镉毒性肾损害与镉、锌结合蛋白——Ⅱ.尿中不同分子量镉、锌结合物的排泄规律

本文研究结果表明:肾功能受损以前,尿镉仅以小分子镉复合物(MMS-Cd,MW<1000)的形式排泄;当肾皮质镉超过其临界浓度并引发肾功能障碍后,尿镉排泄急刷增加,其绝大多数以金属硫蛋白结合镉(MT-Cd,MW=10000)的形式排泄,且MMS-Cd仍继续增加;随着肾损害的加重,尿中又相继出现中、高分子量蛋白结合镉(MMWP-Cd,MW=25000～64500,HMWP-Cd,MW>65000)。但MT-Cd是肾脏受损后尿镉的主要排泄形式,始终占尿镉总量的55～75%。正常动物尿锌主要以MMS-Zn形式排泄(占90%以上);肾损害严重时期方有尿锌的显著升高,且系HMWP-Zn排泄增多所致。     

不同镉锌比例的镉－金属硫蛋白致肾损害的实验研究

本文通过皮下注射不同镉锌比例的Ｃｄ－ＭＴ，来观察大鼠肾功能变化，结果显示：进入大鼠体内的镉主要在肾脏中蓄积，且随注射Ｃｄ－ＭＴ中镉的比例增高而增高；试验组肝、肾中锌的含量高于对照组，其中与Ｃｄ－ＭＴ中镉的比例有一定的关系；注射含镉比较高的大鼠其尿酶（ＮＡＧ、γ－ＧＴ）和尿蛋白（总蛋白和白蛋白）均显著高于对照组。提示：进入生物体内的镉主要以Ｃｄ－ＭＴ形式运输到肾脏；镉可影响生物体内锌的分布，且锌对镉的毒作用有一定的拮抗作用；镉性损伤以肾小管为主，一定程度可累及肾小球。     

不同镉锌比例的镉—金属硫蛋白致肾损害的实验研究

本文通过皮下注射不同镉锌比例的Ｃｄ－ＭＴ，来观察大鼠肾功能变化，结果显示：进入大鼠体内的镉主要在肾脏中蓄积，且随注射Ｃｄ－ＭＴ中镉的比例增高而增高，试验组肝，肾中锌的含量高于对照组，其中与Ｃｄ－ＭＴ中镉的比例有一定的关系；注射含钙比较高的大鼠其尿酶和尿蛋白均显著高于对照组，提示：进入生物体内的镉主要以Ｃｄ－ＭＴ形式运输到肾脏，镉可影响生物体内锌的分布，且锌对镉的毒作用有一定的拮抗作用，镉性损伤以肾     

镉、锌与金属硫蛋白抗体对金属硫蛋白的竞争结合

[目的]通过镉、锌与金属硫蛋白抗体（MT-Ab）对金属硫蛋白（MT）的竞争结合,探讨MT-Ab在镉致肾损伤过程中的作用机制。[方法]根据不同的实验处理分组,每组包含0、5、10、20、40mg／mL 5个不同实验浓度亚组。采用竞争ELISA法,按波长490nm处的光密度值判断竞争结合的程度。[结果]实验所用包被MT质量浓度为1μg／mL,MT-Ab浓度为32U。随着实验镉、锌离子浓度增加,光密度值下降。[结论]镉、锌与MT-Ab对MT的结合存在着竞争作用,MT-Ab可使CdMT解离产生游离镉离子,从而导致肾损伤效应。     

环境镉接触人群尿镉—金属硫蛋白的改变

目的　探讨环境镉接触人群尿镉 金属硫蛋白 (Cd MT)的变化。方法　调查了 90名居住在含镉污水灌溉区 3 0年以上的居民尿中尿镉、尿Cd MT和尿肌酐的变化。结果　尿镉和尿Cd MT分别为 ( 5 17± 2 40 ) μg/g·cre和 ( 6 42± 2 3 5 ) μg/g·cre ;尿镉与尿Cd MT之间密切相关 ,且有一定的剂量反应关系。结论　尿Cd MT可作为慢性镉接触引起的肾损害的一个早期监测指标。     

金属硫蛋白在锌拮抗镉毒性中的作用

重金属镉中毒可导致机体多器官系统的损伤 ,补锌能有效拮抗镉的毒性 ,其机制与金属硫蛋白有着密切的关系。本文拟就金属硫蛋白在锌拮抗镉毒性中的作用做一综述     

大鼠肝脏镉金属硫蛋白的制备

用氯化镉注射Ｗｉｓｔａｒ大鼠，每天１次连续５次后取肝脏制备金属硫蛋白（Ｃｄ－ＭＴ－Ｉ和Ｃｄ－ＭＴ－ＩＩ）。主要步骤经加热，葡聚糖凝胶Ｇ－７５和Ａ－２５层析分析，超微薄膜过滤，有火焰和无火焰原子吸收分光光度计及紫外分光光度计分析等。所得样品较纯且该法可在常规实验室应用。     

