心肌缺血预适应环氧化酶-2、血管内皮因子的表达及其远隔器官效应

目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)在晚期缺血预适应(DPC)心肌及远隔器官(RPC)肝脏中的表达。方法:新西兰兔20只,随机分为DPC组及正常对照组,每组各10例。结扎兔冠状动脉左前降支建立缺血预适应模型,24h后取心肌及肝脏组织,免疫组化法测定心肌及肝脏COX-2、VEGF表达。结果:兔DPC心肌及肝脏COX-2、VEGF表达量比对照组明显增强,差异有显著性(P<0.05)。心肌非缺血区与对照组表达有显著差异性(P<0.05)。结论:缺血缺氧可刺激心肌COX-2、VEGF表达明显增强,心肌非缺血区及远隔器官肝脏也大量表达,COX-2、VEGF可能是参与抗缺血、冠状动脉侧枝血管形成及远隔器官保护效应中的重要物质。     

缺血及二氮嗪预适应对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

目的 探讨缺血及二氮嗪预适应对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用及机制.方法 Wistar大鼠30只,建立离体心脏灌注模型,分成3组,每组10只:(1)缺血再灌注组(I/R组):心脏平衡灌流30 min后,缺血30 min,再灌注1 h.(2)缺血预适应组(IPC组):心脏平衡灌流10 min,经2次缺血再灌注.(3)二氮嗪预适应组(DPC组):心脏平衡灌流10 min,给予2次含二氮嗪(100μmol/l)的K-H液灌注5 min再复灌不含二氮嗪的K-H液,缺血30 min,再灌注1 h.各组取心尖肌做冰冻切片行过氧化物酶体增生激活受体γ协同刺激因子1α(PGC-1α)免疫组织化学染色,电镜标本对心肌线粒体行Flameng评分.结果 IPC组、DPC组PGC-lα表达明显增高,与I/R组比较差异有统计学意义,但IPC及DPC两组间差异无统计学意义(P＞0.05).Flameng评分:IPC组(0.44±0.13)、DPC组(0.47±0.10)、I/R组(1.78±0.14);IPC及DPC两组与I/R组比较差异有统计学意义(均P＜0.01).结论 缺血及二氮嗪预适应对心肌线粒体有保护作用,这一作用可能与PGC-1α激活及高表达有关.     

细胞膜钙ATP酶在心肌缺血／再灌注和腺苷诱导预适应中的作用

目的:探讨在心肌缺血/再灌注和腺苷诱导预适应过程中细胞膜钙泵(PMCA)的可能作用。方法:将培养的乳鼠心肌细胞分为3组:缺血/再灌注组、腺苷预处理组和对照组。各组乳酸脱氢酶(LDH)漏出量以生化法检测(n=5);半定量RT-PCR检测各组PMCA基因转录水平(n=3);PMCA活性以定磷比色法测定(n=5)。结果:(1)缺血/再灌注组LDH漏出量明显增高(P<0.001),腺苷预处理组LDH漏出量显著降低(P<0.001);(2)各组间PMCA mRNA转录水平无显著性差异(P>0.05);(3)各组间PMCA蛋白活性无显著性差异(P>0.05)。结论:在乳鼠心肌细胞缺血/再灌注过程中PMCA无代偿功能;PMCA不直接参与腺苷诱导预适应的心肌保护作用。     

洛伐他汀预适应在大鼠急性心脏缺血再灌注损伤中的心肌保护作用研究

目的 探讨洛伐他汀(Lovastatin)预适应在大鼠急性心脏缺血再灌注损伤中的心肌保护作用机制.方法 将24只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分洛伐他汀组(A组),每天胃内直接灌注洛伐他汀15mg/kg,灌注时间2周;洛伐他汀复合L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)(B组),每天胃内直接灌注洛伐他汀15mg/kg,同时每天腹腔内注射L-NAME 30mg/kg,共2周;模型对照组(C组).2周后建立在体急性缺血再灌注心脏模型,观察心肌组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达以及心肌细胞的凋亡情况.结果 洛伐他汀能明显上调缺血再灌注时心肌组织内eNOSmRNA表达(t=0.006,P＜0.01);下调iNOS mRNA的表达(t=0.0002,P＜0.01);明显降低缺血再灌注所导致的心肌细胞凋亡指数(t=0.03,P＜0.05).结论 洛伐他汀预适应对大鼠心脏急性缺血再灌注时具有心肌保护作用,与其在缺血再灌注过程中eNOSmRNA表达提高及iNOSmRNA表达抑制有关.     

