ANXA1拮抗IL-1β导致的胰岛β细胞功能损伤的机制

目的探究ANXA1拮抗IL-1β引起的胰岛β细胞功能缺陷的作用及机制.方法将ANXA1基因插入pCMV-HA载体中,构建ANXA1过表达质粒,将其转染入小鼠胰岛β细胞系βtc-6细胞后,用IL-1β处理上述细胞,借助于MTT、葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验(GSIS)等方法研究ANXA1对胰岛β细胞的保护作用.结果IL-1β导致胰岛β细胞ANXA1表达降低,同时出现胰岛β细胞存活率下降以及胰岛素合成和分泌量减少;而过表达ANXA1可拮抗上述现象的发生.结论ANXA1保护胰岛β细胞免受IL-1β造成的细胞凋亡增加与功能下降.     

慢病毒介导的中性内肽酶对Aβ诱导的SK-N-SH细胞凋亡的影响

目的： 探讨脑中性内肽酶（NEP）外源表达对神经毒物质β淀粉样肽（Aβ）诱导SK-N-SH细胞凋亡的影响。方法: 采用脂质体法将含中性内肽酶NEP的四质粒系统慢病毒载体转染293FT包装细胞，制备高滴度病毒载体，感染Aβ处理的SK-N-SH细胞，用Western blotting方法检测NEP对Aβ的降解作用、MTT法检测细胞存活率、流式细胞术分析细胞凋亡情况、RT-PCR技术测定凋亡相关基因bcl-2及bax的表达及caspase-3活性检测。结果: 胞内高表达的NEP能够显著降解Aβ，其降解程度与NEP的表达量有剂量依赖关系。细胞存活率及流式细胞术检测结果显示NEP高表达可减轻Aβ诱导的细胞凋亡，细胞存活率于感染病毒后48 h最强，为对照的170%（P＜0.01）,NEP活性组的凋亡率为3.86%，低于对照组的6.41%；RT-PCR结果显示NEP对Aβ诱导的细胞凋亡保护作用可能是通过减少bax的表达，抑制了caspase-3的激活程度来实现的。结论: NEP可以降解Aβ，可以保护由Aβ沉积所致的神经细胞凋亡。     

醛固酮对肾小球系膜细胞合成分泌纤维连接蛋白和TGF-β1表达的影响

目的：研究醛固酮（ALD）及其受体拮抗剂螺内酯（SPI）对大鼠肾小球系膜细胞合成分泌纤维连接蛋白（FN），以及对转化生长因子B1（TGF-β1）基因表达的影响。方法：（1）以不同浓度的ALD（10^-11、10^-9、10^-7mol／L）及／或10^-7mol／L SPI刺激肾小球系膜细胞48h后，用ELISA法测定培养上清中FN的浓度。用半定量RT-PCR法检测该细胞中FNmRNA和TGF-β1mRNA的表达。（2）以10^-9mol／L的ALD刺激系膜细胞不同时间（24、48、72h）后，分别用上述方法测定培养上清中FN的浓度和细胞中FNmRNA和TGF-β1mRNA的表达。结果：（1）ELISA的结果显示，ALD可促进系膜细胞合成分泌FN，且呈剂量和时间依赖性，SPI能拮抗ALD的作用。（2）半定量RT-PCR的结果显示，ALD可促进系膜细胞FNmRNA和TGF-β1mRNA的表达，也呈剂量和时间依赖性，SPI也能拮抗ALD的作用。结论：ALD在蛋白和基因水平上均可促进大鼠肾小球系膜细胞合成分泌FN，及TGF-β1mRNA的表达，SPI能拮抗ALD的作用，具有一定的肾脏保护作用，从而有益于延缓肾小球硬化的进展。     

