DNA甲基转移酶1和组蛋白去乙酰化酶1在子宫内膜异位症在位内膜的表达

目的 探讨DNA甲基转移酶1（DNMT1）和组蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）在子宫内膜异位症患者子宫内膜中的表达及其两者在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。方法 选取子宫内膜异位症患者在位内膜18例, 无子宫内膜异位症的对照子宫内膜20例,应用免疫组织化学法测定DNMT1的分布,应用免疫印迹法检测内膜组织中DNMT1和HDAC1蛋白的表达。结果 免疫组织化学提示,DNMT1主要分布于子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞的胞核;子宫内膜异位症在位内膜中DNMT1的表达强度显著高于对照组子宫内膜（P<0.01）。免疫印迹发现,子宫内膜异位症在位内膜DNMT1和HDAC1蛋白的表达高于对照组子宫内膜, 差异有统计学意义（P<0.05）;且两者的表达呈正相关 （P<0.05）。结论 DNMT1和HDAC1在EMs患者的高表达可能在子宫内膜异位症的发生、发展中起着重要作用。     

树突状细胞在子宫内膜异位症内膜组织中的变化

目的检测不成熟树突状细胞(im DCs)及成熟树突状细胞(m DCs)的标记物CD1a和CD83在子宫内膜异位症(EMS)内膜组织中的表达,探讨不同发育阶段的DCs在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法选取病理检查确诊的"巧克力囊肿"患者30例,分别取其异位内膜组织(异位内膜组)和在位内膜组织(在位内膜组),同时选取30例非内异症内膜组织为对照组。免疫组织化学法检测CD1a、CD83蛋白表达和分布,免疫印迹法检测CD1a、CD83蛋白表达量。结果 CD1a和CD83阳性细胞均分布于固有层基质细胞间及血管周围;CD1a蛋白在对照组、在位内膜组、异位内膜组表达依次升高,组间比较差异均有统计学意义(P0.01);CD83蛋白在对照组、在位内膜组、异位内膜组表达依次减少,差异均有统计学意义(P0.01)。结论子宫内膜异位症患者子宫内膜局部im DCs增多、m DCs减少,可能在子宫内膜异位症中发挥作用。     

白介素-17和血管内皮生长因子在子宫内膜异位症中的作用

目的:探讨白介素-17(IL-17)和血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症血管生成中的作用。方法:采用免疫组织化学及免疫印迹方法检测50例异位症患者在位内膜、异位内膜及47例正常子宫内膜组织中IL-17及VEGF蛋白表达。结果:各组内膜组织腺上皮细胞及基质细胞中均有IL-17和VEGF蛋白表达,内膜异位症在位内膜及异位内膜均高于同期对照组内膜,差异均有统计学意义;对照组分泌期内膜IL-17和VEGF蛋白表达均高于增生期,呈周期性变化,而内膜异位症组分泌期与增生期IL-17和VEGF蛋白均呈高表达,失去周期性变化。结论:内膜异位症患者在位及异位内膜组织中IL-17及VEGF蛋白高表达可能与内膜异位症的发生发展有关。     

基质金属蛋白酶MMP-7及其抑制因子TIMP-1在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的 观察基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)和基质金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitors of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)在子宫内膜异位症(Endmetriosis,EMs)中的表达,探讨二者在EMs发病机制中的作用.方法 采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法检测35例EMs患者的在位内膜,异位内膜及20例时照组为因肌壁间或浆膜下子宫肌瘤在我科行子宫切除术,且月经周期正常的子宫内膜中MMP-7和TIMP-1表达情况,检测结果采用SPSS软件进行统计学分析.结果 MMP-7在EMs在位内膜中的阳性表达率为57.1%,异位内膜中的阳性表达率45.7%,与对照组子宫内膜组织的表达(阳性率为40.0%)相比无显著性差异(P＞0.05).研究组异位内膜中的表达强度明显高于对照组,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).TIMP-1在两组所有标本中均有阳性表达.TIMP-1在研究组异位内膜中的表达强度低于在位内膜,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).研究组在位内膜中的表达强度稍低于对照组,两组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MMP-7在EMs的发生过程中起了重要作用.MMP-7在位内膜中表达增强,异位内膜TIMP-1表达减弱,是EMs患者在位内膜、异位内膜细胞具有侵袭能力的原因之一.     

