p^53,bcl—2及bax基因在非何杰金氏恶性淋巴瘤中的表达？…

目的 探讨凋亡调控基因ｐ５３、ｂｃｌ－２和ｂａｘ的蛋白表达及其与非何杰金氏恶性淋巴瘤（ＮＨＬ）恶性程度之间的关系。方法 运用免疫组化方法检测了６２例ＮＨＬ的凋亡调控基因ｐ５３、ｂｃｌ－２和ｂａｘ的蛋白表达状态。结果 ｐ５３和Ｂｃｌ－２蛋白的表达率,表达强度及阳性细胞密度均随ＮＩＬ恶性程度的发展而逐渐增高,低度恶性组明显低于中度及高度恶性组（Ｐ〈０．０１）,而中度及高度恶性组之间则无显著差异（Ｐ〉０     

bcl-2,bax和p53在小细胞肺癌中的表达及对细胞凋亡的影响

目的探讨p53基因在小细胞肺癌组织中的表达及其与bcl-2,bax蛋白表达的相互关系及临床意义。方法选择华东医院病历资料完整的小细胞肺癌的患者50例,正常肺组织16例,用免疫组化SP法检测bcl-2,bax及p53蛋白的表达。结果 p53的表达与bcl-2的表达呈正相关(r=0.213,P<0.05)。p53阳性表达与bax表达无显著相关性(P>0.05)。p53阳性表达在高分化肺癌组织阳性率为17.6%,中分化组织为90.9%,低分化组织为72.7%,三者差异显著(P<0.05)。p53阳性表达在TNM分期中,Ⅰ期、Ⅱ期阳性率27.3%明显低于Ⅲ期、Ⅳ期阳性率89.3%(P<0.05)。结论p53基因的阳性表达对小细胞肺癌的恶性程度和不良预后有明显的临床意义,p53基因与bcl-2通过作用于细胞凋亡的不同阶段,或是bcl-2参与到p53诱导的线粒体介导的细胞凋亡信号通路上,从而在促进肺癌的发生、发展中共同促进,协同作用。     

低氧训练对大鼠肝组织bax、bcl-2与HIF-1α的影响

目的:探讨"高住低练"肝细胞凋亡调控基因,凋亡调控基因与HIF-1α之间关系。方法:健康成年雄性SD大鼠60只,随机分为6组。低氧暴露组(HE)和高住低练组(Hilo)每天低氧暴露(氧浓度12.6%,相当于海拔4000m)8h和12h,5d/w,共4w;常氧运动组和高住低练组每天均以25m/min的速度训练1h,5d/w,共4w。采用免疫组织化学方法和计算机显微图像分析系统分析bax、bcl-2和HIF-1α阳性表达、阳性物质的定位及定量。结果:(1)Hilo组的bax蛋白表达与HE组和T组相比显著增加(P<0.05),随着低氧暴露时间的延长,呈增长趋势;TUNEL与bax呈正相关(r=0.693,P<0.01);(2)HE组bcl-2蛋白表达显著高于C组,12hHE组的bcl-2蛋白表达比8hHE组显著下降(P<0.05);12Hilo组bcl-2蛋白表达比8Hilo组显著下降,但明显高于C组(P<0.05);(3)肝组织bax/bcl-2值显示,C组与12hHE组和12Hilo组相比具有显著性意义P<0.05);T组与Hilo组相比具有非常显著性意义(P<0.01);(4)HIF-1α与bax呈高度正相关(r=0.958,P<0.01)。结论:bax、bcl-2与HIF-1α基因参与调控肝细胞的凋亡;HIF-1α可能调控bax和bcl-2,并与bax呈高度正相关,调控bax高表达而促进肝细胞凋亡。     