EGCG通过mTOR通路拮抗低氧诱导的PC12细胞的凋亡与自噬

 目的:氯化钴（cobalt chloride, CoCl2）诱导的低氧具有神经毒性,可以诱导神经细胞的凋亡和自噬。茶多酚活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin gallate, EGCG）具有一定的抗细胞凋亡和自噬的作用,但作用机理尚未完全阐明。近年来有研究报道,雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）通路参与了多种神经功能的调节,如神经细胞的分化成熟、抗氧化应激等。为此,我们用CoCl2诱导低氧引起细胞的凋亡与自噬,从mTOR通路探讨EGCG拮抗CoCl2诱导低氧引起细胞凋亡与自噬的作用机制。方法:研究使用Wes-tern blotting方法测定CoCl2以及EGCG处理后mTOR和自噬蛋白beclin-1的表达,使用ELISA法检测细胞caspase-3表达,CCK-8检测细胞活力,免疫荧光法观察LC-3在胞核内的表达。结果:CoCl2诱导低氧引起了细胞凋亡与自噬,而EGCG通过mTOR通路拮抗了CoCl2诱导低氧引起的细胞凋亡与自噬,阻断mTOR通路则逆转了EGCG对神经细胞的保护作用。结论: EGCG通过mTOR通路拮抗了CoCl2诱导的低氧引起的PC12细胞的凋亡与自噬。     

携有胰岛素样生长因子1重组腺病毒对链脲佐菌素诱导胰岛β细胞损害的保护性研究

目的构建含有鼠胰岛素样生长因子-1(rIGF-1)重组腺病毒,研究rIGF-1在链脲佐菌素(STZ)诱导胰岛β细胞损害中的作用。方法构建重组腺病毒并感染RINm5F细胞,ELISA、Western blotting检测rIGF-1蛋白表达;STZ诱导细胞破坏,检测培养上清中NO水平,胰岛素释放试验进行功能测定,流式细胞检测细胞凋亡,四甲基偶氮唑盐法检测细胞存活率。结果成功构建含有rIGF-1基因重组腺病毒,病毒滴度为4.0×108pfu/ml,rIGF-1在细胞内外有效表达,并具有抑制STZ诱导胰岛β细胞凋亡和NO产生、保护细胞胰岛素分泌和促进细胞增殖的活性。结论胰岛β细胞局部表达IGF-1能够保护细胞功能,抑制NO产生,使胰岛β细胞免受诱导凋亡因子的损害,提高细胞存活率。STZ诱导胰岛β细胞凋亡可能与NO介导有关。     

比伐卢定对大鼠胰岛细胞凋亡的影响

目的探讨比伐卢定（直接凝血酶抑制剂）在大鼠胰岛分离过程中保护胰岛细胞的作用。方法将SD大鼠分为比伐卢定处理组和对照组,处理组在胰岛分离全过程中加用比伐卢定进行干预,对照组则不加比伐卢定处理,采用Ficoll非连续密度离心纯化后对两组胰岛细胞的凋亡（采用原位末端核苷酸标记法及流式细胞仪检测）、胰岛产量及活力方面进行比较性研究。结果比伐卢定5000U处理组的胰岛细胞凋亡计数（5±4）个/HPF、凋亡率（16.5±3.6）%、Fas-l基因表达水平（4.6±1.9）%均显著低于对照组（P〈0.01）,胰岛产量（315.3±6.1）IEQ、胰岛素释放水平（179.11±2.18）mIU/L和Bcl-2基因表达水平（10.5±1.2）%均显著高于对照组（P〈0.01）,差异有统计学意义。结论胰岛分离过程中加用比伐卢定对胰岛具有抑制凋亡、提高胰岛产量和保护胰岛活力的作用。     

神经元素3基因沉默对脐源性胰岛前体细胞MafA表达的影响

目的 探讨神经元素3（Ngn3）基因在人脐带间充质干细胞（hUMSCs）向胰岛前体细胞分化过程中的作用以及对肌腱膜纤维肿瘤基因同系物A（MafA）表达的影响。方法 组织块法分离培养并鉴定hUMSCs;采用分阶段联合诱导法诱导hUMSCs向胰岛前体细胞分化,将其分为正常诱导组、基因沉默组、空病毒转染组,后两组在诱导第7天分别转染干扰病毒和空病毒,嘌呤霉素筛选后检测感染效果;21 d诱导结束后倒置相差显微镜和电子显微镜观察细胞形态变化;免疫细胞化学技术检测诱导后各组细胞胰岛素、胰高血糖素、Ngn3的表达;Real-time PCR、Western blotting检测Ngn3以及MafA的表达变化。结果 成功分离培养hUMSCs;分阶段联合诱导使正常诱导组和空病毒转染组细胞分化为胰岛前体细胞,Ngn3、胰岛素、胰高血糖素呈阳性表达,电子显微镜观察可见分泌颗粒;成功沉默了基因沉默组细胞的Ngn3基因,且该组细胞Ngn3、胰岛素、胰高血糖素呈阴性表达;Ngn3、MafA在基因沉默组明显下降（P<0.05）。结论 Ngn3基因沉默阻滞了hUMSCs向胰岛前体细胞的分化,并抑制了MafA的表达。     

