粘多糖贮积症ⅣA的分子遗传学研究进展

粘多糖贮积症ⅣＡ型是由于溶酶体内Ｎ－乙酰半乳糖胺６－硫酸酯酶缺乏而引起的一种常染色体隐性遗传病。对ＭＰＳⅣ的研究近年来取得了重大进展。本就ＭＰＳⅣＡ的发病机理，ＧＡＬＮＳ基因，基因变异类型以及基因诊断的最新进展作一综述。     

谷氨酰胺对缺氧复氧损伤人小肠上皮细胞谷胱甘肽的影响

目的：探讨谷氨酰胺（ＧＬＮ）对缺氧复氧损伤人小肠上皮细胞（ＩＥＣ）内还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）和丙二醛（ＭＤＡ）的影响。方法：采用原代培养人ＩＥＣ作为实验模型,用荧光法测定体外培养ＩＥＣ内ＧＳＨ和ＭＤＡ含量。结果：正常对照组ＧＳＨ含量最高,在对照组加入ＧＬＮ并不影响ＧＳＨ含量（Ｐ〉０．０５）。缺氧６０ｍｉｎ或９０ｍｉｎ复氧３０ｍｉｎ损伤ＩＥＣ细胞内ＧＳＨ含量均显著低于正常对照组（Ｐ〈０．０５）,预先     

双价痢疾菌苗株免疫小鼠后GALT中ASC的观测

为了观测两株菌苗ＦＳＭ－２１１７（Ｉｐａ－）、ＦＳ－５４１６（Ｉｐａ＋）免疫后所引起的肠粘膜相关淋巴组织（ＧＡＬＴ）中的免疫反应，以小鼠灌胃免疫为模型，应用ＢＡ－ＥＬＩＳＰＯＴ法检测了ＧＡＬＴ中诱导部位派伊尔小结（ＰＰ）、肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）和抗原特异性抗体分泌细胞（ＡＳＣ），发现两菌苗株免疫小鼠后，ＰＰ结、ＭＬＮ中福氏、宋内氏抗原ＳＩｇＡ、ＩｇＧ抗体分泌细胞明显增加，尤以ＳＩｇＡ－ＡＳＣ为甚。株间差别无统计学意义。两株菌苗与对照组相比，都具有显著性差别     

二尖瓣狭窄和射频消融后患者血小板膜糖蛋白Ⅳ及凝血酶敏感蛋白的分布

目的：探讨二尖瓣狭窄患者及射频消融术后患者血小板功能状态。方法：运用流式细胞术测定阵发性室上性心动过速（ＰＳＶＴ）患者（ｎ＝１２）射频消融术（ＲＦＣＡ）前、后及二尖瓣狭窄（ＭＳ）患者（ｎ＝１４）股动脉血小板膜糖蛋白Ⅳ（ＧＰⅣ）及凝血酶敏感蛋白（ＴＳＰ）的分布。结果：ＭＳ患者及ＰＳＶＴ患者ＲＦＣＡ后静息血小板膜ＧＰⅣ分布明显多于ＰＳＶＴ患者ＲＦＣＡ前（Ｐ＜０．０５,＜０．０１）;ＭＳ患者静息血小板膜ＴＳＰ分布显著多于ＰＳＶＴ患者ＲＦＣＡ前（Ｐ＜０．０５）,而ＰＳＶＴ患者静息血小板膜ＴＳＰ分布ＲＦＣＡ前后无显著差异（Ｐ＞０．０５）;在凝血酶（０１Ｕ／ｍＬ,０．５Ｕ／ｍＬ）激活时,ＭＳ患者及ＰＳＶＴ患者ＲＦＣＡ后血小板膜ＧＰⅣ及ＴＳＰ分布均显著多于ＲＦＣＡ前（Ｐ＜０．０５,＜０．０１）。结论：ＭＳ患者及ＰＳＶＴ患者ＲＦＣＡ后血小板的活性及反应性增加,血小板发生不可逆聚集的危险性增高。     

