大肠癌凋亡抑制蛋白表达与奥沙利铂化疗敏感性的相关性

目的探讨凋亡抑制蛋白Survivin、Livin、p53及Bcl-2在大肠癌组织中的表达,分析其与奥沙利铂化疗敏感性的相关性。方法采用免疫组化法检测74例大肠癌组织及20例正常组织中的Survivin、Livin、p53及Bcl-2表达;体外培养肿瘤细胞,采用MTT法检测奥沙利铂对肿瘤细胞的抑制率,分析Survivin、Livin、p53及Bcl-2蛋白表达与奥沙利铂对肿瘤细胞抑制的关系。结果大肠癌组织中Survivin、Livin、p53及Bcl-2蛋白表达率(87.84%、81.08%、60.81%、56.76%)显著高于正常对照组织(5%、10%、0、5%)(χ2=4.53、3.81、3.62、2.55,P<0.01);大肠癌组织中Survivin与Bcl-2蛋白表达强度呈中等正相关(r=0.412,P<0.05),其他蛋白表达强度间均无明显相关性(r=0.126⁰.288,P>0.05)。Survivin蛋白及Bcl-2蛋白强表达组中奥沙利铂对肿瘤细胞的抑制率显著高于弱表达组(t=3.305、2.210,P<0.01、P<0.05),Livin蛋白强表达组奥沙利铂对肿瘤细胞的抑制率显著低于弱表达组(t=1.900,P<0.05),p53蛋白强表达组与弱表达组奥沙利铂对肿瘤细胞的抑制率无显著差异(t=0.063,P>0.05)。结论大肠癌肿瘤凋亡抑制蛋白Survivin、Livin、p53及Bcl-2均呈高表达,Livin在大肠癌肿瘤组织中的表达可能与奥沙利铂化疗耐药有关。     

红景天苷诱导小鼠肝癌细胞凋亡作用的机制

目的探讨红景天苷诱导小鼠肿瘤细胞凋亡的形态特征及其诱导细胞凋亡分子的机制。方法建立小鼠肝癌细胞(Hep A)模型,随机分为模型对照组、环磷酰胺组(CTX组)、红景天苷组(Sa组),分析红景天苷对肿瘤组织凋亡形态以及凋亡抑制基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平的影响。结果经红景天苷处理的肿瘤细胞凋亡数量较对照组多,细胞凋亡指数达到20.16%,与对照组比较差异有统计学意义(P0.01),Bcl-2表达减少而Bax表达增加。结论红景天苷通过诱导细胞凋亡抑制肿瘤细胞生长,诱导凋亡的机制为激活凋亡的线粒体途径。     

P53和Bcl-2家族蛋白在胰腺癌中的表达

目的:探讨胰腺癌组织(pancreatic carcinoma,PC)中P53和Bcl-2家族(Bcl-2,Bax,Bcl-xL,BclxS)蛋白表达及与细胞凋亡的关系.方法:免疫组化法检测35例PC中P53蛋白表达,将PC分为P53阴性表达组(第1组,n = 18)和P53阳性表达组(第2组,n = 17);Western blot检测两组PC中P53,Bcl-2,Bax,Bcl-xL和BclxS蛋白表达,TUNEL法检测第1组中凋亡指数(AI).结果:Bcl-2蛋白在P53阳性PC表达上调,而在P53阴性PC表达下调( P = 0.047);Bax和Bcl-xL蛋白在两组PC中表达都明显上调( P = 0.274,0.334);Bcl-xS在P53阳性表达PC明显下调,在P53阴性表达组明显上调( P = 0.01);在P53阴性和阳性表达PC,AI分别为12.1±2.47和9.1±1.48( P = 0.023);Bcl-2家族各成员表达与AI无相关性,而Bcl-2/Bax比率与AI有明显的相关性( P<0.01).结论:Bcl-2是依赖P53调节的抗凋亡蛋白,BclxS是依赖P53调节的促凋亡蛋白,而P53主要通过调节Bcl-2/Bax比率发挥凋亡调节作用.     