TNF-α促进大鼠胰岛β细胞系凋亡

目的观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对胰岛细胞凋亡及TXNIP表达的影响。方法体外培养大鼠胰岛细胞系INS-1细胞,用CCK-8检测TNF-α(0、1、5、10和20 mg/L)的细胞存活率;确定TNF-α作用的最佳浓度和时间后,给予TNF-α(5 mg/L,24 h)处理INS-1细胞;用CCK-8与流式细胞术检测胰岛细胞的存活和凋亡;real-time PCR检测TXNIP和ChREBP mRNA表达;Western blot法检测TXNIP、ChREBP和FOXO1蛋白的表达。结果TNF-α呈浓度依赖性降低INS-1细胞存活率(P0.05),并诱导细胞凋亡;与对照组相比,TXNIP和ChREBP mRNA及蛋白表达水平均上调(P0.05);FOXO1蛋白表达水平下调(P0.05)。结论 TNF-α诱导INS-1胰岛细胞凋亡,加重细胞损伤。     

细胞因子信号传导抑制蛋白-1减轻细胞因子诱导胰岛β细胞促凋亡基因的表达

目的 构建稳定表达细胞因子信号传导抑制蛋白－1（SOCS-1）蛋白的细胞,探讨其在胰岛β细胞凋亡中的保护作用。方法 克隆大鼠SOCS-1基因,构建表达载体pEGFP-C1-SOCS1并转染入大鼠胰岛细胞系RINm5F中,构建稳定表达SOCS-1蛋白的细胞。分别用细胞因子IL-1β 、TNF-α、IFN-γ 、IL-1β联合IFN-r、IL-1β联合TNF-α及IFN-γ刺激24h,RT-PCR与Western blot检测凋亡相关指标。结果 成功构建了稳定表达SOCS-1蛋白的细胞。用IFN-γ、IL-1β联合IFN-r、IL-1β联合TNF-α及IFN-γ刺激后,未转染SOCS-1质粒的细胞iNOS转录水平显著升高。在用所有细胞因子刺激后,未转染SOCS-1质粒的细胞caspase-3表达及活性均显著升高。 结论 SOCS-1蛋白能减轻多种细胞因子诱导的胰岛β细胞促凋亡基因的表达。     

小檗碱对高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡的影响

目的：探讨小檗碱对高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法比较不同浓度的小檗碱对体外培养及高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡的作用，同时应用流式细胞术及原位末端核苷酸标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果：不同浓度的小檗碱对NIT-1胰岛β细胞作用呈剂量依赖性：低浓度小檗碱（≤5 μmol/L） 对细胞无明显毒性，随浓度升高毒性作用明显。在培养基中加入高糖高脂及低浓度的小檗碱共同培养24 h, 小檗碱组细胞凋亡率低于高糖高脂组（P<0.01）。结论：小檗碱能抑制高糖高脂诱导的NIT-1胰岛β细胞凋亡。     

