人脑胶质瘤中增殖细胞核抗原、p53、p21ras及EGFR蛋白的表达

目的:探讨人脑胶质瘤中多种基因蛋白的异常表达及意义。方法:应用免疫组化技术检测102例手术切除人脑胶质瘤组织标本中增殖细胞核抗原(PCNA)及p53,p21ras及EGFR蛋白的表达。胶质瘤组织PCNA标记指数(PCNALI)为556±155,p53,p21ras及EGFR蛋白的表达率分别为586%,523%,42%,均显著高于正常脑组织。PCNALI及EGFR蛋白表达与胶质瘤恶性程度相关(P<001),p53,p21ras及EGFR蛋白的表达与胶质瘤恶性程度无关(P>005)。胶质瘤中PCNALI与EGFR蛋白表达无明显相关(P>005),而与p53和p21ras表达相关(P<005)。结论:p53,p21ras和EGFR异常表达与胶质瘤的发生发展相关,PCNALI是评估增殖活性的良好指标。     

增殖细胞核抗原和p53蛋白表达与星形细胞瘤增殖调控的关系

目的 探讨星形细胞瘤中增殖细胞核抗原（PCNA）和p53蛋白表达增殖调控的关系。方法 采用免疫组化ABC法检测40例星形细胞瘤组织中PCNA和p53蛋白表达情况,分析二者与肿瘤细胞增殖调控的关系。结果 PCNA的表达率,Ⅰ-Ⅱ级78.3%,Ⅲ-Ⅳ级94.1%;p53蛋白的表达率,Ⅰ-Ⅱ级43.5%,Ⅲ-Ⅳ级64.7%;PCNA表达强度与p53蛋白表达强度之间呈正相关关系。结论 PCNA和p53是参与星形细胞瘤细胞增殖调控的重要基因。联合检测两者在星形细胞瘤中表达的变化可以判断肿瘤的增殖情况和恶性程度,对指导星形细胞瘤的治疗具有重要意义。     

增殖细胞核抗原和p53蛋白表达与星形细胞瘤增殖调控的关系

目的探讨星形细胞瘤中增殖细胞核抗原(PCNA)和p53蛋白表达与增殖调控的关系。方法采用免疫组化ABC法检测40例星形细胞瘤组织中PCNA和p53蛋白表达情况,分析二者与肿瘤细胞增殖调控的关系。结果PCNA的表达率:Ⅰ~Ⅱ级78.3%,Ⅲ~Ⅳ级94.1%;p53蛋白的表达率:Ⅰ~Ⅱ级43.5%,Ⅲ~Ⅳ级64.7%;PCNA表达强度与p53蛋白表达强度之间呈正相关关系。结论PCNA和p53是参与星形细胞瘤细胞增殖调控的重要基因,联合检测两者在星形细胞瘤中表达的变化可以判断肿瘤的增殖情况和恶性程度,对指导星形细胞瘤的治疗具有重要意义。     

人脑星形细胞瘤P21 WAF1/CIP1的表达与P53、MDM2及细胞增殖指数间的关系

目的探讨P21、P53和MDM2表达与人脑星形细胞瘤发生、发展及与细胞增殖指数间的关系.方法用免疫组化技术检查41例石蜡包埋的人脑星形细胞瘤标本P21、P53和MDM2蛋白的表达和由增殖细胞核抗原(PCNA)反映的细胞增殖程度,同时用RNA原位杂交技术检测24例新鲜人脑星形细胞瘤标本的p21mRNA表达情况.结果p21mRNA原位杂交检查中无论是高级别肿瘤组或低级别肿瘤组,表达均有明显的差异.免疫组化检查中P21、P53、MDM2和PCNA的阳性率分别为75.6%、68.3%、65.9%和100%.P21蛋白表达在高级别肿瘤中较高P＝0.001,且与细胞增殖指数明显相关,但与P53表达和MDM2表达无明显相关.P53表达与肿瘤组织学分级无关P＝0.424,但与细胞增殖指数明显相关.MDM2表达与肿瘤组织学分级无关P＝0.812,与细胞增殖指数亦无明显相关性.多元线性逐步回归分析表明,细胞增殖指数PCNALI和P21标记指数与肿瘤组织学分级有密切关系P＝0.000和P＝0.001.结论(1)p21mRNA和P21蛋白在人脑星形细胞瘤中过度表达其与细胞增殖指数相关但与P53表达无关表明可能有不依赖于P53的通路诱导P21表达.仅有P21过度表达对抑制肿瘤生长是不够的还需要PCNA参与;(2)P53蛋白表达水平与细胞增殖指数有关,但与肿瘤恶性程度无关,提示p53基因失活可能是人脑星形细胞瘤发生的早期事件(3)细胞增殖指数PCNALI和P21、MDM2标记指数的结果提示p21基因,而非MDM2基因在人脑星形细胞瘤的发展中起作用.     

