FQ—PCR和ELISA法检测婴幼儿巨细胞病毒感染的临床价值探讨

目的 探讨两种不同的方法检测婴幼儿巨细胞病毒（HCMV）感染及在临床诊断与治疗中的应用价值.方法 采用FQ-PCR检测126例临床疑似HCMV感染婴幼儿尿液中HCMV-DNA水平,同时采用ELISA法检测以上婴幼儿血清HCMV-IgM抗体.结果 FQ-PCR检测尿液HCMV-DNA的阳性率为35.71％,ELISA法检测婴儿血清HCMV-IgM阳性率为16.67％.两种方法对HCMV感染诊断的阳性率差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 FQ-PCR检测尿液HCMV-DNA是早期诊断婴幼儿HCMV感染的敏感有效的方法.     

FQ-PCR法对孕前及孕中进行HCMV检测的临床意义

目的 运用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术对孕前及孕中进行人巨细胞病毒(HCMV)检测,探讨受检者孕前及孕时感染HCMV的临床意义.方法 对302例孕前妇女和620例产前孕妇均做HCMV检测,取宫颈分泌物标本用FQ-PCR法做HCMV-DNA检测,取血清标本用ELISA法做HCMV-IgM检测.结果 302例孕前妇女宫颈分泌物标本HCMV-DNA阳性96例,血清标本HCMV-DNA阳性5例;620例产前孕妇宫颈分泌物标本HCMV-DNA阳性94例,血清标本HCMV-DNA阳性7例.可见用FQ-PCR法检测HCMV-DNA的阳性率远高于用ELISA法检测HCMV-IgM,ELISA法检测HCMV感染阳性率明显偏低,说明FQ-PCR法敏感性显著高于ELISA法.结论 宫颈分泌物组和血清组有明显差异,运用FQ-PCR技术对孕前及孕时进行HCMV检测具有重要的临床意义.     

实时荧光PCR检测黄疸婴儿尿中人巨细胞病毒感染研究

目的探讨实时荧光PCR技术检测尿中人巨细胞病毒(HCMV)在黄疸婴儿HCMV活动性感染的检测价值。方法分别应用实时荧光PCR法和ELISA法检测2585例黄疸婴儿尿HCMV-DNA和血清HCMV-IgM,比较病毒DNA与血清抗体的平行性和敏感性。结果 2585例黄疸婴儿尿中实时荧光PCR检测HCMV-DNA阳性1428例;ELISA检测HCMV-IgM阳性1084例。两种方法阳性符合率为73.88%,实时荧光PCR法和ELISA法阳性检出率分别为55.24%和41.93%,差异有统计学意义(P0.01);实时荧光PCR法阳性标本的平均拷贝数为7.86×105。结论 HCMV是引起婴儿黄疸的主要原因之一,实时荧光PCR法检测敏感性要高于ELISA法检测,可以有效地提示体内活动性HCMV感染,具有良好的应用价值。     

荧光定量PCR技术在小儿尿液巨细胞病毒检测中的应用

目的探讨荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)方法检测尿液巨细胞病毒在儿童CMV感染诊断中的意义。方法分别应用FQ-PCR和ELISA法检测75例确诊或高度怀疑为CMV感染和25例对照儿童尿CMV-DNA和血清CMV-IgM,比较病毒DNA与血清抗体的平行性和敏感性。结果75例确诊或疑诊CMV活动性感染患儿中,检测到CMV-DNA 66例;检测到CMV-IgM 54例。两种方法阳性符合率为77%,FQ-PCR和ELISA法阳性检出率分别为88%和72%,有统计学差异(P<0.05)。结论FQ-PCR法检测尿CMV-DNA对诊断活动性CMV感染具有良好的应用价值。     

