过氧化氢对原代人结肠上皮细胞谷氧还蛋白表达的影响

目的采用体外研究方法探讨过氧化氢（H2O2）对原代人结肠上皮细胞谷氧还蛋白（Grx）表达的影响。方法体外分离培养原代人结肠上皮细胞;通过相同浓度H2O2或不同浓度H2O2刺激原代人结肠上皮细胞,使细胞处于氧化应激状态,应用MTT比色法检测不同浓度的H2O2对细胞活力的影响,半定量RT—PCR检测H2O2对细胞Grx基因表达的影响。结果400μmol／L以上的H2O2降低细胞活力,300μmol／L浓度的H2O2在一定时间内随刺激时间的延长Grx基因表达相应增加（P〈0．05）,且在各时间点与对照组相比,H2O2组Grx基因表达均显著增加,在30min时表达量最多;在300μmol／L以下,随着H2O2浓度的增加,Grx基因表达水平亦相应增加（P〈0．05）,而500μmol／L浓度的H2O2组Grx基因表达与400μmol／L组相比有所下降（P〈0．05）。结论H2O2引起的氧化应激可明显上调原代人结肠上皮细胞Grx基因的表达,可能在基因水平上参与了对抗H2O2的的作用,但另一方面也赋予了细胞良好的抗凋亡能力,值得深入探讨。     

硫氧还蛋白与阿尔茨海默病的研究进展

硫氧还蛋白（Thioredoxin,Trx）是一种高度保守且广泛表达的小分子蛋白,具有维持体内细胞内外氧还原平衡、清除自由基、抑制细胞凋亡以及调节转录因子活性等功能,在细胞信号转导中也发挥重要的作用。阿尔茨海默病（Alzheimer’sdisease,AD）发病机理与体内自由基清除能力下降、神经元的丢失与凋亡有紧密的联系,近年来有关Trx与AD的发病机理的研究日渐增多。本文拟对Trx与AD的关系进行综述,理清Trx在AD中的作用,旨在为AD的治疗挖掘新途径。     

硫氧还蛋白互作蛋白在乳腺癌中的研究进展

硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)可以与硫氧还蛋白(TRX)直接结合,作为其内源性抑制蛋白,参与调节细胞内氧化应激水平。TXNIP作为一种抑癌蛋白,在人乳腺癌组织细胞中处于低表达状态,并且与细胞增殖、凋亡、患者预后等相关。本文就乳腺癌中TXNIP的结构、调节氧化应激的功能及抑癌机制做一综述,以证明TXNIP作为乳腺癌分子治疗的新靶点具有潜在价值。     

人谷氧还蛋白1基因克隆及真核表达载体的构建

目的 从ECV304细胞中克隆谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)的cDNA序列并构建真核表达载体pcD-NA3.1( )-Grxl.方法 利用Trizol一步法从ECV304细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术从中获得Grx1的cD-NA,将质粒pcDNA3.1( )进行双酶切、CIP处理并回收纯化,与纯化后的Grx1cDNA连接构成重组表达载体pcD-NA3.1( )-Grx1,转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆鉴定并进行测序分析.结果 经RT-PCR和测序鉴定,成功地克隆了人Grx1cDNA.结论 从ECV304细胞中获得Grx1的cDNA,成功构建了真核表达载体pcDNA3.1( )-Grx1,对Grx1在体外表达、进一步研究其在氧化应激中的作用及其作用机制具有重要意义.     