TGFβ1与EGFR在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的检测转化生长因子β1（transforming growth factor beta 1,TGF-β1）以及表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）在子宫内膜异位症中的表达,探讨两者在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测子宫内膜异位症患者在位内膜（10例）、异位内膜（10例）、正常子宫内膜（10例）中TGF-β1和EGFR的表达情况。结果TGF-β1在子宫内膜异位症异位内膜组中的表达显著高于子宫内膜异位症在位内膜组及对照组（P〈0.05）,TGF-β1在子宫内膜异位症在位内膜组及对照组中的表达无显著性差异（P〉0.05）;EGRF在子宫内膜异位症异位内膜组及在位内膜组中的表达显著低于对照组（P〈0.05）,EGFR在子宫内膜异位症异位内膜组及在位内膜组中的表达无显著性差异（P〉0.05）。结论TGF-β1及EGFR的异常表达可能与子宫内膜异位症的发生发展有关。     

相对定量的2-△△CT法分析HLA-G基因在子宫内膜异位症中的表达

目的检测人类白细胞抗原-G(HLA-G)在子宫内膜异位症(EM)在位与异位内膜组织中的表达。方法选取卵巢子宫内膜异位囊肿患者30例(实验组),非子宫内膜异位症患者30例(对照组),应用实时荧光定量RT-PCR技术检测实验组在位与异位内膜组织,及对照组在位子宫内膜组织中HLA-G mRNA的表达,2-△△CT法分析结果。结果HLA-G mRNA在实验组在位与异位内膜组织中的表达均明显高于对照组(P<0.05),两者比值约为3.5/1。实验组在位与异位内膜组织中的表达无明显差异(P>0.05)。结论HLA-G mRNA的表达异常可能与EM发病有关。     

GnRHⅡ蛋白在子宫内膜异位症患者中的表达及意义

目的：检测GnRHⅡ蛋白在子宫内膜异位症患者异位子宫内膜、在位子宫内膜和正常子宫内膜中的表达情况,同时分析其表达是否与子宫内膜月经周期有关。方法：采用免疫组织化学SP法检测GnRHⅡ蛋白在异位内膜、在位内膜及正常子宫内膜组织中的表达情况,并分析和比较其表达是否有差异。结果：GnRHⅡ蛋白在子宫内膜异位症患者异位、在位子宫内膜及正常子宫内膜中均有表达,阳性表达定位于子宫内膜腺体及间质细胞的细胞质;GnRHⅡ蛋白在异位内膜、在位内膜及对照组正常内膜的表达依次增强,两两比较差异有统计学意义（P＜0.05）;GnRHⅡ蛋白在正常子宫内膜分泌期表达强于增生期（P＜0.05）,且以分泌早中期最强,显著强于增生期和分泌晚期（P＜0.01）,而异位组或在位组的分泌期与增生期比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：GnRHⅡ蛋白在子宫内膜异位症的发病中以及在人类月经生理方面可能起重要作用。     

子宫内膜异位症TGF-β_1及其基因的表达及意义

目的研究子宫内膜异位症中转化生长因子β1（TGF-β1）及其基因表达,探讨TGF-β1在子宫内膜异位症中的作用机制。方法 54例子宫内膜异位症异位内膜、在位内膜,50例对照组正常子宫内膜中,采用免疫组化方法检测TGF-β1的表达,SYBR Green实时定量聚合酶链反应（RQ-PCR）检测TGF-β1 mRNA的表达量。结果 TGF-β1在子宫内膜异位症异位内膜组中的蛋白表达显著高于在位内膜组及对照组（P〈0.05、P〈0.05）;TGF-β1在子宫内膜异位症在位内膜组中的表达与对照组中的表达无显著性差异（P〉0.05）;TGF-β1mRNA在子宫内膜异位症异位内膜中的表达量显著高于在位内膜组和对照组（P〈0.05、P〈0.05）,TGF-β1mRNA在位内膜组的表达量与对照组中的表达量无显著性差异（P〉0.05）。结论 TGF-β1可能参与子宫内膜异位症的发病机制,影响其发生发展。     

血管内皮生长因子及其受体在子宫内膜异位症中的表达和意义

目的:研究血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(Vascular endothelial growth factor receptor1,VEGFR1)在子宫内膜异位症(内异症)患者子宫在位内膜、异位内膜及正常对照组内膜组织中的表达,探讨其在子宫内膜异位症中的作用机制.方法:采用免疫组织化学及Western blot方法检测34例异位症患者在位内膜、异位内膜(内异症组)及34例正常内膜(对照组)组织中VEGF及其受体VEGFR1蛋白的定位及表达.结果:异症组在位及异位子宫内膜组织腺上皮细胞及间质细胞中均有VEGF及VEGFR1蛋白表达,且均高于同期对照组内膜,差异有统计学意义;对照组分泌期内膜VEGF及VEGFR1蛋白表达高于增生期,呈现周期性变化,而内异症组在位及异位内膜VEGF及VEGFR1蛋白表达失去周期性变化,分泌期与增生期均高表达,差异无统计学意义.Western blot检测结果与免疫组化结果一致.结论:内异症患者在位及异位内膜组织中VEGF、VEGFR1蛋白高表达可能与内异症的发生发展有关.     

