难治性颞叶癫痫患者颞叶皮层GRP78、caspase4的表达

目的观察难治性颞叶癫痫患者脑组织内质网应激相关分子GRP78、caspase4的表达,探讨内质网应激在难治性颞叶癫痫脑损伤中的作用。方法应用免疫组化、Western blot方法检测32例难治性颞叶癫痫患者手术切除的颞叶皮层脑组织GRP78、caspase4的表达,并与性别、年龄相匹配的对照组进行比较。结果与对照组相比,GRP78、caspase4在癫痫组表达明显上调(P0.05)。结论癫痫诱发了内质网应激,caspase4可能参与了癫痫后脑损伤,很可能为癫痫脑损伤的治疗提供新的靶点。     

难治性颞叶癫痫颞叶脑组织中uPAR蛋白的表达及临床意义

目的研究难治性颞叶癫痫患者脑组织中的uPAR的表达,探讨其在难治性癫痫发病中的意义。方法从第四军医大学唐都医院神经外科建立的难治性癫痫患者脑组织库中随机抽取30例难治性颞叶癫痫患者术后脑组织,用免疫组织化学、免疫印迹(Western blot)检测uPAR的蛋白表达产物,并与15例对照组进行比较。结果uPAR蛋白在难治性颞叶癫痫患者颞叶脑组织中的表达量与对照组相同部位比较明显增高。结论难治性颞叶癫痫患者颞叶脑组织中uPAR蛋白产物表达增高可能与难治性颞叶癫痫发病过程中病理生理学改变有重要关联,可能为难治性颞叶癫痫的治疗提供新的靶点。     

多药耐药相关蛋白-1在难治性颞叶癫痫患者脑组织中的表达及丙磺舒的干预作用

目的 观察难治性颞叶癫痫患者脑组织中多药耐药相关蛋白1( MRPl)及应用MRP1拮抗剂丙磺舒干预后的表达,探讨MRP1与难治性颞叶癫痫多药耐药的关系.方法 应用免疫组化检测难治性颞叶癫痫患者脑组织实验组和对照组MRP1的表达情况,同时应用免疫蛋白印记(Western blot)方法检测实验组、丙磺舒干预组和对照组MRP1的表达.结果 免疫组化结果显示MRP1在难治性颞叶癫痫患者脑组织中表达增强,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).Western blot结果显示丙磺舒干预组MRP1蛋白水平较实验组明显较少,差异有显著性(P＜0.05).结论 脑内高表达的MRP1参与难治性颞叶癫痫的耐药机制,丙磺舒可以降低脑组织内MRP1的表达.     

TNFα转导难治性人颞叶癫痫神经细胞凋亡的研究

目的 研究难治性人颞叶癫痫颞叶组织中是否存在肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor－α,TNFα）转导的神经细胞凋亡并探讨相关分子机制。 方法 免疫组化SP染色法检测难治性人颞叶癫痫组与对照组脑组织神经元、胶质细胞肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域蛋白（TNFR-assosiated death domain protein,TRADD）、凋亡信号调节激酶1（apoptosis signal-regulating kinase 1，ASK1）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶8（caspase8）的表达并分析其表达差异。透射电镜下观察颞叶癫痫灶神经元、胶质细胞超微结构改变。 结果 难治性人颞叶癫痫组神经元caspase8表达较对照组增加（P＜0.05），胶质细胞caspase8表达较对照组明显增加（P＜0.01）；两组神经元与胶质细胞TRADD、ASK1均未见明显阳性表达；透射电镜观察见癫痫组神经元具有细胞体积变小、核固缩、异染色质增多及边缘化、细胞及核膜边缘皱缩不齐、核分裂像、凋亡小体形成等凋亡特征；星形胶质细胞水肿。 结论 难治性颞叶癫痫病人颞叶组织中：神经元及胶质细胞可能存在TNFα转导的细胞凋亡。     

