牛磺胆酸钠诱导猪急性重症胰腺炎后胰源性激素和皮质醇的变化

目的:观察牛磺胆酸钠诱导猪急性重症胰腺炎(ASP)对血浆胰源性激素和皮质醇水平的影响.方法:选健康白种猪11头,体重16～22kg,雌雄不限,随机分为假手术对照组(Sham组,n=5)和ASP组(n=6).在无菌条件下,向胰总管内注入1 mL/kg 5%牛磺胆酸钠(内含8 000～10 000 BAEE单位胰蛋白酶/mL,pH 7.6)诱导ASP.分别于ASP诱导前30 min,ASP诱导后3、6、12、24、48、72 h取血,以测定血浆淀粉酶、胰岛素、胰高血糖素和皮质醇水平.结果:牛磺胆酸钠诱导猪ASP后3 h,血浆淀粉酶就出现非常明显的上升,至ASP诱导后24 h达峰值,ASP后48、72 h仍维持在很高水平,ASP诱导后各时点与Sham组比较差异均有显著性(P均＜0.01).血浆胰岛素表现为先升高后下降,ASP后6 h即达峰值,但随后急剧下降,趋向于零释放.血浆胰高血糖素呈先下降后升高的变化.血浆皮质醇在ASP后呈双峰样升高,ASP后3 h即达峰值,随后逐渐下降,至AsP后24 h降至(142±21)pmol/L,ASP后48 h出现第二高峰,ASP后72 h趋于恢复,但仍明显高于ASP诱导前30min水平(P＜0.05).血浆胰岛素、胰高血糖素、皮质醇与血浆淀粉酶呈同步改变.但可间接提示牛磺胆酸钠和胰蛋白酶诱导猪ASP后胰腺损害的发生发展过程及其严重程度.结论:经胰总管逆行注入牛磺胆酸钠+胰蛋白酶诱导的猪ASP模型中,除了血浆淀粉酶持续升高外,胰源性激素和皮质醇也出现明显的异常.胰源性激素和皮质醇的变化可间接反映牛磺胆酸钠和胰蛋白酶诱导猪ASP后胰腺损害的发生发展过程及其严重程度.     

猪急性胰腺炎模型的建立及CT特点

目的探讨建立家猪急性胰腺炎模型的方法,观察其CT表现.方法 10只家猪采用牛磺胆酸钠和胰蛋白酶经主胰管注射法,5只家猪采用牛磺胆酸钠及无水酒精被膜下直接注射法分别制作急性胰腺炎模型,行CT平扫及薄层动态增强扫描,24h后处死动物观察胰腺病理组织学变化.结果牛磺胆酸钠和胰蛋白酶经主胰管注射后, CT显示胰腺体积明显肿胀,胰腺实质内密度不均,胰周大片液性阴影,肾前筋膜增厚,增强扫描胰腺不均匀强化,可见多个局灶性低密度无强化区;胰腺被膜下及实质内直接注射药物仅造成一过性胰腺炎症.结论采用牛磺胆酸钠和胰蛋白酶经主胰管注射法可诱导出理想的猪急性胰腺炎.     

MMP-9及TIMP-1在重症急性胰腺炎大鼠肺组织中的表达及生长抑素的影响

目的：观察基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其组织抑制剂TIMP-1在重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肺组织中的动态表达，并探讨其在继发肺损伤中的作用，观察生长抑素对SAP肺损伤的治疗作用。方法：采用胰被膜下多点均匀注射5％牛磺胆酸钠建立大鼠SAP模型。观察炎性介质（淀粉酶、TNF-a、IL-6）、肺体指数、肺组织髓过氧化物酶水平的变化，胰腺、肺脏病理变化及MMP-9、TIMP-1在肺组织中的表达。结果：SAP可以诱导炎性介质释放增多，同时MMP-9及TIMP-1表达上调，MMP-9／TIMP-1比例失衡。并与肺损伤的严重程度呈正相关。生长抑素治疗后MMP-9表达下调，MM-9／TIMP-1比例部分恢复．肺损伤程度减轻。结论：细胞因子介导的肺组织MMP-9／TIMP-1表达比例失衡，可能是SAP继发肺损伤机制的重要环节。     