人脑星形细胞瘤P^21WAF1／CIP1的表达与P^53、MDM2及细胞增殖指数间的关系

目的 探讨P^21、P^53和MDM2表达与人脑星形细胞瘤发生、发展及与细胞增殖指数间的关系。方法 用免疫组化技术检查41例石蜡包埋的人脑星形细胞瘤标本P^21、P^53和MDM2蛋白的表达和由增殖细胞核抗原（PCNA）反映的细胞增殖程度,同时用RNA原位杂交技术检测24例新鲜人脑星形细胞瘤标本的p21 mRNA表达情况。结果 p21 mRNA原位杂交检查中无论是高级别肿瘤组或低级别肿瘤组,表达均有明显的差异。免疫组化检查中P^21、P^53、MDM2和PCNA的阳性率分别为75.6%、68.3%、65.9%和100％。P^21蛋白表达在高级别肿瘤中较高（P＝0.001）,且与细胞增殖指数明显相关,但与P^53表达和MDM2表达无明显相关。P^53表达与肿瘤组织学分级无关（P＝0.424）,但与细胞增殖指数明显相关。MDM2表达与肿瘤组织学分级无关（P＝0.812）,与细胞增殖指数亦无明显相关性。多元线性逐步回归分析表明,细胞增殖指数（PCNALI）和P^21标记指数与肿瘤组织学分级有密切关系（P＝0.000和P＝0.001）。结论 （1）p21 mRNA和P^21蛋白在人脑星形细胞瘤中过度表达,其与细胞增殖指数相关,但与P^53表达无关,表明可能有不依赖于P^53的通路诱导^21表达,仅有P^21过度表达对抑制肿瘤生长是不够的,还需要PCNA参与;（2）P^53蛋白表达水平与细胞增殖指数有关,但与肿瘤恶性程度无关,提示p53基因失活可能是人脑星形细胞瘤发生的早期事件;（3）细胞增殖指数（PCNALI）和P^21、MDM2标记指数的结果提示p21基因,而非MDM2基因在人脑星形细胞瘤的发展中起作用。     

p53 ras p21蛋白及增殖细胞核抗原在非小细胞肺癌中表达的定量研究

目的:从定量角度探讨p53、ras p21和PCNA在非小细胞肺癌中异常表达的特点及与肿瘤分型、分级和局部淋巴结癌转移的关系及其生物学意义。方法:应用抗p53、ras p21、PCNA单克隆抗体对65例非小细胞肺癌进行LSAB免疫组化法染色。结果:ras p21表达腺癌高于鳞癌(P<0.05),在全部病例中ras p21阳性表达Ⅰ级分别高于Ⅱ级和Ⅲ级(P<0.05),腺癌Ⅰ级ras p21表达高于Ⅲ级(P<0.05)。PCNA表达鳞癌显著高于腺癌(P<0.01),在全部病例中其表达Ⅲ级高于Ⅰ级,在鳞癌中PCNA表达Ⅲ级分别高于Ⅰ级和Ⅱ级(P<0.05)。而p53表达与肺癌分型、分级无关。等级相关分析表明p53与PCNA在肺癌中的表达呈显著正相关(总病例rs=0.2591,P<0.05,腺癌rs=0.4275,P<0.05。结论:(1)ras p21、PCNA表达与肺癌分型、分化有关,检测非小细胞肺癌 ras p21、PCNA的表达有助于肺癌分型、分化的判断。(2)肺癌中p53蛋白与PCNA这两种分子可能具有协同调节细胞增殖和分化的作用。     

p53、p16、p21WAF1、c-erbB-2在星形细胞瘤中的表达及其与肿瘤分化和预后的关系

目的分析p53、p16、p21WAF1、c-erbB-2在星形细胞瘤中的表达及其与肿瘤分化和预后的关系.方法应用免疫组化LSAB法对42例星形细胞瘤中p53、p16、p21WAF1、c-erbB-2的表达进行观察,对其中25例有随访资料的肿瘤患者存活因素进行分析.结果p53的表达与肿瘤分化和预后密切相关(P<0.01),高表达者预后差.p16、p21WAF1在分化好的星形细胞瘤中表达较强,预后较好;c-erbB-2在分化差的星形细胞瘤中表达较强,预后差.结论p53能客观反映肿瘤的增殖速度、分化和恶性程度,可以作为判断肿瘤预后有价值的参考指标.星形细胞瘤也存在p21WAF1、p16、c-erbB?2基因异常,对分析肿瘤的形成和判断预后有一定价值.     

