小儿CD56^＋急性髓系白血病临床生物学特征

目的 研究CD56^＋小儿急性髓细胞白血病（AML）的生物学特征及临床意义。方法 对80例初治小儿AML进行细胞形态学、免疫表型、多药耐药P糖蛋白（P170）检测、临床观察、并常规采用HAE方案诱导治疗，判定疗效。结果 综合我中心8年间小儿急性髓系白血病资料分析，CD56阳性率20．69％（30／145）。CD56^＋患儿在FAB分型中以M2b、M5、M7多见，CD56^＋组中免疫表型特征为多表达CD34（85．00％和44．11％P=0．01）。HLA—DR（76．66％和42．00％P=0．003）。和PgP（85．71％和25．58％P=0．001）。此外，CD56^＋AML患儿髓外浸润现象明显（77．27％和45．00％P=0．017），尤其是淋巴结（59．09％和22．50％P=0．006）和脾脏（63．63％和22．50％P=0．002）受累显著，CD56表达与年龄、性别、白细胞计数、血红蛋白含量、血小板计数、及外周血幼稚细胞数无关，也不影响CR率和无病生存时间（DFS），但达首次缓解时间较长，中位时间56天。结论 CD56^＋AML具有独特的，临床生物学特征，生物学侵袭性较强，多表达耐药蛋白P170，预后较差。建议初诊时监测CD56分子表达以判断预后。     

儿童难治性肺炎支原体肺炎常规免疫指标的年龄依赖性变化分析

目的　通过控制年龄因素,探讨难治性肺炎支原体肺炎（RMPP）常规免疫指标变化。方法　回顾性分析2016年1月至2019年12月复旦大学附属儿科医院住院的120例MPP患儿的常规免疫指标。参考中国不同年龄及性别的健康儿童的外周血淋巴细胞亚群的参考值,将120例患儿分为正常或异常组,对于异常组的患儿进一步分为减少组或增多组。比较普通型肺炎支原体肺炎（GMPP）与RMPP两组患儿常规免疫指标的变化的差异性。 结果　RMPP组淋巴细胞亚群异常的患儿比例均高于GMPP组, 两组CD3+, CD19+及NK细胞百分比的差异具有统计学意义（P＜0.05）。两组多数患儿均表现为淋巴细胞计数、 CD3+、 CD4+、 CD8+及NK细胞绝对计数减少。进一步对淋巴细胞减少的亚群分析, 发现两组CD3+及NK细胞计数、 CD3+及NK细胞百分比、 CD4+百分比、 CD4+/CD8+差异具有统计学意义（P＜0.05）。各组血清免疫球蛋白（IgA、 IgM、 IgG、 IgE）水平差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论　T细胞及NK细胞在MPP炎性反应中发挥重要作用, CD4+ 细胞及NK细胞与MPP的严重程度相关, 可能是RMPP的免疫致病机制之一。     

CD4^＋T淋巴细胞表面CD4^＋CD45RA和CD4^＋CD45RO在支气管哮喘患儿外周血中的表达

目的探讨CD4^＋CD45RA和CD4^＋CD45RO分子在支气管哮喘患儿中的表达及其意义。方法分别收集支气管哮喘发作期28例、支气管哮喘缓解期27例、健康对照儿童20例抗凝静脉血100μL，采用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的抗CIM单抗、藻红蛋白（PE）标记的抗CD45RA单抗和PE-菁蓝色素荧光素（PE—Cy5）标记的抗CD45RO单抗，流式细胞仪检测各组儿童外周血CD4^＋T淋巴细胞表面CD45RA和CD45RO的表达。采用SPSS13．0软件进行统计学分析。结果与健康对照和支气管哮喘缓解组患儿比较，支气管哮喘发作组患儿CD4^＋CD45RA^＋T细胞明显减少（q=12．47，8，39Pa〈0．05），CD4^＋CD45RO^＋T细胞显著升高（q=9．50，8．30Pa〈0．05），CD4^＋CD45RA^＋／CD4^＋CD45RO^＋细胞比值显著降低（q=8．96，6．21P。〈0．05）；支气管哮喘缓解组患儿CD4^＋CD45RA^＋T细胞较健康对照组明显升高（q=3．08P〈0．05），CD4^＋CD45RO^＋T细胞及CD4^＋CD45RA^＋／CD4^＋CD45RO^＋细胞比值与健康对照组比较差异无显著性（q=0．45，2．02Pa〉0．05）。结论外周血CD4^＋CD45RA^＋和CD4^＋CD45RO^＋T淋巴细胞平衡失调可能参与支气管哮喘的发病。     

