聪圣胶囊对去皮层血管大鼠前脑BDNF及其受体trkB作用的实验研究

本研究采用WISTAR成年大鼠 ,去除大鼠脑皮层血管建立模型 ,免疫组化采用ABC法 ,研究发现模型组大鼠大脑皮质、海马、大细胞基底核中的BDNF(脑源性神经营养因子 )阳性细胞数量显著减少 ,有的BDNF阳性细胞呈空泡状 ,有的呈萎缩状 ,胞体明显缩小 ,扣带皮质、海马CA1区最明显。结果说明去皮层血管后 ,聪圣胶囊可能激活大鼠皮质、海马等处神经元BDNF、trkB及其mRNA的表达 ,通过其旁分泌和自分泌方式作用自身或邻近神经元 ,也可能通过靶源性的方式作用于大细胞基底核的胆碱能神经元 ,以保护皮质、海马、大细胞基底核神经元免遭变性坏死。     

学习记忆功能障碍与基底前脑胆碱能神经元改变的关系

目的:通过大鼠脑震荡模型观察基底前脑胆碱能神经元的改变,初步探讨脑震荡后学习记忆功能障碍与基底前脑胆碱能神经元改变的关系.方法:采用自制单摆式机械打击装置,建立脑震荡大鼠模型,用Morris水迷宫(MWM)实验评价学习记忆功能,用胆碱乙酰转移酶(ChAT)标记大鼠基底前脑的胆碱能细胞,并进行定量检测.结果:与对照组相比,脑震荡后1～7天进行MWM实验的大鼠在前3天找到平台的时间显著延长(P<0.05);与对照组相比,基底前脑内侧隔核(MSN)、斜角带核垂直支(VDB)ChAT阳性表达细胞数在脑震荡后明显减少(伤后1、2、4、8天组与对照组比较P<0.05).结论:基底前脑胆碱能神经元在脑震荡后明显减少,这可能与脑震荡后学习记忆功能损害有关.     

糖基化终末产物对大鼠基底前脑胆碱能神经元的损伤作用

目的 研究糖基化终末产物(AGE BSA)对原代培养的基底前脑胆碱能神经元形态、生存率、凋亡率、胆碱乙酰转移酶(ChAT)与乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响。在体外水平研究AGEs在阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)神经元缺失发生中的作用及其可能机制。方法 原代培养大鼠基底前脑胆碱能神经元,观察细胞生长变化,进行免疫荧光细胞化学鉴定;用300μg/mLAGE BSA以及糖基化终末产物受体(RAGE)中和抗体阻断处理原代培养的基底前脑胆碱能神经元,作用不同时间后置于倒置显微镜下观察细胞形态变化;采用MTT法检测神经元的存活率;采用流式细胞术检测神经元的凋亡率;经比色法检测ChAT和AchE的活性变化。结果 AGE-BSA干预胆碱能神经元72h后,细胞形态发生明显损伤性变化,细胞存活率明显降低,凋亡率增高,ChAT活性明显下降,AchE活性明显升高;RAGE中和抗体阻断组72h较之AGE-BSA组,细胞形态损伤变化较轻,生存率偏高,凋亡率较低,ChAT活性较高,AchE活性偏低,但比空白对照组生存率降低,凋亡率增高,ChAT活性明显下降,AchE活性明显升高。结论 糖基化终末产物作用72h可以引起胆碱能神经元的损伤,并造成ChAT活性下降和AchE活性明显升高,部分阻断其与特异性受体RAGE的结合可以减弱其损伤作用,提示糖基化终末产物通过其受体参与了对胆碱能神经元的损伤作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对阿尔茨海默病模型大鼠的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对红藻氨酸损毁Meynert基底核致阿尔茨海默病模型大鼠学习和记忆能力的影响及脑内胆碱能纤维密度的变化。方法痴呆组、痴呆治疗组及痴呆对照组大鼠前脑Meynert基底核注射红藻氨酸制造阿尔茨海默病模型;正常对照组注射生理盐水。痴呆治疗组造模后30 min、1、3、5、7 d右侧侧脑室注射bFGF;痴呆对照组同时间注射生理盐水。30 d后Y迷宫测试正常对照组、痴呆组、痴呆对照组及痴呆治疗组大鼠学习和记忆能力;AchE细胞化学染色,并测量基底前脑皮层及海马区AchE纤维密度。结果痴呆组大鼠Y迷宫学习及记忆能力较正常对照组下降(P<0.01),AchE纤维密度减低(P<0.01)。治疗组Y迷宫学习及记忆能力较痴呆对照组有改善(P<0.01),AchE纤维密度亦有所增加(P<0.01),但没有达到正常对照组水平(P<0.01)。结论红藻氨酸前脑Meynert基底核可成功制造阿尔茨海默病模型;bFGF可提高阿尔茨海默病模型大鼠基底前脑皮层及海马区AchE纤维密度,改善其Y迷宫记忆能力。     