环境镉接触人群尿金属硫蛋白排泄与镉致骨损伤效应

目的研究环境镉接触人群尿金属硫蛋白(UMT)的排泄与镉致骨损伤效应的关系。方法镉污染区居民为环境镉接触人群,非污染区居民为对照人群。人群尿镉(UCd)与血镉(BCd)用原子吸收分光光度法测定,用环境接触量估测总镉摄入量(TCd)。UMT、尿β2微球蛋白(UB2M)、尿视黄醇结合蛋白(URBP)及尿白蛋白(UALB)用ELISA法测定,尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(UNAG)和UNAG同工酶B(UNAGB)用荧光分析法测定,均用尿肌酐校正。单光子骨密度仪测定人群前臂骨密度。结果UMT能反映机体接触镉时镉负荷的变化。而高剂量接触镉可先后导致肾功能障碍及骨质疏松。人群UMT排泄量与骨密度的关系同UMT排泄量本身是否异常有关。根据各指标与尿镉的剂量-反应曲线计算得到的基准剂量95%低限水平BMDL值,从小到大排列为UNAGB、UNAG、UB2M、UMT、URBP、T评分及UALB。结论镉致骨质疏松的发生与镉致肾功能障碍有关并迟于后者。UMT不仅能特异而敏感的反映镉致肾的毒性,而且能在一定程度上反映镉对骨骼的损伤。     

金属硫蛋白在镉致睾丸氧化损伤中的保护作用

应用不同剂量的氯化镉（０,２,０．４和０。．８ｍｇ／ｋｇ ＢＷ）对成年雄性ＳＤ大鼠进行腹腔染毒,连续染毒７天后将动物处死,分离睾丸,测定其中金属硫蛋白（ＭＴ）含量,超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）,谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）等抗氧化酶活性和脂质过氧化产物丙二醛（ＤＭＡ）含量,结果显示,低剂量组ＭＴ含量虽有所升高,但与对照组比较差异无显著性,中剂量组ＭＴ含量显著升高,高剂量组ＭＴ含量反而显著降低。     

金属硫蛋白抗镉性肾毒作用的试验研究

采用亚急性镉中毒性肾损害动物模型，观察了金属硫蛋白（ＭＴ）对镉性肾损害的保护作用。结果显示：在镉致肾损害的过程中，可见ＭＤＡ含量增加、ＳＯＤ活性降低，表明镉具有诱导肾脏的脂质过氧化作用。用硫酸锌事先诱导ＭＴ的合成，可延缓镉性肾损害出现的时间和减轻肾损害的程度，表明ＭＴ具有抗镉性肾损害的作用。     

重复性注射镉金属硫蛋白致小鼠肾脏损伤的时程变化

目的 探讨重复性短时间间隔皮下注射镉金属硫蛋白（CdMT)对小鼠肾脏损伤的时程变化。方法 染毒组小鼠给予首次高剂量（0.05mg/kg)和随后重复4次相同低剂量（0.025mg/kg)的CddMT,每次间隔时间为2h,在首次染毒后12、24、72、168和336h处死动物,对照组注射相同体积的生理盐水,观察肝、肾皮质组织中镉、钙以及尿液中镉、钙及尿蛋白的变化。结果 皮下注射CdIMT后,肾皮质中钙含量均高于对照组,在染CdMT后第24及336h肾皮钙含量明显升高,且随着时间的延长尿蛋白、尿钙也有升高的趋势,尿蛋白、尿钙的高峰均出现在注射CdMT后168h,结论 重复性短时间间隔皮下注射CdMT造成小鼠肾脏损害可维持较长的时间,钙稳态失衡是可能的毒作用机制之一。     

Sephadex G-75凝胶柱层析法测定金属硫蛋白

应用Sephadex G-75凝胶柱层祈技术分离出大鼠肝、肾、血液和尿液中金属硫蛋白(MT),通过测定该蛋白质所结合的金属含量来计算MT含量。此法不但能较灵敏地反映镉等重金属中毒情况下MT的体内变化,也能测出正常机体肝、肾等组织中MT含量。若样品加以浓缩亦可检出正常血、尿中MT的含量。     

