异种管状皮质骨复合人重组骨形态发生蛋白与碱性成纤维细胞生长因子修复大段骨缺损

背景：传统的松质骨移植虽然广泛应用于临床,但用于大段骨缺损还存在一定的局限性。目的：通过对复合人重组骨形态发生蛋白,碱性成纤维细胞生长因子（recombinant human bone morphogenetic protein-2／basic fibroblast growth factor,rhBMP-2／bFGF）大段异种皮质骨成骨作用观察,探讨异种皮质骨修复大段骨缺损的可行性。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007-01／2008—01在解放军成都军区昆明总医院动物实验室完成。材料：版纳近交系小耳猪骨,经过钻孔、酶处理等方法处理后,再在真空、冻干、吸附基础上复合rhBMP-2／bFGF,成为具有生物活性的复合皮质管状骨。经复合后每根复合骨含40UbFGF＋10mg聚乙烯吡咯酮＋0．5mgrhBMP-2。方法：45只新西兰兔随机分成3组,于兔左桡骨中段制成2cm的骨-骨膜缺损模型,实验组植入复合皮质管状骨、对照组植入单纯管状皮质骨、空白对照组不植入任何材料。主要观察指标：分别于术后4,8,12周各时间点取材,通过X射线检查、组织学观察等指标观察骨缺损修复情况。结果：实验组术后4周皮质骨活化,术后8周移植皮质骨两端结合处愈合,术后12周骨缺损修复较满意：对照组修复缓慢;空白对照组骨缺损未见修复。结论：近交系管状猪皮质骨复合rhBMP-2／bFGF具有良好的生物学活性,修复大段骨缺损效果显著。     

人骨形态发生蛋白2基因活化纳米骨浆的成骨能力

背景：纳米骨浆在骨缺损修复过程中仅起支架和骨传导作用,不具备骨诱导能力。目的：观察人骨形态发生蛋白2（human bone morphogenetic protein-2,hBMP-2）基因活化纳米骨浆的异位诱导成骨能力和修复骨缺损效果。时间及地点：实验于2006-06/2007-03在华中科技大学同济医学院分子生物中心实验室和协和医院骨科实验室完成。材料：将纳米骨浆与hBMP-2基因真核表达质粒相复合,形成hBMP-2基因局部释放系统。方法：实验一：昆明种小鼠24只右侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆＋hBMP-2质粒作为实验侧,其中12只小鼠左侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆＋空白质粒为对照侧1,另12只左侧注射纳米骨浆为对照侧2。实验二：新西兰白兔54只,其中6只作左桡骨中段骨缺损,不植入材料,为空白对照;另48只制成双侧桡骨中段15mm骨缺损模型,随机分成3组,缺损处分别植入hBMP-2＋纳米骨浆、空白质粒＋纳米骨浆、纳米骨。主要观察指标：实验一：采用放射学、分子生物学和组织形态学等方法检测成骨基因hBMP-2表达和诱导成骨效应。②实验二：取桡骨标本作影像学检查、组织学观察和生物力学检测。结果：实验一：小鼠术后2,4周实验侧有hBMP-2表达。实验侧术后2周出现大量软骨组织和呈岛状散在分布的骨组织,术后4周可见大量成骨组织,新生骨相互融合生长并形成较为成熟的板层骨和骨小梁结构;对照侧未见骨组织形成。实验侧碱性磷酸酶活性明显高于对照侧（P〈0.01）。实验二：术后12周空白对照组骨缺损无愈合,其余3组骨缺损均修复。植入hBMP-2＋纳米骨浆组的碱性磷酸酶水平、成骨速度及新生骨力学强度均明显优于植入空白质粒＋纳米骨浆或纳米骨组（P〈0.05）。结论：经组织学、影像学及生物力学的综合检测验证,纳米骨浆复合hBMP-2质粒后,具有一定的骨诱导作用,植入体内后成骨速度、质量及力学强度较单纯的纳米骨浆明显增强,能够有效修复骨缺损。     