血浆可溶性P选择素在急性出血坏死型胰腺炎并发肺损伤中？…

目的：研究血浆可溶性Ｐ选择素（ＰＰＳ）在急性出血坏死型胰腺炎并发肺损伤大鼠模型中对肺损伤的诊断价值。方法：将５％牛磺酸胆酸钠注入ＳＤ大鼠胆胰管内，制成急性出血坏死型胰腺炎并发肺损伤的动物模型。用放射免疫方法测定ＰＰＳ在模型制成后的１、３和６小时的变化。结果：经病理证实在注入牛磺酸胆酸钠后１小时，成功建立肺损伤模型；且ＰＰＳ在制成大鼠肺损伤模型后的含量明显升高，并在制成肺损伤模型后的３小时达到高峰（     

血管内皮生长因子在大鼠胰腺炎相关肺损伤中的作用

目的:观察胰腺炎大鼠血清中血管内皮生长因子(VEGF)的变化与肺组织湿/干质量比(W/D)及细胞凋亡的关系,探讨VEGF在胰腺炎相关肺损伤中的作用。方法:健康雄性SD大鼠40只,按随机数字法分为A、B、C、D、E共5组。A、B、C组以5%牛磺胆酸钠(1mL/kg)逆行胆胰管注射制备大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)模型,D组以0.5%牛磺胆酸钠(1mL/kg)注射制备大鼠急性水肿性胰腺炎(AEP)模型,E组以生理盐水注射作为对照。A、B、C组分别于建模后3、6、12h处死大鼠,D、E组于建模后12h处死大鼠,取大鼠肺组织进行W/D测定,采用ELISA方法测定大鼠血清中VEGF浓度,以末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)原位检测大鼠肺组织细胞凋亡情况。结果:ANP模型组血清VEGF水平较AEP组及生理盐水对照组显著升高(P<0.05)。ANP模型组血清VEGF值与肺组织W/D比值无关(r=0.082,P=0.702),与肺组织细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.785,P<0.05)。结论:急性胰腺炎时血清VEGF升高可能与肺组织水肿无关,其升高对胰腺炎相关肺损伤可能具有保护作用。     

血浆可溶性P选择素在急性出血坏死型胰腺炎并发肺损伤中的作用

目的：研究血浆可溶性P选择素（PPS）在急性出血坏死型胰腺炎并发肺损伤大鼠模型中对肺损伤的诊断价值。方法：将5％牛磺酸胆酸钠注入SD大鼠胆胰管内，制成急性出血坏死型胰腺炎并发肺损伤的动物模型。用放射免疫方法测定PPS在模型制成后的1、3和6小时的变化。结果：经病理证实在注入牛磺酸胆酸钠后1小时，成功建立肺损伤模型；且PPS在制成大鼠肺损伤模型后的含量明显升高，并在制成肺损伤模型后的3小时达到高峰（14．69士5．55）μg／L。结论：血浆可溶性P选择素的升高对急性肺损伤的诊断有确切意义。     

适合行营养支持的猪重症急性胰腺炎模型的制备

目的：建立稳定的猪重症急性胰腺炎（SAP）模型，且该模型适合于进行长期的营养支持研究。 方法：18头普通江淮猪在无菌条件下行胰管插管，空肠造瘘，膀胱造瘘。术后24小时向胰管内泵入无菌5％牛磺胆酸钠1ml/Kg和7500BAEE/ml胰蛋白酶诱导重症急性胰腺炎模型，所有动物均行营养支持，观察自然病程。 结果：成功建立猪重症急性胰腺炎模型，死亡率仅11%。猪主胰管较长适合于行主胰管插管。诱导胰腺炎后猪外周血淀粉酶明显增高，胰腺病理改变符合出血坏死性胰腺炎表现。 结论：本方法可成功建立猪重症急性胰腺炎模型，且适合行进一步的胰腺炎营养支持研究。     

丹参对实验性急性坏死性胰腺炎的疗效及对血液流变学的影响

采用5％牛磺胆酸钠行犬胰管逆行灌注制备急性坏死性胰腺炎(ANP)模型。观察到ANP早期即出现低切变率下全血表观粘度上升、红细胞聚集性增强及红细胞变形性下降等一系列血液流变学异常。丹参治疗可显著改善上述血液流变学异常,并提高ANP犬生存率和减轻胰腺坏死程度。     