难治性癫痫患者颞叶新皮质中NCAM-140kDa的表达:颞叶新皮质的可塑性与难治性癫痫的关系

目的 研究难治性颞叶癫痫患者颞叶新皮质中NCAM-140kDa(神经细胞粘附分子B)的表达,探讨其在难治性癫痫形成中的意义,并初步探讨颞叶新皮质的可塑性与难治性癫痫的关系.方法按随机化原则,在我们建立的难治性癫痫患者术后脑组织库中抽取15例患者的颞叶脑组织,用免疫组织化学、免疫荧光法分别检测其NCAM-140kDa的表达,并与对照组进行比较.结果免疫组化检测到的实验组和对照组的NCAM-140kDa平均光密度值分别为:0.2290±0.0427、0.1789±0.0258,两组比较差异有显著性(P<0.05).免疫荧光检测到的实验组和对照组的NCAM荧光强度分别为28.8345±3.2635、20.4513±2.2834,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05).结论 NCAM-140kDa在难治性颞叶癫痫患者的颞叶新皮质中表达增加,提示其参与了难治性颞叶癫痫的形成及颞叶皮质神经细胞的可塑性改变与难治性癫痫的形成密切相关.     

Rnd1在难治性癫痫患者脑组织中的表达

目的观察Rnd1在难治性癫痫颞叶脑组织中的表达情况,探讨Rnd1在难治性癫痫发病的作用。方法收40例难治性癫痫患者脑组织颞叶(实验组)以及10例正常颞叶脑组织(对照组),用免疫组化、免疫荧光、Western-blot方法检测患者颞叶脑组织Rnd1的表达,并比较实验组与对照组颞叶脑组织中Rnd1的表达情况。结果免疫组化显示实验组Rnd1的平均灰度(127.62±6.23)与对照组(171.79±3.84)相比差异有统计学意义(t=29.86,p<0.01);实验组Rnd1的阳性细胞数(30.20±3.42)与对照组(11.18±0.67)相比差异有统计学意义(t=21.36,p<0.01)。免疫荧光显示Rnd1的阳性表达区域与特异性神经无性烯醇化酶(NSE)的分布基本重叠。结论 Rnd1主要表达于神经元,可能参与了癫痫的形成并在难治性癫痫形成的过程中发挥了重要作用。     

内质网应激IRE1α/XBP-1通路在多巴胺能神经元变性死亡中的作用

目的 探讨内质网应激1型跨膜蛋白激酶α (IRE1α)/X盒结合蛋白1 (XBP-1)通路在多巴胺能神经元变性死亡中的作用。方法 利用内质网应激诱导剂Thapsigargin观察小鼠原代成纤维细胞中IRE1α/XBP-1通路活性。利用IRE1 α抑制剂KIRA8探究IRE1 α/XBP-1通路在原代中脑多巴胺能神经元变性死亡中作用。结果 相比于未处理组细胞,Thapsigargin处理后原代成纤维细胞中内质网应激IRE1 α/XBP-1通路明显上调。Thapsigargin处理可显著降低原代中脑多巴胺能神经元的存活率,而KIRA8处理可显著改善Thapsigargin导致的多巴胺能神经元存活率降低。结论 内质网应激通过IRE1 α/XBP-1通路介导多巴胺能神经元的变性死亡。     

难治性颞叶癫痫患者脑组织中Vav3的表达

目的研究难治性颞叶癫痫患者脑组织中Vav3的表达,探讨其在难治性颞叶癫痫形成中的意义。方法应用免疫组织化学法检测难治性颞叶癫痫患者脑组织和正常脑组织中Vav3蛋白的表达。光学显微镜下观察Vav3蛋白表达结果,并对免疫组织化学结果进行分析。结果免疫组化检测发现Vav3蛋白在难治性颞叶癫痫患者脑组织中阳性表达率明显高于正常脑组织,两组相比差异具有统计学意义（x^2=15．841,P〈0．015。实验组患者海马组中Vav3染色评分2分和3分占总体的76．93％（10／13）,而在颞叶组中Vav3染色评分1分和2分占总体的64．71％（11／17）,可见在难治性颞叶癫痫患者海马组织较颞叶组织神经元中Vav3的表达明显增强。结论Vav3在难治性颞叶癫痫患者的海马和颞叶脑组织中表达增强,提示其有可能参与了难治性颞叶癫痫的形成。     

