唑来膦酸对骨肉瘤细胞增殖凋亡和VEGF表达的影响

背景与目的：双膦酸盐是一类强有力的骨吸收抑制剂,被广泛的应用于治疗骨质疏松症、变形性骨炎和恶性肿瘤引起的高钙血症。越来越多实验表明双膦酸盐具有直接的抗肿瘤作用。本研究探讨第三代双膦酸盐：唑来膦酸诱导骨肉瘤LM8细胞凋亡的机制和对VEGF表达的影响。方法：CCK-8法、Hoechst 33258染色形态学观察及Annexin V-FITC/PI双染法证实细胞凋亡,流式细胞仪检测活化caspase-3的表达,免疫组化SABC法检测VEGF的表达。结果：唑来膦酸对骨肉瘤细胞株LM8的增殖抑制呈浓度依赖性,50μmol/L唑来膦酸作用48 h能明显抑制LM8细胞增殖,抑制率为（54±3）%,形态学观察可见明显胞核凝聚、固缩;流式细胞仪检测可见细胞凋亡率为（31.7±2.9）%和caspase-3活化;免疫组化SABC显示VEGF的表达明显被抑制。结论：唑来膦酸可能通过激活caspase-3诱导LM8细胞凋亡,并抑制LM8细胞VEGF的表达。     

唑来膦酸治疗癌症骨转移疼痛临床观察

目的探讨唑来膦酸治疗恶性肿瘤骨转移疼痛的疗效和安全性.方法选择恶性肿瘤骨转移中、重度疼痛患者52例,随机双盲分成两组:A组(试验组)22例:唑来膦酸4mg溶于生理盐水50ml静滴;B组(对照组)30例:博宁90mg 生理盐水750ml静滴.结果唑来膦酸镇痛效果:显效(CR):4/22,部分缓解(PR):13/22,无效(NR):5/22,总有效率(CR PR):77.27%(17/22),疗效维持时间16.4天,KPS评分平均提高20分,主要不良反应为一过性骨痛加重,发热、恶心、呕吐.对照组总有效率(RR):77.33%,疗效维持时间14.8天.结论唑来膦酸对缓解癌症骨转移疼痛有效,安全性好,病人可耐受.     

唑来膦酸联合化疗对肺癌骨转移的疗效分析

目的 探讨唑来膦酸联合化疗治疗肺癌骨转移的疗效,为临床治疗提供参考.方法 选取肺癌骨转移患者86例,采用随机数字表法分为观察组和对照组43例.两组患者均应用紫杉醇(150 mg/m2)加顺铂(80 ng/m2)联合化疗,21 d为1个周期,共3个周期.观察组在化疗的基础上增加唑来膦酸治疗,每4周重复一次,连续使用3次.结果 观察组患者疼痛缓解总有效率为(86.0％),显著高于对照组(51.2％)(P＜0.05).观察组患者治疗后活动能力恢复总有效率为(79.1)％,显著高于对照组(48.8％)(P＜0.05).观察组骨病灶修复的有效率为(60.5％),显著优于对照组(44.2％)(P＜0.05).观察组患者生活质量的改善率为(93.0％),显著高于对照组(79.1％)(P＜0.05).两组患者不良反应发生率比较无显著差异(P＞0.05).结论 唑来膦酸联合化疗治疗肺癌骨转移疗效显著,可明显缓解患者骨痛症状,提高患者的活动能力和生活质量.     

唑来膦酸治疗非小细胞肺癌骨转移疗效及安全性的临床研究

[目的]观察唑来膦酸治疗非小细胞肺癌骨转移的疗效及安全性。[方法]临床确诊的41例非小细胞肺癌骨转移患者,唑来膦酸4mg,溶于100ml生理盐水,静脉滴注15min,每3~5周重复。[结果]用药第7d骨转移疼痛缓解有效率为78.0%。骨不良事件发生率中,骨放疗为12.2%,椎体压缩、变形为7.3%,脊髓压迫为4.9%,无1例病理性骨折、骨手术及高钙血症的发生。不良反应有流感样症状、发热、肾功能降低及眼结膜炎。[结论]唑来膦酸可以有效控制非小细胞肺癌骨转移性癌痛,预防、减少和延缓骨不良事件的发生,临床应用安全性好,无严重不良反应。     

