玉竹对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用

本文运用血清药理学方法,观察了玉竹对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用,报告如下。1 实验材料 玉竹:玉竹水煎醇沉液,文火浓缩成2g/ml生药浓度,备用。RPMI1640培养基;每1000ml培养液含日产1640粉10.4g,谷胺酰氨0.292g,Hepes6.02g,NaH-     

野菊花提取物CI-2对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧缺糖性损伤的保护作用

本室在筛选中草药过程中发现野菊花对实验性犬心肌缺血有明显的保护作用,并进一步证实野菊花提取物 CI-2可减小心肌梗塞范围、减轻心肌损伤程度,且具有调整心脏血流动力学等作用。迄今国内外对野菊花防治冠心病作用的研究尚少报道,我室初步实验结果表明,它有可能成为一种新的防治冠心病有效的药物。因此有必要对野菊花及其有效成分作进一步的研究。为在活的细胞水平研究药物对心肌细胞的直接保     

氧化苦参碱对醛固酮诱导心肌细胞损伤的保护作用

目的:研究氧化苦参碱(OMT)对醛固酮(ALD)诱导心肌细胞损伤的保护作用,并分析其对盐皮质激素受体(MR)转录和表达的影响。方法:采用胰酶消化差速贴壁法分离纯化新生Sprague-Dawley(SD)大鼠原代心肌细胞,采用肌钙蛋白和肌动蛋白免疫细胞化学法鉴定心肌细胞及其纯度,并建立ALD诱导的细胞损伤模型。采用噻唑蓝(MTT)法确定ALD导致心肌细胞损伤的最佳作用浓度与时间。实验分为空白组(无血清培养基),ALD组(最佳刺激浓度组),OMT高剂量(ALD+100 mg·L~(-1)OMT)组和OMT低剂量(ALD+50 mg·L~(-1)OMT)组。OMT预保护2 h,继续加入ALD共同作用36 h,并用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)外漏检测分析OMT对ALD诱导心肌细胞膜损伤的保护作用。逆转录-PCR(RT-PCR)分析MR mRNA水平。免疫印迹法(Western blot)检测MR和醛固酮合成酶(CYP11B2)的蛋白表达。结果:16 mg·L~(-1)ALD诱导心肌细胞36 h后能显著引起细胞损伤,OMT(50,100 mg·L~(-1))能够抑制ALD诱导的细胞活力下降及LDH外漏量升高。同时,OMT(50,100mg·L~(-1))能够抑制ALD诱导的MR mRNA水平和蛋白表达升高,上调CYP11B2蛋白表达。结论:OMT对ALD诱导的心肌细胞损伤具有保护作用,其机制可能与抑制ALD-MR系统激活有关。     

人参芦头总皂甙对乳鼠原代培养心肌细胞的作用

此实验通过原代培养的乳鼠心肌细胞,观察了人参芦头总皂甙对心肌细胞正常DNA合成和对缺糖缺氧损伤性培养的心肌细胞的保护作用。结果表明:参芦总皂甙对体外培养心肌细胞DNA合成有促进影响;对缺糖缺氧损伤性培养的心肌细胞有一定的保护作用。     

氧化苦参碱保护醛固酮诱导的心肌细胞损伤作用机制分析

目的:研究氧化苦参碱(OMT)抑制细胞外信号调节激酶ERK1/2磷酸化对醛固酮(ALD)诱导心肌细胞损伤的干预作用。方法:采用胰酶消化与差数贴壁分离纯化原代心肌细胞,免疫细胞化学分析心肌细胞纯度。实验分为空白组、模型组(1×10-5mol·L-1ALD)和OMT高(3.78×10-4mol·L-1),低剂量(1.89×10-4mol·L-1)组共4组。运用MTT法检测细胞存活率,LDH外漏法测定细胞膜损伤程度,蛋白免疫印迹法分析p-ERK1/2及ERK1/2蛋白表达,实时荧光定量PCR分析ERK mRNA表达。结果:OMT可抑制ALD诱导的细胞存活率降低和LDH外漏增加;与模型组比较,OMT预处理后p-ERK1/2蛋白表达明显下调。结论:OMT对ALD诱导的心肌细胞损伤具有保护作用,其作用与抑制ERK1/2蛋白磷酸化有关。     

