闽产白花鬼针草对人结肠癌RKO细胞的抑制作用及诱导凋亡

目的 研究闽产白花鬼针草对人结肠癌RKO细胞增殖的影响.方法 以75%乙醇回流提取白花鬼针草,浓缩后以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得到4个不同的极性部位.以RKO细胞为对象,采用四甲基偶氮唑盐比色法对不同极性部位以及总提取物进行RKO细胞毒性活性筛选,得到最佳活性部位,以1.5%琼脂糖凝胶电泳和凝胶成像系统观察200...     

千金苇茎汤对人肺小细胞癌N446增殖与凋亡的影响

目的：研究千金苇茎汤对人肺小细胞癌N446增殖与凋亡的影响。方法：将千金苇茎汤通过化学分离法制得水提部位;分为不同药物浓度,与N446共同培养,通过细胞活力（MTT）检测;流式细胞仪细胞周期检测以及荧光显微镜线粒体膜电位检测凋亡结果。结果：不同浓度的千金苇茎汤水提部位与N446培养后,细胞活力明显降低、细胞凋亡率明显升高以及线粒体膜电位降低,并有一定的浓度依赖性。结论：千金苇茎汤水提部位可以有效抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,细胞线粒体膜电位水平降低可能参与了该过程。     

白藜芦醇通过影响线粒体膜电位诱导HepG2细胞凋亡

目的 研究白藜芦醇诱导HepG2细胞凋亡的机制,探讨白藜芦醇诱导HepG2细胞凋亡过程中线粒体膜电位的变化。方法采用MTT法测定白藜芦醇对HepG2细胞的生长抑制作用,通过荧光染色及流式细胞术检测细胞凋亡,电子显微镜观察细胞超微结构的变化,用Rhodaminel23和TMRE标记细胞线粒体膜电位（△ψ）,并分别通过流式细胞仪和共聚焦激光扫描显微镜检测。结果低浓度白藜芦醇（≤25μmoFL）对HepG2细胞的生长抑制作用不显著,而高浓度白藜芦醇（〉25μmol／L）显著地抑制HepG2细胞的生长,且呈时间和浓度的依赖性（F=18．532,P〈0．05）;流式细胞术分析显示,白藜芦醇能显著诱导HepG2细胞凋亡,且呈浓度依赖性（P〈0．05）;白藜芦醇能降低HepG2细胞线粒体膜电位。结论白藜芦醇抑制HepG2细胞增殖,并诱导细胞凋亡,白藜芦醇使HepG2细胞线粒体膜电位去极化,提示线粒体膜电位去极化在白藜芦醇诱导细胞凋亡的过程中起作用。     

氯贝丁酯影响肝线粒体功能而致肝损伤的观察

目的 研究氯贝丁酯对离体小鼠肝线粒体和体外培养的AML-12肝细胞损伤的作用机制。方法 用荧光染料JC-1对线粒体膜电位进行标记,检测膜电位变化。通过DCFDA的标记,检测对线粒体膜自由基的影响。加入环孢素（CsA）和抗氧化剂维生素C、甲磺酸去铁胺、过氧化氢酶等,观察对细胞的保护作用。结果 当氯贝丁酯浓度大于0.3mmol/L时,能迅速降低肝细胞中的线粒体以及小鼠肝脏离体线粒体的膜电位。CsA通过拮抗线粒体膜通透性,抑制膜电位下降,从而抑制细胞死亡。用氯贝丁酯处理过的肝细胞及线粒体内自由基显著增加。抗氧化剂维生素C、甲磺酸去铁胺、过氧化氢酶等能够保护细胞,抑制安妥明引起的损伤和死亡。结论 安妥明通过影响线粒体功能,从而诱发过多的自由基产生,最终导致细胞死亡。     