凋亡抑制蛋白Survivin在脑星形细胞肿瘤中的表达及与p53、bcl-2的相关性研究

目的 :探讨凋亡抑制蛋白 Survivin在人脑星形细胞肿瘤中的表达及其与 p5 3和 bcl- 2蛋白表达的相关性。方法 :应用免疫组织化学 SP法 ,检测 Survivin、p5 3、bcl- 2在 4 5例人脑星形细胞肿瘤中的表达。结果 :4 5例脑星形细胞肿瘤标本中 33例表达 Survivin蛋白 ,阳性率为 73.3% ,并随星形细胞肿瘤的恶性程度而增高 (P<0 .0 5 ) ;其中星形细胞瘤阳性率为 36 .4 % ,间变性星形细胞瘤为 81.2 % ,胶质母细胞瘤为 88.9%。而 p5 3蛋白表达阳性、阴性者中 ,Survivin蛋白表达阳性率分别为 5 8.3% (14 /2 4 )、90 .5 % (19/2 1)。两者比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;bcl- 2蛋白表达阳性、阴性者中 ,Survivin蛋白表达阳性率分别为 76 .5 % (13/17)、71.4 % (2 0 /2 8)。两者比较 ,差异无显著性 (P>0 .0 5 )。Survivin蛋白表达阳性率与脑星形细胞肿瘤中 p5 3蛋白表达密切相关 ,与 bcl- 2蛋白表达无相关性。结论 :(1) Survivin蛋白的表达与脑星形细胞肿瘤的组织学分级相关 ,提示 Survivin蛋白表达与星形细胞肿瘤的恶性进展有关。 (2 ) Survivin蛋白的表达与脑星形细胞瘤中 p5 3蛋白异常表达密切相关。     

抑癌p53基因在星形细胞瘤中阳性表达的意义

目的研究p53在星形细胞瘤发生、增殖过程中的作用及临床意义。方法采用免疫组织化学法(S-P法)检测62例资料完整的星形细胞瘤及10例正常脑组织的p53表达,分析p53蛋白在星形细胞瘤及正常脑组织中的表达情况。结果正常脑组织中未见p53蛋白阳性表达,62例星形细胞瘤中共有26例肿瘤p53蛋白表达呈阳性,二者差异有显著性(χ2=4.872,P<0.05),其中在Ⅰ级星形细胞瘤中阳性率为8.33%(1/12),Ⅱ级星形细胞瘤中阳性率为21.05%(4/19),Ⅲ级间变性星形细胞瘤中阳性率为60%(9/15),Ⅳ级胶质母细胞瘤中阳性率为75%(12/16)。结论星形细胞瘤中p53蛋白的表达与肿瘤的级别相关,分化程度越低,p53蛋白阳性表达率越高,检测p53有助于临床判断预后。     

EGFR、HER2、c-jun、c-fos、p21、p16、p53在非小细胞肺癌中的表达及临床病理特征

目的探讨EGFR、HER2、c-jun、c-fos、p21、p16、p53在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及临床病理特征。方法采用荧光原位杂交技术(FISH)和免疫组织化学法(SP)检测64例非小细胞肺癌组织中EGFR、HER2、c-jun、c-fos、p21、p16、p53的表达。结果 (1)64例NSCLC中EGFR和HER2阳性扩增率分别为39.0%和29.7%,在不同病理分级、不同临床TNM分期及有无淋巴结转移间无显著差异(P>0.05)。HER2基因在腺癌的扩增率明显高于鳞癌(P<0.05)。(2)c-jun、c-fos、p21、p16、p53蛋白在不同临床TNM分期有明显差异(P<0.05),在不同病理类型及分级间无明显差异(P>0.05),p53的表达水平在淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)。(3)EGFR与HER2、c-jun、c-fos、p21的表达水平在NSCLC中呈正相关。结论联合检测EGFR、HER2、c-jun、c-fos、p21、p16、p53,有助于为NSCLC的早期诊断及个体化治疗提供新思路和新方法。NSCLC中HER2、c-jun、c-fos、p21在EGFR介导的信号传导通路中发挥了正性调节的作用。     