舒芬太尼对培养大鼠乳鼠缺氧心肌细胞损伤保护作用的研究

目的探讨舒芬太尼对原代培养心肌细胞缺氧损伤的影响。方法将原代培养成活48h的大鼠乳鼠心肌细胞分为3组：A组为对照组（氰化钠造成心肌细胞细胞内缺氧模型）,B组为sufl组（缺氧＋0．1ng／／mL舒芬太尼）,C组为suf2组（缺氧＋0．2ng／mL舒芬太尼）。比较3组心肌细胞形态学（倒置相差显微镜,透射电镜观察）的变化及吸光度A值的改变。结果缺氧12h后,对照组细胞搏动功能变化明显,呈散在性搏动,而实验组搏动频率减慢。随着时间的延长,细胞形态学变化逐渐明显,对照组较实验组变化更显著。结论舒芬太尼对原代培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧损伤有一定的保护作用。     

青藤碱拮抗培养乳鼠心肌细胞的缺氧/复氧损伤

目的:研究青藤碱对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的影响。方法:建立心肌细胞A/R损伤(低氧2h,复氧1h)模型,于复氧后测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)变化及细胞内丙二醛(MDA)含量和细胞存活率。结果:与正常对照组相比,单纯A/R组LDH漏出量、MDA水平显著升高(P<0.01),细胞存活率显著降低(P<0.01)。与A/R组比较,青藤碱10、30、100μmol/L处理组上述变化明显减轻(P<0.05)。结论:青藤碱对乳鼠心肌细胞A/R损伤具有保护作用。     

红景天苷对缺氧诱导培养乳鼠心肌细胞的保护作用

目的 研究中药红景天苷对缺氧诱导培养乳鼠心肌细胞损伤的保护作用并探讨其作用机制.方法 采用体外培养乳鼠心肌细胞,以N2饱和缺氧培养基制备心肌细胞缺氧损伤模型,分别用红景天苷10 mg/L、50mg/L、100mg/L进行治疗后检测心肌细胞丙二醛(MDA)量、超氧化物歧化酶(SOD)活力、细胞内[Ca2+],肌浆网钙泵(SERCA)活性变化.结果 与正常对照组比较,缺氧模型组心肌细胞MDA水平增高,SOD活力下降,SERCA活性下降,细胞内[Ca2+]增加;红景天苷治疗后MDA水平下降(P＜0.05),SOD活力增高(P ＜0.05),SERCA活性增强(P＜0.05),细胞内[Ca2+],减少(P＜0.01),并呈一定剂量依赖趋势.结论 红景天苷对缺氧诱导培养乳鼠心肌细胞损伤具有保护作用,可能与其减轻氧自由基损伤,有可提高SERCA活性减轻钙超载有关.     

白藜芦醇对缺氧诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的:观察白藜芦醇(Res)对缺氧诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用。方法:建立体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧模型,MTT法检测心肌细胞活力,免疫组织化学法检测心肌细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平,检测心肌细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平和心肌细胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果:大鼠乳鼠心肌细胞在体外缺氧培养24 h后,HIF-1α表达水平明显升高;心肌细胞培养液中LDH活性从正常对照组的(93.07±15.84)U.L-1上升到(750.77±181.51)U.L-1(P0.01);心肌细胞内GSH-Px活性从正常对照组(46.96±8.36)U.mL-1下降为(27.13±4.76)U.mL-1(P0.01)。25,50,75μmol.L-1Res可剂量依赖性抑制缺氧诱导大鼠乳鼠心肌细胞内HIF-1α表达增加;心肌细胞培养液中LDH含量呈剂量依赖性下降,分别为(486.17±69.97),(189.43±32.07),(155.34±29.57)U.L-1(P0.05或P0.01);心肌细胞内GSH-Px活性呈剂量依赖性升高,分别为(33.55±6.34),(37.67±6.73),(41.44±7.91)U.mL-1(P0.05或P0.01)。结论:Res对缺氧诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤有良好保护作用。     