慢性酒精中毒大鼠学习记忆及内侧隔核胆碱能神经元的变化

目的 研究酒精致大鼠学习记忆障碍与基底前脑内侧隔核胆碱能神经元变化的关系。方法 将24只雄性Wister大鼠随机均分成对照组和酒精中毒组．酒精中毒组大鼠隔日胃内注入含酒精（2．5g／kg）的蒸馏水2ml共90d，对照组则注入不舍酒精的蒸馏水2ml。然后采用Morris水迷宫扣免疫组织化学技术，分析大鼠基底前脑内侧隔核胆碱能神经元、海马星形胶质细胞数的变化扣学习记忆能力的关系。结果酒精中毒组大鼠Morris水迷宫潜伏期明显延长，基底前脑内侧隔核胆碱能神经元数目明显减少．海马星形胶质细胞数目反应性增生。结论 酒精致大鼠学习记忆能力障碍与基底前脑内侧隔核胆碱能神经元减少有关。     

淫羊藿素对淀粉样蛋白25-35片段所致大鼠胆碱能神经元损伤的保护作用

目的 探索淫羊藿素(ICT)对淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)所致胆碱能神经元损伤的保护作用.方法 40只18月龄SD大鼠随机均分为对照组、模型组、ICT低剂量组(20 mg/kg)、ICT中剂量组(40 mg/kg)、ICT高剂量组(80 mg/kg),模型及ICT治疗组应用ICT灌胃预处理3d后,在大鼠鼠脑海马内注入Aβ25-35造模,ICT继续灌胃2周后,水迷宫观察各组大鼠学习记忆能力,ELISA检测大鼠海马内乙酰胆碱酯酶(AchE)和胆碱乙酰化酶(ChAT)的含量.结果 模型组大鼠较对照组大鼠出现明显学习记忆功能减退,且海马组织中AchE和ChAT含量较对照组明显下降.然而,ICT各剂量治疗组较模型组大鼠学习记忆功能减退明显改善,且AchE和ChAT含量显著增加.结论 ICT可通过改善脑内胆碱能神经功能减轻Aβ25-35所致的大鼠学习记忆功能减退.     

复方千层塔合剂对阿尔茨海默病大鼠胆碱能系统的影响

目的 通过观察复方千层塔合剂对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马神经递质的影响,研究本方的作用机理.方法 将Wistar大鼠随机分为6组,将神经毒物IBO定位注射至大鼠胆碱能神经元聚集的Meynert基底核,建立胆碱能损伤的痴呆动物模型,并选择海马组织胆碱乙酰转移酶(ChAT)活性作为观察指标.结果 复方千层塔合剂(高、低剂量组)大鼠海马区ChAT活性增加明显高于模型组,且高剂量组接近空白组水平.结论 复方千层塔合剂对中枢胆碱能损伤具有修复作用,从而达到改善学习记忆的目的.     

复方丹参对老年痴呆模型大鼠海马和大脑皮层ChAT、AchE活性的影响

目的研究复方丹参对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力,海马和大脑皮层胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响。方法大鼠海马注射β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)造成AD模型,采用硫磺素染色来观察模型组大鼠海马老年斑沉积和神经原纤维缠结情况,采用Morris水迷宫检测学习记忆水平,用比色法测定ChAT、AchE活性变化。结果海马注射Aβ1-40后,大鼠海马出现大量老年斑沉积和神经原纤维缠结,大鼠找到平台的时间和游泳路程明显延长,海马和皮层中ChAT的活性明显降低,AchE活性有增加趋势,但与假手术组相比,没有显著差异(P>0.05);治疗给予复方丹参能显著改善AD大鼠的学习记忆障碍,明显提高AD大鼠海马和皮层中ChAT的活性,但对AchE活性影响不明显。结论复方丹参能提高AD模型大鼠脑组织ChAT活性,改善AD模型大鼠空间学习记忆损害,提示药物的作用可能与胆碱递质合成增加有关。     

