多氯联苯对大鼠睾丸c-fos、c-Myc和β-catenin表达的影响

目的:探讨多氯联苯(PCB)对大鼠睾丸组织表型及表达c-fos、c-Myc和β-catenin的影响。方法:Wistar大鼠45只随机分为4组,对照组饲喂正常饲料,低、中、高剂量组分别饲喂不同PCB含量的颗粒饲料(分别含PCB0.1、1、10mg/kg),90d后建立慢性PCB毒性动物模型。利用组织病理学技术分析PCB对大鼠睾丸组织表型的影响;采用免疫组化方法检测睾丸组织c-fos、c-Myc和β-catenin的表达。结果:PCB染毒组睾丸组织病理学表现为睾丸水肿,间质表型受损,生精小管形态发生改变,间质细胞、初级精母细胞、次级精母细胞消失,精子数量少见。1mg/kg和10mg/kg组c-fos和c-Myc的表达明显强于对照组和0.1mg/kg组(P<0.01);0.1mg/kg组β-catenin蛋白表达下调,与其它各组相比差异显著(P<0.01);1mg/kg组β-catenin的表达高于对照组和10mg/kg组(P<0.05)。结论:PCB能引起大鼠睾丸组织表型的改变,c-fos、c-Myc和β-catenin的异常表达与PCB致睾丸损伤有密切关系。     

实验性精索静脉曲张对青春期大鼠睾丸、附睾精子结合抗原11 mRNA及其蛋白异构体表达的影响

目的:研究实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对青春期大鼠睾丸和附睾中精子结合抗原11(SPAG11)mRNA及其蛋白异构体SPAG11E表达的影响,并探讨其与精索静脉曲张导致男性不育的关系。方法:40只SD大鼠随机分为ELV2周组、4周组,假手术对照2周组、4周组,每组10只。ELV组行部分结扎左肾静脉建立青春期SD大鼠ELV模型,假手术对照组仅显露左肾静脉过程,但不结扎。应用RT-PCR和免疫组化法(n=5)检测SPAG11 mR-NA及SPAG11E蛋白在ELV2周组和ELV4周组及各自对照组大鼠双侧睾丸、附睾中的表达变化。结果:RT-PCR结果显示,SPAG11基因376bp的特异扩增产物仅见于大鼠附睾组织中。免疫组化结果显示,SPAG11E蛋白主要与睾丸生精上皮的圆形和长形精子细胞的顶体泡和顶体、睾丸间质细胞的胞质相结合;在附睾管上皮主细胞胞质和顶部静纤毛中表达。对RT-PCR的相对吸光度值和免疫组化的灰度值进行统计学分析显示:①左侧附睾ELV2周和4周组SPAG11 mRNA和SPAG11E蛋白的表达与各自右侧组及各自对照组比较均有显著减弱(P<0.05或P<0.01);左侧附睾ELV4周组SPAG11mRNA与SPAG11E的表达较ELV2周组显著减少(P<0.05或P<0.01);右侧附睾ELV4周组SPAG11E的表达也较ELV2周组显著减少(P<0.01);②两实验组双侧睾丸SPAG11E蛋白的表达与相应对照组比较均未见明显差异(P>0.05),且在ELV2周组和ELV4周组之间该蛋白的表达也无显著性差异(P>0.05)。结论:SPAG11是特异表达于附睾的基因,在大鼠睾丸和附睾中均可见其蛋白异构体SPAG11E免疫阳性反应,其定位及表达水平具有细胞特异性和区域特异性,而且SPAG11 mRNA及SPAG11E蛋白在ELV模型鼠附睾中的表达发生了明显变化,这提示SPAG11不仅可能在大鼠精子发生、成熟过程中发挥重要作用,还可能与精索静脉曲张所致的男性不育相关。     