益气活血软坚解毒方对荷H_(22)615小鼠肝癌细胞凋亡相关基因Fas、FasL、Bcl-2、Bax、P~(53)、NF-κB表达的影响

目的:研究益气活血软坚解毒(YHRJ)方对荷H22615小鼠肝癌细胞凋亡调控基因Fas、FasL、Bcl-2、Bax、P53、NF-κB表达的影响。方法:将动物分组为NS组(正常对照组)、DDP组(顺铂组)、YHRJ等效剂量组、YHRJ高剂量组、YHRJ等效剂量+DDP组、YHRJ高剂量+DDP组,应用免疫组化、原位杂交、RT-PCR等方法对用药后的荷H22615小鼠肝癌细胞凋亡主要相关基因Fas、FasL、Bcl-2、Bax、P53、NF-κB蛋白与mRNA表达进行检测。结果:免疫组化检测结果显示:与NS组比较,各加药组均能增高Fas、Bax基因蛋白表达(均P0.01),均能降低NF-κB蛋白表达(P0.05或P0.01)及降低突变型P53基因蛋白表达(P0.01)。与NS组比较,YHRJ等效剂量+DDP组能明显降低FasL基因蛋白表达(P0.01)。与DDP组比较,中药组及中药含DDP组能明显降低FasL及突变型P53基因蛋白表达(均P0.01)。与DDP组比较,YHRJ等效剂量组、YHRJ高剂量组、YHRJ高剂量+DDP组能降低NF-κB蛋白表达(均P0.01)。与DDP组比较,YHRJ高剂量组及中药含DDP组明显增高Bax基因蛋白表达(均P0.01)。与NS组与DDP组比较,中药组及中药含DDP组能明显降低Bcl-2基因蛋白表达(P0.05或P0.01)。原位杂交检测NF-κB mRNA表达结果:与NS组及DDP组比较,YHRJ等效剂量组及中药含DDP组明显降低NF-κB mRNA表达(均P0.01)。RT-PCR检测Bax、Bcl-2 mRNA表达结果:与NS组及DDP组比较,YHRJ等效剂量组能明显增高Bax基因mRNA表达(均P0.001)。与NS组比较,各加药组能明显降低Bcl-2 mRNA表达(P0.05或P0.001);与DDP组比较,YHRJ高剂量组能明显降低Bcl-2 mRNA表达(P=0.01)。结论:YHRJ方能够提高荷H22615小鼠肝癌细胞凋亡促进基因Fas、Bax表达,减低细胞凋亡抑制基因FasL、Bcl-2表达,降低细胞凋亡保护基因突变型P53蛋白与NF-κB基因表达,这些作用是诱导肝癌细胞凋亡的分子基础。     

肺癌肿瘤抑制因子1对膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用及机制

目的 观察肺癌肿瘤抑制因子1(TSLC1)对膀胱癌裸鼠移植瘤的抑制作用,并探讨其作用机制。方法将TSLC1过表达人膀胱癌T24细胞株(Ad-TSLC1-T24组)、空载体对照T24细胞株(Ad-T24组)及空白对照T24细胞株(T24组)种植于裸鼠皮下,绘制肿瘤生长曲线,种植细胞5周处死全部裸鼠留取肿瘤组织标本,测量肿瘤体积,称量瘤重,计算抑瘤率,光镜观察移植瘤组织病理变化,RT-PCR法检测移植瘤组织中TSLC1、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)mRNA表达,Western blotting法检测移植瘤组织中TSLC1、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达。结果 肿瘤生长曲线显示Ad-TSLC1-T24组移植瘤生长明显慢于Ad-T24组及T24组,种植细胞5周Ad-TSLC1-T24组肿瘤体积及质量低于Ad-T24组及T24组(P均<0.05),抑瘤率高于Ad-T24组(P<0.05)。HE染色结果显示,Ad-TSLC1-T24组移植瘤细胞出现明显的核固缩、核碎裂等凋亡现象。与Ad-T24组、T24组比较,Ad-TSLC1-T24组移植瘤中TSLC1、Caspase-3 mRNA及蛋白相对表达量增加,Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。结论 TSLC1过表达可抑制膀胱癌裸鼠移植瘤生长,其机制可能与上调Caspase-3表达和下调Bcl-2表达促进了肿瘤细胞凋亡有关。     