鸡血藤黄酮类有效部位对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡与线粒体膜电位的影响

目的探讨鸡血藤黄酮类有效部位(spatholobus suberectus column extract,SSCE)对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡及线粒体膜电位的影响。方法采用细胞增生试剂盒cell counting kit-8,观察SSCE对A549细胞增生的影响;通过Annexin V-PI双染法结合Hoechst33324染色检测SSCE对A549细胞凋亡的影响;应用Mitotracker Red及JC-1染色,检测SSCE对细胞线粒体及线粒体膜电位的影响。结果浓度高于40 mg/L的SSCE对A549细胞生长有抑制作用,且具有浓度时间依赖性。SSCE作用24 h后,A549细胞呈现典型的凋亡现象:膜磷脂酰丝氨酸外翻;细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光;线粒体由棒状变成颗粒状,并向细胞核聚集;线粒体膜电位下降。结论 SSCE可以诱导人非小细胞肺癌A549细胞发生凋亡,改变线粒体形态且降低其线粒体膜电位。     

枸杞多糖对缺氧损伤PC12细胞保护作用

目的：研究枸杞多糖对缺氧损伤大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤株PC12的保护作用。方法：采用氯化钴（CoCl2）建立PC12细胞,通过测定受损细胞给药后的活力、受损细胞LDH泄露量和受损细胞ROS生成量及线粒体膜电位,研究枸杞多糖对受损细胞的保护作用。结果：枸杞多糖能显著增加缺氧模型细胞的活力;降低细胞LDH泄漏量;增强缺氧损害细胞的SOD活性;并增加缺氧损害细胞线粒体膜电位。结论：枸杞多糖对缺氧损伤PC12细胞具有明显的保护作用。     

补骨脂素加长波紫外线光化学疗法对K562细胞凋亡及线粒体膜电位的影响

目的：研究补骨脂素（psoralen，PSO}加长波紫外线（ultraviolet—A，UVA）光化学疗法（PUVA）对人白血病细胞K562凋亡及线粒体膜电位的影响。方法：K562细胞与不同浓度PSO，接受或不接受UVA照射后共同培养，透射电子显微镜下观察细胞超微结构改变，流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化，采用多因素方差分析法进行统计学处理。结果：PUVA处理后的K562细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变。PSO、UVA照射及PUVA均可使细胞凋亡率增加，线粒体膜电位下降；PUVA的作用显著强于前两者（P〈0．01）。结论：PUVA可诱导白血病K562细胞发生凋亡，诱导凋亡途径之一为下调线粒体膜电位水平。     

亚硒酸钠对脑胶质瘤细胞生长及线粒体膜电位的影响

目的:研究亚硒酸钠对人脑胶质瘤细胞生长抑制效应及线粒体膜电位的影响。方法:使用不同浓度的亚硒酸钠(0.004、0.020、0.100及0.500μmol/L)对人脑胶质瘤细胞SHG-44进行侵染,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测亚硒酸钠对SHG-44增殖的影响,提取细胞线粒体后通过激光扫描共聚焦显微镜下观察SHG-44的荧光强度,分析SHG-44的线粒体膜电位。结果:亚硒酸钠对人脑胶质瘤细胞生长具有明显的抑制作用,且随亚硒酸钠浓度的增加抑制作用逐渐加强,0.100及0.500μmol/L染硒组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),0.004及0.020μmol/L染硒组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);0.100、0.500μmol/L染硒组线粒体膜电位显著降低(P<0.05),0.004及0.020μmol/L组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:亚硒酸钠能抑制人脑胶质瘤细胞SHG-44生长,并且降低其线粒体膜电位。     

补骨脂素加长波紫外线诱导HL-60、NB4细胞凋亡时对线粒体膜电位的影响

目的研究补骨脂素（PSO）加长波紫外线（UVA）光化学疗法（PUVA）诱导人白血病细胞HL-60、NB4凋亡时对线粒体膜电位（ΔΨm）的影响。方法细胞与不同浓度PSO,接受或不接受UVA照射后共同培养,电镜下观察细胞超微结构改变,流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化,采用多因素方差分析法进行统计学处理。结果PUVA处理后的HL-60、NB4细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变;PSO、UVA照射及PUVA均可使细胞凋亡率增加,ΔΨm下降,PUVA的作用显著强于前两者（P〈0.01）。结论PUVA可诱导人白血病细胞发生凋亡,诱导凋亡的途径之一为下调线粒体膜电位水平。     

