肝细胞生长因子对重症急性胰腺炎小鼠肠黏膜屏障保护作用

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）对重症急性胰腺炎（SAP）小鼠肠黏膜屏障功能障碍修复作用及机制,以及肠道干细胞在黏膜损伤修复中的作用。方法健康雄性昆明小鼠60只,按数字表法随机分成正常对照（NC）组10只、SAP组25只和HGF组25只。酶耦联紫外分光光度法检测血清D哥L酸水平,肠系膜淋巴结、胰腺、肝脏、脾脏及肺组织细菌培养,流式细胞仪检测肠上皮细胞增殖指数,免疫组化染色法检测小肠隐窝干细胞变化。结果SAP组血清D-乳酸值为（11．17±1．90）mg／L,较NC组（4．87±0．73）mg／L和HGF组（7．30±0．88）mg／L高,差异均有统计学意义（F=78．20,P值均〈0．01）。胰腺、肠系膜淋巴结、肝脏、脾脏、肺脏细菌培养器官移位率SAP组（50％,40／80）高与NC组（14％,7／50）和HGF组（29％,29／100）（χ^2=7．427,χ^2=4．112,P值均〈0．01）。肠黏膜上皮细胞增殖指数SAP组较NC组和HGF组明显下降（F=42．71,P值均〈0．05）,HGF组与NC组比较则明显升高（P〈0．01）。SAP组小肠隐窝干细胞数（1．26±0．87）个,低于NC组（2．16±0．90）个和HGF组（2．50±0．96）个,差异均有统计学意义（F=8．34,P值均〈0．01）。结论HGF可促进肠黏膜上皮细胞的增殖,降低肠道通透性及肠道细菌移位率,减轻急性胰腺炎小鼠肠黏膜的损伤。     

重症胰腺炎大鼠肠道免疫功能改变及精氨酸的调节作用

目的：探讨重症急性胰腺炎（Severe Acute Pancreatitis，SAP）大鼠肠道黏膜免疫功能变化及L-精氨酸（L-Arg）对SAP大鼠肠道黏膜免疫功能的影响。方法：成年、雄性Wistar大鼠随机分为胰腺炎组、假手术组和L．精氨酸治疗组。分别于造模后24、48和72小时取标本检测：鲎试剂法检测大鼠门静脉血内毒索水平、免疫组化方法检测并计数小肠黏膜固有层内CD3、CD4、CD8阳性T淋巴细胞百分数、放射免疫法检测盲肠内容物中分泌型IgA（sIgA）含量。结果：SAP组大鼠各时段门静脉血内毒素水平显著升高，回肠末段黏膜固有层CD3^＋、CD4^＋T淋巴细胞百分数明显减少，CD^＋／CD8^＋T淋巴细胞比值降低，盲肠内容物sIgA含量明显降低；与SAP组比较，L-精氨酸组大鼠各时段门静脉血内毒素水平明显降低，回肠末段黏膜固有层CD3^＋、CD4^＋T淋巴细胞百分数明显增加，CD4^＋／CD8^＋T淋巴细胞数比值升高，盲肠内容物SIgA含量增加。结论：SAP大鼠早期即发生肠黏膜免疫功能明显下降，可能是导致肠道内毒素移位的主要原因，L-精氨酸可以改善SAP大鼠肠道黏膜免疫功能，降低SAP大鼠肠道内毒索移位发生。     

GLP-2对大鼠颅脑外伤后肠粘膜免疫功能的影响

目的研究高血糖素样肽-2（Glucagon-like peptide-2,GLP-2）对大鼠颅脑外伤后胆汁中分泌型IgA（sIgA）、肠粘膜T细胞及其亚群以及肠粘膜蛋白质和DNA含量的影响。方法制作大鼠弥漫性脑创伤模型,连续腹腔注射GLP-2,7d后收集大鼠胆汁测定sIgA、采集门静脉血测定血内毒素及制备小肠粘膜标本,检测小肠粘膜蛋白质、DNA含量和小肠上皮内淋巴细胞的T细胞及其亚群。结果颅脑外伤组大鼠小肠粘膜蛋白质和DNA含量以及胆汁中sIgA显著下降（P〈0.01）,小肠粘膜CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋较对照组显著降低（P〈0.05）;而GLP-2组大鼠小肠粘膜蛋白质和DNA含量以及胆汁中sIgA明显增加（P〈0.01）,小肠粘膜CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋较颅脑外伤组增加（P〈0.05）,门静脉血内毒素也显著减少（P〈0.01）。结论GLP-2能够改善大鼠颅脑外伤后肠粘膜免疫功能,从而减轻内毒血症。     