猕猴组织工程化骨构建及其修复异体骨缺损的放射学评估

目的：用生物衍生骨材料和同种异体骨髓基质干细胞(MSCs)构建组织工程化骨并从放射学评估其植入猕猴体内修复长骨大段骨缺损的效果。方法：于猕猴胫骨结节抽取MSCs并使诱导分化为成骨样细胞，培养后与人源生物衍生骨材料体外复合构成组织工程化骨，植入15只异体猕猴桥接桡骨2.5cm节段骨缺损作为实验组；用单纯生物衍生骨材料桥接对侧同样大小骨缺损作为对照组；另取2只猕猴双侧桡骨同样部位和大小骨缺损旷置作为空白组。术后3，6，12周时双侧前臂正侧位摄X线片，空白组于术后12，24周摄X线片，用放射影像学评分和图像分析X线阻射影比较骨缺损的修复情况。结果：实验组骨缺损放射影像学评分以及新生骨痂的密度在3，6，12周均优于对照组。空白组术后24周骨缺损均无愈合。结论：生物衍生材料和同种异体MSCs构建组织工程化骨植入猕猴桥接大段骨缺损可使骨缺损达较快修复。     

新型含重组人骨形态发生蛋白2骨修复材料的制备及生物学评价

背景：含有重组人骨形态发生蛋白2的骨修复材料（骨优导）已经作为国内第1个Ⅲ类医疗器械注册并获得国家食品药品监督管理局（SFDA）的批准。目的：制备骨修复材料（骨优导），并对其进行生物学评价。设计：分组对比，多角度评估观察实验，于2008-01／07在杭州华东医药集团投资有限公司实验室进行。材料：骨修复材料（骨优导）由杭州华东医药集团投资有限公司提供，是在无菌的洁净车间内，采用基因工程方法，用大肠杆菌发酵技术大规模生产重组人骨形态发生蛋白2，然后与载体材料混合制备得到。方法：根据GB／T16886．12-2005中的规定制备骨修复材料（骨优导）浸提液，按照医疗器械生物学评价方法进行了一系列体内外试验，包括成骨试验、无菌检验、细胞毒性试验、植入试验、热原试验、致敏试验和遗传毒性试验，评价骨修复材料（骨优导）的生物学特性。主要观察指标：各项体内外试验的结果。结果：骨修复材料（骨优导）符合无菌要求，无细胞毒性、无致热原性、无遗传毒性、无致敏性、无组织刺激性，具有良好的组织相容性，且具有异位诱导成骨能力。结论：骨修复材料（骨优导）符合医疗器械骨科植入材料的生物学评价的各项要求。     

纳米羟基磷灰石纤维蛋白凝胶复合重组人成骨蛋白1修复骨缺损

背景：纳米级的羟基磷灰石纤维蛋白凝胶材料与人体内组织成分更为相似,具有良好的生物与力学性能,但缺乏骨诱导作用。目的：观察纳米羟基磷灰石纤维蛋白凝胶/重组人成骨蛋白1复合人工骨的骨缺损修复能力。方法：制备新西兰大白兔单侧桡骨缺损模型后,以数字表法随机分为3组,分别植入不同材料行骨缺损修复：纳米羟基磷灰石纤维蛋白凝胶/重组人成骨蛋白1人工骨组、纳米羟基磷灰石/纤维蛋白凝胶组、空白对照组（未植入任何材料）。术后4,8,12周行大体标本观察、X射线、扫描电镜、放射性核素骨扫描及生物力学测试,比较各组材料修复骨缺损的能力。结果与结论：术后4,8,12周,纳米羟基磷灰石纤维蛋白凝胶/重组人成骨蛋白1人工骨组X射线评分、成骨效果、放射性核素聚集强度、生物力学强度均高于纳米羟基磷灰石/纤维蛋白凝胶组（P 〈 0.05）。空白对照组骨缺损区无骨性连接,骨端硬化,骨缺损未能修复。说明纳米羟基磷灰石纤维蛋白凝胶/重组人成骨蛋白1复合人工骨具有良好的骨缺损修复能力,有望成为一种理想的骨缺损修复材料。     