Inhibitory Effect of Sodium Selenite on the Growth of Human Glioma Cell and Its Effect on Mitochondrial Membrane Potential

目的:研究亚硒酸钠对人脑胶质瘤细胞生长抑制效应及线粒体膜电位的影响.方法:使用不同浓度的亚硒酸钠(0.004、0.020、0.100及0.500 μmoVL)对人脑胶质瘤细胞SHG-44进行侵染,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测亚硒酸钠对SHG-44增殖的影响,提取细胞线粒体后通过激光扫描共聚焦显微镜下观察SHG-44的荧光强度,分析SHG-44的线粒体膜电位.结果:亚硒酸钠对人脑胶质瘤细胞生长具有明显的抑制作用,且随亚硒酸钠浓度的增加抑制作用逐渐加强,0.100及0.500 μmol/L染硒组与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05),0.004及0.020 μmol/L染硒组与对照组相比差异无统计学意义(P ＞0.05);0.100、0.500 μmol/L染硒组线粒体膜电位显著降低(P＜0.05),0.004及0.020 μmol/L组与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论:亚硒酸钠能抑制人脑胶质瘤细胞SHG-44生长,并且降低其线粒体膜电位.     

鬼针草提取物的体外抗肿瘤活性研究

目的研究鬼针草提取物的各萃取部位体外抗肿瘤作用。方法设鬼针草提取物各萃取部位的不同浓度组、抗癌药顺铂为阳性组和空白对照组,采用四甲基偶氮唑盐（MTT法）比色法,观察鬼针草提取物的各萃取部位对肝癌细胞HepG2和白血病细胞K562增殖的抑制作用。结果鬼针草提取物的各萃取部位在体外对肝癌细胞HepG2和白血病细胞K562有明显的抑制作用,氯仿部位的半数抑制浓度分别为9.17,12.74μg/mL。结论鬼针草提取物的各萃取部位能抑制肝癌细胞HepG2和白血病细胞K562的增殖,有较强的体外抗肿瘤活性。     

灵芝对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的影响

目的探讨灵芝对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的影响。方法采用线栓阻断大脑中动脉闭塞法（MCAO）建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。动物随机分为假手术组（Sham）、脑缺血再灌注组（IR）、灵芝组（GA）;于再灌注后3h、12h、24h、48h处死动物取材,流式细胞仪检测脑细胞凋亡率和线粒体跨膜电位。结果（1）IR组和GA组与Sham组比较,脑细胞凋亡率明显增高（P〈0．01）;再灌注3hGA组与IR组比较,脑细胞凋亡率没有明显差异（P〉0．05）;再灌注12h、24h、48hGA组与IR组比较,脑细胞凋亡率降低,有明显差异（P〈0．01）。（2）IR组脑细胞线粒体跨膜电位在再灌注3h、12h、48h较Sham组显著下降（P〈0．05）,其中3h值最低,其后逐渐升高,至48h又出现后续性降低;GA组细胞线粒体跨膜电位在再灌注3h较Sham显著下降（P〈0．01）;GA组线粒体跨膜电位在再灌注12h、48h较IR组显著升高（P〈0．05）。结论急性局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑细胞凋亡率升高,线粒体跨膜电位显著降低,灵芝具有降低凋亡发生率、改善脑组织细胞线粒体跨膜电位水平的作用。     