肺炎患儿血CD16+CD56+、CD16+自然杀伤细胞占淋巴细胞比例的变化

目的探讨肺炎患儿CD16^＋CD56^＋、CD16^＋自然杀伤细胞（NK细胞）占淋巴细胞比例的动态变化及其意义。方法采用流式细胞术动态测定急性肺炎患儿32例治疗第2．5、10天及30例健康对照组儿童外周血NK细胞CD16^＋CD56^＋、CD16^＋占淋巴细胞比例的变化。结果肺炎患儿CD16^＋CD56^＋、CD16^＋NK细胞占淋巴细胞的比例在肺炎急性期、恢复期和康复期均显著低于健康对照组（Pa〈0．01），急性期、恢复期和康复期3组比较，杀伤活性强的NK细胞逐渐升高，各组比较有显著差异（Pa〈0．01）。结论动态监测肺炎患儿血CD16^＋CD56^＋、CD16^＋NK细胞占淋巴细胞比例对预测其病程及预后有重要意义。     

儿童严重脓毒症免疫功能的变化

目的 探讨儿童严重脓毒症体液免疫、淋巴细胞亚群和NK细胞水平变化,与病情严重程度及预后的关系.方法 2013年3月至2017年2月,上海交通大学附属儿童医院重症医学科收治严重脓毒症患儿共224例,其中82例于入PICU 24h内和治疗7d后至少2次进行体液免疫(IgG、IgM、IgA)、细胞免疫[淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD19+]和NK细胞(CD16+56+)测定,比较存活组(59例)与死亡组(23例)、不同器官功能状态患儿(累及出现器官功能障碍个数>3个共36例,2~3个共30例,1个共16例)的免疫功能变化.同期体检儿童15例作为正常对照组.结果 (1)严重脓毒症患儿入PICU时血NK细胞明显低于正常,治疗7 d后存活组NK细胞数量升高[(3.7±1.9)% 比(11.5±1.9)%,P<0.05];严重脓毒症组与正常对照组IgG、IgM、IgA比较差异无统计学意义(均P>0.05),而淋巴细胞亚群中CD3+、CD4+、CD8+细胞比较差异有统计学意义[(62.8±8.5)% 比(70.9±2.3)%、(33.3±7.0)% 比(39.8±1.8)%、(22.6±2.8)% 比(34.8±15.6)%,均P<0.05].(2)淋巴细胞亚群CD3+、CD4+及NK细胞比例随患儿儿童危重病例评分降低、第三代儿童死亡危险评分增高及器官功能障碍数目增多,呈明显下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05),血清IgG、IgM、IgA及CD19+细胞变化差异无统计学意义(P>0.05).(3)死亡组患儿在入院24h内NK细胞及CD3+、CD4+细胞水平明显低于存活组[(1.5±0.5)% 比(4.7±1.4)%,(55.1±5.0)%比(66.4±7.4)%,(29.7±5.2)%比(35.0±7.2),均P<0.05].结论 未发现免疫球蛋白水平与严重脓毒症患儿病情严重程度有相关性;NK细胞及CD3+、CD4+淋巴细胞降低是脓毒症病情加重的标志,可作为评估严重脓毒症患儿预后的参考指标.     

急性白血病患儿外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平测定及临床意义

为探讨急性白血病患儿外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平及意义 ,采用流式细胞技术测定 90例急性白血病患儿外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平。结果 ,急性白血病患儿外周血T淋巴细胞亚群中CD3+ 、CD4+ 、CD4+ CD8+ 均明显低于对照组水平 (P <0 0 1) ,CD8+ 高于对照组水平 (P <0 0 1) ,NK细胞 (CD1 6+ 56+ )明显低于对照组水平 (P <0 0 1) ,经治疗缓解者T淋巴细胞亚群和NK细胞达正常水平。结果表明 ,T淋巴细胞亚群和NK细胞可作为急性白血病辅助诊断指标 ,为临床治疗提供实验依据     

