生长激素对脓毒症大鼠保护作用的机制研究

目的研究重组人生长激素对脓毒症大鼠的免疫调节作用。方法将24只清洁级Wistar大鼠,随机分为对照组以及大、小剂量预处理组,分别给予生理盐水以及大剂量[3 U/(kg.d)]、小剂量[1 U/(kg.d)]重组人生长激素。治疗5 d后,尾静脉注射大肠杆菌内毒素标准品(10 mg/kg),制成脓毒症模型,检测造模前后大鼠血清中TNF-α和IL-10的水平。结果各组注射内毒素前血清TNF-α、IL-10水平差异无显著性(P>0.05),对照组内毒素注射后,血清TNF-α和IL-10均呈升高趋势,造模后4 h达到最高值(P<0.001)。大、小剂量组TNF-α在内毒素注射后各时点均显著低于对照组水平(P<0.005);造模后2 h,大剂量组IL-10明显高于对照组(P<0.001);造模后4 h,大、小剂量组IL-10均明显低于对照组水平(P<0.005)。结论生长激素可以抑制脓毒症早期机体过度产生TNF-α,并对IL-10的产生有双相调节作用(早期抑制炎症反应,后期削弱过度抑制),从而及时适度的调节脓毒症机体的细胞因子网络,纠正脓毒症导致的免疫系统功能紊乱。     

肾上腺素对内毒素致大鼠肠道损害的保护作用

目的 探讨肾上腺素对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)所致大鼠肠道损害的保护作用及其作用机制.方法 50只SD大鼠随机分为5组(每组10只):对照组:大鼠静脉输注0.9％生理盐水24 ml/(kg·h);LPS组:大鼠静脉注射LPS 6m/kg后,静脉输注生理盐水2.4 ml/(kg·h);低、中和高剂量肾上腺素组:大鼠静脉注射LPS 6 mg/kg后,分别静脉输注肾上腺素0.12 μg/(kg·min)、0.3μg/(kg·min)和0.6μg(kg· min).在LPS注射前、注射后2h和注射后6h3个时点取血,检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-10水平,并在24h观察肠道的组织病理学变化.结果 LPS组大鼠在LPS注射后2h血清TNF-α浓度为(1164±145) ng/L,IL-1β浓度为(521±68)ng/L,IL-10浓度为(303±20) ng/L,较对照组均明显升高(P＜0.05).病理结果显示,LPS组小肠黏膜充血、水肿、出血及炎症细胞浸润,上皮细胞坏死、脱落.高剂量肾上腺素组2h血清TNF-α浓度为(576±105) ng/L,2h和6h的IL-10浓度分别为(424±29) ng/L和(24.5±14) ng/L,与LPS组相比血清TNF-α水平明显降低(P＜0.05)且IL-10水平明显升高(P＜0.05),但IL-1β水平无明显变化(P＞0.05).高剂量肾上腺素组大鼠肠道病理损伤明显减轻.中、低剂量肾上腺素组各时间点血清细胞因子水平与LPS组比较,差异无统计学意义(P＞0.05),未见肠道病理损害减轻.结论 肾上腺素可以通过抗炎作用减轻LPS素诱导的肠道损害.     

脓毒症线粒体损伤的氧化应激机制及靶向抗氧化剂的研究

线粒体是细胞氧化的重要部位,在脓毒症时氧化应激作为炎症反应最终的结果,可引起线粒体的改变,从而可能导致器官功能损伤。在正常情况下,抗氧化防御系统通过相互作用可以对抗氧化应激,预防对线粒体的损伤。氧化应激在器官功能损伤的过程中起着重要的作用,目前已有研究发现针对线粒体的抗氧化剂靶向治疗可能是脓毒症引起的多器官功能衰竭治疗的一种新策略。该文就氧化应激在脓毒症线粒体损伤机制及靶向抗氧化剂的研究作一综述。     