LP17多肽对小鼠肠缺血再灌注损伤影响

目的：探讨LP17多肽对小鼠肠缺血再灌注（ IIR）损伤影响。方法将36只小鼠按数字表法随机分为假手术组（ S组）、IIR组（ I/R组）、IIR＋LP17对照肽治疗组（ C1组）、IIR＋LP17治疗组（ C2组）,每组9只。肠系膜上动脉夹闭20 min制作小鼠IIR模型,于再灌注前5 min将药物注入小鼠腹腔,24 h后处死小鼠,检测血清中可溶性髓样细胞触发受体-1（ sTREM-1）和肿瘤坏死因子-α（ TNF-α）的浓度,观察肠黏膜损伤程度,免疫组化法检测肝脏细胞的核因子-κB（ NF-κB）的表达情况。结果血清sTREM-1、血清TNF-α和肝脏细胞NF-κB在I/R组和C1组升高,分别为（1686.34±55.98）pg/ml、（121.81±8.01） pg/ml、（3.36±0.62）表达和（1643.73±65.45） pg/ml、（119.88±8.05）pg/ml、（3.21±0.94）分;在C2组降低,分别为（944.58±39.75）pg/ml、（65.92±4.91）pg/ml和（0.92±0.55）分,与I/R组和C1组比较,差异均有统计学意义（P值均〈0.01）。光镜下S组小鼠小肠黏膜基本正常;I/R组和C1组绒毛破坏较重,绒毛坏死明显,黏膜下水肿、炎性细胞浸润更加明显,肠壁各层均变薄;C2组肠绒毛损伤明显减轻,其肠黏膜损伤评分与其他各组比较,差异均有统计学意义（P值均〈0.01）。结论 LP17多肽通过调节TREM-1的信号转导通路,减轻NF-κB和TNF-α过度激活所致炎症反应,减轻IIR引起的肠黏膜及远隔脏器的损伤。     

胰高血糖素样肽-2对脓毒症大鼠肠黏膜通透性的影响

目的探讨胰高血糖素样肽-2（GLP-2）对脓毒症大鼠肠黏膜通透性的影响。方法采用腹腔注射内毒素（5mg／kg）的方法制作脓毒症模型,根据预实验结果选取病理变化最严重的注射后6h作为实验时间点。成年雄性SD大鼠60只,按数字表法随机分为生理盐水对照组（A组）、脓毒症组（B组）、治疗组（C组）3组,每组20只。A、B、C组分别以生理盐水、脂多糖（LPS）、GLP-2＋LPS腹腔注射于大鼠模型;于注射后6h摘眼球取血,紫外分光光度法检测D-乳酸含量,留取末端回肠组织用免疫组化法检测紧密连接蛋白occludin表达,同时观察肠黏膜病理（HE染色）改变。结果光镜下A组肠黏膜未见明显病理改变;B组肠黏膜明显充血水肿,上皮细胞部分变性、坏死脱落,并有大量炎细胞浸润;C组肠黏膜病理改变较B组明显减轻。A组occludin蛋白沿着细胞膜的顶端呈线状连续分布,B组occludin蛋白分布不均,染色变淡,C组occludin蛋白表达连续性部分恢复,染色变深。B组血液中D-乳酸含量（8．14±0．91）mg／L,高于A组的（3．98±0．68）mg／L和C组的（6．46±0．73）mg／L,差异均有统计学意义（F=144．12,P值均〈0．01）。结论脓毒症大鼠肠黏膜屏障受损,通透性增加;GLP-2可以减轻脓毒症大鼠肠道屏障功能损伤的程度,对脓毒症的肠道损伤有一定治疗作用。     