缺血预适应与后适应对家兔局部短期缺血再灌注心肌细胞凋亡影响的研究

目的：探讨缺血预适应与缺血后适应对兔局部缺血再灌注,心肌细胞凋亡的影响。方法：用30只新西兰大白兔建立心肌缺血再灌注动物模型,采用DNA电泳和TUNEL分析检测缺血再灌注心肌组织的细胞凋亡情况,免疫组化方法检测心肌组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果：缺血再灌注组缺血区心肌DNA电泳出现200bp,400bp2条条带呈梯形,其余各组未见梯形;TUNEL检测显示缺血再灌注组心肌细胞凋亡指数较其他实验组显著增加（P〈0．05）;缺血再灌注组Bcl-2基因蛋白表达量低于其他各组（P〈0．05）;缺血再灌注组Bax基因蛋白表达量高于其他各组（P〈0．05）。结论：缺血后适应可产生内源性心脏保护作用。缺血预适应、缺血后适应显著减轻了兔缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡程度与上调Bcl-2蛋白表达、下调Bax蛋白表达有关。     

远程缺血后适应对脑缺血损伤的实验研究

目的探讨远程缺血后适应对大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注24 h脑梗死体积、神经功能评分及Caspase-3表达的影响。方法大鼠脑缺血模型采用线栓法制备。缺血SD大鼠(280～300 g)48只,随机分为假手术组(n=6)、对照组(即单纯脑缺血/再灌注损伤,n=14)和远程缺血后适应组(脑缺血后给予双下肢的非致死性的缺血再灌注)。根据后适应时间不同,后组者又分为缺血即刻后适应组(n=14)和再灌注即刻后适应组(n=14)。于大脑中动脉再灌注24 h进行神经功能评分、脑组织梗死体积以及Caspase-3表达的测定。脑组织梗死体积采用四氮唑红(TTC)染色法测定。Caspase-3的表达应用免疫组织化学法检测。结果远程缺血后适应组的脑梗死体积与单纯缺血组相比明显降低,差异有显著性(P0.05);与假手术组相比,单纯缺血组Caspase-3阳性细胞数明显增多,差异有显著性(P0.05);与对照组比较,缺血即刻后适应组Caspase-3阳性细胞数降低,差异有显著性(P0.05)。结论远程缺血后适应能减轻脑缺血/再灌注损伤,其保护作用可能与降低Caspase-3的表达有关。     

缺血预适应对兔肢体缺血再灌注后心肌损伤的影响

1目的　观察缺血预适应 (IPC)对兔肢体缺血再灌注后心肌损伤的影响 ,以进一步探讨 IPC对肢体缺血再灌注后心肌的保护作用。 2方法　实验用纯种青紫蓝兔 2 4只 ,随机分成对照 (Control)组 ,缺血再灌注 (IR)组和缺血预适应 (IPC)组 ,每组 8只 ,用BL -4 10生理记录仪测量心功能指标 ,并测定心肌酶含量变化及丙二醛水平。 3结果　发现 IPC可以减轻肢体缺血再灌注后左室舒缩功能的降低 ,并且能降低血中心肌酶及脂质过氧化物丙二醛 (MDA)含量。 4结论　 IPC对兔肢体 IR后心肌的损伤有保护作用     

肝硬化肝癌立体定向照射后细胞因子表达的实验研究

目的应用兔肝硬化肝癌模型观察肝病状态下肝癌照射后放射性肝损伤的细胞因子变化。方法肝硬化肝癌兔16只(实验组1),随机分为两组,每组8只,分别给予单次剂量20,30Gy的立体定向照射;8只单纯接种肝癌兔(实验组2),随机分为两组,每组4只,按上述方法分别给予相同照射。照射后3周全部处死,应用EV二步法分别观察照射后实验组1与实验组2兔肝组织GST-π的变化。结果①给予20Gy照射,实验组1GST-π在癌周组织的表达比实验组2GST-π的表达高,两组间差异有显著性(P=0.010);②给予30Gy照射,实验组1GST-π在癌周组织的表达与实验组2GST-π的表达相似,两组间差异无显著性(P=1.000);③实验组1不同剂量照射后,高剂量组(30Gy)GST-π在癌周组织和肝癌组织的表达比低剂量组(20Gy)的表达低,两组间差异有显著性(P=0.010)。结论①实验性肝硬化肝癌的照射效果单次剂量30Gy优于20Gy;②GST-π可作为评价肝硬化肝癌照射效果的参考指标。     