肾上腺素对内毒素血症大鼠早期炎症因子及急性肺损伤的影响

目的：探讨肾上腺素对内毒素( lipopolysaccharide,LPS)所致大鼠肺损伤的保护作用及其作用机制。方法30只SD大鼠随机分为3组(每组10只)：正常对照组大鼠静脉输注生理盐水2．4 ml/( kg·h);LPS组大鼠静脉注射LPS 6 mg/kg后,静脉输注生理盐水2．4 ml/( kg·h);肾上腺素组大鼠静脉注射LPS 6 mg/kg后,静脉输注肾上腺素0．6μg/( kg·min)。在LPS注射后2 h和6 h通过心导管抽血,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子( TNF)-α、白细胞介素( IL)-6和IL-10水平,并在6 h处死大鼠取肺脏组织,分别予肺组织含水量检测,HE染色观察肺组织病理学变化,以及ELISA法检测肺泡灌洗液(BALF)内TNF-α、IL-6和IL-10水平。结果(1)与正常对照组肺含水量(70．19%±5．87%)相比,LPS组肺含水量(85．24%±5．87%)明显升高( P <0．05),与 LPS 组相比,肾上腺素组肺含水量(78．00%±6．41%)明显降低(P<0．05)。(2)病理观察结果显示,LPS组大鼠肺泡隔内毛细血管充血、水肿及炎症细胞浸润,少部分肺组织可见肺不张及肺泡内水肿、出血。肾上腺素组大鼠肺病理损伤较LPS组明显减轻。(3)与LPS组相比,肾上腺素组各时点血清TNF-α及IL-6水平明显降低(P<0．05), IL-10水平明显升高(P<0．05)。(4)与LPS组相比,肾上腺素组大鼠BALF中TNF-α水平降低[(78±9)ng/L vs.(102±16) ng/L],IL-6水平降低[(268±42) ng/L vs.(347±50) ng/L],IL-10水平升高[(210±23)ng/L vs.(146±34) ng/L](P<0．05)。结论肾上腺素可减轻LPS诱导的急性肺损伤,其保护作用可能与降低TNF-α、IL-6水平,升高IL-10水平有关。     

脓毒症大鼠肾脏线粒体膜电位变化和超微结构损伤的研究

目的 探讨脓毒症时大鼠肾脏线粒体的损伤情况.方法 采用腹腔注射内毒素(LPS)建立脓毒症大鼠模型.30只SD大鼠随机分为对照组、6 h脓毒症组和24 h脓毒症组.分别检测各组大鼠血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平;电镜观察肾脏线粒体形态学变化;运用流式细胞术检测分离肾脏线粒体的肿胀程度和线粒体膜电位,用前向角与侧向角的平均荧光强度比值(FSC/SSC)反映线粒体肿胀程度,用二通道和一通道平均荧光强度比值(FL2/FL1)确定线粒体膜电位.结果 脓毒症大鼠的血清Cr、BUN上升明显高于对照组(P<0.05);肾脏线粒体肿胀程度(FSC/SSC)在24 h脓毒症组中明显增加(对照组:0.55±0.10;6 h脓毒症组:0.58±0.10;24 h脓毒症组:0.66±0.12,P<0.05);肾脏线粒体膜电位(FL2/FL1)在6 h脓毒症和24h脓毒症组中均明显下降(对照组:0.77±0.26;6 h脓毒症组:0.32±0.19;24 h脓毒症组:0.30±0.17,P<0.01),其下降趋势与大鼠血清Cr变化呈负相关(r=-0.510,P=0.004);肾脏线粒体超微结构在24h脓毒症组中损伤明显.结论 脓毒症早期肾脏功能和线粒体膜电位存在损伤;但线粒体超微结构损伤在脓毒症早期表现轻微,晚期损伤明显.     

