唑来膦酸对乏氧骨肉瘤细胞HIF-1α和VEGF表达的影响

目的研究唑来膦酸在乏氧的环境下对骨肉瘤LM8细胞株缺氧诱导因子1-α（HIF—1α）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法建立骨肉瘤细胞体外乏氧培养模型,观察唑来膦酸对骨肉瘤LM8细胞HIF-1α和VEGF表达影响。RT-PCR法检测HIF-1α和VEGF mRNA转录水平;免疫组化和ELISA法分别检测HIF-1α和VEGF蛋白表达情况。结果与常氧组相比,单纯乏氧组和唑来膦酸乏氧组的HIF-1α mRNA转录水平无明显改变（P〉0．05）;但在乏氧条件下,唑来膦酸能明显抑制HIF-1α蛋白的表达。而唑来膦酸能剂量依赖性抑制乏氧条件下VEGF mRNA及其蛋白表达水平（P〈0．05）。结论在乏氧条件下唑来膦酸能够抑制骨肉瘤LM8细胞HIF-1α蛋白的表达,从而使VEGF mRNA及其蛋白表达水平明显下降。     

缺氧诱导因子对肝癌细胞生长和侵袭能力的影响

目的检测在缺氧条件下缺氧诱导因子2α对肝癌SMMC-7721细胞生长和侵袭能力的影响。方法缺氧培养条件下脂质体Lipofectamine介导缺氧诱导因子（HIF-20α）脱氧寡核苷酸转染SMMC-7721肝癌细胞，测转染前后HIF-2α mRNA量和蛋白量检验转染效果；MTY法测定细胞生长和黏附能力变化；Transwell小室测定细胞的体外侵袭能力。结果HIF-2αmRNA和蛋白表达在反义转染组显著低于正义组、随机组与对照组（P〈0．01）。HIF-2仪表达阻断对细胞生长和活力无显著性影响（P〉0．05），但显著抑制体外粘附能力（抑制率16．99％～31．07％）和侵袭能力（抑制率17．9％）（P〈0．01）。结论HIF-2α表达阻断可抑制SMMC-7721肝癌细胞的黏附和侵袭活性。对其生长无显著影响。     

缺氧诱导因子-1α在大肠腺癌组织中的表达及与血管生成的关系

目的 探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达与大肠腺癌发生、发展的关系。方法用免疫组织化学方法检测61例大肠腺癌组织中HIF-1α的表达，并分析其与大肠腺癌生物学行为和微血管密度（MVD）的关系。结果HIF-1α在正常黏膜组织中无表达；腺瘤组织中阳性表达率为15．4％，且均为弱阳性表达，HIF—lq表达在正常黏膜与腺瘤组织中差异无统计学意义（P〉0．05）。癌组织中HIF-1α阳性表达率为65．6％，显著高于腺瘤组织（P〈0．01）。HIF-1α表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和Dukes分期密切相关（P〈0．01），而与肿瘤大小无关（P〉0．05）；HIF-1α 阳性表达程度与MVD呈正相关。给论 HIF-1α过表达可能与大肠腺癌的浸润、转移及新生血管形成密切相关。     

缺氧诱导因子HIF-1仅在妊娠高血压综合征中的作用

目的：探讨缺氧诱导因子HIF-1α在妊娠高血压综合征（PIH）中的作用。方法：采用免疫组化法检测40例PIH患者和40例正常妊娠孕妇胎盘组织中HIF-1α的表达。结果：PIH患者胎盘组织中HIF-1α高于正常妊娠对照组．中度、重度PIH组HIF-1α与正常对照组相比差异均有显著性（P〈0．01），中度组高于轻度组（P〈0．01），重度组高于中度组（P〈0．01）。结论：HIF-1α参与了PIH缺氧的病理生理改变，而且HIF-1α在PIH患者胎盘组织中的表达与PIH的严重程度有关。     

COX-2、HIF-1α在乳腺癌组织中的表达及其与微血管生成的关系

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与微血管密度（MVD）的关系。方法应用免疫组织化学方法检测50例乳腺癌、20例癌旁组织中COX-2、HIF-1α蛋白的表达情况，用CD34抗体标记乳腺癌血管内皮细胞，计算MVD。结果乳腺癌组织中COX-2的阳性表达率为66％（33／50），HIF-1α的阳性表达率为60％（30／50），显著高于癌旁组织（P〈0．01），在乳腺癌组织中COX-2、HIF-1α蛋白表达之间存在显著正相关（r=0．630，P〈0．01）。COX-2、HIF-1α表达与淋巴结转移、临床分期显著相关（P〈0．05），与患者的年龄、肿瘤大小无明显相关性（P〉0．05），COX-2、HIF-1α阳性的乳腺癌组织MVD高于阴性者，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 乳腺癌组织中存在COX-2、HIF-1α的高表达。COX-2蛋白可通过诱导HIF-1α蛋白的表达上调，增强乳腺癌细胞的侵袭力，促进乳腺癌浸润、转移。     