地氟烷预适应对心脏直视手术围术期心肌肌钙蛋白I的影响

目的研究地氟烷预适应对心内直视手术中缺血/再灌注对心肌损伤的保护作用及可能机制.方法择期行先天性心脏病矫正术的患者40例,随机分为地氟烷预适应组(A组,n=20)和对照组(B组,n=20).两组患者均采用相同剂量芬太尼麻醉(30 μg/kg),其中A组在主动脉阻断前吸入10 min 1 MAC的地氟烷,随后继以5 min的洗脱期;而B组只给予15 min的纯氧吸入.观察麻醉前(T0),主动脉开放后即刻(T1)、2 h(T2)、6 h(T3)、24 h(T4)、48 h(T5)、各时点的血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB),心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平以及主动脉开放后心脏自主复跳率.结果 A组在主动脉开放后血浆CK-MB(T2、T3)及cTnI(T1～T5)浓度与B组相比有显著降低(P《0.05),并且心脏自主复跳率有显著增高.结论在临床心内直视手术中,由缺血/再灌注造成的损伤,地氟烷预适应可以产生和缺血预适应相似的心肌保护作用.     

邓氏通冠胶囊改善缺血心肌供血的时效量效关系及NO机制研究

【目的】观察邓氏通冠胶囊改善心肌缺血的时效、量效关系及其NO机制。【方法】时效实验中,昆明种小鼠随机分为6组,即正常对照组、模型组、4个通冠胶囊组(中药组,分别用药1、3、5、7 d,剂量为0.5 g/kg);量效实验中,小鼠随机分为正常对照组、模型组、4个通冠胶囊组(中药组,剂量分别为0.25、0.5、1、2 g/kg);除正常对照组外,其他组均采用腹腔注射垂体后叶素(Pit,30 U/kg)复制心肌缺血模型,测量60 min内心电图T波变化,采用酶法测定小鼠血浆NO含量以确定最佳有效剂量和用药时间;采用免疫组化法测定小鼠心肌一氧化氮合酶(eNOS)活性,采用逆转录聚合酶链反应检测小鼠心肌eNOS基因表达。【结果】在用药3 d后即达到改善心肌缺血的最佳疗效,有效剂量为0.5 g/kg。通冠胶囊能显著性升高心肌缺血小鼠的血浆NO含量与心肌细胞内的eNOS活性,提高缺血心肌eNOS mRNA的表达(均P<0.05)。【结论】邓氏通冠胶囊可能是通过提高eNOS基因的表达,增强eNOS的活性,从而升高NO水平而达到改善缺血心肌供血作用的。     

家兔肢体缺血预处理后血清中IL-2含量的变化

目的　观察兔右后肢缺血预处理后血清中白细胞介素 - 2 (IL - 2 )含量的变化 ,探讨IL - 2与缺血预处理保护作用机理之间的关系。方法　取健康白兔 2 4只 ,分为缺血 /再灌注组、缺血预处理组和正常对照组三组 ,每组 8只 ,分别测定各组兔血清中IL - 2的含量。结果　缺血预处理组IL - 2含量高于缺血 /再灌注组 (P <0 .0 1 ) ,缺血 /再灌注组低于正常对照组 (P <0 .0 1 ) ,缺血预处理组与正常对照组比较差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论　IL - 2可能参与了缺血预处理的内源性保护作用机理     

急性炎症状态对家兔急性心肌缺血的影响

目的:探讨急性炎症状态下发生心肌缺血时对心脏的影响.方法:24只成年家兔(1.8～2.5kg)随机分为空白对照组(A),单纯心肌缺血组(B),内毒素组(C),内毒素加心肌缺血组(D),建立AMI模型,术后6h观察血液学指标及缺血心肌的HE染色、COX-2多克隆抗体免疫组织化学染色.结果:血液学指标示术后6hMDA,NO,髓过氧化物酶(MPO)测定值D组与A,B,C组有明显差异(P<0.05);后3组心房钠尿肽释放增加,D组与B,C组有明显差异(P<0.05),D组左室舒张末压、左室收缩峰压测定值较B,C组降低明显,缺血心肌中环氧化酶-2高度表达.结论:机体处于炎症状态时发生心肌缺血,炎症因子损害心肌,恶化心脏功能.     