唑来膦酸对肺癌骨转移治疗的随机对照研究

肺癌骨转移占晚期肺癌患者30％～65％，大部分系溶骨性转移，常伴有剧烈疼痛及功能障碍，严重影响患者生活质量。我科于2005年2月至6月进行唑来膦酸和帕米膦酸二钠治疗肺癌骨转移临床对照观察，现进行总结。     

唑来膦酸对乳腺癌细胞系MCF-7的凋亡作用及其机制

目的:研究唑来膦酸对乳腺癌MCF-7细胞的凋亡作用和途径.方法:培养乳腺癌MCF-7细胞株,用不同浓度梯度的唑来膦酸进行处理,MTT、Annexin V-PI双染法进行生长抑制和凋亡情况的检测和分析,Western blot检测相关蛋白表达情况.结果:唑来膦酸作用于MCF-7细胞后,MTT、Annexin V-PI双染法检测发现药物对细胞呈明显的生长抑制作用,且有明显的剂量依赖性.当作用时间为48h时抑制作用最为明显.Western blot检测发现,使用唑来膦酸后,Bcl-2、Bcl-XL和Survivin 3个凋亡抑制蛋白表达水平相较于未处理组(NM)表达降低,促凋亡蛋白Bax表达明显升高.同时,Caspase-3和Caspase-9相较于未处理组,表达水平也有明显的升高,并都呈现剂量相关性.结论:唑来膦酸通过线粒体凋亡途径促进乳腺癌MCF-7细胞凋亡,且具有剂量依赖性.     

唑来膦酸治疗恶性肿瘤骨转移研究进展

骨骼是恶性肿瘤常见的转移部位之一,并可带来一系列的并发症,如骨痛、病理性骨折、脊髓压迫症和高钙血症等.二膦酸盐是治疗骨转移最常见的药物,唑来膦酸作为新一代含氮二磷酸盐类药物,是至今已发现的药物中抗骨吸收能力最强的.本文综述了唑来膦酸治疗恶性肿瘤骨转移的研究进展.     

唑来膦酸联合放射治疗对非小细胞肺癌骨转移患者癌痛的疗效观察

目的探讨唑来膦酸联合放疗在非小细胞肺癌(NSCLC)骨转移患者癌痛治疗中的近期疗效及影响因素。方法将本院2013年5月至2015年5月收治的106例NSCLC骨转移患者随机分为联合组与对照组(n=53),对照组接受单纯放疗,联合组在放疗基础上联合唑来膦酸治疗。比较两组患者的疼痛缓解情况,采用多因素Logistic回归分析影响患者短期骨痛缓解情况的因素,单因素Logistic回归分析两种治疗方式下影响患者短期骨痛缓解的因素。结果联合组癌痛缓解有效率为92.5%(49/53),高于对照组的69.8%(37/53),差异有统计学意义(P=0.003);多因素Logistic回归分析显示治疗方式是影响NSCLC骨转移骨痛缓解情况的独立因素,差异有统计学意义(P<0.05);单因素Logistic回归分析显示联合组CT影像学表现为溶骨性病灶者的治疗效果优于对照组,且其骨相关事件发生率也低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论唑来膦酸联合放射治疗NSCLC骨转移患者癌痛方面有较好疗效,值得临床推广。     

唑来膦酸对肺癌95D细胞周期阻滞和诱导凋亡的作用机制

目的 研究唑来膦酸对肺癌95D细胞的细胞周期阻滞及诱导凋亡作用.方法 采用二苯基溴化四氮唑蓝法检测唑来膦酸对肺癌95D细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测唑来瞵酸作用后肺癌95D细胞的细胞周期和凋亡的变化,并在光镜和电镜下观察细胞凋亡的形态变化;采用Western blot和逆转录聚合酶链反应检测唑来膦酸对肺癌95D细胞凋亡相关基因ERK1/ERK2、bcl-2、bax和survivin表达水平的影响.结果 唑来膦酸对肺癌95D细胞的增殖抑制作用呈时间和浓度依赖性,94.0% μmol/L唑来膦酸作用6 d时,抑制率达89.8%.随着唑来膦酸作用时间的延长,G1期细胞数量增多,G2期和S期细胞减少,凋亡细胞的数最逐渐增多.光镜和电镜均观察到细胞出现了相应的凋亡形态学变化.细胞凋亡相关基因ERK、bcl-2和survivin的表达水平下降,bax的表达水平增高.结论 唑来膦酸对肺癌95D细胞的细胞周期有阻滞作用,并能诱导其凋亡.     