对献血者巨细胞病毒感染的研究

目的 了解献血中巨细胞病毒(HCMV)感染状况，并探索一种比较简便的检测方法。方法 用PCR法和DNA杂交法检测同一献血的白细胞及血清中的HCMV—DNA，并用ELISA法检测血清中的HCMV-IgM、IgG(测4个滴度)，连续2a共检测白细胞和血清样本各200人份。结果 PCR法检测白细胞中的HCMV-DNA阳性率分别为63％和70％，DNA杂交法检测的阳性率分别为42％和50％；PCR法检测血清中的HCMV-DNA的阳性率分别为49％和53％，DNA杂交法检测的阳性率分别为33％和39％；HCMV-IgM阳性率2a均为5％；HCMV-IgG阳性率分别为54％和58％。结论 HCMV-IgG抗体可作为HCMV感染的指标。     

PCR及ELISA方法检测献血员中巨细胞病毒感染的比较研究

应用PCR及ELISA方法检测西安地区部分献血员中巨细胞病毒感染情况,并对其结果进行比较,在所检测的360例献血员中,HCMV-DNA阳性率为8.06％,抗HCMV-IgG抗体阳性率为80.00％,抗HCMV-IgM抗体阳性率为2.50％,HCMV-DNA阳性与抗HCMV-IgG抗体阳性符合率为10.o1％,所有抗HCMV-IgG抗体阴性献血员其HCMV-DNA均为阴性。结果表明,对临床易感个体进行输血时,仅用ELISA方法筛选即可。     

巨细胞病毒DNA检测在筛查巨细胞病毒感染中的应用

目的 探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测婴儿尿液人巨细胞病毒(CMV)DNA在儿科CMV感染诊断中的价值.方法 对565例临床疑诊CMV感染患儿分别应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、酶联免疫法(ELISA)检测尿液CMV-DNA及血清CMV-IgM抗体.结果 FQ-PCR检测尿CMV-DNA的阳性率为42 83%,ELISA检测婴儿血清CMV-IgM抗体阳性率为20 18%.两种方法对CMV感染诊断符合率为76 46%,前者诊断阳性率显著高于后者(χ2=33 59,P<0 01).结论 FQ-PCR检测尿液CMV-DNA是早期诊断婴儿CMV感染的敏感有效的方法.     

荧光定量聚合酶链反应在巨细胞病毒性肝炎中的应用

目的 探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)在巨细胞病毒性肝炎中的应用价值.方法 选50例血清HCMV-IgM阳性的肝炎患者和25例健康人做对照组分别进行血清FQ-PCR法检测其HCMVDNA的含量对比其检出率以及与肝功能的关系.结果 50例血清HCMV-IgM阳性的肝炎患者血清HCMVDNA＞103拷贝/毫升者35例,HCMVDNA阳性组要较HCMVDNA阴性组的血清总胆红素(TBiL)谷丙转氨酶(ALT)谷草转氨酶(AST)要高,经统计学处理P＜0.05,差异有统计学意义.25例健康对照组HCMV-IgM和HCMVDNA均阴性.结论 FQ-PCR在巨细胞病毒性肝炎感染中具有早期诊断结果可靠等特点,通过HCMVDNA含量的变化指导临床、评价药物疗效具有一定的临床应用价值.     

人巨细胞病毒DNA检测在小儿人巨细胞病毒感染诊断中的应用

目的 探讨小儿血液、尿液及其母亲母乳的人巨细胞病毒DNA检测结果在人巨细胞病毒感染的诊断价值。 方法 选取2017年—2018年期间在浙江大学丽水医院就诊的疑似人巨细胞病毒感染的患儿328例为研究对象。收集患儿血液、尿液和对应母乳标本,进行实时荧光定量PCR,检测人巨细胞病毒DNA载量;再将患儿血清用化学发光法检测HCMV-IgM,比较不同标本不同检测方法的阳性率。针对阳性患儿,对不同临床症状分布构成进行分析。 结果 328例患儿检测总阳性率为71.04%,男性患儿和女性患儿阳性率分别为71.02%和69.74%,差异无统计学意义(χ2=0.065,P=0.799)。血液、尿液和乳汁的人巨细胞病毒阳性率分别为49.09%、70.43%和58.23%,尿液阳性率最高,差异有统计学意义(χ2=31.147,P<0.001)。新生儿组的乳汁阳性率最高,为72.41%,28 d到1岁之间和1岁以上患儿尿液阳性率最高,各年龄组之间阳性率差异有统计学意义(P<0.05);血人巨细胞病毒DNA和血清HCMV-IgM阳性率检出率分别为49.09%(161/328)和16.16%(53/328),2种方法联合检测的阳性检出率为49.69%,对比单一血DNA检测方法,两者差异无统计学意义(P>0.05)。临床症状小于1岁患儿主要以黄疸,腹泻为主,大于1岁的患儿主要以肝损害和肺炎为主。 结论 在小儿血液、尿液及其母亲母乳HCMV-DNA的检测中,尿液HCMV-DNA对诊断患儿人巨细胞病毒有更好的临床应用价值。且尿标本留取方便、无创,易为家长和小儿接受,所以采用FQ-PCR方法对小儿尿标本进行检测能起到快速、简洁、灵敏的作用,对提高HCMV感染的诊断率有实际的临床意义,对于小月龄患儿临床应推广尿液HCMV-DNA检测。      