人参皂苷Re对重症急性胰腺炎小鼠小肠黏膜的影响及调控机制

目的 探讨人参皂苷Re通过调控 Janus激酶2/信号转导子与转录激活子3（JAK2/STAT3）通路对重症急性胰腺炎（SAP）小鼠小肠黏膜的影响及作用机制。 方法 48只小鼠分为对照组、SAP组、SAP+人参皂苷Re组和SAP+人参皂苷Re+LY2784544组（n=12）。通过腹腔注射雨蛙肽溶液（禁食12 h后,100 μg/kg × 6次,注射间隔60 min）的方法建立SAP模型。腹腔注射人参皂苷Re（4 mg/kg,每日1次,连续7 d）。通过腹腔注射 12.7 mg/kg LY2784544来抑制JAK2/STAT3通路。检测各组胰腺指数、血清淀粉酶和炎性因子水平;检测D-乳酸和FITC-D水平分析小肠黏膜屏障功能;HE染色观察胰腺组织和小肠黏膜组织损伤情况;Western blotting检测小肠黏膜组织中凋亡蛋白Bax和Bcl-2的水平;Real-time PCR和Western blotting检测胰腺组织和小肠黏膜组织JAK2/STAT3通路水平。 结果 SAP组小鼠胰腺指数、血清淀粉酶、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）、FITC-D、D-乳酸、Bax蛋白水平、胰腺组织和小肠组织中JAK2和STAT3 mRNA和蛋白水平均显著高于对照组,而Bcl-2蛋白显著低于对照组（P<0.05）。SAP+人参皂苷Re组小鼠Bcl-2蛋白显著高于SAP组,其余指标显著低于SAP组（P<0.05）。SAP+人参皂苷Re+LY2784544组的Bcl-2蛋白显著高于SAP+人参皂苷Re组,其余指标显著低于SAP+人参皂苷Re组（P<0.05）。 结论 人参皂苷Re可能通过抑制JAK/STAT通路缓解炎性反应减轻SAP模型小鼠的胰腺损伤, 并通过抑制细胞的凋亡保护小肠黏膜屏障。     

肠缺血再灌注损伤小鼠髓样细胞触发受体-1表达的改变及意义

目的 建立小鼠肠缺血再灌注（I/R）损伤模型,观察小鼠小肠I/R损伤后髓样细胞触发受体-1（TREM-1）的表达及其与炎症因子水平变化的关系。方法 将72只小鼠按数字表法随机分为3组,对照组（N组）8只、假手术组（S组）32只、I/R损伤组（I/R组）32只。制备肠I/R损伤模型,制模后S组与I/R组分别于6、12、24、48 h处死8只小鼠取标本：ELISA测定外周血清中可溶性（s）TREM-1、TNF-α的水平并进行相关性分析;免疫组织化学检测小肠组织中TREM-1的表达。结果 I/R组24 h时TREM-1浓度达峰值为（1 272.88±295.52）pg/ml,各时段浓度均高于N组[（168.99±22.79） pg/ml]和S组[24 h（178.58±10.98） pg/ml],差异均有统计学意义（P值均〈0.01）。I/R组TNF-α值 12 h[（33.03±4.12） pg/ml]开始升高, 24 h[（94.01±9.44） pg/ml]达峰值。sTREM-1表达和TNF-α浓度的变化呈正相关（r=0.840,P=0.000）。免疫组化显示在I/R损伤后小鼠肠sTREM-1表达增高,24 h组染色积分最高为（3.38±0.66）分,且阳性部位主要是小肠黏膜固有层和上皮细胞。结论 小肠组织sTREM-1的表达上调可能是导致肠黏膜屏障功能下降及系统性炎症反应的重要环节;sTREM-1可作为判断肠I/R肠黏膜损伤严重程度的的检测指标。     

烫伤对大鼠免疫功能的影响及药膳饮食对其的调理作用观察

目的观察烫伤对大鼠免疫功能的影响及药膳饮食对其的调理作用。方法健康Wistar大鼠70只，体质量（200±20）g，雌雄各半，随机分成正常对照组（A组，n=10）、烧伤常规喂养组（B组，n=30）和烧伤药膳喂养组（C组，n=30）。A组37℃造成假伤后全部处死取材，B、C组大鼠造成30％TB-SAⅢ度烧伤伤后B组常规饲养，C组伤后2h开始以复温至37℃的药膳饮食灌胃，2ml/次，2次／d＋常规饲养。B、C组于伤后3、7、14d各取10只，无菌条件下取材送检，观察T淋巴细胞亚群和NK细胞活性、血浆IgA、IgG、IgM、C3、C4、含量、肠道sIgA含量的变化。结果①B、C组伤后CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋、NK细胞活性、IgA、IgG、IgM、C3、C4水平及肠道sIgA含量均低于A组，CD8^＋高于A组（P〈0．05或P〈0．01）；②C组与B组比较，各免疫指标均恢复快（P〈0．05或P〈0．01）。结论严重烫伤大鼠细胞免疫和体液免疫功能发生了改变；药膳饮食可以改善烫伤大鼠T淋巴细胞亚群分布，提高NK细胞活性，促进血浆IgA、IgM、IgG、C3、C4的恢复和肠黏膜细胞sIgA的分泌，从而改善机体的免疫功能。     

