还原性谷胱甘肽对大鼠盐酸吸入性肺损伤的保护作用及其机制探讨

目的 探讨还原型谷胱甘肽（GSH）对盐酸吸入性大鼠肺损伤的保护作用及其机制.方法 30只健康成年雄性SD大鼠随机分为A组（生理盐水吸入组）、B组（稀盐酸吸入致肺损伤组）和C组（稀盐酸吸入＋GSH预处理干预组）.术后6h处死大鼠,取肺组织测定肺湿/干重比、丙二醛（MDA）含量、髓过氧化物酶（MPO）活性、TNF-α及IL-1β水平、病理学改变以及Caspase-3含量变化.结果 稀盐酸吸入后,B组肺组织呈弥漫性出血及水肿,中性粒细胞浸润,肺泡隔明显增厚.与A组比较,B、C组Caspase-3阳性表达、肺湿/干重比、MDA含量、MPO活性、TNF-α与IL-1β含量均明显增加（P均＜0.01）.C组肺组织水肿及炎性程度较B组减轻,Caspase-3表达及MDA、MPO、TNF-α、IL-1β含量也较B组不同程度减少（P均＜0.01）.结论 预先给予大鼠GSH可以有效对抗盐酸导致的吸入性肺损伤,这种保护作用与其抑制氧化应激、降低炎症反应以及抑制细胞凋亡有关.     

脓毒症大鼠肺损伤时肺组织巨噬细胞移动抑制因子变化及丙酮酸乙酯的干预作用

目的观察脓毒症大鼠肺损伤时肺组织巨噬细胞移动抑制因子（MIF）mRNA的变化及丙酮酸乙酯（EP）的干预作用。方法雄性Wistar大鼠,以盲肠结扎穿孔法建立脓毒症大鼠模型。80只大鼠随机分为假手术组、脓毒症组、EP早期治疗组（建模后6h给药）和EP晚期治疗组（建模后12h给药）。各组分别于模型建立后24h和48h检测肺组织MIF mRNA、髓过氧化物酶（MPO）的活性、肺湿重/干重（W/D）比以及肺组织的病理变化。结果24h、48h脓毒症组、EP6h组和EP12h组MIF mRNA、MPO活性、肺W/D比值以及肺组织的病理学评分均较假手术组显著升高;EP6h组和EP12h组肺组织MIF mRNA水平、MPO活性、肺W/D比值以及肺组织的病理学评分均较同时相点脓毒症组显著降低;脓毒症组24h肺组织MIF mRNA的水平与MPO、W/D比值以及肺组织病理学评分的变化之间呈显著正相关。结论脓毒症大鼠肺损伤时肺组织MIF mRNA的表达显著升高,EP对脓毒症肺损伤有保护作用,其机制可能与其抑制MIF的表达有关。     

百草枯致大鼠肺损伤时内源性CO和NO的变化

目的：探讨内源性CO和NO在大鼠百草枯（PQ）中毒性急性肺损伤中的作用。方法：肺组织常规HE染色和取血测定血浆丙二醛（MDA）含量来评价肺组织损伤情况；检测血浆中肿瘤坏死因子（TNF-α）水平。检测肺组织中CO和NO含量和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性。Western B10t方法测定HO-1和iNOS表达的变化。结果：PQ中毒后大鼠肺组织损伤明显加重，血浆MDA含量及TNF-α水平明显升高，应用正铁血红素（Hm）后血中CO含量明显升高，iNOS活性和N0水平则降低。结论：大鼠百草枯中毒性急性肺损伤时内源性CO和N0产生增加，在应用CO的供体氯血红素后CO升高更为明显，而NO产生降低，在一定程度上减轻了百草枯所致的大鼠急性肺损伤。     