白花蛇舌草提取物体外抑制K562细胞增殖实验研究

目的：观察白花蛇舌草提取物（HDE）体外对人白血病细胞株K562增殖的影响,探讨HDE 用于治疗白血病的作用机制。方法：以白血病K562细胞株为靶细胞,观察不同浓度的HDE对 K562细胞增殖的影响,及胞内线粒体跨膜电位（ΔΨm）的水平;检测低浓度HDE处理前后胞内Sur? vivin、Bcl-2基因表达。结果：HDE（6.4mL/L）能明显抑制K562细胞增殖,且与浓度呈正相关（P< 0.05或P<0.01）。通过流式细胞术对碳氰化合物类亲脂性荧光染料（JC-1）检测发现,HDE能使靶 细胞内ΔΨm降低,且与HDE处理浓度呈负相关;K562细胞经低浓度HDE（3.2mL/L）处理3周后, Survivin、Bcl-2基因表达均低于未经处理细胞的2.7倍和1.6倍。结论：HDE可能通过降低线粒体 跨膜电位,抑制抗凋亡基因的表达,抑制K562白血病细胞增殖。     

钩吻素子诱导人结肠腺癌细胞凋亡的细胞生物学机制研究

目的 探讨钩吻素子体外诱导人结肠腺癌LoVo细胞凋亡的细胞生物学机制.方法 利用激光共聚焦显微技术研究钩吻素子对LoVo细胞跨膜电位、线粒体跨膜电位、细胞内游离钙浓度、活性氧、细胞间通讯的影响.结果 钩吻素子可降低LoVo细胞跨膜电位、线粒体跨膜电位,能降低细胞内游离钙浓度、加入EDTA可使游离钙升高,能增高LoVo细胞的活性氧及细胞间通讯.结论 钩吻素子体外诱导LoVo细胞凋亡的细胞生物学机制可能与上述实验结果有关.     

白藜芦醇诱导胃癌BGC⁃823细胞凋亡的分子机制

目的：探究白藜芦醇对人胃癌细胞BGC823的作用及其分子机制。方法：采用MTT法检测白藜芦醇对BGC823细胞增殖的影响;流式细胞术测定白藜芦醇对BGC823细胞凋亡、活性氧水平和线粒体膜电位的影响;Western blot法检测白藜芦醇对BGC823细胞cleaved caspase?3和cleaved caspase?9蛋白表达的影响。结果：MTT结果显示白藜芦醇对胃癌BGC823细胞具有明显的增殖抑制作用,且呈时间和剂量依赖关系;31.25~500.00 μmol/L白藜芦醇作用24 h和48 h可诱导BGC823细胞凋亡,500 μmol/L作用24 h和48 h,细胞凋亡率分别达（40.42±2.64）%和（75.02±2.36）%。流式细胞术结果显示白藜芦醇作用24 h后可使BGC823细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）增多;与对照组相比,62.50~500.00 μmol/L白藜芦醇作用细胞24 h后,细胞出现了显著的线粒体膜电位降低（P < 0.05）;Western blot结果显示白藜芦醇以浓度依赖方式上调cleaved caspase?9和cleaved caspase?3的表达。结论：白藜芦醇可以显著诱导细胞凋亡,其诱导细胞凋亡与ROS增多、线粒体膜电位降低和调节cleaved caspase?9和cleaved caspase?3的表达有关。     

草氨酸盐对胰腺癌细胞糖代谢和线粒体膜电位的影响

目的探讨草氨酸盐对胰腺癌细胞panc-1糖代谢和线粒体膜电位的影响。方法体外培养人胰腺癌细胞panc-1,分别加入不同浓度的草氨酸盐培养48 h后,行酶组织化学染色及罗丹明123染色,观察细胞糖酵解关键酶乳酸脱氢酶(LDH)活性及线粒体膜电位。结果随着草氨酸盐浓度的升高,细胞LDH染色反应颗粒逐渐减少,细胞数目减少,细胞结构明显不规则;线粒体膜电位随草氨酸盐浓度增加而逐渐降低(P<0.05)。结论草氨酸盐可以抑制人胰腺癌细胞panc-1的LDH活性,阻断其糖酵解,进而影响其能量代谢杀伤肿瘤;同时可能通过降低细胞线粒体膜电位而导致细胞凋亡。     