呼吸道合胞病毒对致敏小鼠气道炎症和CD8+ T细胞功能的影响

目的观察呼吸道合胞病毒（RSV）对致敏小鼠气道炎症和CD8^＋T细胞功能的影响.方法BALB/c小鼠40只,随机分成4组,分别为磷酸盐缓冲液（PBS）对照组、鸡卵白蛋白（OVA）组、RSV组、OVA/RSV组;应用OVA腹腔注射致敏、OVA气道雾化结合RSV滴鼻激发哮喘;支气管肺泡灌洗液（BALF）作细胞分类计数;酶联免疫吸附试验（ELISA）测定BALF上清中白细胞介素（IL）-4、IL-5、干扰素（IFN）-γ含量;苏木精-依红（HE）染色观察肺病理变化;采用三色光流式细胞分析法测定气管旁淋巴结（PBLN）中CD4^＋、CD8^＋T细胞及细胞内细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-5表达与TH2/TH1、Tc2/Tc1比值变化.结果（1）BALF中细胞总数及分类：与OVA组比较,OVA/RSV组细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞均明显增加（分别P＜0.01）;与RSV组比较,OVA/RSV组细胞总数、嗜酸性粒细胞明显增加（分别P＜0.01）.（2）BALF上清中细胞因子含量：与OVA组比较,OVA/RSV组IFN-γ、IL-4、IL-5含量均明显升高（分别P＜0.01）;与RSV组比较,OVA/RSV组IFN-γ无明显变化,而IL-4、IL-5显著上升（分别P＜0.01）.（3）肺组织病理：OVA/RSV组与其他各组比较气道黏膜增厚,管腔狭窄、收缩,上皮破坏,管壁周围炎症细胞浸润明显加重.（4）PBLN中CD4^＋（WN-γ^＋、IL-4^＋、IL-5^＋）、CD8^＋（IFN-γ^＋、IL-4^＋、IL-5^＋）T细胞各占CD3^＋T细胞百分比及TH2/TH1、Tc2/Tc1比值变化：与OVA组比较,OVA/RSV组CD8^＋（IFN-γ^＋、IL-4^＋、IL-05^＋）T细胞百分比、Tc2/Tc1比值增加（分别P＜0.01）,TH2/TH1比值无明显变化.与RSV组比较,OVA/RSV组CD4^＋（IL-4^＋、IL-5^＋）T细胞、TH2/TH1比值、CD8^＋（IL-4^＋、IL-5^＋）T细胞、Tc2/Tc1比值均明显上升（分别P＜0.01）.结论（1）OVA致敏小鼠RSV感染后可明显加重气道炎症,TH2、TH1型炎症均加强,且以TH2型炎症加重为主.（2）OVA致敏小鼠RSV感染后可引起CD8^＋T细胞数量及功能改变,即由产生IFN-γ^＋为特征的Tc1细胞向产生IL-4^＋、IL-5^＋为特征Tc2细胞转化,并可能与气道内IL-4、IL-5升高及嗜酸性粒细胞的大量募集有关.     