白藜芦醇对2,5-己二酮导致SD大鼠睾丸生精障碍治疗作用的实验研究

目的:观察白藜芦醇促进2,5-己二酮(2,5-HD)所致睾丸生精障碍后的生精功能恢复作用。方法:40只雄性SD大鼠随机分为5组(每组8只),A组正常喂饲,B、C、D、E组均饮用含1%2,5-HD的水溶液5周,然后C、D、E组用不同浓度的白藜芦醇[分别为20、40、80 mg/(kg.d)]治疗9周。比较各组外表体征、体重增加值、睾丸重量的变化,及各组生精小管数目、直径以及生精细胞膜c-kit蛋白表达水平。结果:与A组相比,B、C、D、E组大鼠体质瘦弱、皮肤松弛、毛色暗淡、体重增长减慢、睾丸萎缩;睾丸组织HE染色及免疫组化染色显示生精上皮萎缩,生精细胞发育停滞,c-kit蛋白表达受到抑制。经过白藜芦醇治疗后,C、D、E组大鼠外表体征得到恢复,接近A组,体重和睾丸重量均较B组有所恢复(P<0.01);睾丸生精功能部分恢复,但生精小管数目、直径低于A组水平(P<0.001),同时c-kit蛋白重新获得表达,但低于A组水平(P<0.01)。随着白藜芦醇用量增加,C、D、E组大鼠睾丸生精小管数目、直径显著恢复(P<0.01),生精细胞膜c-kit蛋白表达量增加更为明显(P<0.01)。结论:白藜芦醇可以促进2,5-HD所致大鼠睾丸生精障碍的生精功能恢复。     

多氯联苯对大鼠睾丸bcl-2及TGFβ1表达影响的研究

目的:探讨多氯联苯(PCB)对大鼠睾丸结构及功能的影响。　方法:选用Wistar雄性大鼠40只随机分为 4组,A组饲喂正常饲料,B组饲喂含10-8mol/LPCB饲料,C组饲喂含10-7mol/LPCB饲料,D组饲喂含10-6mol/L PCB饲料,饲喂3个月后建立慢性PCB毒性动物模型,用光镜、免疫组化技术研究PCB对大鼠睾丸结构及功能的影 响。　结果:PCB对大鼠睾丸结构的损伤同PCB剂量呈正相关,高剂量PCB组睾丸组织结构受损严重;PCB能诱 导bcl 2和TGFβ1表达,PCB能诱导睾丸组织bcl 2和TGFβ1的表达,两者的表达强度同PCB的浓度相关;高浓度 组TGFβ1的阳性率明显高于对照组和其他组(P<0.01),C组bcl 2阳性率明显高于对照组和其他组(P<0.01)。 结论:PCB对大鼠睾丸组织结构及功能产生明显的损伤作用。     

口服丙烯酰胺对雄性大鼠生长发育及生殖机能的影响

目的:研究丙烯酰胺对雄性大鼠的生殖毒性作用。方法:30只21日龄断奶未成熟雄性大鼠随机分为3组,实验组Ⅰ和实验组Ⅱ分别通过自由饮水方式口服5 mg/kg.d和10 mg/kg.d的丙烯酰胺溶液8周,对照组饮用自来水。分两批(第4周和第8周时)对体重、脏器重等指标进行检测,并做睾丸和附睾的组织形态学观察;第8周时,同时检查附睾尾精子密度和精子形态。结果:两实验组大鼠体重增加显著低于对照组(P<0.05),至实验8周时,睾丸、附睾性器官发育已受到影响,实验组Ⅱ大鼠附睾尾部精子密度明显低于对照组(P<0.05),实验组Ⅰ与对照组差异不显著(P>0.05)。睾丸出现不同程度的病理变化,发生调亡的生精小管周围间质细胞显著增多(P<0.05)。结论:丙烯酰胺会对生精小管产生毒性作用而导致雄性大鼠精子生成减少。     