缺血预处理对兔缺血再灌注心肌bcl—2，bax，p53基因表达的影响

OBJECTIVE: To investigate the effects of ischemic preconditioning on myocardial bcl-2, bax, p53 gene expression during ischemia/reperfusion period in rabbits. METHODS: Twenty four rabbits were randomly allocated to three groups (n = 8), pseudo-operation group(Group P), ischemia/reperfusion group (Group IR) and ischemic preconditioning group(Group IP). Group IR and Group IP were subjected to three hours of left anterior descending coronary artery occlusion followed for three hours of reperfusion. Ischemic preconditioning was achieved by three 5-minute cycles of ischemia, each followed by 5 minutes of reperfusion. Apoptosis index(AI) and protein expression of Bcl-2, Bax, and p53 in the border zone of myocardium of ischemic area at risk were obtained with a flow cytometry. RESULTS: Compared with Group IR, AI was significantly reduced in Group IP(P < 0.01). Bcl-2 expressions was higher in Group IP than in Group IR, while bax and p53 expressions were lower in Group IP than in Group IR. CONCLUSION: The rabbit myocardial apoptosis induced by ischemic preconditioning inhibited ischemia-reperfusion in vivo partly related to the modulating of bcl-2, bax and p53 expression.     

替米沙坦预处理对大鼠缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡及NF-κB表达的影响

目的研究替米沙坦预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤（MIRI）后心肌细胞凋亡及核转录因子κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）蛋白表达的影响。方法健康雄性SD大鼠32只,随机分为4组：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（MIRI组）、替米沙坦预处理Ⅰ组（TⅠ组）和替米沙坦预处理Ⅱ组（TⅡ组）,每组8只。TⅠ组灌胃替米沙坦5.0mg/（kg.d）,TⅡ组灌胃替米沙坦10.0mg/（kg.d）,其余每日灌胃等量生理盐水,持续一周。建立MIRI模型,光镜下观察心肌形态改变、测定血清CK-MB活性、TUNEL检测凋亡细胞及免疫组化测定NF-κBp65的表达。结果与Sham组相比,MIRI组与TⅠ、TⅡ组血清CK-MB活性、凋亡细胞、NF-κBp65表达明显升高（P〈0.01）;与MIRI组相比,TⅠ组血清CK-MB活性明显降低（P〈0.01）,凋亡细胞、NF-κBp65表达降低（P〈0.05）;TⅡ组血清CK-MB活性,凋亡细胞、NF-κBp65表达明显降低（P〈0.01）。结论替米沙坦预处理可降低心肌缺血再灌注血清CK-MB的含量,抑制NF-κBp65的表达,抑制细胞凋亡,对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤起保护作用,而高剂量组的保护作用优于低剂量组。     

右冠状动脉缺血预处理对兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探索右冠状动脉缺血预处理、后处理对兔的心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法：将30只新西兰大白兔随机分为对照组(n=7)、缺血再灌注损伤组(n=8)、右冠状动脉缺血预处理组(n=8)、右冠状动脉缺血后处理组(n=7),分别抽取术前、术后1及6 h的静脉血,测肌酸激酶同工酶、肌钙蛋白T,计算心肌梗死面积。结果：与缺血再灌注损伤组比较,右冠状动脉缺血预处理组、右冠状动脉缺血后处理组肌酸激酶同工酶、肌钙蛋白T浓度在术后1和6 h明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);心肌梗死面积明显缩小,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论：在新西兰大白兔的心肌缺血再灌注心肌梗死模型中,右冠状动脉缺血预处理、右冠状动脉缺血后处理对心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用。     

Experimental Study on Gufusheng in Treatment of Steroid-Induced Ischemic Necrosis of Femoral Head in Rabbits

Objective： To explore.the mechanisim of compound Gufusheng in treatment of steroid-induced ischemic necrosis of femoral head （SINFH）. Thirty-two rabbits were randomly divided into a blank control group （n=12） and a model group （n=20）. The rabbits of the model group were established by intramuscular injection of prednisone acetate （0.32mg/kg/d） for 8 weeks, and 2 rabbits in each group were killed at the 6th and the 8th week respectively to investigate whether the model was successfully prepared. Then remainder in the model group was again randomly divided into group A （Gufusheng group, n=8） and group B （model group, n=8）, while the rest of rabbits in the blank group constituted group C （n=8）. The rabbits in group A were given Gufusheng Decoction （骨复生煎液） by intragastric perfusion, and the rabbits in group B and C were fed with normal saline. After treatment for 4 weeks, the serum insulin-like growth factor-1 （IGF-1） and tumor necrosis factor-~ （TNF-α） levels in the rabbits of the 3 groups were determined by radioimmunoassay （RIA）. The serum TNF-α decreased significantly and the IGF-1 level increased significantly in the Gufusheng group as compared with the model group （both P〈0.01）. Compound Gufusheng can prevent SINFH and promote repair of the tissue of necrosis of femoral head possibly via decreasing the TNF-α and increasing IGF-1 level.     