肾母细胞瘤患儿外周血调节性T细胞和自然杀伤T细胞的表达研究

目的 研究肾母细胞瘤患儿外周血CD4+CD25+CD127low 调节性T细胞（Treg）和CD3+CD16+CD56+自然杀伤T细胞（NKT）的表达变化,初步探讨发生改变的原因及其临床意义。方法 选取2015年11月至2016年7月就诊的21例肾母细胞瘤患儿作为病例组,21例于本院体检的同年龄段健康儿童为健康对照组,采用流式细胞术检测两组儿童外周血中 CD4+CD25+CD127low T细胞占CD4+T细胞百分比和CD3+CD16+CD56+T细胞占CD3+T细胞百分比,分别代表Treg水平和NKT水平。结果 病例组肾母细胞瘤患儿外周血Treg水平低于健康对照组（P < 0.05）;病例组肾母细胞瘤患儿外周血NKT水平高于健康对照组（P < 0.05）。结论 Treg和NKT水平变化与肾母细胞瘤的发生与发展有关,Treg和NKT水平可能是反映肾母细胞瘤患儿免疫功能状态的较好指标。     

婴儿麻疹急性期免疫状态的临床研究

目的 探讨婴儿麻疹急性期的T细胞亚群、自然杀伤细胞(NK)和CD19+T细胞改变及其发病机制,为指导临床治疗提供理论依据.方法 采用直接免疫荧光法,应用流式细胞仪检测25例麻疹患儿外周血T细胞亚群、NK和CD19+T细胞,并与对照组和儿童麻疹组比较.结果 (1)婴儿麻疹急性期淋巴细胞绝对数明显减少,但亚群中CD3+、CD4+T细胞未见减少;(2)婴儿麻疹感染急性期CD19+T细胞均明显低于对照组和儿童麻疹感染急性期[(14.67±8.70)%vs(24.18±6.72)%vs(24.02±8.83)%](P＜0.01).结论 婴儿期麻疹感染时,CD3+、CD4+T细胞抑制不明显,CD19+T细胞受到严重的抑制.     

过敏性紫癜患儿急性期细胞免疫功能变化

目的 研究过敏性紫癜患儿急性期外周血淋巴细胞免疫的变化及其临床意义。方法 采用流式细胞术(FCM)对23例过敏性紫癜急性期患儿外周血淋巴细胞及其亚群：CD3^ 、CD4^ 、CD8^ 、CD19^ 、CD16 56^ 进行定量检测，并用^3H—TdR标记法测定非杀伤(NK)细胞活性。结果 过敏性紫癜急性期患儿外周血CD4^ ,CD4^ /CD8^ ,CD16 56^ 、NK细胞活性均显著低于健康对照组(P＜0.01)，而CD8^ 活性显著升高(P＜0．05)，CD19^ 显著升高(P＜0.01)，均有统计学意义，CD3^ 稍升高，无明显差异(P＞0．05)。结论 过敏性紫癜患儿急性期存在细胞免疫功能失调，主要表现在T细胞亚群紊乱，B细胞呈多克隆活化，NK细胞数量及活性降低。     

sCD40L、CD4＋CD45RA＋T细胞及CD4＋CD45RO＋T细胞在儿童ITP中的作用

目的探讨协同刺激分子可溶性CD40配体（sCD40L）及CD4＋T辅助细胞CD45RA和CD45RO亚群在儿童特发性血小板减少性紫癜中的变化。方法用ELISA法检测25例ITP患儿血浆sCD40L水平;用微量全血流式细胞术法检测ITP患儿外周血CD4＋T辅助细胞CD45RA和CD45RO的表达率;并对sCD40L与血小板计数进行相关分析。结果ITP患儿血浆sCD40L浓度明显升高,与对照组比较差异有显著性（P〈0.05）;CITP组血浆sCD40L浓度升高更为明显,与AITP组或对照组比较差异均有显著性（P〈0.05）。ITP患儿CD4＋CD45RA＋T细胞表达率下降,CD4＋CD45RO＋T细胞表达率升高,差异均有显著性意义（P〈0.05）,而AITP和CITP之间差异无显著性（P〉0.05）。血浆sCD40L与外周血小板计数无相关性（r=-0.047,P〉0.05）。结论CD40L高表达导致的CD40L/CD40信号传导通路异常可能参与ITP发病;ITP患儿存在Th细胞亚群偏移,表现为Th1细胞减少,Th2细胞增多。     

手足口病患儿外周血淋巴细胞亚群变化的临床研究

目的 探讨手足口病(HFMD)患儿外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞、NK细胞的变化特点.方法 将41例HFMD患儿分为一般病例组23例,重症病例组18例,选择20例健康儿童作为对照组,采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞、NK细胞.结果 CD3~+与CD4~+细胞表达:HFMD重症组、一般病例组、对照组依次显著降低(P＜0.01);CD8~+细胞表达:HFMD重症组、一般病例组、对照组依次显著降低(P＜0.05);NK细胞表达:HFMD重症组与一般病例组相似(P＞0.05),皆高于对照组(P＜0.05);B淋巴细胞表达:HFMD重症组、一般病例组、对照组依次升高(P＜0.01).结论 HFMD患儿免疫系统功能紊乱,其中细胞免疫有不同程度的抑制,体液免疫反应亢进.     