螺内酯和缬沙坦对高血压大鼠心肌细胞凋亡相关蛋白的影响

目的探讨螺内酯和缬沙坦对肾血管性高血压大鼠左心室细胞凋亡调控相关蛋白P53、Bax及Bcl-2表达的影响。方法选取SD大鼠46只制成肾血管性高血压大鼠模型后,随机分为高血压组(N组,12只)、缬沙坦组(V组,11只)、螺内酯组(S组,12只)、螺内酯加缬沙坦组(S+V组,11只),另选10只未造模大鼠为假手术组(C组),各组治疗10周后行超声心动图检查,测定大鼠颈动脉压,应用免疫组织化学法检测P53、Bax及Bcl-2蛋白的表达。结果治疗10周后,与C组比较,N组大鼠收缩压明显升高(P0.01);与N组比较,V组、S+V组大鼠收缩压明显降低(P0.05);与C组比较,N组大鼠Bax、Bcl-2和Bax/Bcl-2明显升高,S组大鼠Bax和Bax/Bcl-2明显升高(P0.05,P0.01);与N组比较,S组大鼠Bax、Bax/Bcl-2和V组、S+V组大鼠Bax、Bcl-2、Bax/Bcl-2均明显下降(P0.05,P0.01);与S组比较,V组、S+V组大鼠Bax、Bax/Bcl-2明显下降(P0.05,P0.01)。结论两肾一夹肾血管性高血压大鼠左心室肥厚形成过程中,Bax过表达不完全依赖P53调节。缬沙坦可以通过与血管紧张素Ⅱ1型受体结合,抑制心肌细胞凋亡相关蛋白P53、Bax及Bcl-2的表达及左心室肥厚的发生。螺内酯可以通过与醛固酮受体结合明显降低P53及Bax的表达,降低Bax/Bcl-2比值,部分地逆转左心室肥厚。     

盐酸小檗碱抗大鼠胃癌前病变及其作用机制

[目的]探讨盐酸小檗碱对实验性大鼠胃癌前病变的影响及与细胞凋亡和P53、Bcl-2蛋白、mRNA表达水平的关系.[方法]采用N-甲基-N-亚硝基胍饮水法建立大鼠胃癌前病变模型,用盐酸小檗碱预防和大、中、小3种剂量干预治疗,观察大鼠的一般情况,以光镜观察胃癌前病变的发生率,并运用末端DNA标记法检测凋亡率(AI),免疫组化法检测细胞中P53和Bcl-2蛋白表达,逆转录多聚酶链式反应检测P53和Bcl-2的mRNA水平.[结果]经盐酸小檗碱干预大鼠,其癌前病变的发生率明显降低,与模型组比较P＜0.05,AI显著提高,3种剂量组与模型组比较均P＜0.05,并伴有Bcl-2、突变型P53基因蛋白表达水平降低,野生型P53基因mRNA水平升高,Bcl-2基因mRNA水平下调,其中以大剂量组尤为显著,与模型组比较P＜0.01.[结论]盐酸小檗碱能预防和治疗实验性大鼠胃癌前病变,其机制与提高细胞凋亡率和调控基因表达有关.     