硒对镉转化人支气管上皮细胞系16HBE凋亡和癌基因表达的影响

目的研究在体外染毒条件下硒对镉转化人支气管上皮细胞系16HBE凋亡和癌基因表达的影响。方法用0.625、1.25、2.5和5.0μmol/L亚硒酸钠染毒镉转化16HBE细胞24h,用流式细胞术检测凋亡,用RT-PCR检测p53,bcl-2和bax表达。结果 0.625、1.25、2.5和5.0μmol/L亚硒酸钠染毒镉转化16HBE细胞后,随硒剂量升高细胞凋亡率增高,相关系数r=0.987 9(P<0.01),并且在1.25、2.5和5.0μmol/L亚硒酸钠剂量组的凋亡率与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。亚硒酸钠可以抑制镉转化16HBE细胞p53和bcl-2的表达(P<0.05或P<0.01),bax表达虽有所增强但P>0.05。进行相关性分析,细胞凋亡与p53和bcl-2表达呈负相关,相关系数r分别为-0.923 6(P<0.01)和-0.862 1(P<0.05),而细胞凋亡与bax表达呈正相关,相关系数r=0.781 8(P<0.05)。p53表达和bcl-2表达呈正相关,相关系数r=0.894 1(P<0.05)。p53、bcl-2表达和bax表达之间呈显著负相关,相关系数分别为-0.822 2(P<0.05)和-0.961 3(P<0.01)。结论亚硒酸钠处理镉转化16HBE细胞,通过使p53和bcl-2表达下调、bax表达上调,诱导细胞凋亡从而起到抑制细胞恶性转化的作用。     

膀胱移行上皮细胞癌中凋亡、增殖、相关基因的研究

检测47例膀胱癌组织和8例正常膀胱组织的细胞凋亡和增殖状态,并就它们与p53,bcl-2和bax基因之间的关系进行了探讨。结果发现膀胱癌组织增殖水平和凋亡水平与正常对照组之间有非常显著的差异（P<0.001和P<0.01）。随着肿瘤分级的增加,细胞增殖水平的增幅远远大于细胞凋亡水平的增幅（P<0.001）。p53和bcl-2基因的表达分别与细胞增殖和凋亡水平明显相关。提示细胞增殖和凋亡均参与膀胱癌的发生发展,p53和bcl-2基因分别与细胞增殖、凋亡水平的调控有关。     

异丙酚对谷氨酸诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的 观察异丙酚对谷氨酸诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞的凋亡和相关基因bcl-2、bax蛋白表达变化的影响。方法 取新生2～3d Wistar大鼠T12～L5脊髓背角星形胶质细胞，原代纯化培养3周。将细胞分为正常对照组（C组）、乳剂对照组（L组）、谷氨酸对照组（G组）、异丙酚对照组（P组）、谷氨酸和异丙酚合用组（GP1、GP2、GP3组）。加药后培养24h免疫细胞化学法观察bcl-2和bax蛋白平均吸光度（A）值及细胞形态学变化，流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率。结果 与C组比较，G组、GP。组细胞发生大量凋亡（均P〈0.01），bax蛋白阳性表达，bax蛋白A值升高（均P〈0.01），bcl-2蛋白阴性表达，bcl-2蛋白A值降低（均P〈0.01）。与G组比较，GP2组、GP3组凋亡降低（P〈0.05，P〈0.01），bcl-2蛋白阳性表达，bcl-2蛋白A值升高（P〈0.05，P〈0.01），bax蛋白阴性表达，bax蛋白A值降低（P〈0．05，P〈0.01）。结论 异丙酚通过增强bcl-2蛋白表达，显著抑制谷氨酸诱导的星形胶质细胞凋亡，其抑制程度与剂量有关。     

