胃癌组织P27、MMP-9和PEDF蛋白表达及意义

目的：探讨P27、MMP-9和PEDF蛋白表达在胃癌发生发展中的作用。方法：应用免疫组织化学法检测82例人体胃癌组织标本中胃癌细胞内P27、MMP-9和PEDF的表达；统计学分析上述各分子标记物与胃癌临床病理因素间的关系。结果：（1）82例正常胃黏膜均有P27、PEDF表达，在胃癌组织中的表达率分别为48％和43％。MMP-9在胃癌中表达率为70％，正常胃黏膜呈阴性表达。（2）P27低表达与胃癌组织学分级和远处转移有关（P〈0．05）；MMP-9高表达与浸润深度、淋巴结转移和远处转移有关（P〈0．05）；PEDF低表达与组织学分级、浸润深度、淋巴结转移和远处转移有关（P〈0．05）。结论：胃黏膜上皮细胞在癌变过程中P27和PEDF表达降低，而MMP-9表达升高；MMP-9在胃癌侵袭转移中起促进作用，P27和PEDF可抑制胃癌的进展。     

LN-R和MMP-7表达与胃癌病理生物学行为的关系

【目的】探讨胃癌中层粘蛋白蛋白受体（LN-R）和基质金属蛋白酶-7（MMP-7）的表达及其与胃癌生物学行为的关系。【方法】应用免疫组织化学SP法检测65例胃癌组织及42例远癌胃粘膜中LN-R和MMP-7的表达，并分析其与胃癌临床病理参数间的关系。【结果】LN-R在胃癌中的表达（63．08％）显著高于远癌胃粘膜的表达（21．43％）（P〈0．01），且与癌肿大小、组织分化程度、癌组织浸润深度、TNM分期及淋巴结转移呈正相关（P〈0．05），而与性别、年龄无关（P〉0．05）。MMP-7在胃癌中的表达（70．77％）显著高于远癌胃粘膜的表达（11．90％）（P〈0．01），且与癌组织浸润深度、TNM分期及淋巴结转移呈正相关（P〈0．05），而与性别、年龄、癌肿大小及组织分化程度无关（P〉0．05）。LN-R和MMP-7的表达无明显相关性（P〉0．05）。【结论】LN-R和MMP-7的表达与胃癌浸润、转移密切相关；联合检测LN-R和MMP-7有助于评估胃癌侵袭转移能力，对胃癌的预后判断具有重要的临床意义。     

COX-2和MMP-2在胃癌组织中的表达及临床意义

目的研究环氧合酶-2（Cydooxygenase-2，COX-2）和基质金属蛋白酶-2（Matrix metalloproteinase-2，MMP-2）的表达以及与胃癌浸润转移的关系，探讨二者间的相互关系。方法采用SP免疫组织化学技术，取吉林大学第一临床医院病理科存档的胃癌石蜡标本46例及正常胃组织15例，每例切片2张，分别检测COX-2和MMP-2的表达情况，分析其与胃癌浸润转移的关系。结果用SPSS10．0统计软件进行分析。结果15例正常胃组织中COX-2和MMP-2的表达为阴性，46例胃癌组织中COX-2的阳性表达率为60．9％（28／46），显著高于正常胃组织（P〈0．05），COX-2阳性表达与胃癌淋巴结转移、临床分期相关（P〈0．05），与胃癌大小、浸润程度、分化程度无关（P〉0．05）。MMP-2的阳性表达率为71．7％（33／46），显著高于正常胃组织（P〈0．05），MMP-2阳性表达与胃癌淋巴结转移、临床分期、浸润深度相关（P〈0．05），与肿瘤大小及分化程度无关（P〉0．05），COX-2与MMP-2表达密切相关（P〈0．05）。结论COX-2和MMP-2在胃癌组织中的表达密切相关，COX-2和MMP-2的高表达促进了胃癌的浸润和转移，提示COX-2和MMP-2可作为判断预后的指标和化学治疗的靶点。     