PTPRT在难治性癫痫患者及匹罗卡品致痫大鼠脑组织中的表达

目的 研究难治性癫痫患者及皮罗卡品致痫大鼠脑组织中PTPRT的表达,以探讨难治性癫痫可能的发病机制.方法 用免疫组织化学、免疫荧光、Western blot法检测PTPRT在难治性癫痫患者及癫痫发作后6h及1、7、14、30、60 d的匹罗卡品致痫大鼠脑组织中的表达,并分别与无癫痫发作的人以及大鼠的脑组织比较.结果 在人颞叶皮质中,PTPRT主要在对照组和病例组的神经元有表达,PTPRT在难治性癫痫患者(0.277 ±0.048)脑组织中比对照组(0.171±0.025)显著升高(t=9.586,P＜0.05).在大鼠颞叶脑组织中,对照组和实验组的PTPRT主要在神经元中表达.PTPRT在实验组颞叶中的表达与对照组相比,在癫痫发作后24 h内不断升高,7d和14 d后表达水平则下降,30 d和60 d后表达又升高(A比值:对照组0.443±0.039,6 h 0.840±0.032,24 h 1.113 ±0.064,7d 0.564±0.039,14 d 0.570±0.029,30 d 0.899±0.034,60 d 1.011±0.074,F=256.427,P＜0.05).结论 通过对PTPRT在癫痫动物模型和癫痫患者颞叶脑组织表达规律的研究,结合PTPRT的功能我们推测PTPRT可能通过突触重构以及苔藓纤维出芽参与了神经网络的重构,从而导致了难治性癫痫的发生.     

BDNF及其受体TrkB在颞叶癫痫组织中的表达及意义

目的探讨脑源性神经营养因子（BDNF）和其特异性受体TrkB的表达与颞叶癫痫（TLE）之间的关系。方法选取52例难治性TLE患者术中切除的颞叶、海马及癫痫灶组织,用免疫组化SP法对其组织中BDNF及TrkB含量进行检测,并与12例对照组进行比较研究。结果（1）在难治性TLE患者中,BDNF、TrkB在颞叶、海马及癫痫灶组织中含量较对照组明显增加（均P〈0．05）。（2）BDNF、TrkB两者的表达呈正相关（r=0．545,P〈0．01）。结论难治性TLE患者的颞叶、海马及癫痫灶组织中BDNF及TrkB含量显著增高,且两者的表达呈正相关,提示其可能对TLE的发作、持续及终止起重要作用。     

BDNF及其受体TrkB在颞叶癫组织中的表达及意义

目的探讨脑源性神经营养因子（BDNF）和其特异性受体TrkB的表达与颞叶癫痫（TLE）之间的关系。方法选取52例难治性TLE患者术中切除的颞叶、海马及癫痫灶组织,用免疫组化SP法对其组织中BDNF及TrkB含量进行检测,并与12例对照组进行比较研究。结果（1）在难治性TLE患者中,BDNF、TrkB在颞叶、海马及癫痫灶组织中含量较对照组明显增加（均P〈0．05）。（2）BDNF、TrkB两者的表达呈正相关（r=0．545,P〈0．01）。结论难治性TLE患者的颞叶、海马及癫痫灶组织中BDNF及TrkB含量显著增高,且两者的表达呈正相关,提示其可能对TLE的发作、持续及终止起重要作用。     

耐药癫痫患者和难治性癫痫大鼠脑组织与外周血GST-π蛋白表达

目的考察耐药癫痫患者和难治性癫痫大鼠脑组织与外周血谷胱甘肽S-转移酶π(glutathione S-transferaseπ,GST-π)的表达。方法临床收集2010年1月至2014年3月在我院神经外科行手术治疗的耐药性癫痫患者32例,选择同期因脑血管畸形手术切除的10例正常脑组织为对照;动物试验:收集15只对照组和20只难治性癫痫大鼠组,难治性癫痫依据锂-匹罗卡品癫痫模型制备。检测人与大鼠外周血和脑的GST-π水平表达,并进行组间比较。结果耐药癫痫患者脑组织的颞叶20例,额叶6例,枕叶6例。GST-π在耐药癫痫患者和难治性癫痫大鼠脑的颞叶、额叶、枕叶中均有表达,存在于细胞胞浆,染成浅黄色至棕黄色颗粒,与对照组比,耐药癫痫患者和难治性癫痫大鼠脑和外周血GST-π表达明显增加(P0.05)。结论 GST-π可能参与耐药癫痫的发病,检测外周血GST-π为耐药性癫痫的治疗提供参考。     