大鼠脊髓急性损伤后凋亡相关基因的表达

目的：检测大鼠脊髓损伤后凋亡相关基因的表达,以探讨神经细胞凋亡的分子机制。方法：大鼠脊髓T8-9经中度压迫损伤后,分别在30min,2、4、8、24、48和72h处死取材（n=6）,应用免疫组化及原位杂交技术对脊髓组织进行标记,以检测p53,bcl-2,bax的表达。结果：损伤4h后P53,Bax蛋白及p53mRNA大量表达,其中P53蛋白在24h达到高峰,而Bcl-2仅有少量表达,bcl-2mRNA未见表达。结论：脊髓损伤后凋亡基因（p53,bax)大量表达,并可能在神经细胞的凋亡过程中起重要作用。     

p53突变型胃癌细胞株细胞凋亡及基因调控机制的研究

目的研究顺铂作用于p53野生型AGS、p53突变型MGC-803、SGC-7901 3种胃癌细胞株后，引起细胞凋亡及p53下游基因表达的变化，探讨其发生机制。方法采用流式细胞技术(FCM)检测不同浓度顺铂（0、1、2μg/mL）作用24h后AGS、MGC-803、SGC-7901 3种胃癌细胞株，细胞周期和凋亡率的变化；RT-PCR法检测上述不同浓度顺铂分别作用于3种胃癌细胞株，p53下游基因p21、bax、puma、bcl-2、bcl-xl表达的变化。结果FCM显示，顺铂可引起3种细胞细胞周期发生改变：S+G2期比例均明显升高，同时3种细胞的凋亡率均明显增多（P<0.01）；RT-PCR结果显示，AGS细胞的p53、bax、p21表达均随顺铂剂量的增加而增加（P<0.05），puma变化不明显（P>0.05）；bcl-2、bcl-xl的表达随顺铂剂量的增加而降低(P<0.05)。MGC-803、SGC-7901细胞的bcl-2、bcl-xl表达均随顺铂剂量的增加而降低(P<0.05)，而bax、p21、puma的表达变化不明显。结论在p53突变细胞株中，DNA损伤可诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡，凋亡调控因子的表达也发生改变。其机制可能与p53突变的具体位点有关，亦可能与p53非依赖性途径的信号传递有关。     

p16和p53蛋白在儿童非霍奇金淋巴瘤的表达

目的探讨儿童非霍奇金淋巴瘤（NHL）抑癌基因p16和p53蛋白的表达及其与NHL的关系。方法用免疫组织化学S-P法检测46例儿童NHL患者和12例对照组儿童病理组织中p16和p53蛋白的表达。结果NHL患儿p16蛋白阳性表达率为32.6%,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,p53蛋白阳性表达率为19.6%,与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;p16蛋白阳性率与NHL患者的多位点淋巴结外侵犯、血清LDH增高呈负相关（P〈0.05）,与病理高度恶性、临床分期晚、B状态呈非常明显负相关（P〈0.01）;p53蛋白的表达与NHL病理分类及临床特征间均无明显相关性（P〉0.05）。结论儿童NHL患者p16、p53蛋白表达率较低,p16蛋白阴性表达与儿童NHL患者的不良预后有关。     

慢性应激对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡和bax、bcl-2表达的影响

目的：探讨慢性应激对心肌梗死模型大鼠心肌细胞凋亡及bax、bcl-2表达的影响。方法：大鼠随机分为4组（每组12只）,正常对照组（A组）,假手术组（B组）,心肌梗死模型组（C组）,心肌梗死后慢性应激组（C组）;用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测bax和bcl-2蛋白表达。结果：（1）与A、B组比较,C、D组心肌细胞凋亡指数明显增加,P〈0.01;与C组比较,D组心肌细胞凋亡指数明显增加,P〈0.01;A和B组心肌细胞凋亡指数比较无统计学差别;（2）与A、B组比较,C、D组心肌细胞bax和bcl-2蛋白表达均明显增加,P〈0.01;与C组比较,D组心肌细胞bax蛋白表达明显增加,P〈0.01,而bcl-2蛋白表达明显减少,P〈0.01。结论：慢性应激可促进心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与上调bax蛋白表达和下调bcl-2的蛋白表达有关。     