抑制Wnt/β-catenin信号通路可减轻脓毒症急性肺损伤

摘要 目的：探讨抑制Wnt/β-catenin信号通路对脓毒症急性肺损伤(ALI)的影响。方法：选取（250±10）g健康成年SD雄性大鼠50只,随机分为3组：对照组10只、脓毒症ALI组（CLP组）20只、脓毒症ALI治疗组（CLP+XAV939组）20只。统计各组大鼠体重下降率及死亡率,取肺组织观察肺组织病理学变化,通过蛋白印迹法（WB）、免疫组化（IHC）、免疫荧光(IF)、实时定量PCR等技术检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白（TNF-α、β-catenin、Cyclin D 、LRP5/6）表达在3组之间的差异性。结果：CLP组48h内死亡率为40%,而对照组和CLP+XAV939组无大鼠死亡。对照组大鼠术后48h体重无变化,而CLP组大鼠体重下降20%,CLP+XAV939组下降10%。组织病理学表现,对照组可见完整的肺泡结构,未见炎症细胞浸润;CLP组见肺泡水肿和塌陷,肺泡间隔增厚增宽并有大量炎症细胞浸润,肺血管充血明显;CLP+XAV939组可见基本完整的肺组织结构,炎症细胞数量及分部范围较CLP组减小。WB显示,与对照组比较,CLP组、CLP+XAV939组Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白表达量上升,且CLP组高于CLP+XAV939组（P<0.01或P<0.05）。 实时定量PCR示,CLP组β-cateninmRNA表达量较对照组增高（P<0.05）,CLP+XAV939组与对照组无差异。 IHC示,与对照组比较,CLP组和CLP+XAV939组肺内多种细胞内β-catenin蛋白表达量明显增多,且CLP组多于CLP+XAV939组（P<0.05）。IF示,与对照组比较,CLP组和CLP+XAV939组肺内LRP5/6表达量明显升高,且CLP组高于CLP+XAV939组（P均<0.05）。结论：Wnt/β-catenin信号通路参与脓毒症ALI过程,腹腔注射XAV939抑制Wnt/β-catenin信号通路可减轻ALI。     

虾青素对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的保护作用

目的 研究虾青素对脂多糖(LPS)所致急性肺损伤(ALI)小鼠的保护作用.方法 雄性昆明种小鼠60只,随机分为正常对照组、急性肺损伤模型组、地塞米松阳性对照组(5 mg/kg)以及虾青素低、中、高剂量组(10、15、20 mg/kg)共6组.不同剂量虾青素给大鼠连续灌胃30 d后,腹腔注射脂多糖6.0 mg/kg建立ALI模型.在注射后6 h,收集腹主动脉血并进行左侧支气管肺泡原位灌洗以收集灌洗液,测定血中淋巴细胞亚群(CD+3、CD+4、CD+8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素8(IL-8)及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;测定各组的肺湿重/干重比、肺组织中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)含量及肺组织匀浆TNF-α、白细胞介素10(IL-10)含量.结果 虾青素各剂量组均能降低因LPS诱发的血TNF-α、IL-8、MPO、MDA含量与肺组织湿重/干重比的升高,同时抑制肺组织IL-10含量、血SOD与GSH-Px活性的降低,改善血中淋巴细胞亚群分布.结论 虾青素对LPS所致ALI具有预防性保护作用.     

血必净注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨血必净注射液在心肌缺血再灌注损伤（IRI）时的保护作用。方法将SD大鼠随机分为5组：A组（假手术组）；B组（模型对照组），注射5％葡萄糖注射液2．7ml／kg；C、D、E组分别为血必净注射液大、中、小剂量组，血必净注射液1．32g／kg、0．66g／kg和0．33g／kg，均由尾静脉注射，连用4d。采用左冠状动脉前降支结扎开放建立IRI模型，缺血40min后，再灌注120min，由颈总动脉取血检测内皮素（ET）、一氧化氮（NO）、肌酸激酶同工酶（CK—MB）含量，取出心脏，测定心肌白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、髓过氧化物酶（MPO）含量。计算梗死区心肌梗死范围百分比，光镜和电镜观察心肌病理形态学改变。结果ET、CK—MB、IL-6、TNF—α、MPO含量：与B组相比，C、D、E组均显著降低；NO含量：与B组相比，C、D、E组均显著升高；心肌梗死范围百分比与B组相比，C、D、E组均显著降低；光镜和超微电子显微镜观察血必净注射液大、中、小剂量均能减轻IRI，并随着剂量增加保护作用更强。结论血必净注射液对IRI心肌起到明显保护作用。     