实验性精索静脉曲张对大鼠睾丸和附睾中血管内皮生长因子及其受体1表达的影响

目的:研究实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对青春期大鼠睾丸、附睾中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体fms样酪氨酸激酶(Flt-1)蛋白表达的影响。方法:建立青春期雄性SD大鼠ELV模型,采用免疫组化SP法检测VEGF和Flt-1在ELV组及假手术对照组睾丸、附睾组织中的表达变化。结果:VEGF和Flt-1蛋白在ELV组和对照组大鼠睾丸、附睾中均有表达,其定位和表达量具有细胞特异性和区域特异性。经图像分析和统计检测显示,ELV2周和4周组双侧睾丸和附睾中VEGF蛋白的表达与相应对照组比较均显著增加(P<0.01和P<0.05);ELV2周组双侧睾丸和附睾中Flt-1蛋白的表达与相应对照组比较也显著增加(P<0.01和P<0.01),但4周时在双侧睾丸和左侧附睾中Flt-1蛋白的表达显著下降(P<0.01和P<0.05),而右侧附睾未见明显差异(P>0.05)。结论:实验性精索静脉曲张可造成青春期大鼠睾丸、附睾中VEGF和Flt-1的表达量变化,该变化可能会影响精子的发生和成熟,因而可能是VC引起男性生育力下降甚至不育的原因之一。     

低温对大鼠睾丸扭转后睾丸抗氧化能力影响的研究

目的:探讨低温对睾丸扭转后其抗氧化能力的影响。方法:24只健康青春期SD雄性大鼠随机分为3组:A组为睾丸扭转组,B组为睾丸扭转加低温组,C组为对照组,每组8只。建立单侧睾丸扭转模型。术后第14d采集睾丸。化学比色法测定其总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)的含量。光镜观察睾丸组织学变化。结果:B组T-AOC明显高于A组(P<0.01),而低于C组(P<0.01);B组MDA含量低于A组(P<0.01),而高于C组(P<0.05)。结论:低温可抑制睾丸扭转复位后氧自由基的产生及其引发的脂质过氧化反应,提高扭转睾丸的生存力。     

非酶糖基化终末产物抑制大鼠睾丸Leydig细胞睾酮的生成

目的:研究非酶糖基化终末产物受体(RAGE)在大鼠睾丸Leydig细胞上的表达及非酶糖基化终末产物(AGEs)对大鼠睾丸Leydig细胞睾酮合成的抑制作用。方法:原代培养大鼠睾丸Leydig细胞,RT-PCR和免疫荧光技术检测RACE在大鼠Leydig细胞上表达,不同浓度AGEs处理Leydig细胞(25、50、100、200μg/ml),ELISA法测定睾酮分泌量。结果:RT-PCR和免疫荧光结果表明RAGE在大鼠睾丸Leydig细胞上表达,不同浓度AGEs处理后,人绒毛膜促性腺激素(hCG)诱导的Leydig细胞睾酮合成量呈剂量浓度依赖性下降,与对照组相比,50、100、200μg/ml AGEs处理组差异显著(P0.01)。结论:大鼠Leydig细胞上存在RAGE受体,AGEs显著抑制原代培养大鼠Leydig细胞睾酮的分泌。     

低氧对大鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响

目的:研究低氧对大鼠睾丸生殖细胞凋亡和Bax、Bcl-2表达的影响。方法:雄性成年Wistar大鼠随机分为4组:常氧对照组、低氧5 d组、低氧15 d组和低氧30 d组(各组n=6)。常氧对照组在平原喂养;低氧5 d组、15 d组和30 d组分别在低压舱内模拟5 000 m高原喂养5、15、30 d。采用流式细胞术和TUNEL法检测低氧对睾丸生殖细胞凋亡的影响。运用Western印迹技术检测低氧对大鼠睾丸内凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。结果:低氧5 d组、15 d组和30 d组睾丸内发生生殖细胞凋亡的生精小管数量[每100个生精小管中,含有凋亡生殖细胞的生精小管数分别为(20.50±5.07)、(21.25±7.85)、(14.00±2.45)个]均非常显著地高于常氧对照组[(6.00±2.16)个,P<0.01]。凋亡的生殖细胞以精原和精母细胞为主。低氧15 d组睾丸组织亚单倍体细胞百分率[(2.18±0.82)%]显著高于常氧对照组[(1.30±0.33)%,P<0.05],低氧30 d组[(3.08±0.93)%]极显著高于常氧对照组(P<0.01)。低氧30 d组睾丸组织Bax表达显著高于常氧对照组(P<0.05),其灰度值分别为17.34±4.54和10.50±2.82。低氧30 d组睾丸组织Bax/Bcl-2比值显著高于常氧对照组(P<0.01),比值分别为0.40±0.10和0.27±0.04。结论:低氧诱导大鼠睾丸生殖细胞凋亡增多,慢性低氧引起的睾丸生殖细胞凋亡增多与Bax表达增加有关。     