乳腺导管癌及癌前病变中端粒酶基因与p53,bcl-2的表达及相关性

目的观察端粒酶基因（hTR、hTRT）、凋亡相关基因（p53、bcl-2）在乳腺癌及癌前病变中的表达及相互关系。方法应用原住杂交方法检测端粒酶基因（hTR、hTRT）和凋亡相关基因（p53、bcl-2）mRNA在44例乳腺导管非典型增生组织中的表达，应用免疫组化方法检测p53基因蛋白在上述病例中的表达，并与6例乳腺良性乳腺增生及26例乳腺癌病例进行了比较。结果端粒酶基因（hTR、hTRTmRNA）在乳腺导管重度非典型增生组织中表达增强（60．90,6，52．1％），其表达与在轻、中度非典型增生中（分别为22．2％，11．1％和33．3％。25．0%）和乳腺癌组织中（88．5％，80．896）的表达差异显著（P〈0．05）．p53mRNA在乳腺导管非典型增生组织中的表达随着异型性的增加而下降，而p53基因蛋白则相应增加。Bcl-2在乳腺导管非典型增生组织中呈中度表达，其中以在重度中表达明显。结论端粒酶基因hTR、hTRT的表达与乳腺非典型增生细胞的恶性转化密切相关。同时可检测到p53mRNA的表达缺失、p53蛋白突变及bcl-2mRNA的过表达，且表达水平与端粒酶活性有相关关系。     

人乳腺浸润性导管癌中p53、bcl-2、bax的基因表达

目的:探讨p53、bcl-2、bax在乳腺癌发生发展中的作用。方法:采用免疫组织化学两步法对50例人乳腺浸润性导管癌组织中的p53、bcl-2、bax蛋白进行组化染色。结果:50例人乳腺浸润性导管癌中,p53阳性表达44例,其阳性表达率为88%;bcl-2阳性表达44例,其阳性表达率为88%;bax阳性表达10例,其阳性表达率为10%。p53与bax、bcl-2与bax在人乳腺浸润性导管癌组织中的表达存在显著性差异(P<0.02);p53与bcl-2在人乳腺浸润性导管癌组织中的表达无差异(P>0.5)。结论:人乳腺浸润性导管癌的发生与癌组织中p53、bcl-2基因的高表达和bax基因的低表达密切相关。     

STAT3磷酸化对胃MALT淋巴瘤细胞凋亡的调控作用

目的　探讨STAT3磷酸化对胃MALT淋巴瘤细胞凋亡的调控作用。方法　采用SP免疫组织化学方法检测了 45例胃MALT淋巴瘤细胞及 13例滤泡型淋巴结反应性增生病 (RH)的p -STAT3、促凋亡基因 /蛋白fas和抗凋亡基因 /蛋白bcl-2的表达。结果　p -STAT3、fas及bcl-2蛋白在胃MALT淋巴瘤细胞中均呈过度表达 (阳性率分别为 64 .4%、60 .0 %和 66.7% ) ;低度恶性组的fas蛋白阳性信号强度明显低于高度恶性组 (P <0 .0 5 ) ,而bcl-2蛋白则明显高于高度恶性组 (P <0 .0 5 ) ,在低度与高度恶性组间的p -STAT3阳性表达强度无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;p -STAT3与fas蛋白在胃MALT淋巴瘤细胞中的阳性表达呈明显的负相关 (r=-0 .6791,P <0 .0 5 ) ,而与bcl -2蛋白的阳性表达则呈明显的正相关 (r=0 .72 3 1,P <0 .0 5 )。结论　STAT3活化可能通过抑制细胞凋亡导致胃MALT淋巴瘤细胞的恶性转化及高增殖性 ,并在其演进中起重要作用     