生物衍生骨与骨髓间充质干细胞复合修复兔桡骨大段缺损

背景：生物衍生支架材料具备与自身骨相似的结构和微环境,具有较好的应用前景。目的：探讨生物衍生骨复合成骨诱导的骨髓间充质干细胞修复兔桡骨的节段性骨缺损的可行性,并与单纯生物衍生骨进行比较。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2007—01／2008—01在南华大学生命科学院实验室完成。材料：同种异体骨经脱脂、脱蛋白、部分脱钙和冻干等方法处理后制备生物衍生骨支架材料,与自体骨髓间充质干细胞复合制备组织工程骨支架材料。方法：25只健康成年新西兰大白兔双侧桡骨制备中段15mm的骨缺损,随机取其中20只兔右侧桡骨为实验组植入组织工程骨,左侧为对照组植入单纯生物衍生骨,不做内外固定;另5只兔双侧骨缺损处不植入任何材料作为空白组。主要观察指标：应用X射线放射学检查及组织学观察比较3组骨缺损修复的能力。结果：X射线显示随时间延长骨折处骨痂逐渐增多,实验组8周基本愈合,12周塑形完成;对照组骨痂少,愈合时间推迟;空白组术后12周骨缺损未见骨性修复,最后形成骨不连。术后2,4,8,12周实验组放射学检查评价新骨生成优于对照组（P〈0．05）。组织学检查显示实验组术后4周时材料开始吸收,8周基本降解吸收被新生骨取代,12周完全修复;对照组明显推迟,新骨生成速度、生成量低于实验组（P〈0．05）;空白组各时点均无新骨形成,最后缺损由纤维组织充填。结论：成骨诱导的间充质干细胞／生物衍生骨复合构建组织工程化骨植入修复兔桡骨缺损能够加速新骨形成,其修复能力明显优于单纯生物衍生骨。     

检测rhBMP—2／明胶复合材料的诱导成骨活性：修复兔长骨缺损的实验研究

目的 观察rhBMP-2/明胶复合材料修复兔长骨节段性骨缺损的能力。方法 手术造成桡骨中上段15mm骨缺损，实验组植入rhBMP-2／明胶复合材料，其中rhBMP-2的含量为1.0mg，对照组植入单纯明胶片。通过影像学、组织学观察及骨密度测定。结果 影像学检查示实验组术后4周时缺损区有大量新生骨痂形成，术后8周时新生骨痂将缺损区桥接，术后12周时达到皮质骨连接；对照组无骨痂形成。组织学检查示实验组术后4周时的骨痂为编织骨，术后8周时骨痂外层为板层骨，中央为编织骨，内有骨髓组织，术后12周时骨痂外层为皮质骨，中央为髓腔组织；对照组缺损区为结缔组织和肌组织充填。骨密度测定示术后12周时骨痂密度达到正常值的76％。结论 rhBMP-2/明胶复合材料具有良好的诱导成骨活性，1.0mg的rhBMP－2能够很好地修复兔桡骨15mm的骨缺损。     

组织工程骨体内植入运动与感觉神经束后的成骨效果

目的：用放射学方法评估和比较两种组织工程骨体内神经支配重建方法的成骨效果，探讨神经化与成骨的相互关系。 方法：实验于2003-12／2005-03在南方医科大学南方医院动物所完成。20只新西兰大白兔随机分成3组：组织工程骨组、感觉神经束植入组、运动神经束植入组，每组6只。另2只兔作为骨缺损空白组。①除骨缺损空白组外，其余3组兔均制备组织工程骨。②各组兔均建立股骨1.5cm长骨缺损模型。③组织工程骨组于骨缺损处只嵌入β-磷酸三钙＋经诱导分化的骨髓基质细胞复合物；感觉神经束植入组将隐神经束植入β-磷酸三钙＋经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内；运动神经束植入组将股神经束植入β-磷酸三钙＋经诱导分化的骨髓基质细胞复合物的侧槽内并加以固定；骨缺损空白组骨缺损内不植入任何材料。④术后4，8，12周除骨缺损空白组外各组处死2只兔，观察组织工程骨的表面变化、内痂形成、骨缺损修复情况及周围组织反应。摄股骨正位X射线片，用放射影像学评分和X射线阻射影分析比较骨缺损修复情况。骨缺损空白组于术后12和18周各处死1只，摄片观察骨缺损愈合情况。 结果：实验兔20只均进入结果分析。①术后各组X射线片观察结果：组织工程骨组、运动神经束植入组在术后4，8，12周时，骨缺损区阻射影、材料吸收变化、截骨端愈合情况大体类似，感觉神经束植入组在各时间点的成骨量与骨痂塑形均较组织工程骨组、运动神经束植入组出现早且截骨端愈合快。②术后各组植入修复骨缺损的放射影像学评分结果：感觉神经束植入组正位照片骨缺损修复评分在4，8，12周均较组织工程骨组、运动神经束植入组的放射影像学评分为优14周：（8．333&;#177;0．816），（5.333&;#177;0.517），（5500&;#177;0.836）分；8周：（11.333&;#177;0.516），（7．166&;#177;0．408）．（8．167&;#177;0．307）分；12周：（12．500&;#177;0．894），（9．083&;#177;0．376），（10.083&;#177;0．801）分，P〈0．05]，但组织工程骨组、运动神经束植入组间无明显差异（P〉0．05）。③术后各组植入骨缺损阻射密度测量值的比较：感觉神经束植入组在4，8，12周的骨缺损阻射密度相对值均大于组织工程骨组、运动神经束植入组（4周：58．663&;#177;2．541．43．501&;#177;2．725，44．578&;#177;2．948；8周：62．375&;#177;0．992，54．638&;#177;1．265，54．203&;#177;1．556；12周：84．582&;#177;1．017，71.683&;#177;2．101．73．585&;#177;1．975，P〈0．05），但组织工程骨组、运动神经束植入组间差异不明显（P〉0．05）。 结论：利用感觉神经束植入的方法可以提高组织工程骨的成骨作用，而植入运动神经束却无此作用。     