缺血预处理对兔缺血再灌注心肌bcl-2,bax,p53基因表达的影响

目的 :探讨缺血预处理对兔在体心脏局部缺血再灌注过程中心肌细胞bcl 2 ,bax ,p5 3基因表达的影响。方法 :2 4只新西兰白兔随机分成 3组 (n =8) :假手术对照组 (P组 )、缺血再灌注对照组 (IR组 )、缺血预处理组(IP组 )。除P组外 ,其余两组均接受左冠脉前降支 3h阻断和 3h再灌注。IP组在 3h缺血前接受连续 3次每次缺血 5min ,再灌注 5min的预处理。取心肌缺血区边缘组织用流式细胞仪测凋亡指数 (AI)和bcl 2 ,bax ,p5 3基因的蛋白表达量。结果 :凋亡指数 ,IP组 ( 5 .85± 1.5 9) %较IR组 ( 13.83± 3.98) %显著减少 (P <0 .0 1)。bcl 2基因的蛋白表达量IP组高于IR组 ;bax ,p5 3基因的蛋白表达量IP组低于IR组。结论 :缺血预处理抑制缺血再灌注所致心肌细胞凋亡与上调bcl 2基因的蛋白表达 ,下调p5 3和bax基因的蛋白表达有关。     

缺血预处理抑制缺血再灌注所致兔在体心肌细胞凋亡

目的：为探讨缺血预处理对缺血再灌注过程中心肌细胞凋亡的影响。方法：将24只新西兰白兔制成在体心肌缺血／再灌注模型,并随机分成假手术对照组（P组）,缺血／再灌注对照组（IR组）,缺血预处理组（IP组）,结果：IP组心肌梗死面积与缺血面积的比率比IR组显著减少（P＜0．05）;凋亡指数IP组亦比IR组小（P＜0．01）,IR组心肌DNA Ladder形成明显,IP组DNA Ladder模糊不清,结论：缺血预处理对缺血／再灌注损伤中心肌细胞凋亡具有抑制作用。     

电刺激兔缺血腓肠肌预适应对再灌后心肌的保护作用

目的 研究电刺激缺血腓肠肌的预适应模式是否对缺血／再灌后的兔心肌有保护作用,并初步探讨其保护机制。方法 建立预适应的动物模型,分为对照组（Ａ组）、电刺激组（Ｂ组）、股动脉狭窄组（Ｃ组）及电刺激加股动脉狭窄组（Ｄ组）。以心率、左室功能、左室血清中一氧化氮（ＮＯ）及一氧化氮合酶（ＮＯＳ）水平为观察指标。结果 冠状动脉结扎期各组心率差异无显著性,而再灌注期间Ｃ组及Ｄ组的心率较Ａ组及Ｂ组的心率慢。与其他３组相比,再灌注４ｈ末Ｄ组的左室收缩功能指标（ＬＶＳＰ,ｄｐ／ｄｔｍａｘ）显著改善,同时左室血清中ＮＯ及ＮＯＳ水平较低（Ｐ均〈０．０５）;而Ｂ组,Ｃ组各观察指标与Ａ组相比差异无显著性。结论 电刺激缺血腓肠肌预适应模式能减轻缺血／再灌后的兔心肌损伤,其保护机制可能与ＮＯ等生物介质的效应有关。     

CRISPLD2蛋白对内毒素急性呼吸窘迫综合征小鼠的保护作用

目的 探讨CRISPLD2蛋白对内毒素急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory disease syndrome,ARDS)小鼠的保护作用.方法 采用数字表法,将120只健康雄性昆明小鼠随机分为对照组(A组,40只):气道内滴入LPS(5 mg/kg);LPS预处理组(B组,40只):先予小鼠LPS(2 mg/kg)腹腔内注射,注射后第8天气道内滴入LPS(5 mg/kg);重组CRISPLD2处理组(C组,40只):先予小鼠尾静脉注射重组CRISPLD2(50 mg/kg),6 h后气道内滴入LPS(5 mg/kg).(1)采用数字表法将30只小鼠随机分成A1组、B1组、C1组(各组10只),气道滴入LPS 6 h后处死,测定肺湿干重比(W/D)、通透指数(LPI).(2)采用数字表法将90只小鼠随机分成A2组、B2组、C2组(各组20只),观察5 d内小鼠死亡情况,描绘生存曲线.结果 B、C两组W/D、LPI及5 d死亡率显著低于A组,差异有统计学意义(P<0.05);B组各项检测结果低于C组,差异有统计学意义(P>0.05).结论 提升CRISPLD2蛋白血浓度对内毒素所致ARDS具有保护作用,可降低肺损伤程度,改善肺毛细血管通透性,降低死亡率.