叶下株提取物对盐酸氮芥损伤睾丸组织N-钙粘蛋白表达的保护作用

目的:研究叶下珠(PU)提取物对盐酸氮芥(HN2)损伤睾丸组织N-钙粘蛋白表达的保护作用。方法:以5mg/kg高剂量HN2腹腔注射雄性KM小鼠制备生殖毒性模型,48只KM小鼠随机分为正常对照组、高剂量HN2组(5mg/kg)、高剂量HN2+低剂量PU(125mg/kg)干预组、高剂量HN2+中剂量PU(250mg/kg)干预组、高剂量HN2+高剂量PU(500mg/kg)干预组、高剂量PU组(500mg/kg)6组,每组8只。分别应用免疫组化染色、RT-PCR、Western印迹检测各组小鼠睾丸组织N-钙粘蛋白分布、mRNA及蛋白质表达水平变化。结果:N-钙粘蛋白主要分布在生精小管基底部Sertoli细胞及Leydig细胞、管周细胞胞膜及胞质;HN2处理后,N-钙粘蛋白仅在生精小管基底部及管周细胞有少许表达;不同剂量PU干预高剂量HN2处理后,睾丸内N-钙粘蛋白mRNA和蛋白质表达随PU干预剂量增加而明显上调(P<0.01);高剂量PU干预HN2组及高剂量PU组,N-钙粘蛋白分布表达与正常睾丸组织无明显差异(P>0.05)。结论:PU能有效干预HN2对睾丸组织N-钙粘蛋白表达的损伤。     

抑制核因子-κB活性对肝肺综合征大鼠肺血管内巨噬细胞iNOS表达的影响

目的 研究抑制核因子-κB(NF-κB)活性对肝肺综合征(HPS)大鼠肺血管内巨噬细胞(PIM)内诱导型一氧化氮合酶(iNOs)表达的影响.方法 Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为4组:对照组,吡咯醛二硫氨基甲酸(PDTC)对照组,CCl4组,CC4+PDTC组.对照组不做任何处理.CC4组,肌注CC4(3 ml/kg·4 d),共16次.CC4+PDTC组,注射CC4第4次后,腹腔注射PDTC(20 mg/kg·48 h).PDTC对照组,仅按CC4+PDTC组方法注射PDTC.取动脉血作血气分析,静脉血测内毒素和肝功能.取肠系膜淋巴结作细菌培养.应用免疫组化方法观察PIM的黏附、聚集情况,以及iNOS和NF-κB的蛋白表达和定位.以非放射性凝胶电泳阻滞实验(EMSA)检测NF-κB活性,SYBR Gteen Ⅰ实时定量PCR方法检测肺组织中iNOS的mRNA表达.结果 CCl4组发展成HPS模型,表现为PaO2、PaCO2降低和肺泡一动脉血氧分压差(A-aDO2)升高,肝功能异常,内毒素血症,所有数值都与对照组和PDTC对照组有显著性差异(P<0.05).CCl4组肠系膜淋巴结培养阳性率为62.5%(5/8),与CCl4+PDTC组的66.7%(6/9)无统计学差异(P=1.000).CCl4组中超过10个巨噬细胞的血管为60.8%(292/480),CCl4+PDTC组中超过10个巨噬细胞的血管仅为19.6%(106/540),两组间存在非常显著性差异(P<0.01).对照组和PDTC对照组中肺血管内无巨噬细胞聚集.肺组织切片免疫组化染色检测NF-κB和iNOS蛋白均在CCl4组的PIM中表达.CCl4组的NF-κB活性明显高于对照组和PDTC对照组(P<0.05).CCl4+PDTC组的NF-κB活性明显低于CCl4组(P<0.05),而与对照组和PDTC对照组之间无显著性差异(P>0.05).CCl4组的iNOS的mRNA表达明显高于对照组和PDTC对照组(P<0.05).CCl4+PDTC组的iNOS的mRNA表达明显低于CCl4组(P<0.05),而与对照组和PDTC对照组之间无显著性差异(P>0.05).结论 NF-κB诱导PIM内iNOS高表达在HPS中发挥重要作用,PDTC可能通过抑制PIM中NF-κB的活性,降低PIM活性以及其中iNOS表达,从而改善HPS.通信作者:王宇,电子信箱:wangyu0319@126.com     