盐酸戊乙奎醚对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1 mRNA表达的影响

目的探讨盐酸戊乙奎醚对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1（HMGBl）mRNA表达的影响。方法雄性Wistar大鼠30只,体质量200～250g,采用随机数字表法,将其随机分为3组（n=10）：假手术组（S组）、脓毒症组（L组）、盐酸戊乙奎醚组（PH组）。除S组外,其他2组采用盲肠结扎穿孔术制备大鼠脓毒症诱发急性肺损伤模型。PH组于术毕腹腔注射盐酸戊乙奎醚0．45mg／kg,S组和L组给予等容量生理盐水。分别于术后24、48h时处死5只大鼠,取肺组织,测定HMGBlmRNA表达、髓过氧化物酶（MPO）活性和核因子κB（NF-κB）活性,光镜下观察肺组织病理学结果。结果与s组比较,其他2组肺组织HMGB1 mRNA表达上调,MPO活性升高（P〈0．05）;与L组比较,PH组肺组织HMGBlmRNA表达下调,MPO活性降低（P〈0．01）。PH组肺组织NFxB活性逐渐降低,肺组织损伤程度逐渐减轻。结论盐酸戊乙奎醚减轻脓毒症大鼠急性肺损伤的机制与下调肺组织HMGBl基因表达有关,其下调HMGBl基因表达的机制与抑制NF-κB活化有关。     

黄芪对慢性阻塞性肺病大鼠气道炎症干预作用实验研究

目的探讨黄芪注射液对慢性阻塞性肺病（COPD）大鼠气道炎症的干预作用。方法30只SD大鼠随机分为3组：正常对照组、COPD组、黄芪干预组。观察支气管肺泡灌洗液（BALF）和血清中白细胞总数及百分比,IL-8、TNF-α浓度变化及肺组织形态学改变。结果干预组肺组织形态学改变较COPD组减轻但未恢复正常;干预组BALF和血清中IL-8及TNF-α水平、白细胞总数、中性粒细胞绝对计数、中性粒细胞百分比较COPD组降低（P〈0.05）。结论黄芪注射液可降低COPD大鼠血清及BALF中IL-8及TNF-α水平,并使炎症细胞减少,对COPD大鼠气道炎症具有保护作用。     

益赛普对大鼠放射性肺损伤中TNF-α的影响

目的观察注射用重组人肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白（益赛普）对大鼠放射性肺损伤过程中TNF-α的影响,试图寻找一种预防或治疗放射性肺损伤的有效途径。方法 72只雌性SD大鼠随机分为3组：正常对照组、单纯照射组和益赛普治疗组,每组24只。照射组及治疗组动物麻醉后,行直线加速器全胸部照射一次,剂量为25Gy。照射后第一周内,治疗组大鼠腹腔注射益赛普（5mg·kg^-1）,共计2次。对照组和照射组大鼠注射同等体积的生理盐水。于照射后第1、4、8、和24周处死动物,取部分肺组织行HE染色,观察组织学变化,另提取组织行免疫组化观察组织中TNF-α变化,使用酶联免疫吸附分析法检测血清中TNF-α水平。所有数据采用SPSS统计软件进行方差分析。结果照射组大鼠肺组织血清中TNF-α水平与对照组相比,明显升高,并在第4周时达到顶峰（P〈0.01,q=5.63,q=6.21）;治疗组TNF-α水平与对照组相比,第4周时也增加明显,但是与照射组相比明显下降（P〈0.01,q=4.97q=7.42）。结论大鼠放射性肺损伤时TNF-α水平明显升高,在放射性肺损伤发展中起到重要作用,益赛普能显著降低它们的水平,并抑制炎症反应严重程度,从而能有效地防治放射性肺损伤。     

不同目标血糖水平对脓毒症大鼠肿瘤坏死因子和内皮细胞特异性分子-1表达的影响

目的:探讨胰岛素控制不同目标血糖水平对脓毒症大鼠肿瘤坏死因子(TNF-α)、内皮细胞特异性分子(ESM-1)表达的影响以及对肺损伤的作用。方法:40只SD大鼠随机分为5组:假手术组(Sham组)、脓毒症组及血糖控制A组(4.4~6.1 mmol/L)、B组(6.2-8.3 mmol/L)、C组(8.4-10.0 mmol/L),各8只。盲肠结扎穿孔术后12 h处死,双抗夹心ELISA法检测血清TNF-α、ESM-1水平,光镜观察肺组织病理切片。结果:脓毒症组血清TNF-α、ESM-1的表达明显高于Sham组及各血糖控制组(均P0.05)。A组较B组和C组TNF-α、ESM-1的表达明显降低(均P0.05);B组低于C组(P0.05)。肺病理组织损伤评分脓毒症组均明显高于sham组及各控制组(均P0.05),A组较B组和C组明显降低(均P0.05)。结论:与6.2~8.3 mmol/L及8.4~10.0 mmol/L比较,血糖控制在4.4~6.1 mmol/L明显降低血中TNF-α、ESM-1的表达,且对脓毒症大鼠肺损伤保护作用最明显。     