胶原基纳米骨复合重组人骨形成蛋白2及钛膜修复即刻钛种植体周围骨缺损

背景:影响即刻种植术成功的主要因素是种植体大小、形状往往与拔牙创不相适合,不能形成种植体与拔牙创的紧密接触,解决这一影响因素的方法多采用诱导骨再生膜技术或应用植骨材料.目的:观察胶原基纳米骨(nanohydroxyapatite/collogen,nHAC)复合重组入骨形成蚩白2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)及钛膜修复即刻钛种植体周围骨缺损的效果.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-01/2006-01在解放军第四军医大学中心实验室完成.材料:宝鸡有色金属研究院提供的纯钛材料制成直径2mm,长10mm,螺距0.4mm,带自攻式螺纹的钉状螺旋种植体,无穿龈部分.西安中邦钛生物材料有限公司生产的不可吸收医用钛膜,大小为2 cm×2cm.胶原基纳米骨由清华大学崔福斋教授惠赠,加工成0.5 mm×0.5 mm×0.5 mm的立方体.rhBMP-2由北京军事医学科学院提供.将rhBMP-2用盐酸胍溶解,将制备好的胶原基纳米骨浸入其中,抽真空,冻干,每粒胶原基纳米骨约复合1 mg rhBMP-2.方法:选用健康雄性Beagle纯种犬4只,钛种植体周围骨缺损的修复方法分为以下6组:①阳性对照组植入自体牙槽松质骨.②空白对照组缺损区不植入任何物质,只覆盖钛膜.③nHAC组仪植入nHAC.④nHAC+钛膜组植入nHAC,表面覆盖钛膜.⑤nHAC+mBMP-2组植入nHAC复合rhBMP-2材料.⑥nHAC+rhBMP-2+钛膜组植入nHAC复合rhBMP-2材料,表面覆盖钛膜.每只动物的每侧下颌骨各形成6个缺损区,将6组材料随机植入.主要观察指标:术后6,12周,采用X射线摄片、骨密度测量及组织学检查,观察新骨形成情况和新骨与种植体的关系.结果:12周时各组骨缺损区均愈合良好,骨创均由新生骨所充满,种植体稳固,骨整合良好.nHAC+mBMP-2组及nHAC+nhBMP-2+钛膜组成骨较早,骨成熟较早.nHAC+钛膜组、空白对照组、nHAC+mBMP-2+钛膜组,钛膜下骨生成较好,牙槽嵴较丰满.nHAC+rhBMP-2+钛膜组不但成骨较早,骨形成量最多,而且牙槽嵴最为丰满,12周时骨密度已与阳性对照组一致,但较自体骨移植牙槽嵴更丰满,成骨量更多.空白对照组成骨最慢,阳性对照组成骨最快,但牙槽嵴顶稍有吸收.结论:nHAC具有良好的骨引导作用,修复种植体周骨缺损较好,复合rhBMP-2或/和钛膜后效果更佳.临床上可根据具体情况选用修复即刻种植体周围骨缺损的方法.     