唑来膦酸治疗骨转移癌35例近期疗效观察

 目的 观察唑来膦酸治疗骨转移癌的临床疗效。方法 选择我院2005年1月至2006年6月在门诊及住院骨转移癌患者35例，均给予4周期用药后评价疗效。结果 35例中局部疼痛控制总有效率为88.6 %；活动能力改善总有效率为85.7 %。结论 唑来膦酸可明显提高骨转移癌患者局部疼痛缓解率、延长局部疼痛缓解时间。能明显改善患者的活动能力，提高生活质量，长期应用可促进溶骨性骨病变的重建，患者耐受性好，给药方便，值得临床推广使用。     

塞来昔布对胃癌细胞生长抑制及诱导凋亡的实验研究

目的：研究塞来昔布对胃癌细胞株SGC-7901生长抑制及诱导凋亡的作用。方法：12．5～100μM的塞来昔布处理胃癌细胞株SGC-7901 24小时后，用MTT法测定塞来昔布对胃癌细胞的生长抑制率，流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率及MDRl表达水平。结果：12．5～100μM的塞来昔布对胃癌细胞均有抑制作用，首先表现为S期阻滞，继而出现细胞凋亡，且呈剂量依赖性。胃癌细胞MDRl表达水平在12．5μM药物浓度作用时MDRl表达上调，25～100μM药物浓度作用时MDRl表达水平明显下调，且随药物浓度的增高，MDRl表达水平逐渐下降。结论：塞来昔布通过诱导细胞凋亡对胃癌细胞具有明显抑制作用，同时塞来昔布具有下调胃癌细胞MDRl表达，逆转多药耐药性的作用，但在药物浓度较低时，则为上调MDRl表达。     

可溶性CD40配体对肺癌细胞 A549的生物学作用及其机制研究

背景与目的:尽管对 CD40分子在 B细胞中的功能已有深入的研究,但 CD40在肺癌细胞中的功能目前知之甚少.本研究旨在探讨可溶性 CD40配体(solublE-CD40 ligand, sCD40L)对肺癌细胞株 A549(CD40表达阳性细胞株)的生物学作用及其相关机制.方法:采用四氮唑盐(MTT)比色、 3H标记胸腺脱氧嘧啶核苷( 3H-TdR)掺入法检测 sCD40L对 A549细胞增殖的影响,免疫荧光标记和流式细胞术测定细胞表型及细胞周期的改变,流式细胞术、逆转录聚合酶链式反应( RT-PCR)及 Western blot分析测定 sCD40L对 A549细胞凋亡的影响及 Bcl-2、 Bax基因表达的变化.结果:(1) sCD40L可抑制 A549细胞的增殖(与对照组比较 P< 0.05).(2) sCD40L作用 72 h后, A549细胞表面 CD49e、 CD54、 TNFRⅠ及 CD95L的表达 [分别为( 61.2± 4.8)%,( 31.2± 6.1)%,( 42.7± 5.9)%,( 38.2± 3.4)% ]较对照组 [分别为 (34.7± 2.1)%, (7.1± 1.6)%, (15.2± 4.1)%, (10.1± 2.3)% ]明显升高,而 TNFRⅡ的表达 [( 8.7± 0.8)% ]较对照组 [( 58.1± 3.6)% ]下降.( 3) sCD40L作用 72h后, A549细胞 G1 期细胞比例 [(76.0± 9.1)% ]较对照组 [(56.7± 6.9)% ]增加, S期细胞比例 [(10.3± 5.7)% ]较对照组 [(32.7± 5.5)% ]减少. ( 4) sCD40L在短期( 72 h)内并不引起 A549细胞明显凋亡,但可上调 Bax的表达.结论: sCD40L可引起肺癌细胞 A549生长抑制,细胞周期和表型改变,并可引起凋亡相关基因表达的改变.     

Under usage of zoledronic acid in non-small cell lung cancer patients with metastatic bone disease--a short communication

Background and aim

The use of zoledronic acid (ZA) is now recommended for patients with NSCLC and metastatic bone disease (MBD). We thus examined the rates of ZA administration in NSCLC looking specifically at the use of this drug with systemic chemotherapy (ZCt) and comparing overall survival between patients who had ZCt from diagnosis to those who had chemotherapy (Ct) alone.

Method

In this retrospective audit, we analysed the data of 114 consecutive patients with stage IV NSCLC and MBD at presentation. Forty-three of these patients had received zoledronic acid and chemotherapy (ZCt) and 71 had received chemotherapy alone (Ct).