川芎嗪预处理对体外培养乳鼠心肌细胞低氧再给氧损伤的保护作用

用体外培养乳鼠心肌细胞观察了川芎嗪预处理对低氧／再给氧损伤的保护作用。结果表明：川芎嗪20μg/ml能明显提高低氧3小时／再给氧0、30、60、120分钟时细胞搏动和细胞生存率,使乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醇（MDA）释放减少,超氧化物歧化酶（SOD）释放增多。这种保护作用与低氧预处理（HP）产生的结果一致。上述结果表明川芎嗪预处理对体外培养乳鼠心肌细胞低氧／再给氧所致损伤具有保护作用,其机制可能与提高心肌细胞抗氧化酶活性,清除氧自由基有关。     

氧化苦参碱对心肌损伤大鼠线粒体保护作用的研究

目的:探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对异丙基肾上腺素(isoproterenol,ISO)致心肌损伤大鼠线粒体(mitochondria,Mit)的保护作用及其机制。方法:健康雄性SD大鼠24只,随机分为4组:对照组、模型组、OMT低、高剂量组,每组6只。皮下注射ISO5 mg.kg^-1.d^-1复制心肌损伤模型,低、高剂量组分别腹腔注射OMT100,150 mg.kg^-1.d^-1,连续10 d。差速离心法提取心肌Mit,比色法测定血浆乳酸(lactic acid,LD)、丙二醛(malondi-aldehyde,MDA)的含量与乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)的活性和心肌Mit中MDA的含量与琥珀酸脱氢酶(succinicdehydrogenase,SDH),SOD,GSH-PX的活性,原子吸收法测定心肌Mit的钙含量。HE染色观察心肌组织的病理学改变,电镜下观察Mit超微结构的改变。结果:与模型组相比,低、高剂量OMT均可减轻心内膜下心肌缺血性损伤,保护心肌Mit超微结构的完整性,且二者均可显著降低心肌线粒体MDA和钙含量(P<0.01),增加线粒体SOD与GSH-PX活性(低剂量组P<0.05,高剂量组P<0.01),升高SDH活性P<0.01),降低血浆LDH活性(P<0.01)和LD含量(低剂量组P<0.05,高剂量组P<0.01)。结论:OMT可保护ISO致心肌损伤大鼠Mit的结构和功能,其机制可能与抑制脂质过氧化、减轻钙超载、改善心肌细胞的代谢有关。     

基于TGF-β-Smads信号的氧化苦参碱干预急性心肌梗死诱发实验性大鼠心肌纤维化的研究

目的:研究氧化苦参碱(OMT)对大鼠急性心肌梗死诱发实验性心肌纤维化的保护作用及对TGF-β-Smads信号通路的影响。方法:采用冠状动脉结扎术复制大鼠急性心肌梗死模型,随机分为模型组、OMT高、中、低剂量组(50,25,12.5mg.kg-1)、卡托普利组(50 mg.kg-1);假手术组(Sham)只做冠状动脉穿线而不结扎。模型复制8周后采用HE与Masson染色分析心肌纤维化病变程度,半定量RT-PCR分析TGF-β-Smads信号系统mRNA的表达。结果:模型组急性心肌梗死8周后,病理组织学检查提示心肌细胞减少,细胞外基质沉积,胶原含量增加;RT-PCR结果提示TGF-β1,TβR1,Smad2,Smad3,Smad4 mRNA表达明显增加,而Smad7 mRNA的表达显著降低,与Sham组比较,差异显著。OMT显著抑制急性心肌梗死8周后诱发的实验性心肌纤维化,抑制TGF-β1,TβR1,Smad2,Smad3,Smad4 mRNA表达的上调和增加Smad7 mRNA的表达。结论:OMT对急性心肌梗死诱发实验性心肌纤维化具有一定的抑制作用,其作用机制与TGF-β-Smads信号系统密切相关。     