硫氧还蛋白1与炎性相关性疾病

硫氧还蛋白1是体内抗氧化系统最重要的成员之一,对氧化应激起着关键性作用。它通过直接抗氧化作用和由带有关键信号分子的蛋白质之间的相互作用而间接施加影响。该文综述了硫氧还蛋白1的结构、生物学功能和有关炎性机制,以及该蛋白在免疫、神经、呼吸、心血管、消化系统等炎性相关性疾病的基础研究。     

硫氧还蛋白系统与中枢神经系统疾病

有关中枢神经系统疾病发病机制的学说很多，自由基学说一直倍受关注。即如果中枢神经系统产生的自由基过多且未能及时清除，将会引起细胞结构的破坏进而功能丧失，最终导致中枢神经系统疾病的发生。广泛存在于各种组织细胞中的硫氧还蛋白(thioredox in，Trx)与疏氧还蛋白还原酶(thioredoxinreductase，TR)和NADPH一起组成     

谷氧还蛋白1对高糖诱导的血管内皮细胞凋亡保护作用的研究

目的 观察谷氧还蛋白1(glutaredoxin1,Grx1)在高糖诱导的血管内皮细胞凋亡中的保护作用.方法 在高糖环境中培养人脐静脉内皮细胞,制备人脐静脉内皮细胞损伤模型,细胞分为正常对照组、损伤组、Grx1预保护组.倒置显微镜下观察细胞形态、(MTT比色法)检测细胞活力以初步观察Grx1对细胞损伤的保护作用;利用Hoechst33258染色法荧光显微镜观察细胞凋亡的形态学变化;采用Annexin V-FITC/PI双染法,流式细胞仪检测Grx1对内皮细胞凋亡的影响.结果 光镜观察结果显示,Grx1预保护组与损伤组比较细胞状态明显改善;MTT法显示高糖环境下,Grx1可减轻高糖引起的细胞活性降低;Hoechst33258染色实验显示,Grx1可明显改善高糖所致的内皮细胞变形、皱缩等损伤表现.流式细胞术检测显示当Grx1存在时,细胞凋亡率明显下降.结论 Grx1对高糖诱导的血管内皮细胞凋亡具有明显的保护作用.     

硫氧还蛋白结合蛋白与肺部疾病的研究进展

硫氧还原蛋白相互作蛋白(TXNIP)是硫氧还蛋白(Trx)的内源性抑制剂,它通过与Trx活性部位结合而抑制其活性,破坏细胞内氧化还原平衡,促进氧化应激,最终可诱导炎症或细胞凋亡。TXNIP作为机体内主要的氧化应激相关因子,有可能成为干预治疗的靶点,在肺部疾病中发挥了一定作用,本文对TXNIP在肺部疾病中的表达与哮喘、慢性阻塞性肺疾病、急性肺损伤、肺癌的关系进行简述。     

氧化应激对血管内皮细胞Grx表达的研究

目的采用体外实验，研究人脐静脉血管内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells．HUVEC）是否受氧化应激而高表达Grx。方法体外分离培养HUVEC；用不同浓度H2O2处理HUVEC，MTT法检测HUVEC活力。RT—PCR半定量检测GrxmRNA表达水平的差异。结果成功获得体外培养的HU—VEC；300-500mol／L H2O2均在不同程度上抑制细胞增殖（P〈0.05）。RT—PCR结果表明，GrxmRNA的表达随着200umol／L H2O2作用时间的增加而增加，30min时与正常对照组差异显著（P〈0．01）；不同终浓度H2O2作用30min结果表明，300umol／L H2O2作用可使GrxmRNA的表达量最高（P〈0．01）。结论建立了分离培养HUVEC的方法；氧化应激可上调HUVEC Grx mRNA表达，且HUVEC内Grx的表达与H2O2刺激呈时间剂量依赖关系。     

硫氧还蛋白与动脉粥样硬化性血管疾病的研究进展

硫氧还蛋白(Trx)系统是体内重要的巯基氧化还原系统,能够阻止炎症反应的发生,并维持细胞氧化还原的动态平衡。硫氧还蛋白系统主要由Trx、Trx还原酶、烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸(NADPH)氧化酶以及Trx相互作用蛋白组成。Trx作为Trx系统中的组分,具有抗氧化应激和抗炎作用,作为抗炎因子Trx在动脉粥样硬化性心血管疾病中发挥了重要作用。     