新生儿缺氧缺血性脑病细胞因子与细胞免疫的变化

目的 研究新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）患儿白介素（IL）-1β、IL-10水平及外周血T细胞亚群的变化。探讨免疫学变化在HIE发病中的意义。方法应用ELISA法动态检测HIE患儿及足月正常新生儿出生后第1、3、7天血清IL-1β、IL-10水平。以Ficoll常规分离外周血单个核细胞，用免疫组化法检测HIE患儿及足月正常新生儿生后第1、3、7天CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋毒细胞百分率。结果HIE患儿血清IL-1β、IL-10水平均显著高于正常对照组（P〈0．05，P〈0．01）且与HIE严重程度有关，HIE患儿外周血CD3^＋,CD4^＋、CD8^＋细胞数量与对照组相比差异有显著性（P〈0．01），在不同程度HIE患儿中,以重度HIE患儿细胞免疫功能异常最明显。结论HIE患儿存在一定程度的细胞免疫功能紊乱。IL-1β、IL-10和T细胞亚群参与HIE的病理生理过程。     

小儿脓毒症CD62p、CD63及CD64分子变化及临床意义探讨

目的探讨脓毒症患儿血小板仅颗粒膜糖蛋白（CD62p）、溶酶体膜蛋白（CD63）及中性粒细胞表面膜糖蛋白（CD64）的变化及意义。方法2010年3月至2013年3月哈尔滨市儿童医院感染内科收治的脓毒症患儿56例,其中严重脓毒症16例,一般脓毒症40例,另设健康对照组34例。应用流式细胞术检测儿童外周血的血小板表面活性标记糖蛋白CD62p、CD63及中性粒细胞CD64表达,并进行比较。结果严重脓毒症组患儿外周血的CD62p、CD63及CD64水平明显高于一般脓毒症组,差异有统计学意义（P〈0．01）;一般脓毒症组患儿CD62p、CD63及CD64水平明显高于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）。相关性分析显示,脓毒症患儿的CD62p、CD63与CD64水平呈正相关（r=0．817、0．796,P均〈0．001）,CD62p、CD63、CD64水平与小儿危重病例评分呈正相关（CD62p：r=0．883,P〈0．001;CD63：r=0．862,P〈0．001;CD64：r=0．805,P〈0．001）。结论CD62p、CD63、CD64与感染和炎症严重程度密切相关,可作为评价疾病严重程度及预后的指标。     

儿童传染性单核细胞增多症T细胞亚群变化

目的 探讨传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)患儿T细胞亚群的变化.方法 选取2005年1月至2010年12月在我院住院确诊为Epstein-Barr( EB)病毒感染引起的IM患儿60例为IM组,同期来我院门诊健康体检患儿36例为对照组.所有患儿行血常规、血涂片、T细胞亚群、肝肾功能及病毒抗体、肝炎病毒抗体检测.T细胞亚群检测包括CD3、CD4、CD8、CD4/CD8.结果 与对照组比较,IM组患儿CD3( 81.55％±9.04％)、CD8 (58.13％±13.35％)比例较对照组(53.58％±5.97％)、(31.22％±8.72％)明显升高(P＜0.05);CD4( 18.19％±7.61％)、CD4/CD8(0.37±0.33)比值较对照组(36.98％±5.32％、1.98±0.41)明显降低(P＜0.05).IM组患儿白细胞计数、异型淋巴细胞比值及谷丙转氨酶与CD4/CD8的下降无相关性(P均＞0.05).结论 EB病毒感染引起IM患儿免疫功能显著低下,可早期进行免疫干预治疗.     