自体微小颗粒骨复合牛骨形态发生蛋白修复骨缺损

目的：观察自体微小颗粒骨复合牛骨形态发生蛋白的成骨效果。方法：实验于2002-10／2003-05在哈尔滨医科大学附属第二医院动物实验中心完成。将30只新西兰白兔两侧桡骨干中段造成1．5cm长骨缺损模型，随机分为实验组21只，空白对照组9只。其中实验组左侧植入颗粒骨＋骨形态发生蛋白，右侧植入颗粒骨；空白对照组双侧植入明胶海绵。分别于术后2，4，12周实验组各取7只、空白对照组各取3只对兔桡骨植入物进行大体形态、放射学检查及组织学检查，12周进行生物力学试验。结果：纳入免30只，均进入结果分析。①兔桡骨植入物大体、X射线与组织学检查结果：术后12周实验组两种方法均可以修复节段性骨缺损，但左侧无论从成骨时间及成骨效果上都要优于右侧，空白对照组无骨愈合现象。②兔桡骨植入物生物力学测试结果：证明实验组左侧在最大应力方面要优于右侧[（101．03&;#177;12．49），（7371&;#177;9．75）N，P〈0．051；在弹性模量上二者无显著性差异。结论：自体微小颗粒骨可较好的修复骨缺损，但复合骨形态发生蛋白后在成骨时间和成骨质量上更优。     

复合抗生素的人工骨及异体骨材料

人工骨具有良好的抗生素缓释能力,部分人工骨还具有一定的骨诱导能力,以人工骨作为抗生素缓释载体治疗感染性骨缺损具有广阔的应用前景.异体骨具有良好的骨诱导能力,以异体骨作为抗生素载体可在抗感染的同时促进骨缺损愈合.由于不同载体在抗生素负载、缓释能力以及骨传导、诱导作用等方面各有优劣,因此在感染性骨缺损的治疗中应根据不同患者选取不同的载体,并对载体制作工艺进行不断改进,使其从仿生学意义上更接近人骨组织,进一步增强其骨传导和骨诱导作用,同时具有更强的抗生素缓释功能.     

纳米人工骨混合自体骨治疗骨肿瘤及骨病43例

背景:纳米人工骨是一种新型的骨移植材料,具有良好生物相容性等优势,但其治疗骨肿瘤及骨病的临床效果尚有待进一步研究.目的:回顾性分析纳米人工骨混合自体骨治疗骨肿瘤及骨病的临床效果.方法:对43例骨肿瘤及骨病患者病灶进行彻底刮除,选用大小不一的纳米人工骨条或颗粒混合人工骨充填,并用尽量将腔隙填满压实.病理性骨折的4例患者行内固定,其余患者未行内固定,依病情选择适当的支具.观察植骨后患者全身状态及植骨局部情况,术后不同时间X射线片观察植骨局部情况.结果与结论:43例患者均获随访,最短为6个月,最长为24个月.1例患者切口延迟愈合.余患者全身状态及切口愈合均良好.术后1～3个月纳米人工骨混合人工骨植入区与缺损周围的骨组织之间界限模糊,但局部仍可见密度高影.约12个月植入骨区与周围骨组织密度相似.结果证实应用纳米人工骨混合人工骨治疗骨肿瘤及骨病效果满意,且并发症较少,其为一种比较理想的移植骨替代物,且具有良好应用前景.     