加味孔圣枕中丹对局灶性脑缺血模型大鼠神经细胞凋亡的影响

目的研究加味孔圣枕中丹对局灶性脑缺血模型大鼠神经细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、P53表达的影响。方法线栓法建立局灶性脑缺血大鼠模型,随机分为模型组、银杏叶组及加味孔圣枕中丹组,另设假手术组(n=10)。灌胃给药,连续14 d。观察大鼠神经功能症状评分,荧光TUNEL法检测神经细胞凋亡,免疫组织化学法测定Bcl-2、P53表达。结果与模型组比较,加味孔圣枕中丹能显著降低局灶性脑缺血大鼠Zea Longa和网屏实验评分,降低神经细胞凋亡率和P53蛋白表达,增强Bcl-2蛋白表达(P均0.05)。结论加味孔圣枕中丹能改善脑缺血引起的神经功能损伤,其机制可能与调控凋亡相关蛋白表达、抑制脑缺血引起的神经细胞凋亡相关。     

STAT1在结肠癌细胞中的异常表达及对其成瘤能力和凋亡的影响

目的：探究结肠癌细胞中信号转导子和转录激活因子1(STAT1)的表达情况及对结肠癌细胞成瘤能力和凋亡的影响。方法：应用免疫组织化学方法（SP法）检测54例结肠癌及其癌旁组织中STAT1蛋白的表达。将12只5周龄的BALB/C-nu裸鼠随机分为2组,于其背部皮下分别接种转染STAT1基因的结肠癌Ls-174-T细胞（实验组）和转染空质粒的细胞（对照组）,测定2组移植瘤的大小、质量,TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化法检测Bcl-2、CyclinD1蛋白表达水平,比较分析转染STAT1对移植瘤成瘤能力、细胞凋亡及Bcl-2、CyclinD1蛋白表达水平的影响。 结果：结肠癌组织中STAT1蛋白的阳性表达率显著高于癌旁组织,在中、低分化,伴有淋巴结转移的患者中的阳性率显著高于高分化、无淋巴结转移者。转染STAT1基因的细胞所形成移植瘤体积与质量均显著大于转染空质粒的对照组,其细胞凋亡指数(AI)显著低于对照组,此外其Bcl-2、CyclinD1蛋白的表达水平显著高于对照组。结论：STAT1在结肠癌细胞中可能作为癌蛋白发挥作用,其在结肠癌细胞中的过表达可以促进肿瘤细胞的生长,抑制肿瘤细胞的凋亡,并上调CyclinD1、Bcl-2蛋白的表达。     

针刺对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响

目的探讨针刺对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白、介导细胞凋亡蛋白(Fas)表达的影响及针刺治疗围绝经期综合征的作用机制。方法从32只SD雌性大鼠中筛选出符合围绝经期特征的SD雌性大鼠24只,随机分为针刺组、药物组、围绝经期组,各8只,另选择8只5个月雌性SD大鼠作为青年大鼠组,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记法(TUNEL法)、免疫组化法检测卵巢颗粒细胞的凋亡及Bcl-2、Fas表达,采用IMS细胞图像分析法对染色图像进行分析,对各组阳性染色面积均值进行统计分析,对比各组组间的差异。结果与青年大鼠组相比,围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡、Bcl-2蛋白表达、Fas蛋白表达均具有极显著差异(P0.01);针刺治疗后大鼠体内卵巢颗粒细胞凋亡减少(P0.05),Bcl-2蛋白表达提高(P0.05),Fas蛋白表达降低(P0.05),针刺组与药物组之间大鼠体内卵巢颗粒细胞凋亡、Bcl-2蛋白及Fas蛋白的表达无显著性差异(P0.05)。结论针刺具有抑制围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡、增加Bcl-2蛋白表达及降低Fas蛋白表达的作用。     