整合素β3在子宫内膜异位症与子宫内膜癌中的表达及生物学行为相关性研究

目的研究整合素β3（beta3 integrin）在子宫内膜异位症、子宫内膜癌中的表达,探讨其表达与子宫内膜异位症发生及子宫内膜异位症和子宫内膜癌生物学行为的相关性。方法采用免疫组织化学方法检测10例子宫内膜异位症在位内膜、异位内膜,10例子宫内膜癌,10例对照组正常子宫内膜整合素β3的表达。结果整合素β3在子宫内膜异位症在位内膜组的表达显著低于对照组（P〈0.05）,在异位内膜组中的表达显著高于在位内膜组及对照组（P〈0.05、P〈0.05）;整合素β3在子宫内膜癌组中的表达显著高于对照组（P〈0.05）;整合素β3在子宫内膜异位症异位内膜组中的表达与子宫内膜癌组中的表达差异无显著性（P〉0.05）。结论整合素β3的异常表达可能与子宫内膜异位症的发生有关;且可能与子宫内膜异位症具有和子宫内膜癌相似的生物学行为有关。     

慢性强迫游泳应激大鼠内侧前额皮质磷酸化细胞外信号转导激酶1/2的变化

目的探讨慢性强迫游泳应激模型大鼠内侧前额皮质(mPFC)磷酸化细胞外信号转导激酶1/2(pERK1/2)的表达变化。方法将30只成年健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组(15只)和慢性强迫游泳应激组(15只)。慢性强迫游泳组连续给予28d的强迫游泳,制备慢性强迫游泳应激模型;通过糖水偏好实验、开场实验和Morris水迷宫检测大鼠抑郁行为学的改变;采用免疫组织化学、免疫印迹法检测mPFC中pERK1/2的表达变化。结果慢性强迫游泳应激组糖水消耗量和糖水偏好百分比分别为(4.114±0.644)%、(86.610±4.450)%,对照组为(8.157±1.105)%、(94.930±2.893)%,差异有统计学意义(P0.01);开场实验中慢性强迫游泳应激组和对照组的直立次数分别为1.75±0.96、6.00±0.82,差异有统计学意义(P0.05);水迷宫实验逃避潜伏期分别为(20.762±3.236)s、(5.632±1.065)s,差异有统计学意义(P0.01);免疫组织化学分析显示,对照组和模型组pERK1/2阳性细胞阳性信号吸光度值分别为47.594±5.355和110.810±10.643,差异有统计学意义(P0.01);免疫印迹法分析结果显示,对照组和模型组pERK/2分别占总ERK1/2的0.216±0.029和0.870±0.066,差异有统计学意义(P0.01)。结论慢性强迫游泳应激能诱发大鼠抑郁症状,促进mPFCpERK1/2表达。     

血管内皮生长因子在子宫内膜异位症发病中的作用

目的探讨血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在子宫内膜异位症(endometriosis,EM)发病中的作用。方法应用免疫组织化学方法并结合图像分析技术。结果正常子宫内膜和EM在位内膜腺上皮细胞的VEGF随月经周期呈现规律性变化,分泌期腺上皮VEGF蛋白表达量显著高于增殖期(P<0.05)。在增殖期,EM在位子宫内膜腺上皮VEGF的表达与正常子宫内膜相比无明显差别,但在分泌期,EM在位子宫内膜腺上皮细胞中VEGF的表达强度明显高于正常子宫内膜(P<0.01)。EM在位内膜腺上皮的VEGF含量显著高于同组卵巢子宫内膜异位囊肿的异位腺上皮(P<0.01)。结论表明VEGF的表达异常与EM的发病有关。     

STAT3和SOCS3与子宫内膜异位症的相关性研究

目的: 探讨信号转导和转录活化因子3(STAT3)和细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)的表达与子宫内膜异位症的相关性。方法: 采用Western blotting方法检测30例子宫内膜异位症患者异位(异位组)、在位子宫内膜(在位组)和25例正常子宫内膜(对照组)中总STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)和SOCS3蛋白的表达情况。结果: 总STAT3蛋白在3组内膜中表达无差异,而其活化水平(p-STAT3/STAT3)在异位组最高,SOCS3蛋白表达在异位组最低,两者与在位和对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05),相关性分析显示内异症患者中STAT3活化水平与SOCS3蛋白表达呈负相关(r=-0.499, P<0.01)。结论: 在子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜组织中存在STAT3过度活化和SOCS3蛋白表达下降,两者呈负相关。     

