLD的肺纤维化密切相关。［中国当代儿科杂志，2007，9（5）：449-452］     

秋水仙碱对成纤维细胞产生细胞因子以及分泌细胞外基质的影响

目的　阐明秋水仙碱对体外培养人肾脏成纤维细胞 (FB)产生炎症因子转化生长因子 β1(TGF β1)、白细胞介素 1β(IL 1β)以及细胞外基质的影响。 方法　体外培养人胚胎肾脏FB ,经不同浓度秋水仙碱 ( 5 0 μmol/L、10 0 μmol/L、2 0 0 μmol/L、4 0 0 μmol/L)预处理 1h后 ,加入含 10 0μg/ml脂多糖 (LPS)的FB完全培养液继续培养 18h ,以未经LPS刺激也无秋水仙碱预处理的FB细胞为对照。实验终点收集细胞和上清。分别利用RT PCR方法观察秋水仙碱对FB产生TGF β1和IL 1βmRNA表达的影响 ;ELISA法测定细胞上清TGF β1、IL 1β以及胶原COLⅢ、COLⅣ蛋白含量。结果　 ( 1)单纯 10 0 μg/mlLPS刺激后 ,FB产生TGF β1和IL 1βmRNA分别较未经刺激的正常对照组上调 3倍 (RI值分别为 6 6 1± 1 6、2 2 3± 2 0 ,q =5 90 5 ,P =0 0 0 2 )和 4 7倍 (RI值分别为2 2 0± 2 2、4 7± 0 8,q =10 6 8,P =0 0 0 9)。细胞上清TGF β1和IL 1β蛋白含量均明显高于基础含量 [TGF β1分别为 :( 5 16± 14 )pg/ml和 ( 4 2 0± 5 ) pg/ml(q =80 3,P =0 0 12 ) ,IL 1β分别为 :( 3 4± 0 3) pg/ml和 ( 0 3± 0 1) pg/ml( q=2 97 9,P =0 0 0 3) ]。 ( 2 )秋水仙碱明显抑制FB之TGF β1mRNA以及蛋白表达 ,而     

外源性结缔组织生长因子对肾小管上皮细胞的转分化和胶原合成效应

目的：大量研究表明内源性结缔组织生长因子(CTGF)在肾小管间质纤维化(TIF)进程中发挥了重要作用,为进一步阐明外源性CTGF的作用机制,该实验探讨了重组人结缔组织生长因子(rhCTGF)刺激对人肾小管上皮细胞(HK2)转分化和胶原合成的作用。方法：rhCTGF 5 ng/mL刺激HK2细胞,用倒置显微镜观察细胞形态学变化,同时在刺激后0,3,6,12,24,48 h各点收集细胞,RT-PCR检测上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原Iα1(Col Iα1)和胶原IVα1(Col IVα1)mRNA表达变化。结果：rhCTGF 5 ng/mL刺激使HK2细胞形态由椭圆形转为梭形,下调E-cadherin mRNA表达,上调-αSMA mRNA表达,但对Col Iα1和Col IVα1mRNA表达没有影响。结论：外源性CTGF能导致HK2细胞转分化,但不能促进其胶原合成。     

实验性大鼠早期糖尿病肾组织内皮素-1的变化

目的探讨内皮素-1(ET-1)在早期实验性糖尿病大鼠肾脏中的含量和意义。方法采用免疫组织化学、原位杂交技术检测糖尿病大鼠肾组织ET-1 mRNA含量。结果ET-1 mRNA主要分布于肾小球内皮细胞、系膜细胞、血管平滑肌细胞及肾小管上皮细胞中,髓质高于皮质,糖尿病发生后1~2周肾小球内均明显减少(P<0.05),4周时开始增加(P<0.05),而在髓质中则持续增加。结论ET-1参与早期实验性糖尿病大鼠肾小球高灌注及肾小管间质损伤。