当归及其多糖对隐孢子虫感染小鼠的免疫调节作用

目的 探讨当归及当归多糖对隐孢子虫感染小鼠的免疫调节作用.方法 连续8 d灌服给小鼠醋酸地赛米松后,于第9 d经口接种1×10^6个隐孢子虫卵囊1次,建立隐孢子虫感染模型,再经当归水煎剂及当归多糖灌胃治疗10 d,计数粪便隐孢子虫卵囊,观察肠组织病理学改变,检测T细胞亚群和血清IL-2、IL-4、IFN-γ水平.并设正常对照、模型对照和西药对照组.结果 与模型组比较,西药组、当归水煎剂组和当归多糖组小鼠卵囊排除数量减少（第4天分别为300个、50个、238个和230个）,肠组织病理学改变较轻,免疫学检测发现CD4^＋T细胞[分别为（38.85±8.16）%、（47.98±11.90）%、（55.85±6.63）%、（51.43±8.42）%]CD4^＋/CD8^＋[分别为1.98±0.47、2.25±0.53、2.51±0.55、2.42±0.23）]及IL-2的水平[分别为（28.75 4±1.93）pg/ml、（69.02±10.47）ps/ml、（42.91±4.48）pg/ml、（40.90±0.79）pg/ml]IL-4的水平[分别为（42.00±6.79）pg/ml、（64.26±6.07）pg/ml、（58.31±9.13）ps/ml、（54.95±8.99）pg/ml]和IFN-γ的水平[分别为（28.73±8.71）ps/ml、（45.40±6.11）pg/ml、（84.40±7.63）pg/ml、（78.40±6.32）pg/ml]明显升高（F值分别为13.58、19.37、24.22、54.36和35.74 P值均小于0.05）.结论 当归水煎剂和当归多糖通过增强机体免疫功能促进隐孢子虫感染的免疫抑制小鼠的恢复.     

高通量血液透析对维持性血液透析患者细胞免疫功能的影响

目的探讨高通量血液透析对维持性血液透析（MHD）患者细胞免疫功能的影响。方法收集2012年3月至8月于本院门诊行MHD治疗的患者40例,随机数字表法分为血液透析（HD）组（n=20）和高通量血液透析（HFHD）组（n=20）,分别接受HD和HFHD治疗,均为每周透析3次,每次4h。透析前、透析后4、24、48h,流式细胞术检测两组患者外周血CD4＋．CD8＋、CD25＋,记录CD47CD8＋比值,酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血清IL-2、可溶性IL-2受体（sIL．2R）;另设健康对照组（C组）20例,清晨空腹抽血检测上述指标。结果与C组比较,透析前HD组和HFHD组患者外周血CD4＋、CD25＋、CD4＋／CD8＋水平下降,血清IL．2水平下降,sIL．2R升高（均P〈0．05）。与透析前比较,HD组患者透析后4h外周血CD4＋、CD25＋、CD47CD8＋水平升高,血清IL-2水平升高,sIL-2R降低（均P〈0．05）,CD8＋差异无统计学意义（P〉O．05）;与透析前比较,HD组患者透析后24、48h上述各指标差异无统计学意义（均P〉0．05）。与透析前比较,HFHD组患者透析后4、24、48h外周血CD4＋、CD25＋、CD4VCD8＋水平升高,血清IL．2水平升高,slL-2R降低（均P〈0．05）,而CD8＋差异均无统计学意义（均P〉O．05）。与同时点HD组比较,HFHD组透析后4h各指标差异均无统计学意义（均P〉O．05）;透析后24、48h,HFHD组外周血CD4＋、CD25＋、CD4＋／CD8＋水平升高,血清IL．2水平升高,sIL．2R降低[CD4＋：（38．73±6．25）％比（34．92±5．84）％,（37．03±5．41）％比（32．62±5．79）％;CD25＋：（21．36±4．65）％比（15．29±4．72）％,（18．19±4．27）％比（13．94±5．05）％;CD4＋／CD8＋：1．42±0．31比1．23±0．29,1．38±0．30比1．20±0．33;IL-2：（22．03±5．18）m±L比（19．03±4．87）m#L,（20．54±5．92）mL比（18．26±4．96）mL;sIL-2R：（672．96±159．36）U／ml比（787．32±143．27）u,ml,（720．24±143．92）u,（858,42±172．13）U／ml,均P〈0．05],而CD8＋差异无统计学意义（均P〉O．05）。结论HD可短暂改善MHD患者的细胞免疫功能,HFHD可持续改善MHD患者的细胞免疫功能。     