汕头地区健康献血者人巨细胞病毒抗体及DNA检测结果的评价

目的：了解汕头地区健康献血者人巨细胞病毒（HCMV）感染情况,并探索一种比较可靠的检测方法。方法：采用酶联免疫吸附试验检测健康献血者血清（450份）中HCMV-IgM和．IsG抗体,并对12份疑似HCMV感染（HCMV-IgM、HCMV-IgC双阳性）、278份HCMV-IgM阴性而HCMV-IgG73性及10份HCMV-IgM、HCMV-IgG双阴性的血浆样本进行荧光定量PCR（FQ-PCR）检测。并对两种检测方法的结果进行比较分析。结果：汕头地区健康献血者HCMV-IgM、HCMV-IgG阳性率分别为2．7％和93．8％;FQ-PCR对HCMV-DNA的检出率高于HCMV-IgM阳性率（P〈0．05）。结论：汕头地区健康献血者HCMV阳性率与国内其他地区学者所报道相近,FQ-PCR定量检测血清HCMV-DNA的方法能够更灵敏地反映HCMV活动性感染,FQ-PCR对献血者HCMV感染的诊断有重要作用。     

不同方法检测造血干细胞移植受者巨细胞病毒感染的研究

[目的]探讨造血干细胞移植后检测巨细胞病毒(CMV)感染的有效方法。[方法]分别应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法、荧光定量PCR(FQ-PCR)、间接免疫荧光法(IFA)检测11名干细胞移植受者,96份标本的血清IgM抗体、血浆DNA负荷量和外周血白细胞PP65抗原。[结果]ELISA、FQ-PCR和IFA的阳性检出率分别为15.63%、34.38%、36.46%。ELISA的阳性检出率明显低于FQ-PCR和IFA法。IFA与FQ-PCR两种检测方法对CMV感染的测定结果具有良好的一致性(kappa值为0.818)。[结论]IFA和FQ-PCR是检测造血干细胞移植受者CMV早期感染较为敏感的指标,具有良好的临床应用价值。     

荧光定量聚合酶链反应与免疫印迹法检测人巨细胞病毒

目的比较荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）与免疫印迹法（IBT）检测人巨细胞病毒效果。方法分别应用FQ-PCR和IBT检测疑似人巨细胞病毒（HCMV）感染小儿和成人各42例尿HCMV DNA和血清HCMV IgM。结果 42例疑似人巨细胞病毒感染小儿尿HCMV DNA阳性检出率为57.14%,血HCMV IgM阳性检出率为35.71%。前者的诊断阳性率高于后者,差异有统计学意义（χ^2=3.88,P〈0.05）;42例成人尿HCMV DNA阳性检出率为14.29%,血HCMV IgM阳性检出率为71.43%。后者的诊断阳性率显著高于前者,差异有统计学意义（χ^2=28,P〈0.005）;84例患者尿HCMV DNA阳性检出率38.10%,血HCMV IgM阳性检出率48.81%。2种方法检测HCMV活动性感染的差异无统计学意义（χ^2=1.96,P〉0.1）。结论 FQ-PCR检测HCMV DNA是早期诊断小儿HCMV感染的有效的方法;免疫印迹法检测血清HCMV IgM水平对于判断成人HCMV活动性感染具有一定意义;做人群HCMV普查时,免疫印迹法有较好的应用价值。     