血必净注射液治疗AECOPD的疗效研究

目的研究应用血必净注射液治疗AECOPD的疗效。方法将60例AECOPD患者随机分为对照组及治疗组,每组30例,对照组采用常规治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用血必净注射液,静脉滴注,连用7天,监测治疗前后血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)及肺功能的变化。结果与治疗前相比,治疗组血清TNF-α、CRP、FEV1/FVC及FEV1/预计值均明显改善(P<0.01)。治疗组治疗前后TNF-α、CRP、FEV1/FVC及FEV1/预计值的变化程度较对照组更明显,具有统计学差异(P<0.01)。结论血必净注射液有助于减轻TNF-α及CRP介导的炎症反应,改善肺功能,治疗AECOPD效果显著。     

急性冠脉综合征合并代谢综合征者炎症因子与冠脉病变的相关性

目的：探讨炎症因子水平对急性冠脉综合征（ACS）合并代谢综合征（MS）诊断的意义。方法：收集2008年12月到2011年1月在我院经冠状动脉（冠脉）造影证实的ACS患者152例,按有无MS分为MS组（78例）和非MS组（74例）,测定髓过氧化物酶（MPO）、细胞间粘附分子（ICAM-1）、肿瘤坏死因子（TNF-α）水平,比较两组间各参数水平的差异,根据冠脉造影结果评价其与冠脉病变严重程度的关系。结果：与非MS组比较,MS组血清MPO[（0.68±0.33）μmol/L比（1.99±1.21）μmol/L]、TNF-α[（61.74±7.71）pg/ml比（70.17±7.91）pg/ml]、ICAM-1[（275.09±73.87）pg/L比（292.27±73.87）pg/L]水平显著升高（P均〈0.01）;MS组总狭窄指数明显高于非MS组[（11.03±3.87）比（6.97±3.68）];冠状动脉病变严重程度与MPO、ICAM-1、TNF-α呈正相关（r=0.5,0.51,0.51,P均〈0.01）。结论：髓过氧化物酶、细胞间粘附分子、肿瘤坏死因子水平升高是急性冠脉综合征合并代谢综合征的危险因素,炎症在疾病发生发展过程中起重要作用。     

参附注射液对复苏后大鼠肺组织核转录因子κB及血浆肿瘤坏死因子α的影响

目的:探讨参附注射液对心肺复苏后大鼠肺组织核转录因子κB(NF-κB)及血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法:90只Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组、参附治疗组,采用窒息合并冰氯化钾致大鼠心跳骤停-心肺复苏模型,运用免疫组化方法观察复苏后肺组织细胞中NF-κB的蛋白表达,采用放射免疫法检测血浆TNF-α水平;通过光镜和电镜观察肺组织细胞结构的变化。结果:与假手术组比较,复苏后肺组织NF-κB表达及血浆TNF-α水平均明显增加(P<0.05)。光镜和电镜观察结果显示参附治疗组肺组织细胞结构受损明显减轻。结论:参附注射液可能通过抑制NF-κB活性及降低TNF-α水平,从而阻断NF-κB调控的炎症反应及细胞凋亡,对复苏后肺组织损伤起到防治作用。     

TNF-α在对乙酰氨基酚所致大鼠药物性肝损伤中的作用

目的探讨TNF-α在对乙酰氨基酚所致大鼠急性药物性肝损伤中的作用。方法 40只SD大鼠随机分成空白对照组、益赛普对照组、对乙酰氨基酚组、对乙酰氨基酚+益赛普组,每组10只。单次给药,24 h后采集血液测定生化指标,之后处死大鼠,取肝脏组织做病理检查以及应用ELISA试剂盒检测血清TNF-α。结果对乙酰氨基酚组肝损伤明显,阻断TNF-α后肝损伤减轻。对乙酰氨基酚组肝功生化值及TNF-α水平较空白对照组升高,差异有统计学意义(P0.05),对乙酰氨基酚+益赛普组肝功生化值及TNF-α水平较对乙酰氨基酚组下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论 TNF-α的表达在对乙酰氨基酚所致大鼠急性肝损伤肝组织中明显升高,阻断TNF-α后肝损伤减轻,TNF-α可能参与对乙酰氨基酚所致肝损伤。     