T细胞诱导的结肠炎中多形螺旋线虫感染对CD4^＋T细胞增殖的影响

目的 研究肠道多形螺旋线虫对T细胞诱导的小鼠结肠炎CD4^±T细胞增殖情况的影响。方法 用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）染色的卵清蛋白（OVA）特异性CD4＾±辅助性T细胞转入重度联合免疫缺陷（SCID）小鼠中，制作小鼠实验性肠炎模型。将实验模型小鼠分为多形螺旋线虫感染组和无感染组（每组n=5），观察多形螺旋线虫感染7d后小鼠结肠炎性反应的组织学变化；以流式细胞仪检测感染3、5、7d小鼠肠系膜淋巴结中CD4＾＋T细胞CFSE的阴性率，判定肠系膜淋巴结中CD4＾＋T细胞的增殖情况。结果 与无感染组比较，感染组小鼠第7天时有螺旋线虫感染结肠炎性反应明显加重，黏膜固有层细胞浸润增多，结肠上皮破损增加，病理评分明显升高（5．20±0．84比2．00±0．71，P〈0．05）。感染3、5、7d后，感染组小鼠肠系膜淋巴结中CD4±T细胞增殖均比无感染组明显增强，CFSE的阴性率升高[3d：（7．03±1．61）％比（2．32±0．62）％，5d：（55．05±13．41）％比（29．10±2．23）％，7d：（76．97±1．89）％比（43．87±5．56）％，均P〈0．05]。结论 多形螺旋线虫感染在CD4＾＋T细胞诱导的小鼠实验性结肠炎的早期阶段促进了炎性反应的加重，可能与促进CD4＾＋T细胞的增殖有关。     

鼻咽癌组织中PD-1＋淋巴细胞数升高的意义

目的探讨鼻咽癌组织局部CD8＋和PD-1＋淋巴细胞在鼻咽癌发生发展中的作用。方法采用免疫组化方法检测64例鼻咽癌肿瘤组织和20例慢性鼻咽炎组织的CD8＋和PD-1＋淋巴细胞的分布情况。结果鼻咽癌肿瘤组织中CD8＋淋巴细胞百分比为（10.68±6.81）%,与慢性鼻咽炎组织的（28.5±9.33）%比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;鼻咽癌组织中PD-1＋淋巴细胞为（10.4±5.95）%,与鼻咽炎组织的（6.8±3.21）%比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。鼻咽癌组织中PD-1＋/CD8＋淋巴细胞比率为（1.24±0.91）,与鼻咽炎组织（0.28±0.2）比较,差异有统计学意义（P〈0.001）,但PD-1＋/CD8＋淋巴细胞比率升高与鼻咽癌临床分期无关。结论鼻咽癌组织中CD8＋淋巴细胞减少,PD-1＋淋巴细胞增加,提示PD-1可能参与鼻咽癌免疫逃逸,与鼻咽癌的发生有关。     

自身免疫性脑病患儿外周血中γδT细胞检测的临床意义

目的 探讨检测自身免疫性脑病（AE）患儿外周血中γδT细胞的临床意义.方法 应用流式细胞仪对36例AE患儿和23例健康儿童外周血中γδT细胞、CD3＋淋巴细胞以及CD4＋/CD8＋比值进行检测;同时分析AE患儿治疗前后的上述细胞变化情况.结果 AE患儿外周血γδT细胞和CD3＋淋巴细胞分别为17.54％±2.65％、66.57％±5.01％,显著高于健康对照组（6.47％±2.39％,P＜0.01,61.49％±3.87％,P＜0.05）;而CD4＋/CD8＋比值为1.05±0.27,显著低于健康对照组（1.43±0.28,P＜0.05）.AE患儿治疗后γδT细胞为9.12％±3.24％,较治疗前17.54％±2.65％明显降低,差异有统计学意义（t=10.467,P＜0.01）.结论 AE患儿外周血γδT细胞比例变化与病情有关,γδT细胞检测可作为AE治疗的一项监测指标.     