抗内毒素单链抗体基因的构建、序列分析及表达

目的：构建抗内毒素（ＬＰＳ） 单链抗体基因, 并尝试其在Ｅ．ｃｏｌｉ 中的表达。方法： 采用ｌｉｎｋｅｒ Ｐｒｉｍ ｅｒ Ｍｉｘ ,按ＶＨｌｉｎｋｅｒＶＬ 的结构将鼠抗ＬＰＳ ｍ Ａｂ Ｃ３Ａ２ 的ＶＨ ,ＶＬ 基因拼接成单链抗体（ＳｃＦｖ） 基因;用ＰＥ３７３Ａ 型全自动ＤＮＡ序列分析仪测定其核苷酸序列。ＰＣＲ 扩增抗ＬＰＳ ＳｃＦｖ 基因并更换两端接头序列后,插入谷胱甘肽巯基转移酶（ＧＳＴ）融合表达载体ｐＧＥＸ４Ｔ１ ;转染Ｅ．ｃｏｌｉ ＪＭ１０９ ,以ＩＰＴＧ 诱导表达,ＳＤＳＰＡＧＥ 分析表达产物。结果：扩增出的ＳｃＦｖ基因长７３５ｂｐ , 序列分析表明,该序列完整、正确;ＳＤＳＰＡＧＥ 显示,转染入重组质粒ｐ４ＴＣ３Ａ２Ｆｖ 的ＪＭ１０９ 菌经诱导后,有相对分子质量（ Ｍｒ） 约为５２ ０００ 的外源蛋白表达。结论：成功地构建了鼠抗ＬＰＳ ＳｃＦｖ 基因,并在Ｅ．ｃｏｌｉ ＪＭ１０９中表达了ＧＳＴＳｃＦｖ 融合蛋白。     

脑益嗪抗运动病时大鼠血浆PG和小脑Na~ K~ ATPase图像分析定量研究

为探讨脑益嗪抗运动病作用机理，采用放射免疫方法和计算机图像分析系统，对运动病组（ＭＳＧ）和脑益嗪药物预防组（ＣＰＧ）大鼠血浆ＴＸＢ２、６ＫｅｔｏＰＧＦ１α和小脑毛细血管内皮细胞Ｎａ＋Ｋ＋ＡＴＰａｓｅ进行定量测量和分析研究。结果表明ＣＰＧ大鼠血浆ＴＸＢ２和６ＫｅｔｏＰＧＦ１α显著低于ＭＳＧ（ｐ＜００５），而小脑毛细血管内皮细胞Ｎａ＋Ｋ＋ＡＴＰａｓｅ活性则明显高于ＭＳＧ（ｐ＜００１）。作者认为，血浆ＴＸＢ２和６ＫｅｔｏＰＧＦ１α降低，与脑益嗪阻断血小板和血管内皮细胞Ｃａ２＋内流有关。脑内Ｎａ＋Ｋ＋ＡＴＰａｓｅ活性升高，可能是因为脑益嗪扩张脑血管、增加脑血流，阻滞Ｃａ２＋内流的结果。这些变化可视为脑益嗪抗运动病作用的重要机理。     

病毒性肝炎肝纤维化的临床与病理研究

为了解血清肝纤维化指标与临床及病理的关系，研究病毒性肝炎肝纤维化发生的机制，我们对４９例病毒性肝炎进行了肝组织病理学检查，并检测了其血清Ⅲ型前胶原（ＰＣⅢ）、Ⅲ型前胶原肽（ＰⅢＰ）、层粘蛋白（ＬＮ）、透明质酸（ＨＡ）以及Ⅳ型胶原（Ⅳ－Ｃ）等，同时对其肝组织进行了ＬＮ、Ⅳ－Ｃ、ａ－平滑肌肌动蛋白（ａ－ＳＭＡ）、细胞角蛋白（ＣＫ）等免疫组化研究。血清学检测结果表明，肝硬变慢性重型肝炎组，各项指标明显高于慢性肝炎组及急性肝炎组（Ｐ＜０．０１）。慢性肝炎组各项指标随着肝纤维化程度的加重，均有不同程度的升高，但以Ⅳ－Ｃ升高明显，重度（Ｓ４）患者显著高于轻度（Ｓ０～２）患者（Ｐ＜０．０１）。肝组织ａ－ＳＭＡ、Ⅳ－Ｃ、ＬＮ的表达亦随肝纤维化程度的加重逐渐明显。作者认为，肝纤维化的诊断应结合临床综合判定。     