肾上腺素对内毒素致大鼠炎症性肝损害的保护作用

目的 探讨肾上腺素(Epi)对内毒素（脂多糖，LPS）致大鼠炎症性肝损害的保护作用及其作用机制。方法 50只SD大鼠随机分为5组（每组各10只）：对照组：静脉滴注生理盐水2.4 mL·kg-1·h-1；LPS组：静脉注射LPS 6 mg·kg-1后，静脉滴注生理盐水2.4 mL·kg-1·h-1；低、中和高剂量Epi组：静脉注射LPS 6 mg·kg-1后，分别静脉滴注Epi 0.12、0.3和0.6 μg·kg-1·min-1。在LPS注射前、注射后2和6 h 3个时点取血，检测血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β和IL-10水平，并在6 h时点观察肝脏的组织病理学改变。结果 LPS组注射LPS后2、6 h血清AST和ALT水平较对照组显著升高，同时血清TNF-α、IL-1β和IL-10水平亦较对照组显著升高（P<0.05）。病理检查结果示：LPS组肝窦扩张、充血，局灶性肝细胞坏死。高剂量Epi可显著降低血清AST和ALT水平，减轻肝脏病理损伤，并显著可降低TNF-α水平和升高IL-10水平 (vs LPS组，P均<0.05)，但对IL-1β水平无影响。中、低剂量Epi对LPS致炎症性肝损害无明显保护作用。结论 Epi可通过抗炎作用减轻LPS诱导的炎症性肝损害。     

罗汉果皂苷Ⅵ对小鼠脓毒症致急性肝损伤的作用及其机制探讨

目的 探讨罗汉果皂苷Ⅵ（MⅥ）对小鼠脓毒症致急性肝损伤的作用及其可能作用机制。方法 将60只雄性C57BL/6小鼠随机分成假手术组、模型组、MⅥ低剂量组（低剂量组,25 mg/kg）、MⅥ高剂量组（高剂量组,100 mg/kg）和过氧化物酶增殖激活受体γ辅助激活物1α（PGC-1α）抑制剂组（抑制剂组,100 mg/kg MⅥ+30 mg/kg PGC-1α抑制剂SR-18292）,每组12只。采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症小鼠模型,造模成功后开始腹腔注射给药,每天1次,连续3 d。ELISA法检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）浓度;比色法检测肝组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平;苏木精-伊红染色观察肝组织病理学变化;检测肝脏线粒体呼吸功能,计算线粒体呼吸控制率;RT-PCR检测肝组织线粒体DNA（mtDNA）的拷贝数及肝组织中PGC-1α、核呼吸因子1（NRF-1）、线粒体转录因子A（TFAM）的mRNA水平;Western blot检测肝组织中PGC-1α、NRF-1和TFAM的蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组小鼠血清中ALT、AST水平及肝组织中MDA含量显著增加（P < 0.05）,肝组织中GSH-Px和SOD活性显著降低（P < 0.05）;肝组织病理学损伤严重;肝组织线粒体呼吸控制率和mtDNA拷贝数,以及肝组织中PGC-1α、NRF-1、TFAM的mRNA及其蛋白表达水平均显著降低（P < 0.05）。与模型组比较,高剂量组小鼠血清中ALT、AST水平及肝组织中MDA含量显著减少（P < 0.05）,肝组织中GSH-Px和SOD活性显著增加（P < 0.05）;肝组织病理学损伤得到改善;肝组织线粒体呼吸控制率和mtDNA拷贝数,以及肝组织中PGC-1α、NRF-1、TFAM的mRNA及其蛋白表达水平均显著上升（P < 0.05）;低剂量组上述指标差异均无统计学意义（P > 0.05）。PGC-1α抑制剂SR-18292可显著抑制高剂量MⅥ的干预效果（P < 0.05）。结论 MⅥ能有效减轻小鼠脓毒症致急性肝损伤,其机制可能与增强PGC-1α介导的线粒体生物合成有关。     