过表达SIRT1抑制脂多糖诱导的胰岛β细胞炎症因子表达及NF-κB信号通路激活

目的研究沉默信息调节因子1(SIRT1)对脂多糖(LPS)诱导的胰岛β细胞炎症因子表达及核因子-κB(NF-κB)信号通路激活的影响。方法用LPS处理胰岛β细胞,qRT-PCR和Western blot测定细胞中SIRT1表达变化。用pcDNA3.1-SIRT1慢病毒感染胰岛β细胞,qRT-PCR检测细胞中白细胞介素-6(IL-6)mRNA和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达水平,流式细胞术测定细胞凋亡变化,Western blot检测细胞中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化型Caspase-3(cleaved Caspase-3)、核因子-κBp65亚型(NF-κBp65)、Toll样受体4(TLR4)蛋白表达水平。结果 LPS处理后的胰岛β细胞中SIRT1表达水平降低。pcDNA3.1-SIRT1慢病毒感染可以提高LPS条件下胰岛β细胞中SIRT1表达水平。LPS处理后的胰岛β细胞中IL-6 mRNA和TNF-αmRNA表达水平升高,凋亡率升高,细胞中Bax、Cleaved Caspase-3、NF-κBp65、TLR4蛋白表达升高。过表达SIRT1可以降低LPS条件下胰岛β细胞中IL-6 mRNA和TNF-αmRNA表达水平,抑制细胞凋亡,减少细胞中Bax、cleaved Caspase-3、NF-κBp65、TLR4蛋白表达。结论 SIRT1减少LPS诱导的胰岛β细胞炎症因子表达并下调细胞中NF-κB信号激活水平。     

没食子儿茶素没食子酸酯对1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导的大鼠PC12细胞凋亡的作用

目的： 探讨没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)抑制1-甲基-4-苯基吡啶离子（MPP+）诱导大鼠PC12细胞凋亡及其抗氧化作用、调节胞浆钙离子稳态与其抑制细胞凋亡作用之间的关系。方法: 培养大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株PC12细胞,给予MPP+诱导细胞凋亡。EGCG（10、50及100 μmol·L-1）预处理0.5 h,再加入MPP+使其终浓度为900 μmol·L-1处理24 h后,MTT法检测细胞存活率,Annexin V-PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光酶标仪测定细胞内活性氧,激光共聚焦荧光显微镜通过检测细胞内钙的荧光强度、检测细胞胞浆［Ca2+］i的变化,透射电镜观察凋亡细胞线粒体结构形态变化,并测定细胞内超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的含量。结果: MPP+呈剂量依赖性损伤PC12细胞,诱导细胞凋亡发生率达到31.0％。与模型组比较,EGCG处理后,明显提高细胞活力,降低凋亡细胞率,同时增强SOD活性、减少MDA和ROS的含量,降低胞浆［Ca2+］i浓度,减轻MPP+诱致的细胞线粒体改变。结论: EGCG具有抑制MPP+诱导的PC12细胞凋亡的作用,其作用机制可能与其提高细胞抗氧化能力和减少胞浆［Ca2+］i有关。     

TRB3通过GSK-3β信号通路参与AGEs诱导胰岛细胞凋亡

<正>目的:探讨TRB3在晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导β细胞凋亡中的作用及其与GSK-3β通路相关的分子机制。方法:首先检测糖尿病大鼠模型发病不同阶段体内AGEs水平、胰岛β细胞TRB3表达情况与β细胞凋亡的关系。细胞水平上,检测AGEs处理后大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞TRB3表达水平与细胞凋亡的关系以及沉默或过表达TRB3对AGEs诱导INS-1     

小鼠β细胞系MIN6细胞糖脂毒性模型中Siah1表达变化的研究

目的： Siah1作为一种E3泛素连接酶,在调控细胞凋亡过程中发挥着重要作用,文章旨在在细胞系水平构建胰岛β细胞糖脂毒性模型,检测其中Siah1的表达水平,并预测此模型下Siah1表达的调控机制。方法用高糖高脂联合处理小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞,葡萄糖刺激的胰岛素分泌（ glucose stimula－ted insulin secretion, GSIS）实验检测MIN6细胞胰岛素分泌功能,酸乙醇抽提并检测MIN6细胞内胰岛素含量, Western印迹实验检测Parp1蛋白的剪切情况及Siah1的蛋白表达水平,定量RT－PCR分析Siah1的mR－NA水平。借助miRanda软件预测小鼠、大鼠、人这3个种属中可能调控Siah1表达的microRNAs （ miR－NAs）,并在种属间进行对比分析。结果高糖高脂处理可损伤MIN6细胞的GSIS功能、减少MIN6细胞胰岛素含量,并能导致Parp1蛋白的剪切程度显著增加。该模型下, Siah1的蛋白表达水平增高,而mRNA水平几乎没有变化,这提示此过程中Siah1主要受转录后水平的调控。用miRanda软件预测可能调控Siah1表达的miRNAs,其中有19个miRNAs的结合位点在小鼠、大鼠及人这3个种属中具有同源性。结论糖脂毒性可导致MIN6细胞功能障碍及凋亡,并能增高MIN6细胞中Siah1的蛋白表达水平,而不影响Siah1的mRNA水平。     