DNA结合抑制蛋白-1在结肠癌中的表达及其意义的研究

目的探讨结肠癌中DNA结合抑制蛋白-1（Id—1）的表达与肿瘤细胞分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期的关系。方法用免疫组化方法分别检测17例结肠腺瘤、16例不典型增生、52例结肠癌及J5例癌旁正常纽织中Id—1的表达。结果正常肠粘膜组织中Id-1蛋白偶有表达，在结肠腺瘤、不典型增生、结肠癌组织中的阳性表达率分别为29.4％、43．75％、73．1％，三者比较差别有统计学意义（P〈0．05）。分化程度低的结肠癌组织中Id．1的阳性表达率高于分化程度高者，两者比较差别有统计学意义（P〈0．05）；35例伴有淋巴结转移的肿瘤原发灶者29例（82．9％）表达Id-1，17例无淋巴结转移者9例表达Id-1（52．9％），两者比较有统计学意义（P〈0、05）；随着肿瘤浸润深度的增高、TNM分期的升高，Id-1的表达阳性率逐渐升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。Id-1蛋白的表达与结肠癌组织的分化程度、浸润程度、淋巴结转移、TNM分期有关，与年龄无关。结论Id-1蛋白在结肠癌组织中表达明显升高，并与结肠癌侵袭转移及TNM临床分期相关，可作为结肠癌预后判断的指标之一。     

GST-π、TopoⅡ与胃癌生物学行为之间的关系

目的探讨胃癌GST-π、TopoⅡ的表达与病理分化程度、浸润、转移等生物学行为之间的关系。方法应用免疫组化S-P法检测GST-π、TopoⅡ在60例胃癌组织中的表达,比较胃癌病理分化类型、肿瘤浸润深度、有无淋巴结转移对上述指标表达的影响。结果GST-π、TopoⅡ在高、中分化组胃癌中的阳性表达率分别为94．44％和33．33％,而在低分化胃癌中的阳性表达率分别为66．67％和75．00％,差异均具有统计学意义（P〈0．05）;GST-Ⅱ在有、无淋巴结转移组的阳性表达率分别为90．70％和64．70％,差异有统计学意义（P〈0．05）;TopoⅡ在有、无淋巴结转移的阳性表达率分别为48．83％和52．94％,差异无统计学意义（P〉0．05）。GST-π、TopoⅡ的阳性表达率与胃癌的浸润深度比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论GST-π与胃癌病理分化型、有无淋巴结转移有关;TopoⅡ与病理分化类型有关,而与有无淋巴结转移无关。GST—π、TopoⅡ两者均与肿瘤浸润深度无关。     

组织芯片检测snail mRNA的表达及其与胃癌的关系

目的探讨转录因子snail mRNA在胃癌中的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法制作组织芯片，在组织芯片上通过原位杂交检测snail mRNA在25例非肿瘤胃黏膜组织和100例胃癌组织中的表达情况。结果100例胃癌中snail mRNA的阳性表达率46％，snail mRNA的阳性表达率与胃癌的TNM分期（r=0．176，P=0．027）、淋巴结转移（r=0．299，P=0．003）、脉管转移（r=0．208，P=0．038）、分化程度（r=0．203，P=0．042）呈正相关，与胃癌的病灶大小、浸润深度、远处转移无明显相关性。snail mRNA的阳性表达病例的平均生存时间和5年生存率明显低于阴性表达的病例。结论snail mRNA的表达可预测胃癌的浸润和转移，是指导临床治疗及估计预后的有意义指标。     

食管鳞癌组织中P13K和基质金属蛋白酶-7的表达及其临床意义

目的研究P13K和基质金属蛋白酶-7（MMP-7）在食管鳞癌组织（ESCC）中的表达及其与食管鳞癌细胞发生、发展与转移的关系以及两者之间的相关性。方法应用免疫组织化学sP法检测24例正常食管黏膜、94例食管鳞癌组织中P13K和MMP-7的表达情况。结果食管癌组织中P13K和MMP-7的阳性表达率分别为71．28％（67／94）和52．13％（49／94）,与正常食管黏膜组织阳性表达率4．17％（1／24）和0％（0／24）相比,差异均有统计学意义（P均〈0．01）;P13K蛋白的表达与食管癌细胞的分化程度、淋巴结转移、浸润深度及临床分期显著相关（P均〈0．01）;MMP-7表达率与淋巴结转移（P〈0．05）、分化程度（P〈O．05）、浸润深度（P〈0．01）和I临床分期（P〈0．05）等因素有关;P13K与MMP-7表达呈显著正相关（r=0．232,P=0．025）。结论P13K、MMP-7表达与食管癌发生、发展及侵袭转移有关,可作为评价食管鳞癌生物津行为的指标n     