卡维地洛对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡及相关因素的影响

目的探讨卡维地洛对自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞凋亡、心肌Bcl-2、p53蛋白表达、血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的影响.方法6周龄雄性SHR12只,随机分为2组(n=6)对照组普通饲料喂养+NS 5 mL/d灌胃;卡维地洛组卡维地洛(Car)20 mg/(kg·d)+NS 5 mL溶解灌胃,其余同对照组,共8周.随后给予2%戊巴比妥钠40 mg/kg IP麻醉,剖腹取下腔静脉血3 mL,分3等分于试管中分离血浆保存,待测AngⅡ、SOD与MDA.继之开胸取心脏,取左心室游离壁心肌于10%中性福尔马林中固定24 h,继之脱水,石蜡包埋及切片,并采用TUNEL法、免疫组化法分别检测心肌细胞凋亡率,Bcl-2及p53蛋白表达率.结果与对照组比较,Car组血浆MDA、AngⅡ、心肌细胞凋亡率及心肌细胞p53蛋白表达率均明显降低,而血浆SOD、心肌细胞Bcl-2蛋白表达率则明显增高(P＜0.01).且两组中MDA、AngⅡ及p53蛋白表达率与心肌细胞凋亡率均分别呈正相关;而SOD、Bcl-2蛋白表达率与心肌细胞凋亡率呈负相关(P＜0.05).结论Car具有明显抑制SHR心肌细胞凋亡,p53蛋白表达和抗氧化作用,同时还能明显改善Bcl-2蛋白表达的效应,AngⅡ、p53蛋白表达、Bcl-2蛋白表达和脂质过氧化反应均可能参与了心肌细胞凋亡过程.     

特发性肺纤维化患者上皮细胞促凋亡及抗凋亡信号表达

目的 探讨促凋亡信号和抗凋亡信号在特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)发生中的意义.方法 应用末端原位杂交和免疫组织化学技术,检测12例IPF患者的肺活检组织和10例正常对照肺组织肺泡和支气管上皮细胞凋亡情况及P53、P21、Bax和Bcl-2蛋白表达的变化.结果 IPF患者肺组织的肺泡和支气管上皮细胞凋亡率明显上调(U=0.0,P＜0.01),肺泡和支气管上皮细胞中P53、P21、Bax蛋白表达上调(U=5.0～35.5,P值均＜0.05),肺泡和支气管上皮细胞中Bcl-2蛋白表达下调(U值分别为12.0、18.0,P＜0.01).相关分析结果表明,肺泡和支气管上皮细胞P53、P21、Bax蛋白表达与其凋亡率之间均呈显著正相关(r值为0.436～0.806,P值均＜0.05),肺泡和支气管上皮细胞Bcl-2蛋白表达与其凋亡率之间均呈显著负相关(r值为-0.715～-0.699,P值均＜0.01).结论 肺纤维化时肺泡和支气管上皮细胞凋亡率增高,P53、P21、Bax蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,这些因素在肺纤维化的发生和发展中起重要作用.     

健脾理气合剂对糖尿病胃轻瘫大鼠胃组织凋亡及相关基因Bcl-2、Bax的影响

[目的]观察健脾理气合剂对糖尿病胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DGP)大鼠胃组织细胞凋亡及相关基因Bcl-2、Bax表达的影响。[方法]建立DGP模型,分别予生理盐水、吗丁啉混悬液、健脾理气合剂(高、低剂量)连续灌胃给药3周,检测血糖、胃组织细胞凋亡率,以及胃组织中Bax,Bcl-2蛋白表达。[结果]健脾理气合剂高剂量组与低剂量组、吗丁啉组比较,其胃平滑肌细胞凋亡率明显降低(P0.05),胃壁组织的Bax基因表达明显减少(P0.05),Bcl-2基因表达明显增加(P0.05)。[结论]健脾理气合剂可以减少糖尿病轻瘫大鼠胃壁组织平滑肌细胞凋亡,良性调控胃壁组织的Bax和Bcl-2蛋白表达。     

Survivin蛋白在非小细胞肺癌中表达的研究

目的探讨Survivin、突变型P53、Bcl-2蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其三者之间的关系。方法用链霉菌生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学法(SP法)检测71例手术切除的非小细胞肺癌(NSCLC)组织和30例正常肺组织中Survivin、突变型P53、Bcl-2蛋白的表达;用原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡指数(AI)。结果在NSCLC组织中Survivin、突变型P53、Bcl-2蛋白的表达率分别为61.97%、52.52%、22.54%;30例正常肺组织中无Survivin、突变型P53蛋白表达(P<0.001),Bcl-2蛋白表达率为3.33%(P<0.005);肺癌Survivin阳性、阴性表达组织、正常肺组织的平均凋亡指数分别为11.86±4.67‰、18.67±7.93‰、23.32±6.98‰,肺癌Survivin阳性表达组织与正常肺组织的平均AI相比(P<0.001),肺癌Survivin阴性表达组织与正常肺组织的平均AI相比(P<0.05),差异有显著的统计学意义。结论Survivin蛋白在肺癌组织中的表达,提示该凋亡抑制蛋白在肺癌的发生发展中起抑制癌细胞凋亡的重要作用,AI显示出了Survivin蛋白的抗凋亡作用,Survivin基因有望成为基因治疗的新靶点。     