线粒体硫氧还蛋白对于神经退行性病变干预机制研究进展

线粒体硫氧还蛋白(thioredoxin2,Trx2)是存在于线粒体的一种硫氧还蛋白家族的小分子蛋白质,广泛参与了细胞内抗氧化应激、核酸代谢、细胞生长与凋亡等多种生物学过程。目前研究表明,Trx2可能通过抗氧化或与其他蛋白质相互作用的方式参与多种神经退行性病变如阿尔茨海默病、帕金森病等的发生、发展过程。本文就Trx2在线粒体中的功能及线粒体互作网络参与神经退行性疾病的作用机制进行介绍。     

硫氧还蛋白及硫氧还蛋白相互作用蛋白在结肠息肉癌变中的表达及意义

【摘要】 目的 探讨硫氧还蛋白（thioredoxin,Trx）与硫氧还蛋白相互作用蛋白（thioredoxin interacting protein,TXNIP）在结肠息肉、结肠腺瘤及结肠癌中的表达,分析Trx、TXNIP在结肠息肉癌变中的作用。 方法 收集河北北方学院附属第一医院2019年1月～2019年10月就诊的结肠息肉（结肠息肉组）20例、结肠腺瘤（结肠腺瘤组）40例、结肠癌（结肠癌组）20例以及正常结肠(正常结肠组)20例,通过ELISA法检测血清Trx、TXNIP的含量,采用胰岛素还原法检测血清Trx活性,苏木精-伊红染色（HE）法观察各组织的形态学,应用免疫组织化学法检测组织中Trx、TXNIP的表达,实时荧光定量PCR检测组织中Trx mRNA与TXNIP mRNA的表达水平。 结果 与正常结肠组比较,结肠腺瘤组与结肠癌组患者血清中Trx含量和活性明显升高,结肠息肉组、结肠腺瘤组患者与结肠癌组患者血清中TXNIP含量较正常结肠组明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.05）;在结肠腺瘤组和结肠癌组组织中Trx阳性表达率明显高于正常结肠组,而TXNIP阳性表达率明显低于正常结肠组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与正常结肠组比较,结肠息肉组、结肠腺瘤组及结肠癌组组织中Trx mRNA的表达水平均明显上调,TXNIP mRNA的表达水平均明显下调,差异具有统计学意义（P＜0.05）。 结论 Trx在结肠息肉癌变中高表达,而TXNIP表达降低,表明两者都参与结肠癌前病变与癌组织的发生及发展,两者均在结肠息肉癌变过程中起着重要的作用。     

硫氧还蛋白2在老年白内障患者晶状体前囊膜中的表达及其与细胞凋亡、氧化应激的关系

目的 探讨硫氧还蛋白2（thioredoin-2,Trx-2）在老年白内障患者晶状体前囊膜中的表达及其与细胞凋亡、氧化应激的关系。 方法 选择年龄相关性白内障并行超声乳化术吸出白内障的老年患者40例40眼作为研究组,因外伤行透明晶状体取出术（非白内障）的老年患者20例20眼作为对照组。采用免疫组织化学法测定晶状体前囊膜组织中Trx-2的阳性表达情况。比较2组标本组织和研究组不同Trx-2（+）、Trx-2（-）标本组织中凋亡相关分子（P53、Bcl-2、ASK1）蛋白表达量、氧化应激指标［超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）活性及谷胱甘肽（glutathione,GSH）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）］水平。 结果 研究组标本中Trx-2表达阳性率显著低于对照组标本（P＜0.05）。研究组晶状体前囊膜标本中P53、ASK1的蛋白表达量高于对照组,Bcl-2的蛋白表达量低于对照组;标本上清液中SOD、CAT、GSH的水平低于对照组,MDA的水平高于对照组（P＜0.01）。研究组中,Trx-2（+）的晶状体前囊膜标本中P53、ASK1的蛋白表达量低于Trx-2（-）者,Bcl-2的蛋白表达量高于Trx-2（-）者;标本上清液中SOD、CAT、GSH的水平高于Trx-2（-）者,MDA的水平低于Trx-2（-）者（P＜0.05或P＜0.01）。 结论 老年白内障患者晶状体前囊膜中Trx-2表达减弱,其抗凋亡及抗氧化应激作用减弱,可能是导致疾病发生发展的重要分子机制之一。     

