抗心律失常药E-4031通过蛋白激酶C途径影响豚鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换

应用全细胞电压钳技术的斜坡脉冲程序,测定离体豚鼠心肌细胞准稳态电流-电压关系曲线,研究E-4031增强Na⁺/Ca²⁺交换电流的机理. 结果表明蛋白激酶C激动剂十四酰佛波乙酯（TPA）5,10和15 nmol·L^-1使膜电位+50 mV时的Ni²⁺敏感电流分别增加（116±43）%,（225±63）% 和（289±69）%. 使膜电位-100 mV时的Ni²⁺敏感电流分别增加（29±17）%,（104±21）%和（140±29）%. 蛋白激酶C拮抗剂他莫昔芬20 μmol·L^-1可完全阻断E- 4031和TPA对该电流的刺激作用. 结果提示,E-4031通过蛋白激酶C途径激动Na⁺/Ca²⁺交换.     

氯丙烯引起的神经电生理及细胞内Na+, K+, Ca2+等离子含量的改变

为探讨氯丙烯的周围神经损伤机制, 用荧光分子探针, 电子探针X线微区分析和电生理学方法研究了氯丙烯引起的鸡胚神经细胞和大鼠坐骨神经纤维轴浆内的Na⁺, Ca²⁺离子和Na, K, Ca, Mg, Cl, P元素含量和神经细胞静息膜电位(RMP), 大鼠坐骨神经复合动作电位(CAP)及小鼠肋间神经束膜内动作电位(APIPS)的改变. 结果显示, 随着氯丙烯剂量的增加, 鸡胚脑神经细胞[Ca²⁺]_i明显增加, [Na⁺]_i在高剂量时亦增加; 大鼠坐骨神经轴浆内Ca增加, K减少, Na增加不如Ca明显; RMP减小; 大鼠坐骨神经CAP的峰值明显下降, 时程稍延长; 小鼠肋间神经APIPS的K⁺电压波形消失. 表明氯丙烯引起的RMP, CAP及APIPS的改变, 均与细胞和轴浆内的Na⁺, Ca²⁺离子和Na, K, Ca, Mg, Cl, P元素的改变有关. 提示中毒患者出现运动和感觉障碍可能与轴浆内外Na⁺, K⁺浓度差减小造成神经兴奋与传导降低和Ca²⁺进入轴浆过多导致神经纤维变性有关.     

丙泊酚对大鼠脑突触体Na+, K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性的影响

Effect of propofol on Na⁺, K⁺-ATPase and Ca²⁺-ATPase activities of cerebral synaptosomes was investigated in rats. It was found that propfol 50 mg·kg^-1 ip significantly inhibited Na⁺, K⁺-ATPase activity of hippocampal and brain stem′s synaptosomes (P<0.01). Propofol 100 mg·kg^-1 ip significantly reduced Na⁺, K⁺-ATPase and Ca²⁺-ATPase activity of cerebrocortical, brain stem′s and hippocampal synaptosomes (P<0.01). It is suggested that the central inhibitory effect of propofol may be related to the inhibition of Na⁺, K⁺-ATPase and Ca²⁺-ATPase activity of cerebral synaptosomes.     

四肽FMRFa对大鼠心室肌Na+/Ca2+交换的抑制

目的　研究四肽FMRFa对大鼠单个心室肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换的作用。方法　用膜片钳全细胞记录法测定成年大鼠心室肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换电流(I_Na⁺/Ca²⁺)和其他离子通道电流。结果　FMRFa对大鼠心室肌细胞I_Na⁺/Ca²⁺呈浓度依赖性抑制,100μmol·L^-1浓度时抑制内向和外向I_Na⁺/Ca²⁺密度分别达60.1%和56.5%,对内向电流及外向电流的IC₅₀分别为20μmol·L^-1和34μmol·L^-1。FMRFa5μmol·L^-1抑制I_Na⁺/Ca²⁺内向和外向电流密度分别为38.7%和34.9%,但FMRFa5μmol·L^-1及20μmol·L^-1对L型钙电流、钠电流、瞬时外向电流和内向整流钾电流均无显著抑制作用。结论　FMRFa对大鼠心室肌细胞是一个特异性Na⁺/Ca²⁺交换抑制剂。     