p16、p21、p27基因多态性与上皮性卵巢癌易感性关联的研究

目的探讨抑癌基因p16、p21和p27的多态性与上皮性卵巢癌易感性的关联.方法选取2007年3月-2011年4月间120例卵巢癌患者作为考察对象,同时选取120例健康女性人群作为对照组.分别采集外周静脉血5ml,提取基因组DNA,分析每个样本的基因型,并做统计学分析.结果两组的p16基因C540G的C/C、C/G和G/G基因型频率分布无显著性差异(P>0.05);两组的p16基因C580T的C/C、C/G和G/G基因型频率分布无显著性差异(P>0.05);两组p21基因的T/T、T/C和C/C基因型频率分布无显著性差异(P>0.05);两组的p27基因的V/V、V/G和G/G基因型频率分布有显著性差异(P<0.05).结论 p16基因和p21基因型的多态性上皮性卵巢癌的易感性有关;p27基因的V/V纯合型可能会增加卵巢癌的发病风险,值得临床关注.     

INK4系列抑癌基因(p16、p15、p18、p19)在白血病中的甲基化

目的 探讨p16基因家族失活与白血病发生、发展及预后的关系，进一步阐明白血病发病机制，监测发病过程。方法 采用甲基化敏感限制内切酶Hpa Ⅱ或Msp Ⅰ结合PCR技术研究白血病患者p16、p15、p18、p19基因甲基化状况：(1)研究不同类型、不同阶段白血病p16基因家族外显子1和／或外显子2纯合子缺失，(2)用REP-PCR分别对上述病例中无外显子1缺失的病例进行甲基化研究，探讨甲基化发生频率，分析与白血病发病关系。结果 p16、p15基因外显子1在急性白血病(AL组)甲基化率分别为35．29％，48．65％，急性非淋巴细胞白血病(ANLL组)为25％，37．5%，急性淋巴细胞白血病(ALL组)为60％，69．23％，初治AL组为29．09％，42．10％，复发AL组为61．54％，70．59％，慢性粒细胞白血病(CML)慢性期、急变期、白血病完全缓解(CR-AL)、对照组均无甲基化。p18、p19基因无论在AL组、ALL组、ANLL组、复发AL组、初治AL组，或是在CML的慢性期、急变期、CR-AL、对照组均无甲基化。结论 (1)在p16基因家族中，p16、p15基因甲基化在AL的发生频率较高，ALL甲基化率明显高于ANLL，以复发ALL组最高。p18、p19基因在AL组中未见甲基化。(2)在ALL中，p15甲基化率高于p16甲基化率，在ANLL中，p16、p15基因的甲基化率高于对照组。(3)p16、p15基因甲基化可作为AL病程进展、复发、预后的指标之一。(4)p16、p15基因甲基化在CML病程中(慢性期、急变期)意义不大。     

食管癌前病变和癌组织中p15、p16、mdm2和p53蛋白的表达

目的:探讨食管癌高发区河南林州市食管癌患者p15、p16、mdm2和p53的表达变化特征及其与各级病变的关系.方法:取食管癌高发区河南林州市居民156例的食管内镜黏膜活检组织(包括正常食管上皮(NOR)21例,基底细胞过度增生(BCH)45例,不典型增生(DYS)23例,原位癌组织(CIS)45例和鳞状细胞癌(SCC)22例),采用免疫组化ABC法分析p15、p16、mdm2和p53蛋白的表达情况.结果:NOR和各级癌前病变组织及SCC组织中均出现不同程度的p15、p16、mdm2和p53表达.随着病变发展(从NOR→BCH→DYS→CIS→SCC),p15和p16的表达逐渐降低,mdm2和p53的表达逐渐增高(P＜0.05).结论:p15、p16的低表达和p53、mdm2的高表达可能是导致病变持续向癌方向发生发展的机制之一.     

肝癌组织中bax,突变p53和c—myc蛋白测定

目的：检测肝癌组织中促细胞凋亡基因、癌基因和抗基因的治疗。方法 用免疫组化技术ＡＢＣ法,测定肝细胞中的ｂａｘ、ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ蛋白。结果 ｐ５３基因突变、ｃ－ｍｙｃ基因激活导致肝癌的发生,同时,促细胞凋亡基因ｂａｘ基因增强,细胞凋亡剧烈。     

p16、p21、p53蛋白在肺癌组织中的表达及其意义

目的 探讨肺癌组织中p16、p21、p53蛋白的表达及其意义。方法 采用免疫组化方法检测30例肺癌组织中p16、p21、p53蛋白的表达情况。以上标本中有7例呼吸道合胞病毒(RSV)N基因片段扩增阳性。结果 30份肺癌标本中p16、p21、p53蛋白阳性表达率分别为36．7％(11／30)、43．3％(13／30)、53．3％(16／30)；各种蛋白阳性表达例数在鳞癌与腺癌组织间差异无显著性意义；不同临床分期的肺癌标本，其p16、p21阳性表达，差异具有显著性意义；晚期肿瘤组织较早期p53阳性表达增强。p16、p21在肿瘤Ⅲ Ⅳ期较Ⅱ期阳性表达率下降。p16、p21、p53蛋白在RSV N基因片段扩增阳性肺癌标本中的表达与扩增阴性的肺癌标本比较差异无显著性意义。结论 p16、p21可能作为判断肺癌分期及预后的参考指标。RSV感染对肺癌组织细胞癌基因无明显影响。     