人工麝香对体外培养的心肌细胞的保护作用

目的:探讨含人工麝香血清对心肌细胞的保护作用。方法:制备含人工麝香血清,建立体外培养心肌细胞模型,应用血清剥夺法造成心肌细胞缺血后,给予不同剂量含药血清进行处理,观察心肌细胞形态、自发性搏动频率及培养液中MDA、LDH、NO含量的变化。结果:人工麝香1:2稀释组增加NO释放(P<0.05);人工麝香血清:空白血清(1:1)组减缓缺血损伤造成的心肌细胞自发性搏动频率下降程度(P<0.05),降低缺血所致的LDH活力的升高(P<0.05),增加NO的释放(P<0.01);未稀释的含人工麝香血清组降低缺血所致的LDH活力的升高(P<0.01)、MDA含量的增加程度(P<0.05),增加NO的释放(P<0.01)。结论:含人工麝香血清对体外培养的心肌细胞具有保护作用,可能通过其促进NO生成,减少LDH,MDA释放有关。     

Effects of pilose antler extracts on doxorubicin-induced beating abnormalities of cultured myocardial cells

Effects of pilose antler extracts and subsequent fractions on normal and doxorubicin (DX)-administered cultured myocardial cells from mouse embryo were investigated. A water extract did not affect the percentage of beating cells at 1–100 μg/mL but suppressed the beating rate at 100 μ/mL. A pretreatment with the water extract significantly restored the percentage of beating cells which was reduced by administration of DX, and showed a tendency to recover the reduced beating rate. A similar pretreatment with an aqueous EtOH-solnble portion (fraction 1) of the water extract significantly recovered both the percentage of beating cells and the beating rate, but further fractionation did not improve the activities. LDH leakage from DX-administered myocardial cells was significantly diminished by the pretreatment with fraction 1, though ATP content in the cells was not appreciably recovered.     

葡萄籽中原花青素对心肌细胞的保护作用

目的研究原花青素(proanthocyanidins, PA)对心肌细胞损伤的保护作用及机理.方法体外培养乳鼠心肌细胞,用DOG、ADR、X-XO造成损伤模型,比色法测定培养液中LDH的活性.用·OH生成系统Fe2+-抗坏血酸(Fe2+-VitC)和ADR刺激大鼠心肌组织匀浆,用TBA比色法测定MDA生成;用自旋捕集ESR法测定PA对·OH的清除作用.结果25和50mg/L PA均能对抗DOG、ADR、X-XO所致心肌细胞损伤,使心肌细胞胞浆酶LDH漏出显著减少(P<0.01),且剂量依赖性的抑制自发性及Fe2+-VitC、ADR体系诱导的大鼠心肌组织匀浆MDA的生成;ESR法直接抑制·OH的产生,50mg/L PA的抑制率为48.41%.结论PA对心肌细胞损伤有一定的保护作用,其机理与清除活性氧自由基和抗脂质过氧化作用有关.     

蒙药诃子汤制草乌总生物碱对乳大鼠心肌细胞的毒性作用研究

目的 探讨蒙药诃子汤炮制草乌总生物碱对心肌细胞的毒性作用.方法 制备乳大鼠原代心肌细胞,胎盘蓝染色法检测心肌细胞存活率,免疫组织化学染色法鉴定心肌细胞.制备的原代细胞培养3-4d,分别加入诃子汤制草乌、生草乌总生物碱0.5、0.25、0.125、0.0625 mg/mL培养30、60 min,MTT法检测心肌细胞存活率,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,Hoechst33528荧光染色法检测细胞核凋亡率.结果 诃子汤制草乌总生物碱、生草乌总生物碱在与心肌细胞共同孵育30 min、60 min时均能降低心肌细胞活力,细胞LDH漏出率增加,发生细胞凋亡;诃子汤制草乌总生物碱所致的心肌细胞毒性作用弱于生草乌总生物碱.结论 经诃子汤炮制的草乌总生物碱对心肌细胞的毒性作用明显低于生草乌总生物碱,表明采用诃子汤炮制确能降低草乌的心肌毒性.     