罗汉果皂苷Ⅵ对小鼠脓毒症致急性肝损伤的作用及其机制探讨

目的 探讨罗汉果皂苷Ⅵ（MⅥ）对小鼠脓毒症致急性肝损伤的作用及其可能作用机制。方法 将60只雄性C57BL/6小鼠随机分成假手术组、模型组、MⅥ低剂量组（低剂量组,25 mg/kg）、MⅥ高剂量组（高剂量组,100 mg/kg）和过氧化物酶增殖激活受体γ辅助激活物1α（PGC-1α）抑制剂组（抑制剂组,100 mg/kg MⅥ+30 mg/kg PGC-1α抑制剂SR-18292）,每组12只。采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症小鼠模型,造模成功后开始腹腔注射给药,每天1次,连续3 d。ELISA法检测血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）浓度;比色法检测肝组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平;苏木精-伊红染色观察肝组织病理学变化;检测肝脏线粒体呼吸功能,计算线粒体呼吸控制率;RT-PCR检测肝组织线粒体DNA（mtDNA）的拷贝数及肝组织中PGC-1α、核呼吸因子1（NRF-1）、线粒体转录因子A（TFAM）的mRNA水平;Western blot检测肝组织中PGC-1α、NRF-1和TFAM的蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组小鼠血清中ALT、AST水平及肝组织中MDA含量显著增加（P < 0.05）,肝组织中GSH-Px和SOD活性显著降低（P < 0.05）;肝组织病理学损伤严重;肝组织线粒体呼吸控制率和mtDNA拷贝数,以及肝组织中PGC-1α、NRF-1、TFAM的mRNA及其蛋白表达水平均显著降低（P < 0.05）。与模型组比较,高剂量组小鼠血清中ALT、AST水平及肝组织中MDA含量显著减少（P < 0.05）,肝组织中GSH-Px和SOD活性显著增加（P < 0.05）;肝组织病理学损伤得到改善;肝组织线粒体呼吸控制率和mtDNA拷贝数,以及肝组织中PGC-1α、NRF-1、TFAM的mRNA及其蛋白表达水平均显著上升（P < 0.05）;低剂量组上述指标差异均无统计学意义（P > 0.05）。PGC-1α抑制剂SR-18292可显著抑制高剂量MⅥ的干预效果（P < 0.05）。结论 MⅥ能有效减轻小鼠脓毒症致急性肝损伤,其机制可能与增强PGC-1α介导的线粒体生物合成有关。     

脓毒症急性肾损伤发病机制的研究进展

脓毒症急性肾损伤是脓毒症多器官功能障碍的表现之一.当出现急性肾损伤时,往往提示病情危重.脓毒症急性肾损伤主要与肾脏血流动力学改变、缺血再灌注损伤、直接的炎症损伤、凝血和血管内皮细胞功能紊乱及细胞凋亡等有关.     

microRNA在脓毒症患儿线粒体功能障碍的研究进展

脓毒症是各种病原微生物及免疫原性物质引起的全身炎性反应和宿主自身免疫性损伤,进一步发展可致多器官功能障碍综合征.线粒体是细胞中重要的细胞器,通过氧化磷酸化反应为机体提供ATP,对机体生长、代谢、疾病的发生发展等多方面都有重要意义.关于脓毒症的研究在过去的几十年取得了巨大进展.大量研究表明,线粒体功能障碍程度与脓毒症的预后密切相关.microRNA是一类内源性非编码小分子RNA,在基因转录后水平调控基因和生物蛋白表达,进而调节线粒体的生物功能和氧化应激作用,对脓毒症的进程和预后有重要影响.现对microRNA在脓毒症线粒体功能障碍的相关研究作一综述.     

核因子E2相关因子2对脓毒症胰腺损伤保护作用的研究

脓毒症是重症患儿继发胰腺损伤的重要原因,胰腺急性损伤后可引起炎症介质大量释放,加剧机体炎症反应及应激状态,使病情进一步恶化。核因子E2相关因子2（ nuclear factor-E2-related af ctor 2,Nrf2）是人体重要的保护性转录因子,可激活人类基因组中500多种基因的表达,其中大部分具有细胞保护作用。研究证实Nrf2具有的细胞保护作用主要包括调控炎症反应、抗氧化应激、改善线粒体功能、减弱毒性蛋白的聚集等。本文就Nrf2保护脓毒症导致胰腺损伤的主要机制作一综述。     

尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白测定对危重症患儿急性肾损伤的早期诊断意义

目的 评估尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（urine neutrophil gelatinase-associated lipocalin,uNGAL）对PICU患儿急性肾损伤的早期诊断价值.方法 对象是上海交通大学附属儿童医院2013年4月至6月期间PICU收治的80例危重症患儿.入PICU后连续观察72 h,根据急性肾损伤（acute kidney injury,AKI） pRIFLE标准将患儿分为AKI组15例和非AKI组65例.根据脓毒症的诊断标准将患儿分为脓毒症组31例和非脓毒症组49例,于入科6h内、24 h、48 h及72 h留取患儿尿液和血液测定uNGAL和血肌酐（serum creatinine,Scr）.比较AKI组与非AKI组、脓毒症未合并AKI组与非脓毒症非AKI组、脓毒症合并AKI组与脓毒症未合并AKI组间uNGAL水平的差异,以及AKI组Scr和uNGAL之间的相关度,绘制ROC曲线评价48 h uNGAL和Scr对危重症患儿AKI诊断的敏感性和特异性.结果 80例患儿中有13例进展为AKI.（1）AKI组6h内、24 h、48 h、72 h uNGAL[M（QR）,ng/ml]水平分别为863.00（696.00）、700.50（580.00）、365.50（285.00）、289.50（319.30）,明显高于非AKI组[20.00（106.00）、20.00 （85.30）、20.00（101.00）、20.00（36.00）] （P ＜0.01）.（2）新发展AKI组患儿uNGAL值各时间点均明显高于非AKI组,两组48 h Scr水平间差异有统计学意义.（3）脓毒症未合并AKI组uNGAL水平病初时升高,48 h后逐渐降至正常,与非脓毒症非AKI组比较差异无统计学意义.（4）脓毒症合并AKI组uNGAL水平持续明显升高,与脓毒症未合并AKI组比较差异有统计学意义（P＜0.01）.（5）48 h uNGAL和Scr的ROC曲线下面积分别为0.902（95％ CI：0.801 ～1.004）和0.874（95％ CI：0.768 ～0.981）.结论 uNGAL在儿童危重症合并AKI时较Scr提前24 ～ 48 h升高,反映疾病的严重程度,可以作为PICU患儿AKI的早期诊断标志物.     

红细胞分布宽度对脓毒症患儿急性肾损伤的预测价值

目的 初步探讨红细胞分布宽度（RDW）对脓毒症患儿急性肾损伤（AKI）的早期预测价值。方法 126例脓毒症患儿根据是否合并AKI分为AKI组（66例）及非AKI组（60例）,另以RDW值的均数为界,分为高RDW组（58例）及低RDW组（68例）。比较各组年龄、性别比、体质指数（BMI）、急性生理和慢性健康评分（APACHE Ⅱ评分）、序贯器官衰竭估计评分（SOFA评分）、血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、尿酸（UA）、C反应蛋白（CRP）、血常规,并分析与RDW独立相关的因素。结果 AKI组与非AKI组在年龄、男女比例、BMI、CRP、SOFA评分、APACHE Ⅱ评分等方面的差异无统计学意义（P > 0.05）,AKI组的血清BUN、Cr、UA、RDW高于非AKI组（P < 0.05）。高RDW组与低RDW组在年龄、男女比例、BMI等方面的差异无统计学意义（P > 0.05）,但高RDW组的BUN、Cr、UA、CRP、SOFA评分、APACHE Ⅱ评分、血红蛋白、平均红细胞体积等较高（P < 0.05）。多元线性回归分析提示：与RDW独立相关的因素包括年龄、性别、APACHE Ⅱ评分、Cr、Hb、MCV。结论 脓毒症患儿红细胞分布宽度对于早期预测肾损伤具有一定的临床价值。     