肝细胞代偿性增生对二甲基亚硝胺致癌作用的影响

目的探讨肝细胞代偿性增生对二甲基亚硝胺（ＮＤＭＡ）致大鼠肿瘤作用的影响。方法对照组用ＮＤＭＡ处理,实验组首次ＮＤＭＡ处理前２４小时行部分肝切除术。观察肿瘤发生情况及γ谷氨酰转肽酶（ＧＧＴ）、胎盘型谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴＰ）、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）和癌基因的表达。结果实验组肝脏ＧＧＴ和ＧＳＴＰ灶的数量和面积高于对照组,ＧＳＴＰ的表达高于ＧＧＴ,肾癌变过程中见ＧＳＴＰ的表达。实验组第５６周肿瘤总发生率和第７１周肿瘤总发生率及肝、肾肿瘤发生率高于对照组。ＰＣＮＡ阳性细胞数量与肝病变组织的增殖情况一致。胰岛素样生长因子Ⅱ（ＩＧＦⅡ）与ｃｍｙｃ、ＨｒａｓｍＲＮＡ的表达在变异肝细胞灶和结节较高,在肝细胞癌和腺瘤较弱,肝组织未见ｃｊｕｎｍＲＮＡ表达。结论肝细胞代偿性增生促进多次低剂量ＮＤＭＡ的致癌作用。ＩＧＦⅡ与ｃｍｙｃ、Ｈｒａｓ基因产物的过量表达在肝癌发生、发展中可能具有协同作用。     

人类系膜增生性肾炎与细胞存活因子bcl-2增强表达有关

ｂＣＩ－２原癌基因是一种存活因子,具有阻止或延缓细胞凋亡的作用。本研究目的是了解ｂＣＩ—２在系膜增生性肾炎细胞增殖中的作用。材料与方法选择５５例不同肾脏疾病患者肾穿组织切片进行ｈ１一２、ｈ一６７、。一平滑肌肌动蛋白（。一ＳＭＡ）抗体免疫组化染色,其中狼疮性肾病的膜增殖性肾炎（ＬＮ—ＭＰＧＮ）６例,ｌｇＡ肾病２４例,微小病变性肾病９例,特发性膜性肾病川例石例体位性血尿作为对照。染色后分别计算每个肾小球中的阳性细胞数并加以比较。结果ＬＮ—ＭＰＧＮ及ｌｇＡ肾病患者肾小球中ｈｉ一盯及ａ—ＳＭＡ阳性细胞数…     

霍乱弧菌O139菌毛提取及其疫苗的试制

目的　 寻求Ｏ１３９ 型霍乱弧菌菌毛提取纯化的最适方法和其疫苗研制。方法　ＳＤＳＰＡＧＥ,斑点酶免疫（ＤＢＩ） 检测和ＢＡＥＬＩＳＡ 法。采用ＰＥＬＡ 材料包封菌毛,成为缓释微球疫苗。结果电泳均存在相对分子质量为２０ ．５ ×１０３ 的条带;ＤＢＩ结果为阳性。小鼠血清ＩｇＧ 以皮下ＭＳＴＣＰ 组最高（１∶７ ６８０） ,唾液中的ｓＩｇＡ 以口服ＭＳＴＣＰ 组最高（１∶６０） 。保护力试验中口服组的保护力约为３０ ％ ～４０ ％ ,而皮下组为７０ ％ ～９０ ％ 。结论　 口服组主要诱导粘膜免疫,皮下组主要诱导全身性免疫。ＴＣＰ 是霍乱弧菌的共同抗原之一,可作为霍乱疫苗的候选抗原。     