氧化应激及p16和p53/p21与细胞衰老关系的研究进展

细胞衰老的机制主要包括外在的氧化应激理论和内在的基因调控理论。近年来,活性氧簇引发细胞衰老的途径以及p16、p53/p21等衰老相关基因的表达调节的研究取得了突出进展,进一步阐述了细胞衰老的机制。随着对细胞衰老认识的加深,细胞衰老与个体衰老、肿瘤发生的关系及细胞衰老更深刻的意义等课题,也引起了越来越多的科学研究的注意。     

对二乙烯基偶氮苯的合成

目的合成对二乙烯基偶氮苯(DVAB)。方法用对硝基苄溴和三苯基磷合成的Wittig试剂,与甲醛反应,生成对硝基苯乙烯。对硝基苯乙烯再进行还原偶联反应,得到DVAB。结果用红外光谱、核磁共振谱和元素分析确定其结构;用紫外光谱测其光谱性质。结论该合成路线优化,产率较高。     

p27、p21、PTEN与BRCA1在卵巢癌中的表达

目的探讨p27、p21、PTEN和BRCA1在卵巢癌发生发展中的表达。方法应用免疫组织化学方法及半定量分析方法,检测53例卵巢癌、10例正常卵巢组织中的p27、p21、PTEN和BRCA1表达,分析它们与年龄、组织类型、病理学分级及淋巴转移的相关性,并分析它们在卵巢癌中的相互关系。结果p27、p21、PTEN和BRCA1在正常卵巢组织中高表达,在卵巢癌中表达降低（P〈0．05）,且随着肿瘤病理学分级增高及发生淋巴转移时,阳性表达率逐渐下降,四种蛋白在肿瘤中,尤其是浆液性囊腺癌中的表达呈正相关（P〈0．01）。结论p27、p21、PTEN和BRCA1表达下降可能在卵巢癌的发生发展中起重要作用,联合检测p27、p21、PTEN和BRCA1在卵巢癌中的表达可预测肿瘤生物学行为特征,并作为判断预后的指标。     

p14ARF、mdm2、p53蛋白在鼻咽癌中表达的研究

目的探讨p14ARF、mdm2、p53蛋白在鼻咽癌中的表达及其意义。方法应用免疫组化法检测58例鼻咽癌组织和20例慢性鼻咽炎症组织中p14ARF、mdm2、p53蛋白的表达情况。结果p14ARF、mdm2、p53蛋白在鼻咽癌组织和慢性鼻咽炎症组织中的阳性表达率分别为31.0%、41.4%、65.5%和100%、0、0,各个蛋白在两组之间表达的差异有统计学意义(P<0.05)。结论p14ARF蛋白低表达以及mdm2、p53蛋白高表达与鼻咽癌有关。     

p15、p16基因在胆管癌中的表达及临床意义

目的研究p15、p16在胆管癌中的表达并探讨其临床意义。方法应用超敏SP免疫组化方法检测38例胆管癌和8例胆总管囊肿中p15、p16蛋白的表达情况。结果p15、p16蛋白在胆管癌中的表达阳性率分别为52．63％和57.89％,均低于在胆总管囊肿中的表达阳性率100％,有显著统计学差异（P〈0．05）;p15、p16蛋白阳性率在胆管癌Ⅰ～Ⅲ级逐级下降,Ⅰ级的阳性率高于Ⅲ级（P〈0．05）;在Ⅰ～Ⅳ期阳性率逐期下降,Ⅰ＋Ⅱ期的阳性率高于Ⅲ＋Ⅳ期的阳性率（P〈0．05）;有淋巴结转移癌组织中的表达阳性率为25．00％和31．25％,显著低于在无淋巴结转移癌组织中的阳性率72．73％,77．27％（P〈0．05）。结论p15、p16可能参与了胆管癌的发生、发展和转移,检测p15、p16蛋白的表达对评估胆管癌的分级、分期及淋巴结转移有重要意义、