白细胞介素10对实验性重症胰腺炎病理评分的影响研究

目的探讨白细胞介素 10 (IL 10 )对大鼠重症胰腺炎 (SAP)胰腺病理及血清淀粉酶的影响。方法 48只SD大鼠随机分为假手术组、SAP组和IL 10治疗组 ,用 5 %牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射 ,制成SAP模型。结果SAP组和IL 10治疗组均有不同程度的胰腺间质水肿、腺泡坏死、炎性细胞浸润和间质出血。制模后 6h和 12h的胰腺病理评分IL 10治疗组 (4 0 0± 0 3 3和 6 2 5± 0 2 5 )比SAP组 (6 13± 0 3 5和 9 5 0± 0 5 0 )明显降低 (P <0 0 1) ;IL 10治疗组的血清淀粉酶 (AMY)浓度在 6h时 ,比SAP组低(P <0 0 5 ) ,在 12h时 ,与SAP组无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论早期应用IL 10能降低大鼠重症急性胰腺炎血清AMY的浓度 ,明显减轻胰腺间质水肿、腺泡坏死、炎性细胞浸润和间质出血等病理改变     

1α-羟化酶在重症急性胰腺炎大鼠肾脏中的表达及其意义

目的 探讨1α-羟化酶在重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肾脏中的表达及意义.方法 48只Wistar大鼠随机分为假手术组（SO组）和SAP组,采用5％牛磺胆酸钠（STC）逆行胰胆管注射法建立SAP模型.分别于造模后1、3、6及12 h测定血清淀粉酶、肌酐及尿素氮水平,观察胰腺和肾脏组织病理变化,并以蛋白印迹技术（Western blot）对肾脏1α-羟化酶的表达水平和趋势进行分析.结果 SAP组大鼠术后血清淀粉酶、肌酐及尿素氮水平呈逐渐升高趋势,于1、3、6及12 h明显高于SO组（P＜0.05）.光镜下胰腺内出现腺体破坏、腺泡坏死、间质出血、炎性细胞浸润等病理损害,肾脏内肾小管上皮细胞出现脱落、坏死、炎性细胞浸润及管型等病理改变.SAP组大鼠肾脏组织中1α-羟化酶呈逐渐下降趋势,且自3h起明显低于SO组.结论 在SAP发病过程中,随着病情的进展,肾脏1α-羟化酶的表达水平呈逐渐下降趋势,可能参与了SAP并发低钙血症的发生.     

中性粒细胞凋亡对急性胰腺炎相关性肺损伤的影响

目的 研究中性粒细胞（PMN）在急性胰腺炎相关性肺损伤（PALl）中自发性凋亡的变化及与肺损伤的相关性，探讨PMN凋亡在这一过程中的病理意义。方法 采用5％牛磺胆酸钠（TAC）逆行胆胰管注射造成大鼠急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）模型。将36只实验动物随机分为AHNP组、假手术组及地塞米松（DXM）治疗组，3h后处死动物。从支气管肺泡灌洗液分离PMN，在体外分别孵育1、3、6h后，以Annexin V／PI双染色法测定其自发性凋亡率。取肺组织测定肺湿／干比值、髓过氧化物酶（MPO）含量及肺通透性指数，研究自发性凋亡率与肺损伤之间的相关性。结果 三组大鼠支气管肺泡灌洗液PMN的自发性凋亡率随体外孵育时间的延长而逐渐增加；在3、6h时，AHNP组均低于假手术组及DXM治疗组，而肺温／干比值、MPO含量及肺通透性指数则高于后两组。AHNP组3h凋亡率与肺温／干比值、MPO含量及肺通透性指数呈负相关。结论 肺PMN凋亡减低与PALI大鼠模型肺损伤成负相关，同时伴有活性增强，是PALI发生的重要原因；DXM可减轻PALI，与其促进PMN凋亡。     

氧化磷脂对内毒素信号通路的影响及对急性胰腺炎的治疗作用

目的探讨氧化磷脂(OXPAPC)对内毒素信号通路的影响及其对急性坏死型胰腺炎(ANP)的治疗作用。方法88只SD大鼠随机分为ANP模型组和OXPAPC治疗组。ANP模型制备采用胰管内逆行注射5%牛磺胆酸钠,OXPAPC治疗组在造模后0h、6h给予OXPAPC(25mg/kg)腹腔注射,并观察死亡率;其余于造模后12h、24h、48h及72h分批处死,检测血清淀粉酶和乳酸脱氢酶(LDH)活性;酶组织化学检测胰腺组织中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性改变;RTPCR检测胰腺组织炎性介质mRNA表达;western印迹检测细胞内信号转导蛋白激酶表达的变化;EMSA检测核因子蛋白活性。结果OXPAPC治疗组大鼠死亡率显著低于ANP组;OXPAPC治疗组血清淀粉酶活性及LDH活性于第12小时和第24小时显著降低;OXPAPC治疗组胰腺组织坏死和炎性细胞浸润程度显著减轻;OXPAPC治疗组胰腺组织MPO活性显著降低,炎性介质mRNA表达呈不同程度的下调,细胞内信号转导蛋白激酶表达下调,转录因子活性减弱。结论OXPAPC可阻断内毒素信号通路,从而显著降低实验性ANP的严重程度。     