自发1型糖尿病小鼠细胞因子变化及β细胞凋亡

研究自发的1型糖尿病雌鼠模型（NOD）在自然状态下发生糖尿病过程中β细胞凋亡及细胞因子TNF-α，TNF-γ，诱生型NO合酶（iNOS)和Fas,FasL在不同周龄的表达。HE法检测胰岛炎，免疫组化法检测各种抗体的表达。TUNEL法检测凋亡细胞，半定量法对胰岛炎评分并计数凋亡的β细胞和各种抗体阳性细胞率，分析其相关性，凋亡细胞两个峰值出现在3周和32周，与周龄无关，与胰岛炎及血糖均相关，Fas 细胞97.3%为胰岛细胞，FasL表达于胰岛细胞和浸润的单核细胞。在发病小鼠单核细胞上阳性率增高，FasL与血糖相关，IFN-γ，TNF-α的表达与周龄相关，IFN-γ在晚期而TNF-α持续起作用，但在幼鼠与鼠不同，两种细胞因子相关，iNOS与周龄，胰岛炎及血糖均相关，β细胞主要以凋亡方式死亡，凋亡是多因素作用的结果。Fas-FasL,NO和IFN-γ，TNF-α可能独自起作用。后两者作用于不同阶段。     

K+通道阻断剂四乙铵对胰岛β-细胞凋亡的作用机制研究

目的 研究K^＋通道阻断剂四乙铵（TEA）对诱导胰岛β-细胞凋亡的作用及机制。方法 以IFN-γ＋IL-1β诱导NIT细胞凋亡,同时加入TEA,通过AnnexinV检测、PI染色,利用四唑蓝比色实验（MTT法）检测不同浓度TEA对链脲佐菌素（STZ）处理细胞活性的影响;使用流式细胞术检测TEA对诱导NIT细胞凋亡的影响;通过硝酸还原酶法、硫代巴比妥酸TBA法、化学比色法、黄嘌呤氧化酶法、分别测定培养上清液中NO和氧自由基含量以及细胞裂解物中NO合成酶（NOS）及超氧化物歧化酶（super oxide dismutase,SOID）活性。结果 1mmol／L TEA能显著抑制IFN-γ＋IL-1β诱导的NIT细胞凋亡。IFN-γ＋IL-1β可显著增加NOS活性,降低SOD的活性,从而导致培养上清液中NO及氧自由基的含量显著增加;TEA可显著抑制STZ的作用。结论K^＋通道在胰岛β-细胞的凋亡中可能起着重要作用;K^＋通道阻断剂TEA可显著抑制IFN-γ＋IL-1β诱导的胰岛β细胞凋亡,其机制可能与下调NIT细胞诱导性NO合成酶（iNOS）活性,上调SOD活性,减少NO的产生以及增强其清除氧自由基的能力有关。     

靶向微管解聚蛋白stathmin siRNA对Aβ1-42诱发PC12细胞损伤的保护作用

目的:探讨微管解聚蛋白stathmin siRNA对β淀粉样蛋白片段(Aβ1-42)诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法:构建靶向stathmin基因的shRNA真核表达载体;然后用脂质体转染的方法将重组质粒转染至大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞,用G418筛选得到稳定转染的细胞;通过RT-PCR和Western印迹方法分析stathmin基因mRNA及蛋白表达水平,筛选表达最低的稳定细胞株。用不同质量浓度的Aβ1-42诱导稳定细胞株,用MTT试验观察筛选稳定细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:与对照组比较,转染了重组载体pSilencer4.1-s的细胞中stathmin核酸和蛋白水平的表达均显著下调。与Aβ1-42处理的PC12细胞(63.88±2.36)和PC12-parental细胞(65.78±5.74)比较,Aβ1-42处理的PC12-s细胞(78.57±5.22)的存活率明显增加。用Aβ1-42处理过的PC12细胞(28.31±1.65)和PC12-parental细胞(26.65±3.64)的凋亡比用Aβ1-42处理过的PC12-s细胞(17.77±2.37)的凋亡明显增加。结论:Stathmin基因的下调对Aβ1-42诱导PC12细胞损伤具有保护作用,为阿尔茨海默病的治疗探索了一条新策略。     