Cardioprotective effects and underlying mechanisms of oxymatrine against Ischemic myocardial injuries of rats

Oxymatrine has been demonstrated to have a variety of pharmacological actions. Accumulating evidence indicates that oxymatrine may exert a protective effect on the cardiovascular system. The study was designed to explore the possible role of oxymatrine against myocardial ischemic damage and several related signaling pathways as potential mechanisms. The protective properties of oxymatrine were studied in a rat model of acute myocardial infarction due to permanent ligation of the left anterior descending coronary artery. The results showed that administration of oxymatrine relieved myocardial injuries during ischemia, and this was achieved by protecting cardiomyocytes from apoptotic death. The beneficial effects of oxymatrine were likely mediated by an inhibition of lipid peroxidation (MDA production) and an increase in endogenous antioxidant activity (SOD), activation of the survival signaling molecule (Bcl-2), and a reduction of apoptotic mediator (Fas) and intracellular Ca2+ overload.     

芒果甙保护柔红霉素致大鼠心肌细胞毒性中铁代谢的改变

目的:探讨铁代谢在芒果甙保护柔红霉素致大鼠心肌毒性细胞中的改变,并对其作用机制进行初步研究。方法:以4μmol/L柔红霉素单用或联合应用25～200μmol/L芒果甙为处理因素作用于大鼠心肌细胞24小时、48小时及72小时,应用qRT-PCR法检测各组心肌细胞铁调节蛋白1(IRP1)、铁调节蛋白2(IRP2)mRNA表达,应用RT-PCR法检测铁蛋白(Fn)mRNA表达,同时采用免疫细胞化学染色法检测转铁蛋白(Tf)及转铁蛋白受体(TfR)表达。结果:25～200μmol/L芒果甙模型组在干预24小时后IRP1、IRP2表达水平较柔红霉素(4μmol/L)组降低,干预48小时、72小时后,二者表达较柔红霉素组升高;干预24小时、72小时25～200μmol/L芒果甙模型组Fn表达较柔红霉素组随浓度升高逐渐降低,干预48小时后则较柔红霉素组均升高;柔红霉素组及25～200μmol/L芒果甙模型组24小时的Tf、TfR表达均明显高于空白对照组;72小时柔红霉素组的TfR表达明显低于空白对照组,而25～200μmol/L芒果甙模型组表达较柔红霉素组升高。结论:芒果甙能改变柔红霉素心肌毒性细胞的铁代谢水平,由此可推测,铁代谢可能是芒果甙保护柔红霉素致大鼠心肌细胞毒性的机制之一。     

氧化苦参碱治疗慢性乙型肝炎远期疗效观察

目的　探讨氧化苦参碱治疗慢性乙型肝炎的远期疗效。方法　将慢性乙型肝炎患者 2 38例随机分为 2组 ,治疗组予氧化苦参碱注射液肌肉注射 ,90d为 1个疗程。对照组予α-干扰素针剂肌肉注射 ,6～ 10个月为 1个疗程。疗程结束后随访 1年。结果　治疗结束 1年后 ,治疗组ALT及SB复常率分别达 79.4 %和 6 9.8% ,HBeAg阴转率达 4 5 .6 % ,HBV -DNA阴转率达 4 4 .9% ,与对照组比较无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论　氧化苦参碱治疗慢性乙型肝炎具有价廉、无毒、效佳的特点 ,远期疗效确切 ,是治疗慢性乙型肝炎的有效药物     

白藜芦醇对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用及其机制研究

目的探讨白藜芦醇对H2O2所致心肌细胞损伤的保护作用。方法采用H2O2处理培养的乳鼠心肌细胞,造成氧化应激模型,应用MTT法观察白藜芦醇对心肌细胞活力的影响,SOD及MDA试剂盒检测细胞培养液中SOD与MDA含量,并通过流式细胞仪检测乳鼠心肌细胞的凋亡情况。结果①损伤模型组与空白对照组比较,心肌细胞活力明显降低,心肌细胞凋亡率明显增加,而MDA活性明显升高,SOD活性明显降低;②不同浓度白藜芦醇可显著性提高受损心肌细胞活力,减少心肌细胞的凋亡,同时可显著降低培养液中MDA活性,而升高SOD活性。结论白藜芦醇可减轻H2O2对心肌细胞的损伤程度,对心肌细胞具有保护作用,其机制可能与其抗心肌细胞氧化和抗凋亡有关。