痢疾杆菌口服免疫小鼠肠道相关淋巴组织中CD45R^＋和CD45RB^＋…

为了解肠道相关淋巴细胞（ＧＡＬＴ）对痢疾杆菌口服免疫的应答状况，分离了Ｓｈｉｇｅｌｌａｆｌｅｘｅｒｉ四次免疫后Ｂａｌｂ／ｃ小鼠脾（ＳＰ），肠系膜淋巴结（ＭＬＮ），Ｐｅｙｅｒ’ｓ结（ＰＰ），固有膜（ＬＰ）和上皮内（ＩＥ）淋巴细胞，对末次免疫后１～３ｄ内免疫组与对照组ＧＡＬＴ中的ＣＤ４５Ｒ＾＋和ＣＤ４５ＲＢ＾＋细胞群作了ＦＣＳ分析，结果免疫后起动７ｄＩＥ和ＬＰＣＤ４５Ｒ＾＋细胞增加而ＭＬＮ和ＰＰＣＤ４     

细胞粘附分子在狼疮性肾炎及膜增殖性肾炎肾组织中的表达

用免疫组化方法和计算机图像分析系统，对２５例狼疮性肾炎（ＬＮ）ＩＶ型及１５例膜增殖性肾炎（ＭＰＧＮ）Ｉ型患者肾组织内ＩＣＡＭ－１和ＶＣＡＭ－１的表达进行了定量研究。结果显示：ＭＰＧＮ及ＬＮ患者肾组织中ＩＣＡＭ－１及ＶＣＡＭ－１表达均显著增加，ＬＮ患者ＩｃＡＭ－１在肾小球内皮细胞表达最强，且与内皮细胞增殖程度显著正相关。     

用BA－ELISA斑点法检测痢疾杆菌免疫小鼠GALT中的特异性抗体分泌细胞（ASC）

改进的ＢＡ－ＥＬＩＳＰＯＴ法使免疫酶斑更为清晰，保存时间延长。用此法检测了痢疾杆菌福氏２ａ经口及腹腔免疫后，小鼠派伊尔氏（ＰＰ）淋巴结、肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）及脾脏（ＳＰＬ）中特异性ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体分泌细胞（ＡｎｔｉｂｏｄｙＳｅｃｒｅｔｉｎｇｃｅｌｌ，ＡＳＣ）的动态变化，得到有规律的结果：两种免疫途径均能在ＰＰ及ＭＬＮ中诱导出３类特异ＡＳＣ的显著升高，但口服导致的升高其持续时间较腹腔途径为短。此外，腹腔途径还能诱导ＳＰＬ中３种ＡＳＣ升高。     

二尖瓣狭窄和射频消融后患者血小板膜糖蛋白Ⅳ及凝血酶敏 …

目的;探讨二尖瓣狭窄患者及射频消融术后患者血小板功能状态。方法：运用流式细胞术测定阵发性室上性心动过速（ＰＳＶＴ）患者射频消融 （ＲＦＣＡ）前、后及二尖瓣狭窄（ＭＳ）患者股动脉血小板膜糖蛋白Ⅳ及凝血酶敏感蛋白（ＴＳＰ）的分布。结果：ＭＳ患者及ＰＳＶＴ患者ＲＦＣＡ后静息血小权膜ＧＰⅣ分布明显多于ＰＳＶＴ患者ＲＦＣＡ前;ＭＳ患者静息血小板膜ＴＳＰ２显著多地ＰＳＶＴ患者ＲＦＣＡ前,而ＰＳＶＴ患者静息血小     

类肝素聚乙烯醇复合材料抗凝血性能的研究

本文报道了聚乙烯醇羧甲醚（ＰＣ）、聚乙烯醇硫酸酯（ＰＳ）及聚乙烯醇接枝甲基丙烯酸β羟乙酯、丙烯腈（ＰＶＡｇＨＥＭＡＡＮ）的合成制备方法。通过红外光谱和元素分析定性、定量证实了合成方法的可行性。研究了将ＰＣ、ＰＳ以不同重量比加入ＰＶＡｇＨＥＭＡＡＮ后形成的聚乙烯醇衍生物复合材料（ＣＤＰＶＡ）对抗凝血性能的影响。（ＣＤＰＶＡ）对人血的溶血度仅为３２％,人血复钙时间比空白对照延长２０２ｓ,凝血时间延长１８５７ｓ。ＳＥＭ观察表明ＣＤＰＶＡ接触血液一定时间后表面没有形成血液蛋白纤维网络,具有微相分离结构。     