乳腺癌基质金属蛋白酶-9及前哨淋巴结CK19mRNA表达的相关性

目的：研究乳腺癌组织中基质金属蛋白酶（matrixmetallo-proteinases-9，MMP-9）基因表达与乳腺癌前哨淋巴结（SLN）微转移分子CKl9mRNA检测的关系，揭示乳腺癌的浸润和转移机制。方法：应用S—P免疫组化法检测76例乳腺浸润癌组织和20例乳腺非恶性肿瘤组织中MMP-9的表达情况；采用原位杂交技术检测同组76例乳腺浸润癌SLN微转移分子CK19mRNA的表达，同时与常规病检法比较其检测敏感性，并比较淋巴结转移组、微转移组、无转移组患者的临床资料。结果：76例乳腺浸润癌中，常规病检无淋巴结转移36例，淋巴结转移40例。MMP-9在淋巴结转移组和无淋巴结转移组原发灶阳性表达的平均秩次为45．95、30．19，转移组明显高于无转移组，两者差异具有显著性（P〈0．05）。原位杂交法检出36例阴性淋巴结中9例有CK19mRNA表达，原位杂交法与常规病检法转移的检出率比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：淋巴结的转移与MMP-9的表达具有相关性，检测MMP-9蛋白表达将有助于判断乳腺癌的转移及预后。应用原位杂交法可明显提高乳腺癌的检出率。     

MMP-2和TIMP-2在大肠癌组织中的表达及其意义

目的探讨基质金属蛋白酶（MMP-2）及其抑制物（TIMP-2）的表达与大肠癌浸润，转移的关系。方法应用免疫组织化学S-P法对58例大肠癌组织中MMP-2和TIMP-2进行检测，并以大肠腺瘤组织标本20例作为对照。结果MMP-2的表达率在大肠癌为74．1％，高于大肠腺癌瘤的35％（P〈0．05）。其表达与大肠癌的浸润深度，Dukes分期和淋巴结转移均密切相关（P〈0．05）。TIMP-2的表达在大肠腺瘤及大肠癌组织中无显著性差异（P〉0．05），但其表达与大肠癌组织学类型。分化程度，淋巴结有无转移密切相关，大肠癌MMP-2和TIMP-2蛋白表达存在显著负相关（r=-0．3684，P〈0．05）。结论MMP-2和TIMP-2对大肠癌浸润、转移均有明显影响。MMP-2蛋白阳性表达促进大肠癌浸润和转移，MMP-2和TIMP-2的检测可作为临床判断大肠癌的恶性程度、转移及估计预后的重要参考指标。     