Results

Forty-three (37.7%, 43/114) of NSCLC patients diagnosed with MBD received ZA with their first chemotherapy (ZCt). Patients on ZCt, after adjustment for the planned prognostic factors (sites of disease, histology and PS), had better overall survival (OS), with a median of 34 weeks, compared to those who received chemotherapy alone, who had a median of 19 weeks (p = 0.03), HR = 0.60 (95%CI: 0.38-0.96). After adjusting for prognostic factors (sex, age. single versus doublet chemotherapy), ZCt patients still maintained a trend to better OS (p = 0.06) HR 0.63 (95%CI: 0.39-1.02) 34 versus 21 weeks.

Conclusions

The percentage of patients with MBD treated with ZA at first chemotherapy (37.7%) is low. The addition of ZA increased OS in NSCLC patients with MBD in this audit. More formal policies and dedicated trials on the treatment of MBD in NSCLC patients need to be put in place.     

rhTRAIL对耐顺铂人肺腺癌细胞凋亡的影响

背景与目的TRAIL和TNF、Fas一样均属TNF蛋白超家族成员。研究表明,TNFα可用于克服某些肿瘤细胞的化疗耐药性,而一些化疗药物可上调死亡受体DR的表达,从而促进TRAIL诱导的细胞凋亡。本研究旨在探讨重组人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白rhTRAIL对耐顺铂人肺腺癌细胞凋亡的影响。方法常规体外培养耐顺铂人肺腺癌细胞株A549/DDP,应用MTT比色法、DPA法、流式细胞术和激酶法,检测rhTRAIL对耐顺铂人肺腺癌细胞株A549/DDP细胞增殖的抑制活性及其诱导细胞凋亡的效应。结果单用rhTRAIL时,低剂量rhTRAIL(6.25、12.5、25.0μg/L)对A549/DDP细胞的生长抑制率和各项凋亡指数(细胞凋亡率、DNA片段化比率和Caspase3活性)均无明显影响,P>0.05,但当rhTRAIL浓度在50μg/L时,细胞生长抑制率、细胞凋亡指数、DNA片段化比率和Caspase3活性均明显增高,各达68.6%、(27.13±0.66)%、(37.4±2.0)%和0.117±0.011(P<0.05)。当3mg/LDDP和rhTRAIL联用时,12.5μg/L的rhTRAIL即可使A549/DDP细胞生长抑制率、细胞凋亡指数、DNA片段化比率和Caspase3活性明显增高,各达30.4%、(19.39±0.54)%、(17.3±4.1)%和0.138±0.009(P<0.05)。结论单用较高剂量的rhTRAIL可以诱导耐顺铂人肺腺癌细胞A549/DDP细胞凋亡。低剂量顺铂可以增强rhTRAIL诱导A549/DDP细胞凋亡的效应。rhTRAIL可望成为耐药性肺癌治疗的一种重要的生物制剂。     

紫花牡荆素诱导人肺癌Ａ５４９细胞凋亡及其机制的探讨

目的　探讨紫花牡荆素（ＣＡＳ）诱导人肺癌Ａ５４９细胞凋亡及其机制。方法　体外培养Ａ５４９细胞。ＭＴＴ法测定ＣＡＳ对Ａ５４９细胞的增殖抑制作用;ＡｎｎｅｘｉｎＶ／ＰＩ双染色分析细胞凋亡率;ＪＣ-１探针流式细胞术分析线粒体跨膜电位;Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ法分析线粒体细胞色素Ｃ的释放和Ｂａｘ蛋白的表达。结果　ＣＡＳ能抑制人肺癌Ａ５４９细胞增殖,呈浓度依赖性。ＡｎｎｅｘｉｎＶ／ＰＩ法检测结果显示１０μｍｏｌ／ＬＣＡＳ作用Ａ５４９细胞１２、２４和４８ｈ后,凋亡率分别为２２.３９％、３８.６６％和６４.８２％。ＪＣ-１探针流式细胞术分析表明,ＣＡＳ能降低Ａ５４９细胞线粒体跨膜电位;Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ显示ＣＡＳ能促进线粒体细胞色素Ｃ的释放和上调Ｂａｘ蛋白表达。结论　ＣＡＳ具有诱导Ａ５４９细胞凋亡的作用,其作用机制可能与降低细胞线粒体膜电位、增加细胞色素Ｃ释放和上调Ｂａｘ蛋白表达有关。     