三氟拉嗪对大鼠脑突触体内Ca2+水平和Ca2+, Mg2+-ATP酶活性的作用

用Quin 2法测得大鼠脑突触体内静息游离Ca²⁺浓度([Ca²⁺]_i)为85±13 μmol·g^-1 protein. 三氟拉嗪(TFP) 1, 5和10 μmol·L^-1对静息突触体[Ca²⁺]_i无明显影响, 但能以剂量依赖方式增高65 mmol·L^-1 KCl所致突触体[Ca²⁺]_i升高, 从192±58 μmol·g^-1 protein分别达到233±63, 431±99和661±173 μmol·g^-1 protein. TFP 5,10和50 μmol·L^-1分别使突触体Ca²⁺, Mg²⁺-ATP酶活性降低31％, 41％和45％; 使Mg²⁺-ATP#FK酶活性降低30％, 36％和39％, 提示TFP可能是通过抑制钙调素, 进而抑制Ca²⁺, Mg²⁺-ATP酶活性, 使突触体[Ca²⁺]_i升高, 促进神经末梢释放递质.     

Ⅲ类抗心律失常药E-4031增强大鼠心室肌细胞Na~ /Ca~(2 )交换电流(英文)

目的:研究E-4031对Na~ /Ca~(2 )交换电流的影响及其信号转导机制。方法:应用全细胞电压箝技术的斜坡脉冲程序,测定离体大鼠心肌细胞准稳态电流-电压关系曲线。结果:E-4031 5,10和20umol·L~(-1)分别使膜电位 50mV时的Ni~(2 )敏感电流从对照组(0.48±0.12)增加到(0.78±0.20),(96±0.16)和(1.15±0.13)pA/pF,蛋白激酶C激动剂-TPA 50nmol·L~(-1)使该电流从(0.60±0.16)增加到(1.33±0.25)pA/pF。蛋白激酶C拮抗剂Tamoxifen可完全阻断E-4031和TPA对该电流的刺激作用。结论:E-4031通过蛋白激酶C途径激动Na~ /Ca~(2 )交换系统。     

IQ23 对豚鼠心室肌细胞钙通道和CHO H10细胞异源表达的钙通道α1亚单位的作用

应用膜片钳全细胞记录技术, 观察了具有正性肌力作用的苄基异喹啉衍化物IQ₂₃,即1-〔对甲氧苄基-2-（N-苄基, N-甲基)〕-6,7-二甲氧基异喹啉盐酸盐,对豚鼠心室肌分离细胞的Ca²⁺通道, 以及CHO H₁₀细胞表达的Ca²⁺通道α₁亚单位的作用. 结果显示, 当豚鼠心室肌细胞从保持电位(V_h)-50 mV除极至测试电位(V_t)0 mV时, IQ₂₃ 3, 10 μmol·L^-1分别使Ca²⁺电流(I_Ca)由对照的(0.47±0.23) nA增至(0.57±0.23)和(0.79±0.31) nA (P<0.05). 在CHO H₁₀细胞V_t 为20 mV时, IQ₂₃ 10 μmol·L^-1电压依赖性的增强Ba²⁺电流(I_Ba), I_Ba从(0.45±0.10) nA增至(0.67±0.20) nA (V_h=-80 mV), 或从(0.43±0.08) nA增至(0.60±0.14) nA (V_h=-40 mV). IQ₂₃ 10和30 μmol·L^-1还分别使电流-电压曲线的峰值和失活曲线的半失活电位向负膜电位方向移动. 实验结果表明, IQ₂₃通过作用于通道的α₁亚单位, 对心肌L型Ca²⁺通道产生电压依赖性激动作用, 此作用为其正性肌力效应提供了部分解释.     

羟苯氨酮对豚鼠心肌细胞膜Na+和Ca2+ 离子通道的影响羟苯氨酮对豚鼠心肌细胞膜Na+和Ca2+ 离子通道的影响

目的探讨羟苯氨酮(oxyphenamone)的正性肌力作用机制。方法用膜片钳全细胞记录技术测定心肌细胞膜Na⁺ 电流与L型Ca²⁺电流。结果羟苯氨酮剂量依赖性地明显抑制豚鼠心肌细胞膜Na⁺ 电流，促进Na⁺ 通道失活，并延长其恢复时间；它对Ca²⁺电流的影响呈双向性，2～10 μmol·L^-1 使电流增加，促进钙通道的激活过程；20与50 μmol·L^-1时则使Ca²⁺电流明显抑制。结论羟苯氨酮的正性肌力作用不是通过激活钠通道，也不完全依赖于激活L型钙通道，它对钠通道的抑制和在高浓度时对L型钙通道的抑制提示该药可能具有抗心律失常作用。     