急性心肌梗死大鼠主动脉组织中Profilin-1蛋白表达与细胞损伤、凋亡及ERK1/2信号通路关联研究

目的探讨Profilin-1蛋白在急性心肌梗死大鼠主动脉组织中的表达及其与细胞损伤、凋亡及ERK1/2信号通路的关系。方法 20只成年雄性Wistar大鼠随机分为心肌梗死模型组和假手术对照组,每组各10只。对两组大鼠进行急性心肌梗死模型处理。Western免疫印迹法测定两组大鼠急性心肌梗死后升主动脉组织内Profilin-1蛋白和细胞外信号激酶磷酸化蛋白(p ERK1/2)的表达量,流式细胞术检测心肌细胞内皮微颗粒(EMP),分光光度计法测定一氧化氮(NO)水平、心肌损伤指标肌钙蛋白T(c Tn T)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,RT-PCR法检测心肌凋亡因子P53、Fas、Bax、Bcl-2 m RNA的表达水平。结果与对照组相比,模型组大鼠的主动脉组织Profilin-1和p ERK1/2蛋白表达水平较高(P0.05);模型组EMP值较高,NO水平较低(P均0.05);心肌组织中c Tn T、CK-MB、P53、Fas和Bax因子m RNA表达较高,Bcl-2 m RNA水平较降(P均0.05)。模型组Profilin-1和p ERK1/2蛋白表达量与c Tn T、CK-EMP、P53、Fas和Bax水平呈正相关,与NO和Bcl-2水平呈负相关(P均0.05)。结论在大鼠急性心肌梗死模型中Profilin-1蛋白表达升高。     

B细胞非霍奇金淋巴瘤患者FHIT与Bcl-2关系的初步探讨

目的初步探讨B细胞非霍奇金淋巴瘤（NHL）组织中脆性组氨酸三联体（FHIT）、Bcl-2蛋白表达及意义。方法应用免疫组化EnVision法检测52例B细胞NHL组织（NHL组）和10例坏死增生性淋巴结炎组织（对照组）中FHIT、Bcl-2蛋白的表达情况。结果与对照组比较,NHL组FHIT蛋白表达降低,Bcl-2表达升高;NHL组中FHIT蛋白与Bcl-2蛋白表达呈负相关（P〈0.05）。结论 B细胞NHL发生可能与FHIT蛋白缺失、Bcl-2蛋白介导的凋亡受阻有关。     

吉西他滨纳米磁靶向药囊对肺鳞癌细胞株A2裸鼠模型 Bcl-2表达的影响

目的：研究吉西他滨纳米磁靶向药囊对肺鳞癌 A2细胞体内移植瘤的抑制作用及对Bcl-2表达的影响。方法将植入肺鳞癌细胞株 A2细胞的裸鼠肺癌模型分为3组：模型组、化疗药物组和纳米磁靶向药囊组。观察并计算各组小鼠肿瘤生长情况,并通过 RT-PCR 和 Western blot 检测各组 Bcl-2的表达情况。结果纳米磁靶向药囊可以显著抑制肿瘤生长,抑瘤率为33%,并且显著下调Bcl-2的 mRNA 和蛋白表达水平,与模型组相比差异有统计学意义(P 值均<0.05)。结论纳米磁靶向药囊可以显著抑制肺鳞癌 A2移植瘤的生长,下调 Bcl-2的表达,诱导肿瘤细胞凋亡。     