MMP-2，TIMP-2，MMP-9的表达与胃癌侵袭转移的关系

目的检测胃癌组织以及癌旁胃组织中MMP．2、TIMP．2、MMP．9的表达差异,并分析其对胃癌侵袭转移能力的影响及其可能机制。方法将97例胃癌组织以及89例癌旁胃组织制作成组织芯片,用免疫组织化学半定量的方法检测MMP-2、TIMP-2、MMP-9在胃癌组织及癌旁胃组织中的表达程度并分析其与临床病理参数的关系。结果MMP-2、TIMP-2、MMP-9在89例胃癌组织和配对的癌旁胃组织中的表达均有显著差异（P〈O．01）,其中MMP-2在胃癌组织的表达大于其在癌旁非肿瘤胃组织,而TIMP．2、MMP．9在胃癌组织的表达小于其在癌旁非肿瘤胃组织。MMP-2的高表达率与胃癌组织的临床分期,浸润深度,淋巴结转移显著正相关（P〈0．01）;TIMP．2与胃癌组织的临床分期,浸润深度（P〈0．01）,淋巴结转移（P〈0．05）显著负相关。MMP．9在肠型胃癌的表达要显著高于弥漫型胃癌（P〈O．05）。MMP-2的高表达与TIMP-2的高表达显著负相关（P〈O．01）。结论MMP-2可促进胃癌的侵袭转移,在胃癌组织高表达;TIMP-2抑制胃癌的侵袭转移,在胃癌组织低表达;MMP-2的表达与TIMP-2的表达显著负相关。MMP-9在胃癌组织表达低,．在肠型胃癌中的表达显著高于弥漫型胃癌,与TIMP-2的表达无显著相关性。     

HL-60细胞IRP2 mRNA、TfR mRNA、Fn mRNA的表达关系研究

为了探讨白血病细胞铁代谢及其调节机制，以及铁调节蛋白2（IRP2）在HL-60细胞铁代谢中的作用，将FeCl3或去铁胺（desferrioxamine，DFO）加入含有10％胎牛血清的RPMl1640培养液中，使HL-60细胞处于缺铁或富铁的不同状态下进行培养。分别于细胞培养后第12、24和48小时收集细胞，提取总RNA，采用RT-PCR半定量法测定IRP，mRNA、铁蛋白（Fn）mRNA和转铁蛋白受体（TfR）mRNA等指标的相对表达量。结果表明：①各实验组之间IRP2 mRNA的表达量变化不大，组间差异无统计学意义（F组间=1．199，P〉0．05）；而细胞培养时间对IRP2 mRNA的表达有影响，组内差异有统计学意义（F组内=43．418，P〈0．01），表现为随时间的延长，IRP2 mRNA的表达降低。②各实验组之间TfR mRNA的表达差异有统计学意义（F组内=7．184，F组间=113．926，P〈0.01）。在加入DFO的两个实验组中，TfR mRNA的表达升高。在加铁的两个实验组中，与对照组相比较，于12小时时TfR mRNA的表达量上升，24小时时达到高峰，之后迅速下降。③在加铁的两个实验组中，Fn mRNA的表达量较高，大约是对照组的2倍，它们与对照组比较，差异具有统计学意义（P〈0．05）；而在加入DFO的两个实验组中Fn mRNA的表达与对照组相比较，无明显的差异（P〉0．05）。④IRP，mRNA与TfR mRNA及Fn mRNA的表达均不相关（r=-0．005，r=0．074，P〉0．05）。结论：①IRP2在转录水平上可能是通过自身不同片段的量的变化，而在转录后水平上是以氧化修饰的方式通过自身降解，对HL-60细胞的铁代谢进行调节。②Fn mRNA和TfR mRNA不同程度地参与了对HL-60细胞内铁的调控过程。     

胃癌患者外周血癌胚抗原、细胞角蛋白20及生存素基因检测的临床意义

目的:研究癌胚抗原(CEA)mRNA、细胞角蛋白20(CK20)mRNA及生存素(survivin)mRNA与胃癌患者诊断、转移的相关性,评估其检测的临床应用价值。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法联合检测79例胃癌、56例癌前病变及50例正常对照者外周血survivin、CEA、CK20基因的转录,并分析其与临床病理及预后关系。结果:正常对照组外周血未检测到CEA、CK20、survivin mRNA的转录,癌前病变患者survivin转录检测的阳性率为16.1%,平均拷贝数为1.6±0.8。胃癌外周血CEA、CK20、survivin mRNA转录阳性率分别为48.1%、60.8%、87.3%,其阳性率和肿瘤的分期、淋巴结转移等相关。Survivin mRNA高转录者5年生存率显著低于低转录者。胃癌患者外周血CEA、CK20、survivin mRNA转录的联合检测对肿瘤预后的判断具有较高的特异度和阳性似然比。结论:实时RT-PCR联合检测胃癌外周血中多个肿瘤标志物基因的表达,是一种较为理想的监测肿瘤复发、判断预后的方法。     