Delta-catenin蛋白通过抑制JNK通路活性而减少肺癌细胞的凋亡

背景与目的：作为黏附蛋白catenin家族中的一员,Delta-catenin蛋白可以促进肿瘤细胞的增殖和侵袭,然而其提高肿瘤细胞增殖能力的机制并不清楚。本研究检测了Delta-catenin对肺癌细胞凋亡的影响及其与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein hinase,MAPK)信号通路蛋白的关系,并初步探索了Delta-catenin促进肿瘤细胞侵袭增殖的可能机制。方法：采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测肺癌细胞过表达Delta-catenin前后p38、c-jun氨基末端激酶(c-jun N-terminal kinase,JNK)蛋白活性的变化,同时利用流式细胞术检测了肿瘤细胞凋亡数量的改变,还通过Matrigel基质胶侵袭实验检测了肿瘤细胞侵袭数量的变化。结果：与未处理组和空载体对照组相比,过表达Delta-catenin后肺癌细胞的p38蛋白活性没有变化(P＞0.05),但JNK的蛋白活性却显著减少(P＜0.05),与此同时,肿瘤细胞的凋亡比例显著下降(P＜0.05),而肿瘤细胞的侵袭能力却明显增强(P＜0.05)。结论：Delta-catenin可能通过抑制肺癌细胞JNK通路的活性而减少肿瘤细胞的凋亡,进而促进肿瘤细胞的侵袭。     

吉非替尼对肺癌A549细胞系的放射增敏作用

目的:研究分子靶向药物吉非替尼(Gefitinib,Iressa)在体外对人肺腺癌A549细胞系的放射增敏作用。方法:MTT法检测Iressa单药或与放射线联合对A549细胞的抑制率;将细胞分为4组:对照组、Iressa组、照射组、Iressa 照射组,15μg/ml的Iressa处理72h后予照射,进行单细胞集落形成率试验、流式细胞术分析照射后0、24、48h各组细胞周期和凋亡率变化。结果:MTT结果显示,A549细胞的抑制率与Iressa浓度成正相关,Iressa处理48hIC50为49.88μg/ml。当Iressa浓度为5、10、15、20、30、40μg/ml时,能增强放射线对A549细胞的抑制率。各组单细胞集落形成率分别是对照组(11.97±2.82)%、Iressa组(7.43±0.58)%、照射组(1.55±0.5)%、Iressa 照射组(0.57±0.15)%,提示Iressa本身可抑制A549细胞增殖,与放射线联合能增强放射线抑制A549细胞的效果。流式细胞术分析显示15μg/ml的Iressa处理72小时,A549细胞周期中的G0~G1期比例明显升高,从(67.51±2.56)%上升到(73.63±1.62)%;G2~M期比例从(8.39±0.61)%下降到(7.02±1.1)%;S期比例从(24.1±2.65)%下降到(19.36±1.63)%;凋亡率从(0.99±0.56)%上升到(1.95±0.7)%。照射后24hIressa 照射组凋亡率升高明显,为(4.34±1.13)%,对照组(0.33±0.46)%,Iressa组(0.89±0.37)%,照射组(0.98±0.23)%。结论:Iressa在体外对A549细胞有抑制增殖和促进凋亡作用,使细胞周期G0~G1期比例升高,S期和G2~M期比例下降,凋亡率升高。Iressa与放射线联合可以明显提高A549细胞的凋亡率。本试验显示Iressa具有放射增敏作用,为临床开展放射线联合Iressa治疗非小细胞肺癌的研究提供了实验依据。     

托瑞米芬协同顺铂抑制A549细胞生长

目的：研究托瑞米芬（TOR）对人肺腺癌细胞系A549的毒性作用及其与顺铂（DDP）联用的协同效应，以期为肺癌的综合治疗提供新的方向。方法：用MTT显色法检测TOR及与DDP联用后对A549细胞的毒性作用，测定其A值。用流式细胞仪检测细胞DNA含量，Western Blotting法检测p53及p21蛋白表达，明确可能的机制。结果：TOR能直接抑制A549细胞的生长，＞或等于5μmol/L的ＴＯＲ浓度可明显增强DDP的细胞毒性作用，TOR可加强DDP对S期，G2及M期细胞的作用，且DDP加TOR后p21蛋白表达增加。结论：＞5μmol/L的TOR与DDP联用对A549细胞具有显著的协同抗肿瘤效应。其机制可能与DDP对细胞周期阻断的时相改变有关，且可能与p21蛋白诱导相关及可能和非p53依赖蛋白机制有关。