Evidence for an increased release of proteolytic activity by the eutopic endometrial tissue in women with endometriosis and for involvement of matrix metalloproteinase-9

BACKGROUND: For the implantation of endometrium in ectopic locations, remodelling of the extracellular matrix (ECM) is necessary. Many studies have shown an increased expression of various proteases in the ectopic endometrium of women with endometriosis. Few, however, have addressed possible changes in protease expression in the eutopic endometrium. METHODS AND RESULTS: Herein, we reveal an increased release of proteolytic activity by the eutopic endometrium of women with endometriosis compared with normal women (P < 0.01). Using zymography and western blotting, we identified matrix metalloproteinase (MMP)-2 and MMP-9 in the culture medium, and further found that MMP-9 secretion, as assessed by zymography and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), was elevated in women with endometriosis compared with normal women (P < 0.05). No statistically significant difference in MMP-2 secretion between women with and without endometriosis was noted. However, a significant difference in the levels of the tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMP)-1, a known MMP-9 inhibitor, was found (P < 0.05). CONCLUSION: The endometriosis-associated increase in proteolysis and imbalance between the secretion of MMP-9 and that of its natural inhibitor, TIMP-1, revealed in the culture medium of endometrial tissue may reflect in vivo the enhanced capacity of this tissue to break down the ECM in host tissues, thereby favouring its ectopic implantation and development.     

创伤后应激障碍模型大鼠内侧前额皮质磷酸化细胞外信号调节激酶1/2及EM>c-fos/EM>的变化

目的 探讨创伤后应激障碍（PTSD）模型大鼠内侧前额皮质（mPFC）磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（pERK1/2）和c-fos的表达变化。 方法 将30只成年健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组（15只）和PTSD模型组（15只）,采用无连续单一应激（SPS）方法制备PTSD模型。用免疫组织化学和免疫印迹法检测mPFC pERK1/2的表达变化,RT-PCR检测c-fos mRNA表达变化。 结果 免疫组织化学分析显示,对照组和模型组pERK1/2阳性细胞数分别为10.4±2.07、48.8±10.08,阳性信号吸光度值分别为24.955±3.691、110.810±10.643,差异有统计学意义（P<0.01）;免疫印迹分析显示,对照组和模型组pERK/2相对表达量分别为0.510±0.052和1.109±0.106,差异有统计学意义（P<0.01）;RT-PCR分析结果显示,对照组和模型组c-fos mRNA相对表达分别为0.267±0.067和1.049±0.131,差异有统计学意义（P<0.01）。 结论 mPFC pERK1/2和c-fos表达增高,可能参与了PTSD模型大鼠的病理生理过程。     

内异症子宫内膜ER、PR基因表达的研究

目的/:v探讨子宫内膜异位症(内异症)子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)基因表达在内异症发病中的作用。方法:利用大鼠内异症动物模型,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测子宫内膜ER和PRmRNAs的表达情况。结果:内异症模型组大鼠异位内膜ER、PRmRNAs的表达显著低于在位内膜及对照组正常子宫内膜(P＜0.01);而模型组在位内膜ER、PRmRNAs的表达与正常对照组比较差异无显著(P＞0.05)。内异症模型组异位内膜ER/PRmRNA比值大于在位内膜及正常子宫内膜ER/PRmRNA比值(P＜0.01)。结论:内异症大鼠异位内膜ERmRNA表达的相对增高在内异症的发生与发展中起着一定的作用。     

Pleiotrophin (PTN) and midkine (MK) mRNA expression in eutopic and ectopic endometrium in advanced stage endometriosis

Endometriosis is characterized by the ectopic implantation of endometrium on peritoneal surfaces. Angiogenic and growth factors may play a significant role in the pathogenesis of endometriosis. Midkine (MK) and pleiotrophin (PTN) are two related peptides associated with carcinogenesis and angiogenesis. To test the hypothesis that a higher expression of MK and PTN in ectopic and eutopic endometrium from women with endometriosis might favour increased angiogenesis and growth with subsequent ectopic implantation, we investigated PTN and MK expression by quantitative competitive PCR (QC-PCR) in endometrium from 30 women with severe, stages III and IV endometriosis and from 30 women without endometriosis. Total RNA was extracted and reverse transcribed into cDNA, and QC-PCR was performed to evaluate PTN and MK mRNA expression. Results were analysed by analysis of variance. Eutopic endometrium from endometriosis patients showed increased expression of MK and PTN mRNA compared with endometrium from normal women in the luteal phase (P < 0.05). MK and PTN mRNA expression in ectopic endometrium was significantly lower than that in eutopic endometrium from women with and without endometriosis (P < 0.05). Our results suggest increased MK and PTN expression may be related to the initiation of ectopic endometrial implants and peritoneal invasion.