针刺督脉穴对拟AD大鼠海马区AchE、ChAT 活性的影响

目的探讨针刺对拟AD大鼠大脑海马胆碱能神经功能的影响.方法应用迷宫试验观测针刺对拟AD大鼠学习记忆能力的影响;并分别采用巯基比色分析法和免疫组化方法测定大鼠海马区乙酰胆碱酯酶(AchE)和胆碱乙酰化酶(ChAT)活性的变化.结果针刺组大鼠海马区AchE、ChAT活性比模型组有显著提高(P＜0.01 ). 经迷宫学习记忆能力测试,针刺组大鼠成绩好于模型组(P＜0.01 ).结论针刺督脉穴可增强海马区AchE和ChAT活性,改善拟AD大鼠的记忆功能障碍.     

化呆醒神汤对大鼠血管性痴呆模型病理变化及胆碱能纤维的影响

本实验采用反复缺血再灌方法复制出血管性痴呆 (VD)动物模型 ,以具有调理脾胃、消痰化瘀功效的化呆醒神汤进行治疗。光、电镜观察发现VD大鼠海马CA1区大量神经元出现变性、坏死及脱失 ,线粒体肿胀、空泡样变性、突触变性 ;组织染色及定量分析发现VD大鼠海马CA1区、额叶皮质内乙酰胆碱酯酶 (AchE)阳性纤维数量显著减少。化呆醒神汤可以明显减轻VD大鼠海马CA1区神经元损伤 ,增加海马CA1区、额叶皮质内AchE阳性纤维数量。     

聪圣胶囊对早老龄小鼠脑缺血再灌后学习记忆障碍的影响

采用早老龄小鼠 ,制备脑缺血再灌合并尾部放血降压致学习记忆功能障碍拟血管性痴呆模型。通过避暗试验、水迷宫试验和脑组织病理形态学 ,观测了聪圣胶囊对模型小鼠学习记忆和脑病理损伤的改善作用。实验结果表明 ,采用双侧颈总动脉反复缺血再灌合并尾部放血降压的方法可明显降低早老龄小鼠的学习记忆能力 ,给药 4 5d后 ,聪圣胶囊各剂量均可使小鼠学习记忆障碍程度得到改善 ,并可减轻脑组织病理损伤程度。     

促红细胞生成素对血管性痴呆大鼠胆碱能神经纤维保护作用的研究

目的：研究促红细胞生成素（Epo）对血管性痴呆（VD）大鼠胆碱能神经纤维的保护作用,探讨EPO对脑缺血后损伤的保护作用及其机制。方法：将大鼠随机分为假手术组、用药组和模型组,每组12只。用药组和模型组按“两血管阻断＋硝普钠降压”法建立VD大鼠模型,并给予Epo治疗,采用Morris水迷宫实验、Nissl染色、乙酰胆碱酯酶（AchE）组化染色和AchE活性测定法检测Epo对学习记忆、细胞形态和AchE表达和活性的作用。结果：与假手术组和用药组相比,Epo明显缩短VD模型组大鼠Morris水迷宫中的逃避潜伏期,显著增加了海马CA1区锥体细胞及尼氏小体数量,并且显著提高了AchE免疫阳性细胞数量和AchE活性（P＜0.01, P＜0.05）。结论：EPO可改善VD大鼠行为学表现和病理损害,其机制可能与保护胆碱能神经纤维有关。     

Animal model of vascular dementia and its cholinergic mechanism

Vasculardementia(VD),oneofmajortypesofseniledementia,inflictsmoreandmoreoldpeopleallovertheworld,andhasbeenregardedasanimportantmedicalandsocialproblem.Recently,widespreadat-tentionhasbeenpaidtoitsprevention.However,theexactpathogenicmechanismofVDremainsunclear,andareliableanimalmodelofVDhasnotyetbeenestablished,whichsignificantlypreventsthefurtherstudyofthisproblemwithanimalexperiment.Recentstudiessuggestthatchronichypoperfusionofcerebralbloodflow(CBF)oftheforebrainmaybeoneofthemajorcause…     