小柴胡汤对免疫抑制小鼠淋巴细胞共刺激分子的免疫调节作用

目的探讨小柴胡汤对免疫抑制小鼠外周血淋巴细胞共刺激分子的调节作用。方法每日给予正常小鼠及肌肉注射环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠小柴胡汤25g/kg体重,连续10d。并设免疫抑制模型及正常对照小鼠。于实验第11天,收集所有小鼠血样,分离淋巴细胞,采用流式细胞术检测实验小鼠外周血淋巴细胞CD28、CTLA-4、CD80和CD86的表达,并与对照组比较。结果与正常对照小鼠比较,免疫抑制小鼠淋巴细胞亚群发生明显变化、CD4/CD8比例明显倒置（P〈0.01）,淋巴细胞CD28、CTLA-4、CD80和CD86的表达明显降低（P〈0.01）。与正常对照小鼠相比较,给予小柴胡汤的正常小鼠的淋巴细胞亚群及淋巴细胞共刺激分子的表达差异无统计学意义（P〉0.05）。与免疫抑制小鼠相比较,给予小柴胡汤的免疫抑制小鼠CD3＋细胞增加（P〈0.01）,CD3＋CD4＋细胞增加（P〈0.01）,CD3＋CD8＋细胞降低（P〈0.01）,CD4/CD8比例升高（P〈0.01）,CD28、CD86和CD80表达增加（P〈0.01）,而CTLA-4的表达无明显差异（P〉0.05）。结论小柴胡汤可能通过调节淋巴细胞表面协同刺激分子的表达进而调节免疫抑制小鼠的免疫功能。     

nTreg与基因1型CHC患者抗病毒疗效的关系

目的研究基因1型慢性丙型肝炎（CHC）患者治疗过程中外周血自然调节性T细胞（nTreg）的动态变化及其与抗病毒疗效的关系。方法32例初治的CHC患者,均为基因1型,治疗方案为干扰素联合利巴韦林治疗48周。分别在治疗前、治疗过程中2、4、8、12、24、48周以及治疗结束后12或24周采集外周血标本。用流式的方法检测外周血单个核细胞（PBMC）中nTreg的比率。COBASAmpliprep／COBAS TaqmanHCV试剂盒检测HCV—RNA定量。结果24例患者治疗12周时HCV—RNA转阴,并且随访至治疗结束后24周仍阴性,达到持续病毒学应答（SVR）;8例患者治疗12周时病毒量未转阴,无应答（NVR）,24周时终止治疗。应答组和无应答组治疗前外周血中nTreg的比率差异无统计学意义（P〉0．05）。应答组治疗过程中2、4、12、24、48周及治疗结束后各个时间点PBMC中nTreg水平分别为（0．91±0．22）％、（1．31±0．29）％、（1．78±0．43）％、（1．92±0．44）％、（1．90±0．37）％、（1．14±0．35）％;在治疗2周（P〈0．001）及治疗结束后（P〈0．001）下降明显。无应答组治疗过程中2、4、12、24周及治疗结束后各时间点PBMC中nTreg水平分别为（1．21±0．15）％、（1．24±0．18）％、（1．42±0．11）％、（1．45±0．11）％、（1．14±0．10）％;Treg水平在治疗4周时缓慢上升（P=O．005）,在治疗结束后显著下降,与治疗24周比较差异有统计学意义（P〈0．001）。结论CHC患者外周血nTreg水平与干扰素／N巴韦林抗病毒治疗的疗效密切相关,抗病毒治疗2周时nTreg水平的下降可以预测其疗效。提示nTreg可能在机体清除病毒的早期过程中起着重要作用。     

花姜酮对重症急性胰腺炎大鼠肝损伤的保护作用

目的:探讨花姜酮对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝损伤的保护作用。方法:70只Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组(SO组,n=10);重症急性胰腺炎组(SAP组,n=40);花姜酮(ZER)预处理组(ZER组,n=10),ZER药物对照组(ZER-CON,n=10)。其中SAP组又分为造模1h、3h、6h、12h四个时间亚组(n均=10)。SAP组及ZER组大鼠采用胆胰管逆行注射5%硫磺胆酸钠(STC)溶液(1ml/100Kg)造模;SO组及ZER-CON组则向胆胰管注入等量生理盐水。ZER组及ZER-CON组于造模前30min由股静脉注射10mg/Kg的ZER溶液。比较各组大鼠于造模12h死亡情况、腹水量、血清淀粉酶(AMY)、磷脂酶(PLA2)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平以及胰腺肝脏组织病理学评分(分级)。结果:ZER-CON组大鼠死亡率、腹水量、AMY、PLA2、ALT、AST水平以及胰腺和肝脏组织病理学评分(分级)与SO组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。SAP组上述指标明显高于SO组,差异有统计学意义(均P0.05)。ZER组上述指标与SAP组相比明显降低(均P0.05),但均高于SO组和ZER CON组(P0.05)。结论:ZER对SAP大鼠肝脏损伤具有一定的保护作用。