用BA—ELISA斑点法检测痢疾杆菌免疫小鼠GALT中的特异性抗体分…

改进的ＢＡ－ＥＬＩＳＰＯＴ法使免疫酶斑更为清晰，保存时间延，用此法检测了痢杆杆菌福氏２ａ经口及腹腔免疫后，小鼠伊尔氏（ＰＰ）淋巴结，肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）及脾脏（ＳＰＬ）中特异性ＩｇＡ，ＩｇＧ，ＩｇＭ抗体分泌细胞（ＡｎｔｉｂｏｄｙＳｅｃｒｅｔｉｎｇＣｅｌｌ，ＡＳＣ）的动态变化，得到有规律的结果，两种免疫途径均能在ＰＰ及ＭＬＮ中诱导出３类特异ＡＳＣ的显著升高，但口服导致的升高其持续时间较腹腔途径为短     

与人精子抗原交叉的大肠埃希菌506株M_r36000蛋白的提取与纯化

以ＳＤＳ和超声波处理大量培养的Ｅ．ｃｏｌｉ５０６株制备全菌蛋白。首先采用（ＮＨ４）２ＳＯ４分段盐析对Ｍｒ３６０００蛋白进行初步纯化。发现与人精子交叉抗原的Ｍｒ３６０００蛋白位于６０％８０％和８０％９０％两个饱和硫酸铵盐析段中，并经与兔抗人精子抗体（ＲＡＨＳＡｂ）进行Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹得以证实。将上述含Ｍｒ３６０００蛋白的盐析物合并，进行ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２００柱层析，获得较纯的Ｍｒ３６０００蛋白，并对Ｍｒ３６０００纯化蛋白的特性进行了研究。用ＳＤＳＰＡＧＥ法测出纯化蛋白的Ｍｒ为３６０００；用Ｒｏｔｏｆｏｒ制备型等电聚焦电泳测定Ｍｒ３６０００蛋白的等电点为３８。     

血清IV型胶原和层粘连蛋白测定在结缔组织病中的意义

目的 探讨血清Ⅳ型胶原（ＩＶ．Ｃ）和层粘连蛋白（ＬＮ）在类风湿关节炎（ＰＡ）、系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）和其它结缔组织病（ＣＴＤ）患者中的意义。方法 采用放射免疫法（ＰＩＡ）对３６例ＲＡ、３４例ＳＬＥ和１７例其它ＣＴＤ患者以及６３例正常人的血清ＩＶ．Ｃ和ＬＮ含量进行了测量。结果 各组患者血清ＩＶ．Ｃ和ＬＮ含量均较对照组明显升高（Ｐ〈０．０１～０．０００１）,且ＳＬＥ组血清ＬＮ水平明显提高ＲＡ组（Ｐ〈     

智能化中医耳穴诊断仪

智能化中医耳穴诊断仪何家祥，张大卫，高文君，王笑然（天津大学，天津）ＴＨＥＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴＯＦＴＨＥＩＮＴＥＬＬＩＧＥＮＴＣＨＩＮＥＳＥ－ＭＥＤＩＣＩＮＥＥＡＲＡＣＵＰＯＬＮＴＤＩＡＧＮＯＳＥＲ￥ＨｅＪｉａ－ｘｉａｎｇ；ＺｈａｎｇＤａ－ｗｅｉ；Ｇ...     

组织金属蛋白酶抑制剂TIMP-2基因转染对胃癌细胞体内外侵袭能力的影响

目的了解ＴＩＭＰ２基因转染对胃癌细胞侵袭行为的影响，进行阻断肿瘤细胞侵袭转移的筛选尝试。方法采取脂质体将外源基因ＴＩＭＰ２导入人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１，经体外Ｂｏｙｄｅｎ小室测定肿瘤细胞侵袭能力与体内肾包膜下瘤组织种植侵袭模型对比分析，观察Ⅳ型胶原酶前体（ＭＴＭＭＰ）与基底膜Ⅳ型胶原免疫组化改变。结果发现转染ＴＩＭＰ２基因的胃癌细胞其表达ＭＴＭＭＰ的能力降低，成瘤时间延长，成瘤率降低，体外与体内的侵袭能力受到抑制。结论ＴＩＭＰ２基因转染可使胃癌细胞的侵袭表型得到下调。