子宫肉瘤和子宫肌瘤中bcl-2和bax蛋白的表达及意义

目的：研究凋亡调节蛋白bcl-2及bax在子宫肉瘤和子宫肌瘤中的表达及意义。方法：用免疫组织化学ABC法检测34份子宫平滑肌肉瘤标本（Ⅰ期18例,Ⅱ期1例,Ⅲ期8例,Ⅳ期7例）和34份子宫平滑肌瘤以及34份正常子宫肌层标本中的bcl-2及bax蛋白的表达。结果：子宫肌瘤中bcl-2表达强于子宫肉瘤和正常子宫肌层（P<0.01）,肉瘤中的表达强于正常子宫肌层（P<0.05）。正常子宫肌层中bax的表达强于子宫肌瘤和子宫肉瘤（P<0.01）,但bax在肌瘤和肉瘤之间的表达无显著性差异（P>0.05）。Ⅰ,Ⅱ期子宫肉瘤中bcl-2和bax蛋白表达均高于Ⅲ,Ⅳ期者（P<0.01）。bcl-2表达阳性的子宫肉瘤的预后好于bcl-2表达阴性者。结论：bcl-2和bax的表达失调在子宫肌瘤和子宫肉瘤的发病机制中起一定作用。bcl-2和bax主要在子宫肉瘤发生的早期起作用,bcl-2与肉瘤预后相关。     

妊娠期肝内胆汁郁积症患者胎盘细胞凋亡及调控基因的研究

通过观察妊娠期肝内胆汁郁积症(ICP)患者胎盘细胞凋亡及其调控基因P53、bcl-2、bax在胎盘中的表达,探讨细胞凋亡基因在胎盘凋亡中的作用。方法采用光镜检查、原位末端标记法(TUNEL)和免疫组化法对32例ICP患者的胎盘组织中的P53、bcl-2、bax及凋亡指数进行检测,并以18例正常妊娠妇女的胎盘组织作为对照。结果①ICP患者胎盘发生梗死率明显高于正常妊娠组;②ICP患者胎盘细胞中细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞、蜕膜细胞及绒毛间质细胞的凋亡指数分别为:42.72±23.73;45.34±21.97;23.03±27.10;34.13±22.49,明显高于正常妊娠组的9.80±9.06;11.20±8.39;4.33±7.69;5.53±7.65,P<0.01。③调控基因P53、bcl-2、bax的表达在两组中无显著性差异。结论①ICP患者胎盘组织中梗死及细胞凋亡明显增加,提示ICP患者围生儿不良结局可能与胎盘组织凋亡水平升高有关;②ICP患者胎盘组织的细胞凋亡是非P53依赖型,并与bcl-2、bax的表达无关。     

氧化砷诱导人肝癌细胞凋亡相关基因的实验研究

目的：探讨氧化砷（As2O3)对人肝癌细胞诱导凋亡作用的分子机制。方法：以As2O3作用于体外培养的人肝癌细胞株HepG2，通过免疫组化技术对bcl-2,bax,p53,Fas及c-myc五种基因编码蛋白的表达进行检测。结果：经As2O3作用的人肝癌细胞bcl-2基因编码蛋白表达减少，bax,Fas基因编码蛋白表达增加，p53,c-myc基因编码蛋白表达改变不明显，结论：As2O3诱导肝癌细胞凋亡分子机制可能是下调bcl-2基因编码蛋白表达，增强box,Fax基因编码蛋白表达。     

bcl—2、P53和p21基因蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

目的：了解抑凋亡基因bcl-2、抑癌基因p53和癌基因p21基因蛋白在肝细胞癌（HCC）中的表达状况及意义。方法：用bcl-2、p53和p21基因蛋白抗体对55例肝细胞癌合并结节性肝硬变手术标本进行S－P免疫组化检测,分析基因蛋白表达率与病理分级和预后的关系。结果：bcl-2基因蛋白在HCC和结节性肝硬变中的表达率分别为72．7％（40／55）和36．4％（20／55）,两者存在差异（P＜0．05）;p53蛋白在HCC中表达率为54．5％（30／55）,而肝硬变组织均呈阴性表达,两者存在显著差异（P＜0．01）;p21蛋白在HCC和结节性肝硬变中的表达率分别为63．6％（35／55）和38．2％（21／55）,两者无差异（P＞0．05）;而bcl-2、p53和p21的表达率和表达强度均与HCC的病理分级无关（P＞0．05）。另外,在随访29例HCC患者中发现生存率短组（6个月至1年）的16例中,bcl-2、p53和p21的共同表达率为50％（8／16）。研究结果提示：HCC的发生、发展与bcl-2、p53和p21蛋白的异常表达或突变有关;bcl-2、p53和p21之间可能存在相互协同作用,对HCC的预后有一定的影响;bcl-2、p53和p21蛋白过度表达反应了HCC癌细胞的分化程度及增殖情况,因而可作为HCC诊断和预后的参考指标之一。     