间硝苯地平对老龄肾性高血压大鼠心肌和脑微粒体Na+,K+-ATP酶,Ca2+-ATP酶和Mg2+-ATP酶活性的影响

间硝苯地平(m-Nif,ig20mg·kg^-1·d^-1持续给药9周)可显著降低老龄肾性高血压大鼠(RVHR)血压和左室重量(P<0.01),增高心、脑微粒体Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性(P<0.01),降低Mg²⁺-ATP酶活性,体外量效关系研究发现,m-Nif在较高剂量(10～1000μmol·L^-1)时可增高RVHR心脑微粒体Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性,且随剂量增加而增高。上述结果表明,m-Nif可改善老龄RVHR心脑微粒体Na⁺,K⁺泵和Ca²⁺泵功能。     

一种新的钠-钙交换电流记录方法及阿米洛利的作用

目的：研究胞外不同Ca²⁺浓度对豚鼠心室肌细胞钠-钙交换电流(Na⁺-Ca²⁺ exchange current, INa-Ca)的影响和阿米洛利(amiloride)对该电流的作用。方法：建立缺血再灌时胞内Na⁺超载的细胞模型,用膜片钳全细胞技术,记录I_Na-Ca的电流-电压关系曲线。结果：阿米洛利10^-5,3×10^-5和10^-4 mol.L^-1,在+50 mV时,对I_Na-Ca的抑制率分别是15.4%,22.6%和40.9%;在-80 mV时抑制率分别是5.6%,14.6%和23.2%。结论：胞内Na⁺超载确可引起Na⁺-Ca²⁺交换系统激活;阿米洛利对豚鼠心室肌细胞I_Na-Ca有抑制作用,且对I_Na-Ca外向成分的抑制作用大于对内向成分的抑制作用。     

KB-R7943对豚鼠心室肌细胞Na+-Ca2+交换电流的作用

目的　观察KB-R7943对豚鼠心室肌细胞Na⁺-Ca²⁺交换电流(I_Na-Ca)的内向电流成分和外向电流成分的影响。方法　采用缺血再灌时胞内Na⁺超载的细胞模型,在同时记录内向、外向电流的双向离子条件下,用膜片钳全细胞技术,记录I_Na-Ca的电流-电压关系曲线。结果　10^-6和10^-5mol·L^-1KB-R7943,在+50mV时,对I_Na-Ca的抑制率分别是29.4%和61.7%;在-80mV时抑制率分别是22.1%和56.9%。结论　KB-R7943对豚鼠心室肌细胞I_Na-Ca有抑制作用,但对外向成分和内向成分的抑制不具选择性。     

氯丙烯对神经细胞内 Ca2+, 游离钙调蛋白, 环腺苷酸含量和钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ活性的影响

用培养的鸡胚脑神经细胞研究了1.02和2.04 mmol·L^-1氯丙烯作用24 h后细胞内Ca²⁺, 游离钙调蛋白(CaM)和环腺苷酸(cAMP)含量及钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca²⁺/CaM-PK Ⅱ)活性的改变. 结果显示, 随着氯丙烯浓度的增加, 细胞内Ca²⁺分别增加了4.2和6.2倍, cAMP含量增加了22%和39%, Ca²⁺/CaM-PK Ⅱ活性增加了2.8和5.0倍(P<0.01); 而游离CaM含量则分别减少了55%和69%(P<0.01). 结果提示氯丙烯引起病理性神经轴浆内微管和神经微丝堆积与细胞内Ca²⁺增加有关. 这可能由于细胞内Ca²⁺增加, 激活CaM, 继而激活Ca²⁺/CaM-PK Ⅱ, 催化微管相关蛋白2和tau-蛋白磷酸化, 抑制微管组装, 使解聚的微管堆积在轴浆内.     

抗心律失常药E-4031通过蛋白激酶C途径影响豚 鼠心室肌细胞Na+/Ca2+交换 (英文)

应用全细胞电压钳技术的斜坡脉冲程序 ,测定离体豚鼠心肌细胞准稳态电流 -电压关系曲线 ,研究E- 40 31增强 Na /Ca2 交换电流的机理 .结果表明蛋白激酶 C激动剂十四酰佛波乙酯 ( TPA) 5,1 0和1 5nmol· L-1使膜电位 50 m V时的 Ni2 敏感电流分别增加 ( 1 1 6± 43) % ,( 2 2 5± 63) %和 ( 2 89±69) % .使膜电位 - 1 0 0 m V时的 Ni2 敏感电流分别增加 ( 2 9± 1 7) % ,( 1 0 4± 2 1 ) %和 ( 1 40± 2 9) % .蛋白激酶 C拮抗剂他莫昔芬 2 0 μmol· L-1可完全阻断 E- 40 31和 TPA对该电流的刺激作用 .结果提示 ,E- 40 31通过蛋白激酶 C途径激动 Na /Ca2 交换 .     