外源性一氧化氮对脑缺血-再灌注损伤大鼠海马气体信号分子的影响

目的 研究外源性一氧化氮(NO)对脑缺血-再灌注(I-R)损伤大鼠海马气体信号分子的影响.方法 24只Wistar大鼠随机均分为四组:脑I-R对照组(Ⅰ组),脑I-R+低浓度硝普钠(SNP)组(Ⅱ组)和脑I-R+高浓度SNP组(Ⅲ组),对照组(Ⅳ组).夹闭两侧颈总动脉制作大鼠全脑I-R模型.颈总动脉夹闭前30 min分别腹腔注射SNP 2 mg/kg(Ⅱ组)或4 mg/kg(Ⅲ组).脑缺血20 min,再灌注6 h后处死大鼠,取脑海马组织,检测硫化氢(H_2S)、NO和CO的量和胱硫醚β-合酶(CBS)、血红素氧合酶-1(HO-1)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,以及CKS mRNA、iNOS mRNA和HO-1-mRNA表达水平.结果 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组大鼠海马中H_2S、NO和CO的含量和CBS、HO和iNOS的活性均高于Ⅳ组;CBS mRNA、iNOS mRNA和HO-1 mRNA表达增高(P<0.05或P<0.01);Ⅱ、Ⅲ组大鼠海马中的上述指标均高于Ⅰ组(P<0.05或P<0.01).结论 外源性NO能诱导脑I-R后大鼠海马CBS mRNA和HO-1 mRNA表达,激活CBS和HO.在脑I-R损伤过程中存在N0对CBS/H2S和HO-1/CO系统的调节.     

成年糖尿病大鼠睾丸、附睾和前列腺内雄激素受体的表达研究

目的:观察糖尿病大鼠睾丸、附睾和前列腺内是否存在雄激素受体(AR)的异常表达。方法:用链脲菌素(STZ)诱导成年大鼠糖尿病模型,实验分正常对照组(C组)、糖尿病组(D组)及胰岛素治疗组(ID组),分别以Northern印迹及放射配基法检测睾丸、附睾和前列腺内AR的mRNA及蛋白质水平。结果:D和ID组血清睾酮水平低于C组(P<0.05);附睾内D和ID组AR的mRNA水平低于C组(P<0.05),睾丸和前列腺内D组AR的蛋白质水平低于C组(P<0.05)。结论:糖尿病大鼠睾丸、附睾和前列腺内AR的表达降低,从而削弱了雄激素的生物利用度,这可能是导致患病大鼠性与生殖功能障碍的原因之一。     