病毒性肺炎患儿自然杀伤细胞亚群、T细胞亚群及血IL-2、IL-4、INF-γ变化的研究

目的 探讨病毒性肺炎患儿自然杀伤(NK)细胞亚群、T细胞亚群及血IL-2、IL-4、INF-γ的动态变化及临床意义.方法 采用流式细胞术测定32例病毒性肺炎患儿急性期(肺炎起病2?d内)、恢复期(肺炎起病5?d内)外周血NK细胞亚群、T细胞亚群,用ELISA法测定血IL-2、IL-4、INF-γ水平,用乳酸脱氢酶释放法测定NK细胞活性变化,并与30例健康对照组儿童进行比较.结果 (1) 病毒性肺炎患儿CD16+CD56+、CD16+NK细胞在急性期分别为(0.73±0.17)%、(0.39±0.2)%,恢复期分别为(1.47±0.22)%、(0.89±0.14)%;急性期与恢复期比较,恢复期CD16+CD56+、CD16+NK细胞明显升高(P<0.01),但均显著低于对照组(P<0.01).两组NK细胞亚群变化与其活性改变呈正相关.病毒性肺炎患儿CD56+NK细胞与健康儿童差异无显著性(P>0.05).(2) 与对照组相比,病毒性肺炎患儿的急性期、恢复期IL-2、IL-4均无明显改变,差异无显著性(P>0.05);急性期INF-γ无明显改变,差异无显著性(P>0.05),而恢复期INF-γ[(28.10±1.38)?μg/L]明显高于急性期[(22.78±1.19)?μg/L],差异有非常显著性(P<0.01).(3) 与对照组相比,病毒性肺炎患儿CD4+、CD4+/CD8+T细胞计数在急性期与恢复期均无明显改变,差异无显著性(P>0.05).病毒性肺炎急性期、恢复期CD8+T细胞均低于对照组,差异有显著性(P<0.05),但病毒性肺炎急性期、恢复期间差异无显著性(P>0.05).结论 病毒性肺炎患儿NK细胞活性降低,活性与亚群数目呈正相关;病毒性肺炎患儿抑制性T细胞功能低下.病毒性肺炎急性期NK细胞激活是多因素共同作用的结果 .     

脓毒症患儿T细胞亚群和sjTREC基因水平的评估

目的 本研究旨在评价脓毒症患儿T细胞亚群和sjTREC基因水平,为其合理的免疫调节治疗提供理论依据.方法 根据感染严重程度将患儿分为脓毒症组(25例)、严重脓毒症组(23例)和正常对照组(50例).在使用血制品、免疫制剂及营养支持前测定各组患儿T细胞亚群.通过实时荧光定量PCR法分别检测各组患儿sjTREC基因水平变化,利用双标准曲线法对sjTREC基因水平进行绝对定量,检测结果用sjTREC与Co内参基因拷贝数比值(sjTREC/Cα×2×1000)表示,结果应用SPSS 16.0软件进行统计学处理.结果 严重脓毒症组患儿CD3+、CD4+和CD8+细胞比例明显低于正常对照组(P＜0.01);严重脓毒症组患儿sjTREC基因水平为173.86±38.37,明显低于脓毒症组(345.15±66.21)和正常对照组(389.42±50.20),差异有统计学意义(P＜0.01).结论 严重脓毒症患儿存在T细胞亚群数量紊乱和胸腺输出功能下降,故在早期进行细胞免疫支持可能会改善临床预后.     

调节性T细胞及Foxp3基因在特发性血小板减少性紫癜患儿免疫失调中的作用

特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP）是一种儿童常见的出血性自身免疫病，但发病机制尚未完全明了，难以找到真正特异而有效的治疗方法。近年研究发现CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（regulation T cell，Tr细胞）是维持机体免疫耐受的重要调控者，在自身免疫病中的作用逐渐成为研究的热点。为探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与ITP发生、发展的关系及其临床意义，我们于2005年2月-2006年7月采用流式细胞术和RT—PCR检测了ITP患儿外周血中Tr细胞的数量及相关基因Foxp3的表达。     

儿童复发性呼吸道乳头状瘤病患儿T细胞亚群的变化研究

目的 分析儿童复发性呼吸道乳头状瘤病（Jo-RRP）患儿外周血T细胞亚群的变化并探讨其临床意义. 方法 40例Jo-RRP患儿为病例组,选择同期体检的20例儿童做健康对照组,采用流式细胞仪对Jo-RRP病例组、健康对照组外周血T细胞亚群进行检测,并分析患儿T细胞亚群的变化与疾病进程的相关性. 结果 Jo-RRP病例组CD3＋ T、CD4＋ T细胞百分率及CD2/CD8＋比值较健康对照组降低,差异有统计学意义（P＜0.05）. 结论 Jo-RRP患儿存在T细胞介导的免疫功能障碍,免疫功能降低在Jo-RRP的进程中起重要的作用.     

高胆红素血症新生儿细胞免疫状态

近年来研究发现胆红素是一种潜在的免疫毒性物质，本研究以高间接胆红素血症患儿为研究对象，选择可反映红细胞免疫粘附功能的CD35及反映T细胞亚群功能的CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋及CD4^＋／CD8^＋为检测指标，以探讨新生儿高胆血症的免疫功能变化。