比较不同类型抗抑郁剂对新生大鼠神经细胞内游离Ca2+浓度的影响

The ability of antidepressant drugs to increase the concentration of intracellular Ca²⁺(［Ca²⁺］_i) was examined in dispersed brain cells from neonatal rat cortex and hippocampus using the Ca²⁺ sensitive fluorescent indicator Fura-2. Desipramine (DIM 0.1-1.0 mmol·L^-1) increased ［Ca²⁺］_i in a concentration-dependent manner. DIM (1.0 mmol·L^-1) and fluoxetine (1.0 mmol·L^-1) induced ［Ca²⁺］
_i increases were not altered by the absence of external Ca²⁺ or by the presence of nimodipine (10 μmol·L^-1). Pretreatment with neomycin (10 mmol·L^-1), an inhibitor of inositol 1,4,5-trisphosphate production, significantly inhibited DIM-induced ［Ca²⁺］_i increase but could not effectively inhibit fluoxetine-induced ［Ca²⁺］_i increase. Pretreatment with dantrolene (0.05 mmol·L^-1), an exhaustor of Ca²⁺ store, inhibited fluoxetineinduced ［Ca²⁺］_i increase, suggesting that DIM and fluoxetine provoke intracellular Ca²⁺ mobilization. In addition, fluoxetine-induced ［Ca²⁺］_i increase was about 1.5 times higher than that induced by DIM at the same concentration (0.4 mmol·L^-1). Moclobemide, an inhibitor of monoamine oxidase A, did not affect ［Ca²⁺］_i. It is concluded that DIM and fluoxetine may be Ca²⁺ mobilizing agents.     

异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚时心肌细胞核Ca2+转运

目的 观察异丙肾上腺素(Iso)致大鼠心肌肥厚模型心肌细胞核⁴⁵Ca²⁺摄取、钙释放通道肌醇1,4,5-三磷酸(IP₃)受体(IP₃R)和ryanodine受体(RyR)的动力学变化，以探讨细胞核Ca²⁺的转运是否参与心肌肥厚发生。方法 Iso(sc 20、10和5 mg·kg^-1剂量递减3 d，3 mg·kg^-1维持7 d)制备大鼠心肌肥厚模型，用差速离心和蔗糖密度梯度离心提纯心肌细胞核，用⁴⁵Ca²⁺同位素法测定细胞核钙摄取，用［³H］标记配体分析心肌细胞核IP₃R和RyR的动力学特点。结果 与对照组相比，Iso可导致大鼠心肌显著肥大，伴有显著心肌纤维化；心肌细胞核膜IP₃R与其配体的最大结合容量(B_max)减少23.4%(P<0.05)，解离常数(K_d)无明显变化(P>0.05)；细胞核RyR的B_max增加59.9%(P<0.01)，K_d无明显变化(P>0.05)；⁴⁵Ca²⁺摄取显著低于对照组(P<0.01)，最大摄取与对照组相比降低62%(P<0.01)，达半数最大摄取时［Ca²⁺］无显著变化。结论 Iso导致大鼠心肌肥厚纤维化发生过程中，心肌细胞核⁴⁵Ca²⁺摄取能力降低，核上RyR数目上调，而IP₃R数目下调，受体亲和力无变化，提示心肌细胞核钙调节系统参与心肌肥厚的发生过程。     

四丙酰关附醇胺对大鼠离体心脏再灌性心律失常及心肌离子含量的影响

在大鼠离体Langendorff灌流心脏观察四丙酰关附醇胺(TPGFA)对再灌性心律失常及心肌Na⁺, K⁺, Ca²⁺水平的影响. TPGFA 6-12 mg·L^-1显著降低30 min缺血+30 min复灌和吡那地尔(1.25 μmol·L^-1)+12 min缺氧+40 min再给氧两种模型的室性心动过速和心室纤颤发生率；TPGFA 3-12 mg·L^-1可显著减慢心率， 延长心电图的QT_c，减少K⁺从心肌细胞内丢失；12 mg·L^-1时还减少细胞内Ca²⁺堆积. 结果表明TPGFA可保护大鼠离体心脏的再灌性心律失常，其作用机理可能与抑制外向K⁺电流有关.     