心脏瓣膜置换术患者围术期细胞因子浓度变化以及脑苷肌肽的影响

目的探讨体外循环（CPB）下心脏瓣膜置换术患者围术期血清细胞因子浓度的变化以及脑苷肌肽对其影响。方法40例CPB下心脏瓣膜置换术患者，随机分为脑苷肌肽组（A组）和对照组（B组），每组20例。A组于麻醉诱导后静脉注射脑苷肌肽20ml（每毫升含神经节苷脂50pg、多肽3．2mg），B组给等容积生理盐水。分别于给药前（T1）、CPB结束（12）及结束后2h（T3）、6h（T4）、24h（T5）各时间点采集颈内静脉球部血，测定细胞因子白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度。结果两组IL-6、IL-8和TNF-α浓度在CPB后均显著升高，组间比较显示B组IL-6和IL-8浓度在T3、T4和髑时间点均显著高于A组（P〈0．05），B组TNF-α浓度在12、T3、T4和T5时间点均显著高于A组（P〈0．05）。结论脑苷肌肽可以减少体外循环心脏瓣膜置换手术中炎性细胞因子IL-6、IL-8和TNF-α的释放。     

糖耐量正常的向心性肥胖患者8-异前列腺素水平及其与胰岛素抵抗的关系

目的观察向心性肥胖患者的8-异前列腺素（8-iso-PGF2α）水平及其与胰岛素抵抗的关系。方法筛选糖耐量正常的向心性肥胖患者（包括胰岛素抵抗与无胰岛素抵抗者）及正常对照组。分别测定血清8-iso-PGF2α,丙二醛（MDA）,游离脂肪酸（FFA）等。结果向心性肥胖组8-iso-PGF2α、MDA、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、FFA均显著高于对照组（P〈0．05）。8-iso-PGF2α差异最显著（P〈0．01）,且与FFA、BMI及甘油三酯（TG）呈显著正相关。胰岛素抵抗亚组的8-iso-PGF2α水平显著高于无胰岛素抵抗亚组。多元回归分析显示,8-iso-PGF2α与HOMA-IR相关性最强。结论糖耐量正常的向心性肥胖患者氧化应激增强,且氧化应激是胰岛素抵抗的重要危险因素,循环中8-iso-PGF2α水平能更好地反映其程度。     

黄连解毒汤对脓毒症大鼠的心脏保护作用

目的探讨中成药黄连解毒汤对脓毒症大鼠心脏的保护作用。方法 50只大鼠随机分为假手术组、模型组、黄连解毒汤组,采用盲肠结扎穿孔方法复制脓毒症模型,假手术组除不对盲肠进行结扎穿孔外,余同模型组;模型组和黄连解毒汤组分别在造模前后给予生理盐水和黄连解毒汤(1.5mL/100g)灌胃。观察黄连解毒汤对大鼠72h生存时间,血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB)水平,心肌组织形态学等指标的影响。结果黄连解毒汤组能够显著延长脓毒症大鼠的72h生存时间,降低脓毒症大鼠血清中CK、CK-MB及TNF-α水平,减轻心肌组织的损伤,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论黄连解毒汤有延长脓毒症大鼠的生存时间、减轻炎症因子对的心脏损伤、保护大鼠心脏功能的作用。     

脓毒症血清对人肺血管内皮细胞NF-kB表达的影响

目的：观察严重脓毒症患者血清对人肺血管内皮细胞（pulmonary microvascular endothelial cell,PMVECs）NF-kB表达的影响,探讨严重脓毒症致急性肺损伤的发生机制。方法：随机将离体培养PMVECs分为3组：正常培养组（加入10%胎牛血清,A组）、健康血清组（加入10%健康人血清,B组）、患者血清组（加入10%严重脓毒症患者血清,C组）,分别于刺激0、1、2、4、6h免疫组化观察离体PMVECs NF-κB表达并测定各组平均光密度（average optical density,AOD）值;ELISA法检测培养上清液分泌的TNF-α水平;比较不同时相3组PMVECs上述指标变化。结果：与A组及B组相比,C组PMVECs胞核NF-κB呈强阳性表达,且1h AOD值达高峰,后逐渐下降（0.523±0.012,0.498±0.009,0.444±0.030）;ELISA显示：不同时相A组与B组TNF-α水平均无明显差异（P〉0.05）,C组与A组、B组相比各时间点TNF-α水平均明显升高,且均有显著差异（P〈0.01）。结论：严重脓毒症患者血清可通过活化NF-κB启动分泌TNF-α,这可能是严重脓毒症致急性肺损伤的一个重要通路。