组织工程化骨替代材料的评价及其在修复骨肿瘤性骨缺损中的应用

目的制备和综合评价组织工程化骨替代材料并用于修复骨肿瘤所导致的骨缺损。方法制备狗和人的异体脱钙骨基质颗粒(DBM),提取牛骨形成蛋白(bBMP)并经成骨诱导活性测定,将bBMP与DBM用直接掺和的方法复合后,再与骨水泥(BC)混合制成组织工程化复合材料,进行综合评价后备用。56例下肢骨肿瘤患者在微波诱导高温原位灭活后,应用组织工程化复合材料对遗留的骨缺损进行修复重建。结果bBMP、DBM和BC组织工程化复合骨修复替代材料具有良好的生物相容性、很强的生物力学强度和成骨诱导活性,并且具有良好的粘合性和可塑形性。临床应用56例,经平均9个月的随访,效果良好且无任何不良反应。患肢膝关节功能评价,优52例(93%),良4例(7%),优良率100%。结论bBMP、DBM和BC组织工程化复合骨修复替代材料是目前修复骨缺损理想的产品,有广阔的临床应用前景。     

自体骨、同种异体骨及骨形态发生蛋白重组骨治疗腰椎骨折

背景：骨形态发生蛋白重组骨是一种新型植骨材料,已逐步应用于临床,但在椎骨折机骨融合中效果仍少见报道。 目的：比较自体骨、同种异体骨及骨形态发生蛋白重组骨治疗腰椎骨折的疗效差异。 方法：选择2005年3月至2009年3月南阳医学高等专科学校附属第一医院收治的腰椎骨折患者78例,根据植骨材料不同随机分为3组,分别植入自体骨、同种异体骨、骨形态发生蛋白重组骨。     

骨囊肿植骨后持续被动运动促进骨愈合的疗效观察

Background: Bony cyst is a kind of common benign bone disease, for which, cause is unclear. Multiple bony cyst is rare in clinic. It is supposed metabolic and genetic factors may be involved. People aged 5～ 15 years are commonly affected population (Female: Male 1:2).     

放射性核素骨显像骨代谢与骨密度的相关性分析

目的：探讨放射性核素骨显像骨代谢与骨密度的相关性,通过骨显像了解骨质疏松状况.方法：18例患者,男5例,女13例,年龄50～88岁,平均65岁.所有患者均通过骨密度扫描仪进行骨密度检查后,进行全身骨显像.骨显像与骨密度检查均取第L1～L4和股骨颈,并勾画感兴趣区（ROI）,然后分别测定各部位ROI放射性计数和骨密度值,计算骨显像各部位ROI值与同侧股骨中段ROI值的比值,观察各部位ROI比值与其骨密度值之间的相关性.结果：骨显像L1～L4各部位ROI比值与其骨密度值呈显著相关,而且,正常组与骨质疏松组的ROI比值与骨密度的相关性存在显著性差异.股骨颈的ROI比值与其骨密度无显著相关.骨显像L1～L4的ROI比值与其相应部位骨密度测定值之间变化趋势基本一致.结论：放射性核素SPECT骨显像腰椎ROI比值与其对应部位的骨密度值之间均呈显著相关,可通过其反映腰椎骨密度的变化.     

纳米脱钙骨基质促进骨愈合**☆

背景:纳米脱钙骨基质具有较大的表面积/体积比,纳米颗粒团聚后在表面自然形成不规则的纳米沟槽,可促进成骨细胞在其表面黏附生长及基质分泌.目的:评价纳米脱钙骨基质作为骨移植替代物的植骨融合能力.方法:以改良Urist法制备人同种异体脱钙骨基质,使用液氮冷冻球磨机及MICROS超细粉碎机制备纳米脱钙骨基质.咬除家兔L 2-4双侧小关节及双侧椎板和横突表面皮质骨,随机分为3组,分别在腰椎椎板及横突间植入纳米脱钙骨基质、脱钙骨基质及自体骨,术后4,8,12周通过影像学、组织学观察植骨融合效果.结果与结论:①X射线与CT表现:术后12周,纳米脱钙骨基质组椎板、附件形态已接近正常节段,新生骨与椎板间隙完全消失,新生骨与植骨床骨质密度均匀一致;脱钙骨基质组植骨区域椎板表面有少量新生骨块影,在新生骨与椎板表面尚有一定间隙;自体骨组椎板与植骨融合界面愈合良好,植骨区有新生骨块影,融合骨块质地均匀.②组织学表现:术后12周,纳米脱钙骨基质被新生骨替代,与椎板间形成骨性连接,新生骨内可见大量骨细胞,与自体骨组效果相似;脱钙骨基质组植骨区达到骨性愈合,新生骨内可见板层样骨,也有类骨物质.表明纳米脱钙骨基质具有良好的成骨诱导能力,是自体骨移植的良好替代物.