3, 5, 4'-三甲基白藜芦醇对豚鼠心室肌细胞钠电流和钾电流的影响

目的 研究3, 5, 4'-三甲基白藜芦醇(trans-resveratrol derivative 3,5,4'-trimethoxystilbene,TMS)对豚鼠心室肌细胞钠电流(I_Na)和钾电流(I_K1)的直接作用,探讨其心肌保护作用。方法 用全细胞膜片钳技术记录TMS对单个心室肌细胞I_Na和I_K1的作用。结果 TMS(10 μmol·L^-1)可快速抑制豚鼠心室肌细胞I_Na,用药后3 min左右即开始起效,10 min时抑制率为(36.8±5.6)％(P<0.005),洗脱后可完全恢复;1,3 μmol·L^-1 TMS未影响I_Na大小。TMS不改变I_Na的最大激活电压,也不影响I_K1的大小。10 μmol·L^-1使半数最大失活电压(V_1/2)由(-87.0±3.3)mV变化到(-96.7±3.5)mV (P<0.001),使失活曲线斜率(S)由(4.9±0.3)mV 变化到(5.4±0.3)mV (P<0.01);使半数最大激活电压(V_1/2) (-38.9±1.4)mV 变化到(-47.3±1.3)mV (P<0.001),未改变激活S。结论 TMS可直接作用于豚鼠心室肌细胞,快速抑制I_Na,且此作用快速、可逆。     

甲基莲心碱对豚鼠心肌及猪冠状动脉平滑肌细胞钾通道的作用

用膜片钳单通道技术,观察在细胞膜内侧加入甲基莲心碱(Nef)后K⁺通道特性的改变, 以研究Nef对豚鼠心室肌细胞及猪冠状动脉平滑肌细胞K⁺通道的作用. 结果：Nef可使心肌细胞及冠脉平滑肌细胞上K⁺通道开放概率（P_O）降低. 10, 20 μmol·L^-1 Nef分别使心肌细胞K⁺通道降低（50±32）%和（96±5）%, 30, 50 μmol·L^-1的Nef分别使猪冠脉平滑肌细胞上K⁺通道P_O降低(51±21)%和(71±14)%. 结果表明,Nef可从通道内口阻断心肌及平滑肌细胞上K⁺通道,但对前者的作用更强.     

溶血性磷脂酰胆碱诱导血小板活化及蛋白质酪氨酸激酶和蛋白激酶C的作用

应用双道血小板聚集仪和荧光分光光度计分别测定溶血性磷脂酰胆碱(LysoPC)诱导的兔洗涤血小板聚集,细胞内钙离子浓度(［Ca²⁺］_i),细胞内pH值(pH_i)的变化及5-羟色胺(5-HT)的释放,并观察蛋白质酪氨酸激酶(PTK)抑制剂金雀异黄素(Gen)和蛋白激酶C(PKC)抑制剂星形孢菌素(Sta)对其作用的影响. 结果表明：LysoPC(30-300 μmol·L^-1)诱导血小板聚集,5- HT释放和［Ca²⁺］_i 升高,均呈现良好的浓度依赖性,100 μmol·L^-1以上时伴有pH_i的增加;Gen使LysoPC 诱导的聚集浓度效应曲线右移,半效聚集浓度值从(100±23) μmol·L^-1增加到(200±42) μmol·L^-1,明显抑制 ［Ca²⁺］_i 升高和胞浆碱化,对5-HT释放无明显影响;Sta对较低浓度LysoPC 诱导的血小板聚集,5-HT释放, ［Ca²⁺］_i 和pH_i的增加均有明显抑制作用,但对高浓度LysoPC 诱导的血小板活化无明显影响. 提示：LysoPC通过内Ca²⁺调节和Na^＋/H^＋交换介导血小板聚集和致密颗粒释放;PTK的激活参与了LysoPC诱导的血小板聚集,内Ca²⁺调节和Na^＋/H^＋交换,而在5-HT释放的机理中意义不大;PKC的激活在较低浓度LysoPC 诱导的血小板活化中起重要作用,高浓度LysoPC通过不依赖于PKC的途径激活血小板.     

赛庚啶对离体犬心肌肌质网Ca2+,Mg2+—ATP酶活性和45Ca2+摄取功能的影响

当赛庚啶浓度在8×10^-6mol/L～2×10^-4mol/L之间时,该药对正常犬心肌肌质网Ca²⁺,Mg²⁺—ATP酶活性几乎没有影响,仅在10^-3mol/L时对该酶活性才有一定的抑制作用(抑制率为39.85%,P<0.01)。正常犬心肌肌质网的⁴⁵Ca²⁺摄取过程有明显的时间依赖性,至第30 min,其⁴⁵Ca²⁺摄取量可达312.79±22.25 nmol/mg protein.赛庚啶对心肌肌质网的~(45)Ca²⁺摄取有一定的抑制作用,其IC₅₀为1.94×10^-4mol/L。