急性坏死型胰腺炎时肠道细菌微生态改变与胰腺感染的实…

目的：探索肠道生物屏障改变在胰腺感染中的作用。方法：１５只杂种犬在定植耐氨苄青霉素大肠杆菌（携带质粒ＰＵＣ１８的ＪＭ１０９）后，随机分组。胰腺炎组（８只）胰管内注入５％牛磺胆酸钠和胰蛋白酶引发急性坏死型胰腺炎，对照组（７只）仅作单纯剖腹术，７天后活杀。定量分析肠道粘膜及内容物中的菌群数，且对血液和内脏进行细菌培养。结果：胰腺炎组肠粘膜及内容物中大肠杆菌计数均高于对照组（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）     

急性坏死性胰腺炎血液流变性改变的实验研究

胰胆管注射牛磺胆酸制备大鼠急性坏死性胰腺炎模型，检测血液流变学指标、红细胞脆性，胰腺病理学检查。结果表明：急性坏死性胰腺炎大鼠全血粘度、血浆粘度、红细胞压积均显著升高；纤维蛋白原降低。红细胞脆性增加。在急性坏死性胰胰炎时，上述血液流变性改变，可能是胰腺进行性坏死，病情恶化的主要原因之一。     

重症急性胰腺炎大鼠模型的改良

目的：探讨5％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射诱导重症急性胰腺炎大鼠模型的相关技术的改良。方法：将36只健康雄性SD大鼠随机分为模型组（n=18）和假手术组（n=18），应用经胆胰管近十二指肠开口端逆行刺入注射5％牛磺胆酸钠诱导重症急性胰腺炎动物模型；两组均在模型诱导后3、6、12h检测血淀粉酶、胰腺组织含水量，观察胰腺组织形态变化．光镜下进行胰腺病变程度Kusske评分。结果：模型组在模型诱导后3、6、12h血淀粉酶、胰腺组织含水量、胰腺大体病理的Hughes评分和胰腺组织学Kusske评分比假手术组明显升高（P〈0．05，P〈0．01）。结论：此大鼠模型是SAP大鼠模型诱导方法的有效改进，具有创伤小，操作简便，存活时间长、模型诱导成功率高的特点，是较为理想的SAP动物模型。     

白细胞介素10与白细胞介素18在重症急性胰腺炎中的表达

目的探讨抗炎性细胞因子白细胞介素(IL)10与促炎性细胞因子白细胞介素(IL)18在重症急性胰腺炎(SAP)中的表达。方法将42只大鼠按随机数字表法分为对照组和SAP组,采用3.5%牛磺胆酸钠(1mlkg)胰胆管内逆行注射诱导大鼠SAP模型。动态定量测定肺湿重系数、腹水量、血清淀粉酶、IL10、IL18的水平和以半定量RTPCR法检测肺组织中IL10mRNA与IL18mRNA的表达,并在光镜下观察胰腺及肺组织病理学改变。结果SAP组肺湿重系数、肺损伤评分、腹水量、血清淀粉酶、IL10、IL18水平和肺组织中IL10mRNA与IL18mRNA的表达与对照组相比均明显增高和增强(P<0.05),IL18与IL10水平呈负相关(r=-0.60,P<0.01)。SAP组大鼠血清中IL10与肺组织IL10mRNA水平均与肺损伤严重程度呈负相关(r=-0.66,P<0.01与r=-0.60,P<0.01),而IL18与肺组织IL18mRNA水平均与肺损伤严重程度呈正相关(r=0.74,P<0.01与r=0.79,P<0.01)。结论IL18在SAP并发肺损伤中有重要的作用,而IL10对肺损伤有保护作用。     