PDECGF特异性RNA抑制片段诱导裸鼠膀胱癌细胞凋亡的研究

目的 利用RNA干扰技术在裸鼠膀胱癌动物模型中通过抑制靶向沉默血小板源性内皮生长因子基因(PDECGF)的表达,探讨其在活体动物肿瘤组织中的作用.方法 将psiPDECGF-1及-2稳定转染的阳性T24细胞株及其他对照组直接接种于裸鼠皮下,观察肿瘤细胞生长及成瘤情况、测定肿瘤体积的变化;免疫组化检查PDECGF蛋白表达;TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡.结果 裸鼠体内成瘤实验发现siRNA2组第21天时成瘤率只有50%,而其他各组成瘤率为100%.siRNA2组生长速度明显慢于其他3组,siRNA2组不仅成瘤延迟,且生长速度明显慢于其他3组(P＜0.01).免疫组化证实siRNA2组肿瘤组织PDECGF 蛋白表达最低; TUNEL检测siRNA2组细胞凋亡数明显多于其他3组 (P＜0.05).结论 PDECGF siRNA载体稳定转染细胞株体内实验可见膀胱癌细胞成瘤率降低,成瘤延迟及肿瘤生长速度减慢,癌细胞凋亡增多.PDECGF siRNA在裸鼠体内依然对膀胱癌细胞有明显抑制作用.     

盐酸氨溴索对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织细胞凋亡和血清炎症因子的影响

目的研究细胞凋亡在大鼠慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)形成过程中的作用机制,并探讨盐酸氨溴索对慢阻肺大鼠肺组织细胞凋亡和血清炎症因子的影响。方法 34只健康SD大鼠随机分为3组:A正常对照组、B盐酸氨溴索组、C模型组。采用免疫组化法检测Bcl-2(b cell lymphoma/lewkmia-2)蛋白、Bax(Bcl-2 associated x protein)蛋白及Caspase-3蛋白的表达;采用血清酶联免疫吸附测定法测定各组血清中炎症因子(LTB4、IL-8、SP-D)的浓度。结果与A组比较,C组中Bax蛋白、Caspase-3蛋白以及炎症因子表达增多,Bcl-2蛋白的表达及Bcl-2/Bax减少,差异均显著(P0.05);与C组比较,B组Bax蛋白、Caspase-3蛋白以及炎症因子表达减少,Bcl-2蛋白的表达及Bcl-2/Bax增高,差异均显著(P0.05)。结论慢阻肺的发病机制可能与细胞凋亡有关,盐酸氨溴索在慢阻肺肺组织中发挥抗细胞凋亡和抗炎作用,其机制可能在于调控死亡信号通路中Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达以及抑制炎症因子的表达,起到肺保护的作用。     

丙泊酚对大鼠肺缺血再灌注损伤细胞凋亡及相关蛋白的影响

目的 探讨丙泊酚对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)细胞凋亡及相关蛋白的影响.方法 雄性SD大鼠42只,随机分为3组:假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、丙泊酚组(P组).IR组、P组均建立大鼠原位肺缺血再灌注模型(缺血1 h,再灌3 h),P组于缺血前30 min静脉输注丙泊酚5 mg·kg-1·h-1.实验结束后立即取左肺标本,用免疫组化法检测Bcl-2与Bax蛋白表达情况,原位细胞凋亡检测(TUNEL)法检测肺上皮细胞凋亡指数(AI),同时光镜下观察肺组织的病理学变化.结果 与S组相比,IR组凋亡指数增加,肺组织中Bcl-2、Bax表达均增强,Bcl-2/Bax比值明显降低 (P＜0.05);与IR组相比,P组Bcl-2蛋白表达增加、Bax蛋白表达减少和细胞凋亡指数降低(P＜0.05),光镜下肺组织病理学变化明显轻于IR组.结论 丙泊酚对大鼠LIRI具有保护作用,其机制可能与调控Bcl-2/Bax蛋白表达从而减轻肺细胞凋亡有关.