人巨细胞病毒感染与自然流产的关系

目的探讨人巨细胞病毒（HCMV）感染与自然流产的关系。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）及聚合酶链试验（PCR）对自然流产组的132例患者的血清及外周血进行HCMV-IgM和HCMV-DNA检测,其中流产组45例的绒毛组织进行HCMV-DNA检测并与对照组作比较。结果流产组HCMV-IgM及外周血、绒毛组织HCMV-DNA阳性率分别为16.7％,18.2％,20.0％,对照组分别为4．0％,1．1％,4.8％,两组比较差别有显著性（P〈0.05）。结论HCMV感染与自然流产有相关性,HCMV感染是引起自然流产的重要原因之一。     

小儿巨细胞病毒感染44例临床分析

目的:分析小儿巨细胞病毒感染的临床特点及诊断方法。方法:对应用ELISA方法检测血清CMV-IgM抗体,FQ-PCR方法检测尿CMV-DNA而确诊为巨细胞病毒感染的44例患儿的临床资料进行回顾性分析。结果:44例患儿中肝功能损害25例(56.8%),肺炎21例(47.7%),神经系统损害4例(9.1%),血液系统损害8例(18.2%),先天性发育异常5例(11.4%)。结论:小儿巨细胞病毒感染主要引起肝脏、呼吸系统、神经系统、血液系统损害及先天异常,ELISA法和FQ-PCR法检测巨细胞病毒感染敏感、快捷、方便。     

白血病患者巨细胞病毒抗体检测及其临床意义初探

目的初步探讨白血病患者巨细胞病毒(HCMV)感染状况及HCMV抗体检测的应用价值.方法采用ELISA法对75例白血病患者和28名健康人HCMV抗体进行检测.其中有11例M3患者作化疗前后对比检测.结果白血病组HCMV-IgM抗体阳性率为2.7%,健康对照组为0;白血病组HCMV-IgG抗体水平较健康对照组显著(P＜0.01)或非常显著(P＜0.005)增高;如以HCMV-IgG抗体高于8.4IU/ml(约临界值1.1IU/ml的4倍)考虑为HCMV活动性感染,则白血病组阳性率35.7%,较健康对照组3.6%明显升高(P＜0.005),且M3化疗后阳性率有上升趋势.结论HCMV抗体检测有助于白血病患者HCMV感染的临床诊疗.     

婴儿巨细胞病毒性肝炎GM-CSF、CRP和TNFα检测的临床意义

目的 探讨粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、C反应蛋白(CRP)和肿瘤坏死因子α(TNFα)在婴儿巨细胞病毒(CMV)肝炎发病中的作用.方法 56例CMV肝炎患者和51例正常对照者,用荧光探针PCR法定量检测血液中巨细胞病毒DNA(HCMV-DNA),用双抗体夹心法ELISA检测血清中的GM-CSF和TNFα水平, 用免疫比浊法检测血液中CRP含量.结果 婴儿巨细胞病毒肝炎患者血清中GM-CSF、CRP和TNFα水平明显高于正常对照组(P＜0.01, P＜0.01,P＜0.01).结论 GM-CSF、TNFα和CRP参与婴儿巨细胞病毒肝炎的免疫病理反应和抗病毒免疫.     

尿液中的巨细胞病毒PCR快速检测方法的建立和应用

目的 探讨尿液中包涵体形成与巨细胞病毒(HCMV)DNA联合检测对HCMV感染诊断的临床应用价值。方法 采用尿液离心涂片染色后显微镜查包涵体;聚合酶链反应(PCR)检测HCMV-DNA。结果 模板含量在50～500pg之间为最佳。在36份包涵体尿中,HCMV-DNA阳性12份,阳性率为33.3％。结论 应用PCR快速检测包涵体尿液中HCMVDNA,对HCMV原发性感染的诊断和临床治疗都具有重要意义。     