莱菔硫烷对镉致大鼠肾脏损伤的保护作用

目的探讨亚慢性染镉对大鼠的肾脏毒性及莱菔硫烷(SFN)的保护作用。方法 Wistar大鼠32只,按体重随机分为对照组、低剂量和高剂量单纯染镉组、莱菔硫烷干预组,每组8只。对照组和低、高剂量单纯染镉组大鼠皮下注射生理盐水,SFN干预组大鼠皮下注射1 mg/kg SFN;2 h后,对照组腹腔注射生理盐水,其他三组分别腹腔注射3、6、6μmol/kg氯化镉。皮下注射隔日1次,每周3次;腹腔注射每日1次,每周5次;连续处理6周。将大鼠放入代谢笼,收集24 h尿液,测定尿蛋白含量和碱性磷酸酶(ALP)、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)和乳酸脱氢酶(LDH)活力;然后将大鼠乙醚麻醉,腹主动脉采血测定大鼠血清尿素氮(BUN)含量;切取大鼠肾皮质,测定肾皮质还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。结果与对照组比较,高剂量单纯染镉组尿蛋白和血清BUN含量及尿NAG、LDH和ALP活力明显上升(P0.01);肾皮质中GSH含量、SOD和GSH-Px活力显著降低(P0.01);MDA含量升高(P0.01)。与高剂量单纯染镉组比较,SFN干预组尿蛋白和血清BUN,尿NAG、LDH和ALP活力及肾皮质MDA含量下降;GSH-Px和SOD活力上升;差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论给大鼠亚慢性染镉可引起明显的肾脏损伤,SFN对镉致大鼠肾脏损伤有一定的保护作用。     

镉染毒大鼠肾损害与钙稳态关系的研究

目的 探讨镉中毒性肾损害的细胞分子学机制。方法 通过腹腔注射Cd^2 1．4mg／(kg．bw)制备肾损伤模型，观察镉性肾损害时胞浆中钙含量的变化及其与肾损害之间的关系。结果 随着隔作用时间的延长，肾皮质中尿蛋白、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)不断升高，肾小球滤过率(GFR)减少，肾胞浆中钙显著增高，Ca^2 -Mg^2 -ATPase活性也随之升高。结论 镉性。肾损伤中，细胞钙稳态受到破坏，从而导致了肾功能的损害。     

氧自由基在急性镉中毒性肾损伤中的作用

目的探讨氧自由基在急性镉中毒性肾损伤中的作用。方法给大鼠腹腔注射ＣｄＣｌ２（１５μｍｏｌ／ｋｇ）与巯基乙醇（３００μｍｏｌ／ｋｇ）混合液制备急性镉中毒性肾损伤模型，观察染镉后不同时间肾细胞线粒体、胞浆中一系列脂质过氧化指标的变化，同时测定肾皮质镉含量，检测肾功能和肾脏超微结构的改变。结果染镉后２小时肾皮质镉含量已达峰值；超微结构出现改变；氧自由基生成及丙二醛（ＭＤＡ）含量亦显著高于对照组（Ｐ＜０．０１），超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活力下降。至染镉后１２小时，氧自由基产生及脂质过氧化反应达到高峰；肾功能损害亦十分明显；线粒体、溶酶体等细胞器严重受损。结论氧自由基大量生成及由此引起的脂质过氧化反应可能在镉对肾组织的损害中起重要作用。     

亚硒酸钠对镉和汞肝肾氧化损伤影响的实验研究

目的:观察一次染镉和汞对大鼠肝、肾组织氧化损伤作用,探讨亚硒酸钠预处理对镉和汞氧化损伤的影响。方法:Wister大鼠48只,随机分成6组,每组8只,第1组为染镉实验对照组,第2组为单纯染镉组,第3组为亚硒酸钠预处理组,第4组为染汞实验对照组,第5组为单纯染汞组,第6组为亚硒酸钠预处理干预组。第1、4组大鼠先腹腔注射生理盐水,2 h后皮下注射生理盐水。第2组大鼠先腹腔注射生理盐水,2 h后皮下注射35μmol/kg氯化镉溶液。第3组大鼠先腹腔注射10μmol/kg亚硒酸钠溶液,2 h后皮下注射35μmol/kg氯化镉溶液。第5组大鼠先腹腔注射生理盐水,2 h后皮下注射2.5 mg/kg HgCl2溶液,第6组大鼠先腹腔注射20μmol/kg亚硒酸钠溶液,2 h后皮下注射2.5 mg/kg HgCl2溶液。染毒24 h后测定肝、肾皮质镉或汞、谷胱甘肽、丙二醛含量和谷胱甘肽过氧化物酶活性。结果:与对照组比较,单纯染镉组大鼠肝GSH、MDA含量显著升高,GSH—Px活性显著下降。Na2SeO3预处理组肝、肾皮质GSH和镉含量显著降低,肝脏GSH—Px活性及肾皮质MDA含量显著升高。单纯染汞组大鼠肝、肾皮质及尿汞含量均显著高于对照组。单纯染汞组肝MDA含量显著高于对照组,GSH含量和GSH—Px活性显著低于对照组。Na2SeO3预处理组的肝脏GSH含量和GSH—Px活性均较单纯染汞组升高,有显著性差异。单纯染汞组肾皮质MDA含量显著高于对照组,GSH含量和GSH—Px活性显著降低。Na2SeO3预处理组中肾皮质MDA含量低于单纯染汞组,GSH—Px含量高于单纯染汞组。结论:给大鼠一次染镉和汞,可以对肝和肾脏产生明显的氧化损伤作用。亚硒酸钠对急性染镉和汞所致肝肾损伤具有一定的拮抗作用,其机制可能与增加内源性GSH、使GSH—Px活性增强以及清除自由基能力提高有关。