清开灵注射液对神经细胞凋亡和线粒体膜电位的影响

目的以缺氧、缺糖再给氧为模型,观察清开灵注射液对大鼠海马神经细胞凋亡和线粒体膜电位的影响。方法四唑盐比色实验(MTT)检测细胞线粒体活性,流式细胞术检测细胞凋亡百分率和线粒体膜电位,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率。结果缺氧、缺糖5 h再给氧3、12、24 h时,细胞凋亡率明显增高,形态学观察也发现大量神经细胞的染色质凝聚、核碎裂、凋亡小体产生;细胞线粒体膜电位和活性均显著降低,随再给氧时间的延长而进一步下降,清开灵注射液能显著降低神经细胞凋亡及坏死的百分率,提高线粒体膜电位和活性,与缺氧、缺糖再给氧组相比均有显著性差异(P<0.05~0.01)。结论清开灵注射液可抑制缺氧、缺糖再给氧损伤所致的线粒体膜电位降低,从而稳定线粒体膜电位、抑制细胞凋亡的发生,而对海马神经细胞起到保护作用。     

马齿苋总黄酮对氧化应激损伤血管内皮细胞的影响

目的 观察马齿苋总黄酮对过氧化氢诱导人血管内皮细胞氧化损伤的保护作用.方法 采用体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,实验分为5组：正常对照组、过氧化氢损伤组、马齿苋总黄酮低、中、高剂量组.MTT法测定各组细胞活力,荧光分光光度计测量各组细胞线粒体膜电位水平.结果 与正常对照组比较,过氧化氢损伤组血管内皮细胞活力、线粒体膜电位显著降低（P＜0.01）;与过氧化氢损伤组比较,马齿苋总黄酮干预组血管内皮细胞活力、线粒体膜Ratio值明显升高（P〈0.05）,且存在明显的剂量依赖关系.结论 马齿苋总黄酮对氧化应激诱导血管内皮细胞损伤具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化、维持线粒体膜电位有关.     

二氢青蒿素结合SERCA2b诱导结肠癌HCT-116细胞凋亡的机制研究

目的 探讨二氢青蒿素（DHA）与肌浆/内质网钙ATP酶（SERCA）的结合位点及其通过线粒体途径诱导人结肠癌HCT-116细胞凋亡的作用机制。方法 分别于不同浓度（0,10,20,40μmol/L） DHA环境中培养HCT-116细胞24 h后,用Western blotting检测细胞中SERCA2蛋白表达水平;CCK-8法检测细胞增殖情况;行Hoechst核染色;用JC-1探针检测细胞线粒体膜电位。通过LeDock分子对接方法,预测DHA与SERCA的结合位点。基于生物膜干涉技术,将合成的Ile315与Thr316位点突变后的SERCA2b突变蛋白和非突变蛋白分别与小分子DHA进行结合检测。结果 Western blotting与CCK-8检测结果显示,随着DHA浓度升高,SERCA2蛋白表达水平显著下降,细胞增殖显著降低,并呈剂量相关（P <0.01）。Hoechst核染色显示,DHA诱导了HCT-116细胞核变圆、固缩。JC-1探针检测结果表明,在DHA处理4 h内,线粒体膜电位逐渐降低,其后线粒体膜电位则出现明显降低。分子对接预测提示DHA与Thr316形成氢键相互作用...     

ALP小分子抑制剂对脑神经胶质瘤细胞凋亡的影响

目的:探讨ALP小分子抑制剂对脑神经胶质瘤细胞凋亡作用的影响。方法:采用JC-1染色检测线粒体膜电位的变化及流式细胞术法检测C6脑神经胶质瘤细胞凋亡率。结果:ALP小分子抑制剂对C6脑神经胶质瘤细胞具有明显的抑制作用,并在48 h作用最为明显。荧光显微镜下观察:ALP小分子抑制剂抑素(2 000μg/ml)治疗组可见典型的细胞凋亡形态学特征性改变;线粒体膜电位显著降低;细胞凋亡率明显增加分别与空白对照及ALP小分子抑制剂(1 000μl/ml)治疗组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:ALP小分子抑制剂可能通过降低细胞线粒体膜电位,诱导细胞凋亡,发挥抗肿瘤生长作用。