组织学、血清学、尿荧光定量聚合酶链反应及尿沉渣中巨细胞包涵体检测方法在诊断巨细胞病毒所致胆汁淤积型婴儿肝炎综合征作用的研究

目的:探讨肝脏光镜组织学检查、血清学检测巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)特异性免疫球蛋白M(Immune globulin M,IgM)、尿HCMV荧光定量PCR(Fluorescence quantitative polumerase chain reaction,QPCR)检测和晨尿找包涵体方法在诊断婴儿肝炎综合征中HCMV感染的作用.方法:免疫组织化学法检测肝组织HCMV的极早期抗原(Immediately early antigen,IEA)和早期抗原(Early antigen,EA).采用Fisher精确检验比较HCMV-IEA/EA阳性组和阴性组在组织形态改变上的差异.运用ELISA方法常规检测血清HCMV抗体IgM、荧光定量PCR技术检测尿HCMV-DNA和瑞氏染色后显微镜下检测晨尿脱落细胞沉渣中包涵体,分析上述检查方法的灵敏度和特异度.结果:淤胆型婴儿肝炎综合征(Infantile hepatitissyndrome,IHS)患儿肝组织HCMV-IEA/EA阳性22/36例.HCMV-IEA/EA阳性组及阴性组比较,光镜组织形态学分析无明显特异性,晨尿脱落细胞找HCMV包涵体差异无统计学意义(P均＞0.05),而血清HCMV-IgM、荧光定量PCR技术检测尿HCMV-DNA差异有统计学意义(P均＜0.01).血清HCMV-lgM、荧光定量PCR技术检测尿HCMV-DNA和晨尿脱落细胞找HCMv包涵体诊断符合率分别为77.8%、69.4%和50.0%.结论:普通组织病理对淤胆型婴儿HCMv肝炎的诊断缺乏诊断特异性,血清HCMv-IgM检测仍不失为简单易行的实验室诊断方法.     

重组PP150抗原用于胶体金免疫斑点技术检测抗HCMV-IgM

目的: 探索应用重组人巨细胞病毒(HCMV)PP150抗原用于免疫滴金技术检测血清中抗HCMV-IgM的诊断价值. 方法: PCR扩增HCMV pp150抗原决定簇(840～1048aa)编码基因片段,插入原核表探索应用重组人巨细胞病毒(HCMV)PP150抗原用于胶体金免疫斑点技术(CGIDA)检测血清中抗HCMV-IgM的诊断价值. 达载体pMAl-p2,转化宿主菌E.coli,诱导表达及纯化. 重组抗原CGIDA与酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对比检测. 结果: 重组抗原CGIDA与ELISA试剂盒比较,符合率达96.0%;CGIDA检测HCMV-IgM的敏感度为74.2%,特异性为100%. 结论: 重组抗原pp150用于 CGIDA对HCMV的早期诊断,具有较好应用价值.     

不同标本巨细胞病毒DNA检测在小儿巨细胞感染中的应用

目的不同标本血液、尿液、母乳HCMV-DNA检出率比较,探讨荧光定量PCR法与ELISA法对HCMV感染的诊断价值。方法 378例疑似HCMV感染婴儿,为金乡县人民医院2014年7月至2015年6月新生儿科及儿科住院患儿,根据年龄分为两组:新生儿组(0-28天)116例,婴儿组(29天~12月)262例;其中男230例,女148例。选择未感染HCMV病毒的新生儿血清标本100例作为正常对照组。分别收集血液、尿液及母乳。分别应用荧光定量聚合酶链式反应法(FQ-PCR)检测DNA,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)比较,并进行统计学处理。结果不同标本血液、尿液、母乳HCMV-DNA检出率比较,新生儿组母乳检出率最高,血液次之尿液最低;婴儿组尿液检出率最高。荧光定量PCR法检测尿液DNA含量较酶联免疫法检测血清Ig M抗体阳性率高,两者比较有统计学意义(P0.01)。结论血液检测是有创检查,尤其是新生儿采血又很困难,通过本试验得出可以用尿液HCMV-DNA检测代替巨细胞病毒的初筛;荧光定量PCR法阳性检出率高于酶联免疫法检测血清Ig M抗体,两者比较有统计学意义,表明荧光定量PCR法在临床上对巨细胞病毒的诊断更有优势和价值。