血清miR-21-3p对脓毒症患儿并发急性肾损伤的预测价值

目的 探讨血清miR-21-3p及其联合血肌酐（Scr）、胱抑素C（Cys-C）及肾损伤分子-1（KIM-1）对脓毒症患儿并发急性肾损伤（AKI）的预测价值。方法 2016年1月至2019年3月诊断为脓毒症的患儿142例,根据是否并发AKI分为AKI组（n=49）和非AKI组（n=93）。检测两组血清miR-21-3p、Scr、Cys-C及KIM-1水平,绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-21-3p、Scr、Cys-C及KIM-1水平预测AKI的价值,Pearson相关分析血清miR-21-3p表达水平与Scr、Cys-C及KIM-1表达水平的相关性。结果 AKI组血清miR-21-3p、Scr、Cys-C及KIM-1水平明显高于非AKI组（P < 0.05）。ROC曲线分析结果显示血清miR-21-3p、Scr、Cys-C及KIM-1水平四项联合预测脓毒症患儿并发AKI的曲线下面积（0.962,95% CI：0.906~0.998）均分别大于上述各单项指标预测的曲线下面积（P < 0.05）,且敏感度（97.0%）和特异度（91.4%）最高。相关分析显示,AKI组血清miR-21-3p表达水平与Scr、Cys-C及KIM-1表达水平均呈正相关（r=0.704、0.812、0.863,P < 0.01）。结论 血清miR-21-3p表达水平在脓毒症并发AKI患儿中明显升高,联合Scr、Cys-C及KIM-1指标对预测脓毒症并发AKI具有较高的价值。     

肾脏缺血再灌注损伤的免疫学机制研究进展

固有免疫和适应性免疫参与肾脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI).在IRI急性期,肾血管内皮细胞黏附分子表达和血管通透性增加;肾小管上皮细胞补体C3沉积和Toll样受体2、4表达增加;树突状细胞早期活化导致中性粒细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞、CD4+T细胞和B细胞等迁移到缺血后肾脏.可溶性免疫分子(如补体活化产物、细胞因子和趋化因子)参与肾脏IRI急性损伤和(或)修复.Foxp3+调节性T细胞和旁路活化的巨噬细胞参与肾脏IRI修复;而B细胞限制IRI修复.     

瘦素在严重感染及脓毒性休克中作用的研究进展

瘦素(leptin,LP)是一种主要由脂肪细胞分泌的细胞因子,受肥胖基因调节,通过中枢和外周调节摄食和体质量的平衡.同时,LP参与免疫应答、抗炎和创伤修复等病理生理过程.新近发现LP可通过抑制中性粒细胞和单核细胞活化和坏死,对危重病患者脏器功能可能有保护作用.严重感染时,LP的改变对判断脓毒症及脓毒性休克预后有一定的参考价值.本文综述在严重感染及脓毒性休克时LP的表达及与主要细胞因子的关系.     

水通道蛋白2在脓毒症大鼠肾脏的表达及意义

目的 探讨水通道蛋白2(AQP2)在脓毒症大鼠肾脏的表达及对水代谢调节的意义.方法 将6周龄Wistar大鼠64只,随机分为假手术组和手术组各32只,采用盲肠结扎穿孔法(CLP)复制脓毒症模型.每组分为3、6、12和24 h 4个亚组,各8只,分别留取尿液、血液、肾脏标本.观察尿量、尿渗透压和肾功能,HE染色光镜观察肾脏病理变化,采用实时定量PCR方法检测AQP2 mRNA表达,免疫组织化学方法检测AQP2的蛋白表达.结果 手术组大鼠术后3 h尿量减少、尿渗透压增高,6 h后尿量逐渐增多、尿渗透压降低;血肌酐和尿素6 h开始升高,24 h达高峰;随术后时间延长肾脏病理损害加重,主要表现为肾小管上皮细胞之间间隔消失,细胞核消失;肾小球球襻融合,细胞结构不清;间质可见点灶状炎性细胞侵润.AQP2 mRNA的表达在术后3 h增高,12、24 h明显减低;AQP2蛋白表达在术后12 h下降,24 h最低,较假手术组均有显著性差异(P<0.05).结论 AQP2参与脓毒症时肾脏水代谢的调节,AQP2表达下调导致脓毒症尿浓缩功能障碍的主要病理机制之一.