硫氧还蛋白在凋亡途径中的作用机制

硫氧还蛋白(Trx)是体内广泛存在的氧化还原蛋白,其家族中两种重要的硫氧还蛋白:硫氧还蛋白1(thioredoxin1,Trx1)和硫氧还蛋白2(thioredoxin2,Trx2)都含有保守的-Cys-Gly-Pro-Cys-还原序列。由于Trx具有调节细胞生长增殖和抗凋亡的作用,因此Trx在凋亡途径中的作用机制就成为了对抗肿瘤的研究热点。     

硫氧还蛋白5在精索静脉曲张大鼠睾丸中的表达及意义

目的：观察精索静脉曲张(Varicocele, VC)大鼠以及通过高位结扎精索静脉术后大鼠睾丸组织中硫氧还蛋白5 (TXNDC5)的表达水平。方法：将30只7周龄雄性SD大鼠按照随机数字表法平均分入模型组、假手术组和治疗组。模型组大鼠按照经典的Turner法建立精索静脉曲张模型;假手术组大鼠仅游离左精索静脉而不进行缩窄和结扎;治疗组大鼠在模型组造模的基础上在术后8周行左精索静脉高位结扎术。三组大鼠继续饲养4周后留取标本。对各组大鼠睾丸组织进行HE染色,观察睾丸组织病理形态;免疫组化检测TXNDC5的蛋白表达情况。结果：假手术组睾丸组织形态正常,而模型组和治疗组大鼠睾丸组织均存在不同程度的损伤,且治疗组损伤程度较低。治疗组大鼠睾丸组织内TXNDC5的蛋白表达量比模型组升高但是仍低于假手术组。结论：精索静脉曲张可以导致睾丸组织损伤,使睾丸组织TXNDC5表达量下降,而精索静脉曲张高位结扎可以一定程度扭转精索静脉曲张引起的损伤。     

硫氧还蛋白2的研究进展

硫氧还蛋白2(Trx2)是特异位于线粒体的小分子蛋白,它在抗氧化应激、阻止线粒体介导的细胞死亡、调节某些基因的表达等方面起着关键作用。最新研究表明,Trx2还可促进血管再生、减少高血压病理生理改变,抑制神经退行性变、保护脑细胞,且高表达Trx2的细胞对致癌剂有更强的抵抗力。因此,Trx2与心血管、神经系统、肿瘤等疾病的发病机制密切相关。现综述Trx2的结构、生物学功能和有关机制,以及该蛋白在相关疾病中的基础研究。     

一种新的阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因

目的 铁氧还蛋白系铁硫蛋白，在多种反应体系中起着传递电子的作用，也参与抗滴虫药物甲硝咪唑杀虫作用的激活。本研究旨在克隆和分析阴道毛滴虫铁氧还蛋白基因，以便进一步探讨其生理功能。方法 构建阴道毛滴虫cDNA表达文库，分离cDNA进行克隆、测序及序列分析。结果 在分离出的cDNA克隆中发现一个新的铁氧还蛋白基因。该基因读码框全长312bp，相应蛋白质序列具103个氨基酸；在该蛋白质前体的N端带有10个氨基酸残基的氢酶体靶片段(MLSQCSPLRF)。序列分析显示该铁氧还蛋白(TvFd2)与已报道的阴道毛滴虫铁氧还蛋白(TvFd)有高度同源性(69％)；TvFd2与铁氧还蛋白(2Fe-2S)的两大亚类(氧化酶铁氧还蛋白和光合铁氧还蛋白)均具较低的同源性；可与(2Fe-2S)结合的4个半胱氨酸排列成典型的铁氧还蛋白保守序列(-C-X5-C-X2-C-Xn-C-)。结论 分析表明TvFd2是一新的阴道毛滴虫铁氧还蛋白，其功能有待进一步研究。     