硫化氢／3-巯基丙酮酸转硫酶在癫痫患者颞叶中的表达

目的探讨硫化氢(H_2S)/3-巯基丙酮酸转硫酶(3-MST)在癫痫患者颞叶中的表达。方法难治性癫痫患者(实验组)外侧颞叶标本15例,高颅压患者(对照组)内减压切除的正常外侧颞叶脑组织标本15例。检测外侧颞叶脑组织中H_2S含量,采用免疫荧光及Western blotting技术检测3-MST表达,观察H_2S/3-MST在癫痫患者外侧颞叶及高颅压患者正常外侧颞叶脑组织中的表达变化。结果实验组外侧颞叶脑组织细胞中H_2S/3-MST表达显著高于对照组,差异均具有统计学意义(均P0.05)。结论在癫痫的病理生理过程中,H_2S/3-MST的高表达可能与其在癫痫中神经保护作用相关。     

难治性颞叶癫痫的手术治疗方式及其疗效研究

目的 探讨难治性颞叶癫痫的临床特点、术前评估方法、手术治疗方式及其疗效。方法 105例难治性颞叶癫痫患者术前行头部CT及MRI检查,同时加行双侧海马磁共振波谱分析(MRS);并均行长程视频脑电图检查。根据患者的术前临床发作特点、影像学和长程视频脑电图检查结果,在术中皮层脑电图监测下行手术治疗。术后随访患者1年以上,观察手术的疗效。结果 本组患者中,48例海马硬化患者行前颞叶切除术(包括大部分海马及杏仁核);另外57例有其他病灶的患者先行病灶切除术,复查皮层脑电图其中23例患者仍有异常放电,对这23例患者加行前颞叶切除术(包括大部分海马及杏仁核),前颞叶切除后有5例患者仍有异常放电,予以皮层热灼术。手术疗效:术后80例患者的癫痫发作完全消失,13例患者较术前明显缓解,12例患者无明显变化;总有效率为88. 6%,优良率为76. 2%。结论 颞叶癫痫的发作形式有一定的临床定位价值,如果患者的神经影像学和视频脑电图检查结果一致,则强烈建议手术治疗。手术一定要在皮层脑电图监测下进行;同时术中在切除颞叶病变后,应根据皮层脑电图监测结果加行前颞叶切除术,必要时再加行皮层热灼术,以解决双重病理现象。     

大脑后部离断术治疗难治性癫痫1例临床分析

目的介绍一种新的治疗后脑病变引起的难治性癫痫的手术方法——大脑后部离断术,并就该手术方法和适应证进行讨论。方法应用大脑后部离断术治疗1例左侧后皮层广泛病变引发的成年难治性癫痫患者。该患者左侧顶叶、枕叶、颞叶脑软化、坏死、萎缩,但中央前后回和额叶皮层结构完整,左侧运动感觉语言功能仍然存在。手术方法为彻底离断顶枕叶、颞叶。结果手术后癫痫得到有效控制,随访6个月,只有2次轻微的复杂部分性发作,Engel分级Ⅱ级,没有新的神经损害并发症发生。结论后脑离断术可以有效治疗大脑后皮层病变所致的难治性癫痫,较多脑叶切除术有手术创伤小、省时、并发症少的优点。     