mRNA deadenylation and telomere disease

Dyskeratosis congenita (DC) is an inherited BM failure disorder that is associated with mutations in genes involved with telomere function and maintenance; however, the genetic cause of many instances of DC remains uncharacterized. In this issue of the JCI, Tummala and colleagues identify mutations in the gene encoding the poly(A)-specific ribonuclease (PARN) in individuals with a severe form of DC in three different families. PARN deficiency resulted in decreased expression of genes required for telomere maintenance and an aberrant DNA damage response, including increased levels of p53. Together, the results of this study support PARN as a DC-associated gene and suggest a potential link between p53 and telomere shortening.     

MPO mRNA,IgH mRNA和CD3ε mRNA表达对急性白血病分型的意义

比较基因分型和免疫分型在急性白血病诊断分型中的意义。采用链亲和素－胶体金细胞原位杂交技术，研究了９例急性白血病的髓过氧化物酶ｍＲＮＡ，免疫球蛋白重链ｍＲＮＡ和ＣＤ３ε ｍＲＮＡ的基因表达并同时分析了白血病的免疫表型。     

VEGF mRNA和bFGF mRNA在胃癌组织中的表达及其意义

目的探讨VEGFmRNA和bFGFmRNA在胃癌组织中的表达及意义。方法应用原位杂交染色检测5 7例胃癌手术切除标本中VEGFmRNA和bFGFmR NA表达情况。结果VEGFmRNA和bFGFmRNA表达与胃癌浸润及转移有关。癌细胞浸润深度≥ 2 /3肌层病例VEGFmRNA和bFGFmRNA阳性率分别为70 .6 %和 73.5 % ,明显高于浸润深度 <2 /3肌层病例(P <0 .0 5 ) ;伴区域淋巴结转移病例VEGFmRNA和bFGFmRNA阳性率分别为 73.0 %和 70 .3% ,明显高于无淋巴结转移病例 (P <0 .0 5 )。结论VEGFmRNA和bFGFmRNA可作为胃癌的预后指标 ,可望为胃癌抑血管生成治疗提供实验依据和新线索     

PRAME mRNA和SOX9 mRNA在肺腺癌中的表达及临床意义

目的探讨黑色素瘤特异性抗原(PRAME)mRNA和性别决定基因盒9(SOX9)mRNA在肺腺癌中的表达及临床意义。方法选取2015年2月至2018年4月于该院接受手术治疗的73例肺腺癌患者为研究对象,术中收集肺腺癌癌组织及癌旁正常组织,采用实时荧光定量PCR检测不同组织中PRAME mRNA、SOX9 mRNA的相对表达水平并进行比较;分析肺腺癌患者癌组织PRAME mRNA、SOX9 mRNA表达与临床病理特征的关系;采用Spearman相关分析PRAME mRNA表达与SOX9 mRNA表达的相关性;分析PRAME mRNA、SOX9 mRNA表达与肺腺癌患者预后的关系;采用COX回归模型分析影响肺腺癌患者预后的因素。结果与癌旁正常组织相比,肺腺癌癌组织PRAME mRNA的相对表达水平降低(P<0.05),SOX9 mRNA的相对表达水平升高(P<0.05)。PRAME mRNA、SOX9 mRNA表达与肺腺癌患者性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05),与病理分级、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。Spearman相关分析显示,肺腺癌癌组织PRAME mRNA表达与SOX9 mRNA表达呈负相关(P<0.05)。与预后良好组相比,预后不良组肺腺癌患者PRAME mRNA的相对表达水平降低(P<0.05),SOX9 mRNA的相对表达水平升高(P<0.05)。COX回归模型分析结果显示,PRAME mRNA低表达、SOX9 mRNA高表达、低分化、临床分期Ⅲ期、有淋巴结转移均是影响肺腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论肺腺癌癌组织中PRAME mRNA、SOX9 mRNA表达异常,且两者呈负相关,可能为肺腺癌的病情及预后评估提供参考依据。     