血浆谷氧还蛋白水平与新诊断2型糖尿病患者颈动脉粥样硬化的相关性研究

目的  探讨血浆谷氧还蛋白（Grx）水平与新诊断2型糖尿病（T2DM）患者颈动脉粥样硬化（CAS）的相关性。方法  选取2016年1月～2016年5月于唐山市人民医院内分泌科就诊的新诊断T2DM患者100例作为研究对象。根据颈动脉超声检查结果将其分为CAS组（CAS组,n=52例）和非CAS组（NCAS组,n =48例）。同时从该院健康体检中心选取非糖尿病健康人群55例作为正常对照组（NC组,n=55例）。记录其年龄、性别、体重指数（BMI）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）,收集其临床检验结果,包括空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1C）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、同型半胱氨酸（Hcy）及超敏C反应蛋白（hs-CRP）。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆Grx水平。结果  3组间Grx水平比较结果显示,CAS组和NCAS组均高于NC组,CAS组高于NCAS组（均P < 0.05）;在T2DM患者中,Grx与HbA1c、hs-CRP均呈正相关（均P <0.05）;在T2DM患者中,经Logistic回归分析发现,年龄（■=1.225,P =0.021）、HbA1c（■=1.754,P =0.016）、Grx（■=1.556,P =0.009）均为其CAS发生的危险因素。结论  新诊断T2DM患者血浆Grx与其CAS相关,提示Grx可能参与了CAS的发生及发展。

     

新诊断2型糖尿病患者血清硫氧还蛋白、硫氧还蛋白相互作用蛋白与颈动脉粥样硬化的相关性

目的  探讨新诊断2型糖尿病（T2DM）患者血清硫氧还蛋白（Trx）、硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）水平与颈动脉粥样硬化（CAS）的相关性。方法  选取2014年2月-2015年11月于河北省唐山市工人医院内分泌科就诊的新诊断T2DM患者160例作为病例组。根据颈动脉超声检查结果将患者分为T2DM伴CAS组（CAS组,n=65例）和T2DM不伴CAS组（NCAS组,n=95例）。同时从医院健康体检中心选取非糖尿病健康人群140例作为正常组。记录其年龄、性别、体重指数（BMI）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）,收集其临床检验结果,包括空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）、糖化血红蛋白（HbA1C）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、同型半胱氨酸（Hcy）,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清Trx、TXNIP含量,采用胰岛素还原法检测血清Trx活性。结果  与正常组比较,T2DM患者FPG、HbA1c、HOMA-IR、Trx、TXNIP水平升高,Trx活性下降（均P <0.05）;T2DM患者CAS组较NCAS组年龄较大,FPG、HbA1c、SBP、Trx、TXNIP水平较高,Trx活性下降（均P <0.05）;在T2DM患者中,Trx与HbA1c呈正相关,TXNIP与HbA1c、HOMA-IR呈正相关,Trx活性与TXNIP呈负相关（均P <0.05）;在T2DM患者中,年龄、HbA1c、Trx、TXNIP及Trx活性为合并CAS的影响因素,其中年龄（■=1.134,P =0.032）、HbA1c（■=1.275,P =0.021）、Trx（■=1.532,P =0.015）、TXNIP（■=1.731,P = 0.005）为CAS发生的危险因素,而Trx活性（■=0.507,P =0.002）为CAS发生的保护因素。结论  新诊断T2DM患者血清Trx、TXNIP、Trx活性与其CAS相关,提示Trx系统可能参与了CAS的发生及发展。