肿瘤坏死因子-α转导的人难治性颞叶癫痫神经细胞凋亡的研究

目的研究人难治性颞叶癫痫(TLE)颞叶组织中是否存在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)转导的神经细胞凋亡。方法采用免疫组化SP染色法检测30例难治性TLE(TLE组)与10例脑外伤患者的正常颞叶组织(对照组)脑组织神经元、胶质细胞中肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域蛋白(TRADD)、凋亡信号调节激酶1(ASK1)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶8(caspase 8)的表达并分析其表达差异。透射电镜下观察TLE痫灶神经元、胶质细胞超微结构改变。结果TLE组神经元和胶质细胞caspase 8表达较对照组增加(分别P<0.05,P<0.01)。两组神经元与胶质细胞中均未见TRADD、ASK1明显阳性表达。透射电镜观察见TLE组神经元具有细胞体积变小、核固缩、异染色质增多及边缘化、细胞及核膜边缘皱缩不齐、核分裂像、凋亡小体形成等凋亡特征,而胶质细胞则出现水肿现象。结论人难治性TLE病颞叶组织的神经元及胶质细胞中可能存在TNF-α转导的细胞凋亡。     

影响手术治疗难治性颞叶癫痫预后的危险因素探讨

目的探讨影响手术治疗难治性颞叶癫痫预后的危险因素.方法以手术方法治疗难治性颞叶癫痫患者42例,经至少1年随访,以术后癫痫发作频率系统对疗效进行评分,分析术前发作频率,婴儿期热性惊厥、脑炎、围产期脑损伤、颅内肿瘤、颅脑外伤等可能病因,可能病因发生年龄,发病年龄,手术年龄,病程和手术疗效的关系.结果发作频率≥1次/周者较＜1次/周者疗效差,两组间差异有显著性意义.有婴儿期热性惊厥患者与无婴儿期热性惊厥患者的疗效差异有显著性意义,前者优于后者.脑炎,围产期脑损伤,颅内肿瘤,颅脑外伤等可能病因,可能病因发生年龄,发病年龄,手术年龄,病程两组间差异无显著性意义.但经多重回归分析发现发作频率高是影响手术疗效的唯一危险因素.结论发作频率高是影响手术治疗难治性颞叶癫痫预后的唯一危险因素.     

难治性颞叶癫痫患者脑组织脑源性神经营养因子表达明显高于正常对照者

脑源性神经营养因子在癫痫中的作用一直备受争议,现有的研究多为动物实验研究结果,本文采用光镜及电镜技术,观察24例难治性颞叶癫痫患者致痫灶组织病理及超微结构变化,结果显示颞叶癫痫患者致痫灶神经元变性,胶质细胞增生,细胞核空泡化,可见嗜神经细胞现象,免疫电镜及免疫组化显示难治性颞叶癫痫患者脑组织脑源性神经营养因子表达明显多于正常对照者,证实难治性癫痫患者致痫灶病理改变明显,且与脑源性神经营养因子表达变化有关。     

头颅MRI正常表现的难治性癫痫患者手术治疗探讨

对于难治性癫痫患者行头颅MR I检查时,发现颞叶内侧硬化、皮层发育不全、肿瘤或血管畸形等疾病,其往往提示癫痫手术治疗后具有较好的疗效,一般可以达到6 5%~9 0%以上的癫痫发作缓解率;故头颅MR I对发现难治性癫痫的病灶具有独特的诊断价值,尤其是颞叶癫痫。但仍有2 0%~3 0%的癫痫患者,在高分辨率的MR I检查下不能发现任何异常;本文主要就头颅MR I正常表现的难治性癫痫患者影像学认识、手术治疗的必要性及疗效等方面进行探讨。     

颅内电极植入术在癫痫外科的运用21例分析

目的 探讨颅内电极植入术在药物难治性癫痫术前痫灶定位中的作用。方法 21例药物难治性癫痫患者通过电极植入、开颅皮层电极监测下痫灶切除术、术后随诊等验证电极植入定位痫灶的准确性。前颞叶杏仁核海马切除术10例,前颞叶杏仁核海马切除术+额叶切除术3例,单侧额叶切除术6例(3例+胼胝体前部切开术),双侧额叶部分切除术1例,左额颞顶病灶切除术1例。术后随诊1~7年。结果 21例患者开颅术中皮层及深部电极提示癫痫灶与开颅术前颅内电极植入后监测所提示的痫灶位置相同。治愈率达71%,总有效率达85.8%,无手术死亡及偏瘫等严重并发症。结论 利用术前颅内电极植入定位致痫灶,可以提高药物难治性癫痫的手术治愈率和有效率。