OPN和uPA mRNA在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨骨桥蛋白(OPN)mRNA及尿激酶犁纤溶酶原激活物(uPA)mRNA在肝细胞癌(HCC)组织巾的表达及与临床病理特征的关系.方法 应用RT-PCR方法检测60例HCC癌组织、20例正常对照肝组织中OPN和uPAmRNA的相对表达量.结果 HCC癌组织中OPN和uPA mRNA的阳性表达率均分别高于对照正常肝组织(P均<0.05):痛组织中OPN mRNA的表达量在有门静脉癌栓形成组及在有早期复发转移组均高于无门静脉癌栓形成组和无早期复发转移组(分别P<0.05和P<0.01),uPA mRNA的表达水平在有包膜浸润和有门静脉痛栓形成组中均高于无包膜浸润和无门静脉癌栓形成组(分别P<0.05和P<0.01):OPN mRNA的高表达和uPA mRNA的高表达呈正相关(P<0.05).结论 HCC癌组织中OPN的表达水平可以作为判断肝癌细胞转移能力和预示肝癌早期复发的重要指标.阻断OPN的表达可能可以降低uPA的分泌,从而减少肿瘤的浸润和转移.     

系统性红斑狼疮患者外周血滤泡辅助性T细胞与CXCR5及其配体CXCL13基因表达水平的研究

目的检测滤泡辅助性T细胞(Tfh)的CXCR5、CXCL13在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中的表达,探讨其与SLE的发生及病情活动性的关系。方法 90例SLE患者和60例健康对照者,采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR5+PD-1+/CD4+T细胞(Tfh)比例,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中CXCR5、CXCL13浓度,实时荧光定量RT-PCR检测PBMC中CXCR5 mRNA、CXCL13 mRNA的表达。结果活动组SLE患者外周血Tfh比例(11.01%±1.31%)、血清中CXCR5、CXCL13浓度[分别为(368.21±171.56)pg/ml、(387.59±213.54)pg/ml]和CXCR5 mRNA、CXCL13 mRNA(分别为2.15±0.63、1.71±0.37)的表达均高于健康对照组[分别为1.78%±0.11%,(210.6±100.17)pg/ml,(149.45±104.52)pg/ml,0.53±0.22,0.46±0.13;均P<0.05];SLE患者外周血Tfh比例与CXCR5 mRNA的表达水平呈正相关(r=0.68,P<0.01),与SLEDAI亦呈正相关(r=0.67,P<0.01),其中CXCR5 mRNA的表达水平与SLEDAI呈高度正相关(r=0.82,P<0.01)。SLE患者外周血Tfh比例与CXCL13 mRNA的表达水平呈正相关(r=0.73,P<0.01),与SLEDAI亦呈正相关(r=0.87,P<0.01)。结论 SLE患者外周血中Tfh细胞比例、CXCR5、CXCL13明显升高,可能在其发病过程中起了一定的作用。     

探讨大肠腺癌中SDF-1、CXCR4 mRNA的表达及相关性

目的 探讨基质细胞来源因子1 （stromal cell-derived factor 1,SDF-1）及其受体C-X-C家族趋化因子受体（C-X-C chemokine receptor,CXCR4） mRNA的表达与大肠腺癌发生及浸润转移的关系.方法 应用逆转录聚合酶链法检测50例大肠腺癌、30例正常肠黏膜组织中SDF-1和CXCR4的mRNA表达情况,并进行统计学分析.结果 SDF-1mRNA、CXCR4mRNA在大肠腺癌组织中的表达量显著高于正常肠黏膜组织,且差异均有统计学意义（P均＜ 0.01）;SDF-1 mRNA、CXCR4 mRNA的表达量与患者的性别、年龄、分化程度无关（P均＞ 0.05）,与癌组织浸润深度和淋巴结转移有关（P均＜0.05）;大肠腺癌组织中SDF-1mRNA和CXCR4mRNA的表达呈正相关（r=0.847,P＜ 0.01）.结论 SDF-1及其受体CXCR4在大肠腺癌发生及浸润转移中发挥着重要作用.