iNOS基因转染对雄激素非依赖性前列腺癌细胞DU145生长的影响

目的:观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转染对雄激素非依赖性前列腺癌细胞DU145生物学行为的影响。方法:将iNOS基因转染到DU145细胞并筛选出阳性细胞进行扩增,并设空载体组和对照组。观察细胞的形态变化,MTT法绘制生长曲线;流式细胞术检测细胞凋亡率;了解NOS抑制剂对转染细胞的影响。结果:转染iNOS后,DU145细胞分泌的NO[(272.50±15.82)μmol/L]显著高于空载体组[(122.00±18.93)μmol/L]和对照组[(121.00±6.98)μmol/L](P<0.05)。流式细胞术检测结果提示转染iNOS组细胞凋亡率[(42.78±2.01)%]明显高于空载体组[(30.65±1.46)%]和对照组[(28.96±1.50)%](P<0.05)。MTT测定结果提示转染组细胞生长较空载体组和对照组减慢(P<0.05),NOS抑制剂可以加快其生长,但无显著性差异(P>0.05)。结论:iNOS基因转染可以使DU145细胞分泌较高浓度的NO,诱导细胞凋亡,抑制细胞生长,为晚期雄激素非依赖性前列腺癌的基因治疗提供一个有效的靶点。     

氰戊菊酯对大鼠精子及生殖激素的影响

目的探讨氰戊菊酯(Fen)对雄性大鼠精子计数、活力以及生殖激素的影响。方法成年雄性SD大鼠,分别以0、20、40、80mg/kg剂量的Fen连续灌胃染毒15和30d,按常规方法进行精子计数和精子活力检测,应用放射免疫法和化学发光免疫法测定大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)和睾丸匀浆中T、E2水平。结果Fen染毒15d时,与0mg/kg组相比,40mg/kg剂量组精子数量明显减少(P<0.01),20和40mg/kg组睾丸匀浆中T水平显著降低(P<0.01,P<0.05),血清LH、FSH水平随染毒剂量的增加而升高,且FSH水平和染毒剂量有显著的剂量-效应关系(P<0.05);Fen染毒至30d时,各组间精子数量差异不显著,与0mg/kg组相比,40mg/kg剂量组(a+b)级精子活力显著降低(P<0.05),血清LH、FSH水平随染毒剂量的增加而升高,但差异不显著。结论Fen对雄性大鼠有明显的生殖毒性作用,能够改变血清和睾丸中的生殖激素水平。     

饮酒对大鼠生精细胞iNOS,Bcl-2基因表达的影响

目的 探讨酒精对大鼠睾丸诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、Bcl-2基因表达和生精细胞凋亡的影响。方法30只成年健康SD雄性大鼠随机均分为对照组、低剂量组和高剂量组，用不同剂量的酒精灌胃成年大鼠26d（两个生精周期）后，免疫组织化学法（SP法）检测睾丸iNOS、BCl-2基因表达的变化；原位缺口末端标记法（TUNEL法）检测细胞凋亡指数（A1）的变化。结果 与对照组相比，低剂量组大鼠睾丸iNOS、Bcl-2基闪表达强度和细胞凋亡指数（A1）无明显变化（P〉0．05）：而高剂量组与对照组和低剂量组相比，iNOS表达显著增强（P〈0．01），Bcl-2基因表达明显减弱（P〈0．01，P〈0．05），细胞凋亡指数则增加（P〈0.01）。结论 长期大量饮酒可以诱导睾丸生精细胞凋亡增加，iNOS与Bcl-2基因表达的改变是重要原因之一。     

电磁辐射对大鼠睾丸P450scc mRNA表达及睾酮合成的影响和防护

目的:探讨电磁辐射对大鼠睾丸合成睾酮(T)的影响及其机制,评价铜丝网的防护效果。方法:采用Wistar雄性大鼠,随机分为对照组(n=60)、无屏蔽电磁辐照组(n=60)和铜丝网全身屏蔽辐射组(n=60),电磁辐照后分别取3、6、24、72h各时相点各组大鼠15只;采用放射免疫法(RIA)分别测定电磁辐照后3、6、24、72h及对照组血清T含量,反转录聚合酶链反应(RTPCR)测定各组睾丸组织中细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)mRNA水平。结果:无屏蔽辐照组辐照后3h血清T含量和P450sccmRNA水平均明显低于对照组(分别较对照组降低83.9%,56.9%;P均<0.01),6h略有回升,但仍明显低于对照组(分别较对照组降低54.8%,27.3%;P均<0.01),24h恢复到正常水平,72h再次出现明显降低(分别较对照组降低60.1%,56.1%;P均<0.01);采用铜丝网全身屏蔽后,血清T和睾丸组织P450sccmRNA表达均未见明显变化。结论:电磁辐射能在转录水平影响睾丸间质细胞P450sccmRNA的表达,从而降低T的合成;铜丝网屏蔽具有较好的防护效果。     