碱性成纤维细胞生长因子对阿尔茨海默病模型大鼠的影响

OBJECTIVE: To study the effects of basic fibroblast growth factor (bFGF) on the praxiology and cerebral acetylcholinesterase (AchE) fiber density of kainic acid-lesioned rat models of Alzheimer disease (AD). METHODS: AD models were induced in 30 normal adult rats by damaging the rat nucleus basalis of Meynert (NBM) with kainic acid, and the models were then assigned into 3 groups to receive cerebroventricular infusion with bFGF, saline or nothing for treatment, serving respectively as the treatment group at 30 min, 1, 3 and 7 d after the injury, sham treatment group or injury group. Another 10 rats were used as control group, which received saline injections into the NBM without further treatment. The learning and memory abilities of the rats were measured through Y-maze test 30 d after the operations, and AchE cytochemical study was conducted to calculate the density of the AchE fibers in the hippocampus and forebrain of the rats. RESULTS: In comparison with the injury group, improvement was noted in the memory ability of rats with bFGF treatment and the density of AchE fiber was also significantly increased (P<0.01), but the improvement in both respects failed to reach the normal level (P<0.01). CONCLUSIONS: AD model can be successfully established by damaging the NBM with kainic acid, and bFGF is beneficial in improving the impaired learning and memory abilities and increasing the density of AchE fibers in the basal forebrain cortex and hippocampus in the models.     

小鼠血管性痴呆模型中大脑皮层生长抑素及胆囊收缩素蛋白的表达

[目的]观察血管性痴呆（vascular dementia,VD）小鼠大脑皮层生长抑素（somatostatin,SS）和胆囊收缩素（cholecystokinin,CCK）的表达变化,探讨VD的发生机制.[方法]复制小鼠VD模型,利用y-迷宫检测VD模型小鼠学习记忆能力,采用免疫组化方法,研究VD小鼠大脑皮层中SS和CCK表达的变化.[结果]VD小鼠比正常小鼠Y-maze学习次数显著增多,差异有显著性（P＜0.01）;大脑皮层SS及CCK阳性神经元的计数明显减少,差异有显著性（P＜0.05）.[结论]VD的发生可能与大脑皮层SS和CCK的表达减少有关.     

肉苁蓉苯乙醇苷对东莨菪碱致记忆障碍小鼠保护作用的研究

目的：探讨肉苁蓉苯乙醇苷对东莨菪碱致学习记忆障碍小鼠的保护作用。方法：用高、低剂量（100 mg/kg、50 mg/kg）的肉苁蓉苯乙醇苷对东莨菪碱致记忆障碍模型小鼠进行灌胃,4周后用方形水迷宫检测学习和记忆能力,并测定脑组织内胆碱乙酰化酶（ChAT）及胆碱酯酶（AChE）含量、血清和脑组织中SOD含量、血清和肝组织中MDA含量。结果：与模型组比较,肉苁蓉苯乙醇苷组小鼠在方形水迷宫中的碰壁次数以及找到终点所需的时间都明显缩短,显示学习、记忆的错误次数降低,学习反应期缩短,记忆潜伏期延长;肉苁蓉苯乙醇苷能提高小鼠脑组织内ChAT和AChE的含量、改善胆碱能神经系统功能,提高小鼠血清和脑组织中的SOD含量以及降低血清和肝组织的MDA含量。结论：肉苁蓉苯乙醇苷具有提高学习、记忆能力。     

电针三阴交对AD小鼠学习记忆能力及海马区Ach、AchE、ChAT的影响

目的 观察电针"三阴交穴"对SAMP8快速衰老模型小鼠学习记忆能力和脑组织海马区内乙酰胆碱(Ach)、乙酰胆碱酯酶(AchE)、乙酰胆碱转移酶(ChAT)的影响.方法 将快速老化SAMP8小鼠随机分为模型组和电针组,并设同源SAMR1小鼠作为对照组,每组均为6只.电针组给予三阴交电针干预;对照组,模型组常规抓取,不进行针刺.采用Morris水迷宫法检测小鼠的学习记忆能力;酶联免疫法(ELISA)检测小鼠海马部位的乙酰胆碱含量、乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶活性.结果 Morris水迷宫定位航行实验和空间探索实验显示:较SAMR1小鼠相比SAMP8小鼠学习记忆能力显著下降(P<0.01),电针治疗后明显改善(P<0.05),差异有统计学意义.指标显示:模型组较对照组海马内AchE、ChAT活性明显降低,Ach含量显著减少(P<0.01),电针治疗后AchE、ChAT活性明显升高,且Ach含量明显增多(P<0.05),差异有统计学意义.结论 电针三阴交穴可以明显改善老年痴呆模型小鼠学习记忆能力并提高海马区乙酰胆碱含量,其作用可能是通过改善脑组织海马区乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱转移酶活性来实现的.