IFN-γ和TNF-α诱导Fas表达在β胰岛细胞杀伤中的作用

目的：研究人β胰岛细胞Ｆａｓ的表达及细胞因子诱导Ｆａｓ表达量的增加在β胰岛细胞杀伤中的作用。方法：用ＦＡＣＳ检测ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α作用于人β胰岛细胞株（ＮＩＴ）前后Ｆａｓ表达水平及ｓＦａｓＬ和抗Ｆａｓ介导细胞凋亡的变化。结果：ＮＩＴ表达无Ｆａｓ表达,ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α可促进其Ｆａｓ表达增加,以及对ｓＦａｓＬ和ａｎｔｉ－Ｆａｓ介导细胞毒敏感性增加。结论：细胞因子诱导β胰岛细胞表面Ｆａｓ的表达可能在Ⅰ型糖尿病（ＩＤＤＭ）的病理损伤中起重要作用。     

线粒体功能障碍在胰岛β细胞脂性凋亡中的作用

目的:探讨线粒体途径在脂毒性诱导的胰岛β细胞株MIN6凋亡中的作用。方法:胰岛β细胞株MIN6分别在含或不含棕榈酸(0.1-0.5mmol/L)的DMEM无血浆培养基中孵育24h;Hoechst33258染色法检测细胞凋亡,用试剂盒测定caspase-3活性;透射电镜观察MIN6细胞株线粒体结构;RT-PCR法检测bcl-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤因子2(bcl-2)、固醇调节元件结合蛋白亚型1c(SREBP1c)和DNA损伤可诱导的转录子3(chop-10)mRNA的表达。结果:棕榈酸诱导MIN6细胞凋亡,引起细胞线粒体肿胀,抑制bcl-2mRNA的表达并促进bax、SREBP1c和chop-10mRNA的表达。结论:棕榈酸通过促进线粒体功能障碍而诱导胰岛β细胞凋亡,这一过程可能和bax、bcl-2、SREBP1c和chop-10mRNA表达异常有关。     

PTEN抑制剂对软脂酸引起脐静脉内皮细胞凋亡的保护作用

目的 探讨抑癌基因PTEN（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten）的抑制剂双过氧钒（bpV）对软脂酸（PA）引起人脐静脉内皮细胞（HUVEC）凋亡的保护作用。方法 四甲基偶氮唑盐(MTT)测定细胞生存率;Hoechst-PI染色荧光显微镜观测细胞凋亡形态;Annexin-Ⅴ-PI流式细胞术测定细胞凋亡,Western blotting检测总PTEN和磷酸化PTEN蛋白水平,实时定量PCR测定细胞PTEN mRNA的表达。 结果 MTT显示,PA（0.2~0.6mmol/L）作用24h后可明显抑制HUVEC细胞的生长;Hoechst-PI染色荧光显微镜及Annexin-Ⅴ-PI双染流式细胞检测证实不同浓度的PA处理24h后,随着PA浓度(0.2~0.6mmol/L)的增高,其诱导HUVEC细胞的凋亡作用增强,实时定量PCR 及Western blotting显示,PA浓度(0.2~0.6mmol/L)作用细胞后PTEN的转录及活性随浓度增高而增加,并呈现一定的剂量依赖性。bpV作用细胞可以增加细胞的生存率,抑制细胞的凋亡,PTEN的转录及蛋白表达降低。结论 一定浓度范围内PA剂量依赖性诱导HUVEC细胞发生凋亡性损伤,在此过程中伴随细胞内PTEN表达上调和活性增强,PTEN抑制剂双过氧钒使细胞的凋亡作用减轻,在此过程中PTEN转录及蛋白表达降低,PTEN信号通路可能是PA诱导脐静脉内皮细胞凋亡的重要通路之一, PTEN抑制剂可抑制此通路起到对细胞的保护作用。