脾切除对肝前性门静脉高压大鼠肝脏种植型肿瘤的诱导型一氧化氮合酶mRNA表达和肿瘤微血管密度的影响

目的 观察脾切除对肝前性门静脉高压大鼠肝脏种植型肿瘤组织的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达和肿瘤微血管密度(MVD)的影响.方法 采用门静脉部分结扎的方法 建立20只肝前性门静脉高压大鼠的模型,3周后将其随机分为2组:施行脾切除手术组(A组)、不施行脾切除手术组(B组),脾切除1周后在A、B组大鼠的肝脏上种植Walker256瘤株,2周后肿瘤组织取材.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法 测定各组肿瘤组织标本的诱导型iNOS mRNA的表达量;免疫组织化学方法 染色进行肿瘤微血管计数;测定A、B组大鼠肝脏种植肿瘤的最长、最短径,计算肿瘤体积.结果 A、B两组iNOS mRNA表达量分别为2.32±0.24、2.98±0.28(P<0.05),A、B两组的肿瘤MVD分别为(18.76±1.21)/HP、(19.98±1.28)/HP(P<0.05),iNOS mRNA的表达量及肿瘤MVD的变化呈正相关(r=0.4751,P<0.05).结论 施行脾切除术可以降低肝前性门静脉高压大鼠肝脏种植型肿瘤iNOS mRNA的表达,导致一氧化氮(NO)的合成、释放减少,削弱了肿瘤血管生成的促进因素,使肿瘤组织MVD降低.该手术有助于降低肝脏肿瘤的侵袭能力.     

诱导型一氧化氮合酶在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏的表达

目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠术侧肾脏的表达.方法:建立左侧输尿管梗阻模型(UUO组),设假手术组为对照.3 d后应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测iNOS的mRNA水平.结果:与对照组相比,UUO组大鼠肾脏出现明显病理变化,并且其iNOS mRNA表达明显增加.结论:iNOS参与UUO的发生和发展的病理过程.     

脾动脉缩窄对门静脉高压大鼠脾脏iNOS表达及Th1/Th2平衡的影响

目的 观察脾动脉缩窄对肝硬化门静脉高压大鼠脾脏iNOS、Th1/Th2型细胞因子表达的影响,并探讨机制.方法 肝硬化门静脉高压大鼠随机分3组(n=10):假手术组(SOG)、脾动脉缩窄术组(SAC)和脾动脉结扎术组(SAL);正常大鼠10只行假手术作为对照组(NCG).免疫组化法测脾脏iNOS表达,RT-PCR法测脾脏IFN-γ、IL-4mRNA表达,对iNOS与IFN-γ、IL-4表达量作相关分析.结果 SOG脾脏iNOS明显高于NCG(P＜0.01),SAC和SAL明显低于SOG(P＜0.01).SOG脾脏IFN-γmRNA和IFN-γ/IL-4明显低于NCG(P＜0.01),IL-4mRNA明显高于NCG(P＜0.01);SAC脾脏IFN-γmRNA高于SOG(P＜0.05),SAC和SAL脾脏IL-4mRNA低于SOG(P＜0.05),而IFN-γ/IL-4高于SOG(P＜0.05).iNOS与IFN-γ负相关(r=-0.672,P＜0.01),与IL-4正相关(r=0.634,P＜0.01).结论 脾动脉缩窄术后门静脉高压大鼠脾脏iNOS表达降低,IFN-γ/IL-4升高,脾脏Th1/Th2失衡改善可能与术后iNOS表达降低有关.