缺氧诱导因子-1α和葡萄糖转运蛋白1在卵巢上皮癌中的表达及其意义

目的探讨卵巢上皮性肿瘤组织中缺氧诱导因子（HIF）-1α、葡萄糖转运蛋白1（Glut1）的表达水平及两者之间的关系。方法采用免疫组织化学法检测80例卵巢上皮性肿瘤组织和正常卵巢组织中HIF—1和Glut1的表达情况。结果在卵巢上皮癌、卵巢交界性肿瘤、良性卵巢上皮性肿瘤和正常卵巢组织中HIF-1α阳性表达率分别为75．5％、50．0％、13．3％、0；Glut1阳性表达率分别为80．O％、60．0％、0、0；在卵巢上皮癌和卵巢交界性肿瘤与良性卵巢上皮性肿瘤和正常卵巢中两者表达差异有统计学意义，而且HIF-1α和Glut1与肿瘤的组织学分级和FIGO临床分期有关（P〈0．05）。HIF-1α的表达与Glut1有相关性。结论HIF-1α和Glut1对卵巢上皮癌的发生、发展具有重要作用，两者存在着一定的协同作用。     

HIF-1α、IGF-1在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、胰岛素生长因子-1（IGF-1）在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义。方法应用免疫组化法检测HIF-1α和IGF-1在65例卵巢浆液性肿瘤中的表达,并随访其中37例浆液性腺癌患者。结果HIF-1α、IGF-1阳性表达率为卵巢浆液性腺癌〉交界性〉良性浆液性肿瘤（P〈0.05）。卵巢浆液性腺癌组织中HIF-1α、IGF-1表达与病理分级、淋巴结转移相关（P〈0.01）,与临床分期无关（P〉0.05）,3年以上生存组〈3年内死亡组（P〈0.01）,两者表达呈正相关（P〈0.01）。结论HIF-1α、IGF-1与卵巢浆液性腺癌发生、发展及患者预后密切相关,两者有协同促癌作用。     

缺氧对肝癌细胞HepG2中HIF-1α和HK11表达的影响

目的探讨缺氧对肿瘤细胞周期调控的机制及乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）、己糖激酶Ⅱ（HKⅡ）表达的影响。方法人肝癌细胞HepG2分成3组：缺氧12h组、缺氧24h组及对照组。缺氧组分别在缺氧条件下（37℃，5％CO2、2．0％O2饱和度）培养12h和24h，对照组置于正常氧浓度条件下（37℃。5％CO2、21．0％O2饱和度）培养24h。流式细胞仪检测细胞周期分布，免疫组织化学S2P法检测HIF-1α表达，荧光定量PCR法检测HKⅡ mRNA表达量。结果缺氧情况下细胞周期分析处于G0／G1期细胞百分比明显增多，处于G2／M期的细胞减少，并且可见到较明显的凋亡峰的形成，缺氧12h组、缺氧24h组的CO／G1期比例显著高于对照组（p〈0．05）；HIF-1α和HKⅡ在两组缺氧组与对照组比较，其表迭量明显增加（p〈0．05），缺氧24h组与缺氧12h组比较有显著性差异（p〈0．05）。结论HIF-1α可刺激人肝癌细胞HKⅡ表达的增加，细胞阻滞在Go／G1期，以HIF-1α为药物靶点可望成为治疗肝癌基因治疗的新途径。     

EBV—miRNA—BHRF1—1对鼻咽癌细胞p53基因表达的影响

目的通过研究EBV-miRNA-BHRF1—1对鼻咽癌细胞p53基因表达的调控作用,探讨其对鼻咽癌患者基因治疗的应用价值。方法利用已构建好的EBV—miRNA-BHRF1—1表达质粒及空质粒载体,分别作为转染BHRF1—1质粒组和空质粒组,设置加入PBS转染的CNE-2细胞株作为对照组（PBS组）,转染至鼻咽癌细胞株。采用RT—PCR方法检测鼻咽癌相关基因（p53基因）的mRNA水平,Western检测p53蛋白表达水平,并利用CCK-8比色法检测鼻咽癌细胞的生长情况。结果BHRF1-1组细胞BHRF1—1表达量为（0．98±0．05）,高于空质粒组（0．66±0．10）及PBS组（0．65±0．12）（均P〈0．01）,BHRF1-1组、空质粒组、PBS组的细胞p53 mRNA表达量分别为（0．65±0．07）、（0．98±0．06）、（0．99±0．03）,BHRF1—1组均低于空质粒组和PBS组（均P〈0．01）;BHRF1—1组细胞内p53蛋白表达量低于空质粒组和PBS组。BHRF1—1组的细胞增殖抑制率（14．9％）高于空质粒组（11．2％）和PBS组（2．5％）（均P〈0．01）。结论EBV—miRNA—BHRF1—1能有效的调控声3基因mRNA水平及其蛋白翻译水平,并可能对鼻咽癌细胞株的增殖有一定的抑制作用。     