HIF-1α在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其与肿瘤细胞凋亡和增殖的关系

目的:研究HIF-1α在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其与肿瘤细胞凋亡和增殖的关系.方法:利用免疫组织化学检测了77例胃MALT淋巴瘤bcl-2及fas蛋白的表达.结果:在NHL中,HIF-1α中呈高表达,阳性率为89.6%,高度恶性组的阳性表达强度明显高于低度恶性组(P<0.01),但B细胞型与T细胞型之间比较无明显差异(P>0.05);Caspase-3阳性表达率为(79.2%),低度恶性组的阳性信号强度明显低于高度恶性组(P<0.05);PCNA的阳性率94.8%,高度恶性组的阳性表达强度明显高于低度恶性组(P<0.01);在B细胞型和T细胞型NHL中,低度恶性和高度恶性组中HIF-1α与Caspase-3及PC-NA的阳性信号强度均呈明显的正相关关系.结论:在NHL的发生发展过程中,HIF-1α通过调控肿瘤细胞的高增殖和高凋亡发挥作用,并在其恶性转化中可能起着重要作用.因此,检测HIF-1α有可能作为判断该肿瘤的生物学行为和临床预后的指标之一.     

Survivin和p53在非霍奇金淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的研究非霍奇金淋巴瘤(NHL)Survivin、p53的表达,探讨其在NHL发生、发展中的作用及相互关系.方法应用免疫组织化学方法对54例NHL及10例反应性增生淋巴结石蜡包埋组织中Survivin、p53蛋白表达产物进行检测.结果NHL组织中Survivin及p53蛋白的阳性率为51.9%(28/54)、40.7%(22/54).随着NHL恶性程度的逐增,Survivin蛋白的表达强度及其阳性细胞密度逐渐增高,Survivin在低度恶性组NHL中的表达低于中-高度恶性组,分别为19%(4/21)、72.7%(24/33),两组之间差异显著(P＜0.001).p53-positive组Survivin表达显著高于p53-negative组,Survivin与p53表达之间显著相关(P＜0.05).结论Survivi表达异常对促进NHL恶性增殖有一定作用.在NHL发病中Survivin与p53蛋白异常表达密切相关相关.分子水平干预Survivin蛋白表达可能提高淋巴瘤放、化疗疗效.     

生长抑素对重症胰腺炎胰腺细胞凋亡的影响

目的　探讨生长抑素治疗大鼠急性坏死性胰腺炎时对胰腺细胞凋亡和调控基因bax及bcl- 2的影响。方法　以牛胆酸钠诱导SD大鼠急性坏死性胰腺炎模型 ,并应用TUNEL法染色和免疫组化SABC法检测胰腺组织中基因bax及bcl- 2蛋白表达及生长抑素治疗后对胰腺细胞凋亡及凋亡调控基因bax及bcl- 2蛋白表达的影响。结果　TUNEL法染色显示生理盐水治疗组胰腺细胞凋亡指数显著低于生长抑素治疗组 ,免疫组化SABC法检测生长抑素治疗组胰腺细胞bax染色阳性率高于生理盐水治疗组 ,但无统计学意义 ;生理盐水治疗组胰腺细胞bcl- 2染色阳性率明显高于生长抑素治疗组。结论　生长抑素治疗急性坏死性胰腺炎的机制之一可能是诱导损伤的胰腺细胞凋亡以减轻胰腺炎症反应 ,细胞凋亡机制可能与生长抑素抑制bcl- 2的表达有关而与促进bax的表达无关。