髓过氧化物酶在腹腔灌洗治疗重症急性胰腺炎急性肺损伤中的作用

目的探讨髓过氧化物酶(MPO)在腹腔灌洗治疗重症急性胰腺炎(SAP)急性肺损伤中的作用。方法成年Wistar大鼠60只,随机分为4组:①阴性对照组(C组):开腹后仅翻动胰腺;②SAP组(S组):采用3.5﹪牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制成SAP模型;③腹腔灌洗组(W组):复制SAP模型成功后于胰腺被膜外放置灌洗管,于下腹部留置引流管,0.9%生理盐水行腹腔持续灌洗;④腹腔注射组(E组):取S组大鼠胰腺匀浆及腹水,于正常大鼠腹腔内注射。于造模后3、6和12h分批处死大鼠,采下腔静脉血2ml行淀粉酶测定;取左肺下叶组织行MPO检测;对胰腺及肺组织进行病理评分。结果 S组及E组肺泡间质水肿、出血,并有中性粒细胞、巨噬细胞浸润。在不同时间点,S组、W组和E组血清胰淀粉酶、肺MPO均高于C组(P0.01),W组升高的程度小于S组。结论 SAP相关性腹水可以导致急性肺损伤,肺组织中MPO表达升高,提示其参与了急性肺损伤的发生过程,其原因可能与相关性腹水激活了粒细胞有关。早期腹腔灌洗将SAP相关性腹水进行稀释并引出体外,减少了腹膜巨噬细胞的活化,下调了MPO水平,减轻了肺损伤的程度,具有较好的治疗作用。     

急性坏死型胰腺炎时肠道细菌微生态改变与胰腺感染的实验研究

目的：探索肠道生物屏障改变在胰腺感染中的作用。方法：１５只杂种犬在定植耐氨苄青霉素大肠杆菌（携带质粒ＰＵＣ１８的ＪＭ１０９）后，随机分组。胰腺炎组（８只）胰管内注入５％牛磺胆酸钠和胰蛋白酶引发急性坏死型胰腺炎，对照组（７只）仅作单纯剖腹术，７天后活杀。定量分析肠道粘膜及内容物中的菌群数，且对血液和内脏进行细菌培养。结果：胰腺炎组肠粘膜及内容物中大肠杆菌计数均高于对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），而双歧杆菌及乳杆菌均明显减少（Ｐ均＜０．０１）；肠粘膜厌氧菌／需氧菌比值严重倒置（Ｐ＜０．０５）；脏器和血培养结果：胰腺炎组所有动物均出现了肠道细菌易位，以肠系膜淋巴结和胰腺易位率最高（８７．５％～１００．０％），且能找到术前人工定植于肠道的耐药质粒菌。胰腺炎后第１天和第２天血培养阳性率分别为７５．０％和６２．５％，而对照组全部阴性。结论：急性坏死型胰腺炎时肠道出现明显的细菌微生态失调，以过度生长的Ｇ－杆菌为主的肠道细菌易位到胰腺及其它脏器，成为胰腺及胰周感染的根源。     

抗生素腹腔灌洗治疗急性出血坏死性胰腺炎效果的观察

目的：探讨白介素－６（ＩＬ－６）、ＩＬ－８和肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）在急性出血坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）发病中的作用，并观察各种腹腔灌洗液对ＡＨＮＰ的治疗效果。方法：将１２０只大鼠随机分成：正常对照组、ＡＨＮＰ组，抗生素持续灌洗组和抗生素间断灌洗组。采用５％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射建立大鼠ＡＨＮＰ模型，并于模型制成后２４、４８、７２ｈ小时取血液，腹水，胰腺组织，测定血液，腹水中ＩＬ－６、ＩＬ－     

大黄对急性重症胰腺炎合并肝损害时白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α和氧自由基的影响

目的探讨大黄对大鼠急性重症胰腺炎合并肝损害治疗作用的机制。方法通过胰胆管逆行注射5％牛磺胆酸钠制作大鼠急性重症胰腺炎合并肝损害模型，检测血清白细胞介素-6（IL-5）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、丙二醛（MDA）、红细胞超氧化物歧化酶（SOD）的水平及大黄治疗后的变化。结果大黄治疗后急性重症胰腺炎大鼠血清IL-6、TNF-α、MDA明显降低，红细胞SOD升高（均P〈0．01）。结论大黄通过降低血清IL-6、TNF-α、MDA、红细胞SOD水平，可以对实验性急性重症胰腺炎合并肝损害的治疗产生一定的有益作用。