PI3K／AKT抑制剂联合放射对CNE-1细胞Ku70、Ku80表达的影响

目的：分析体外研究磷脂酰肌醇3-激酶,丝氨酸苏氨酸激酶（P13K／AKT）信号转导通路抑制剂（LY294002）联合放射对鼻咽癌细胞CNE-1KuT0、Ku80mRNA表达的影响,探讨P13K／AKT抑制剂影响放射敏感性的机制。方法：体外培养人鼻咽癌细胞CNE-1,取指数生长期细胞分为四个实验组：对照组（A）、单纯放射组（B）、单纯药物组（C）、加药联合放射组（D）;RT-PCR检测各组Ku70、Ku80mRNA的表达水平。结果：RT-PCR结果显示,放射后Ku70mRNA的表达增高,而抑制剂LY294002单纯作用CNE-1细胞后Ku70mRNA的表达水平无改变,但联合放疗后,可以降低放射后的Ku70mRNA的表达水平（P〈0．05）;本实验中Ku80mRNA的表达水平在各实验组中未观察到明显改变。结论：LY294002联合放疗可抑制Ku70表达,通过减少CNE-1细胞DNA损伤后的再修复影响放射敏感性。     

扛板归对肝纤维化大鼠肝组织缺氧诱导因子1α及血管内皮生长因子表达的影响

目的研究中药扛板归对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化大鼠肝组织缺氧诱导因子1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达的影响。方法72只SD大鼠,按随机数字表法分为六组,每组12只,用二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化模型,不同浓度扛板归干预后,肝脏常规制片并HE染色观察病理形态学改变,免疫组织化学方法检测各组大鼠肝组织HIF-1α及VEGF蛋白表达的情况。结果扛板归高剂量组中HIF-1α及VEGF蛋白表达情况从（-）～（3＋）分别为1只,9只,1只,0只和1只,8只,2只,0只、中剂量组大鼠肝组织HIF-1α及VEGF蛋白表达从（-）-（3＋）分别为1只,7只,2只,0只和1只,6只,3只,0只,与模型组比较均明显降低（P〈0．01）。结论扛板归具有显著的抗肝纤维化,其机制可能通过降低HIF—1α及VEGF蛋白的表达而调控细胞外基质的代谢有关。     

卵巢肿瘤组织中缺氧诱导因子1α与血管内皮生长因子C的相关性研究

目的探讨缺氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）和血管内皮生长因子C（VEGF—C）在卵巢癌组织中的表达及其相关性。方法2002年2月至2007年10月笔者所在医院312例卵巢上皮性肿瘤及正常卵巢的组织蜡块,应用免疫组化技术检测HIF-1α和VEGF—C的表达情况。结果卵巢癌、交界性卵巢肿瘤、良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织中HIF-1α的阳性表达率分别为78．4％、44．1％、16．2％和0。交界性卵巢肿瘤和卵巢癌组织中HIF—1α的表达高于正常卵巢和良性卵巢肿瘤,卵巢癌高于交界性肿瘤,差异均有统计学意义（P〈0．01）。卵巢癌组织中HIF-1α的表达与手术病理分期和病理类型无关（P〉0．05）,而与病理分级呈正相关（r=0．356,P〈0．01）。卵巢癌组织中HIF-1α表达与YEGF—C表达呈显著正相关（r=0．140,P=0．055）。结论卵巢癌组织过度表达HIF-1α,并通过诱导VEGF—C促进肿瘤新生血管的形成。     

肾透明细胞癌中HIF-1α和Survivin表达及其相关性研究

目的 探讨肾透明细胞癌组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和存活素（survivin）的表达、与Robson分期关系及两者的相互关系.方法 采用免疫组化法检测32例肾透明细胞癌及10例正常肾脏组织中HIF-1α和survivin的表达.结果 HIF-1α和survivin在肾透明细胞癌中的表达（分别为0.037±0.0182,0.093±0.0384）较正常组织（分别为0.008±0.0055,0.014±0.0059）明显升高（P〈0.05）;按Robson分期Ⅲ,Ⅳ期者（0.053±0.0179,0.137±0.0291）较Ⅰ,Ⅱ期者（0.029±0.0117,0.070 ±0.0154）明显增高（P〈0.05）;二者表达呈正相关（r=0.655,P〈0.05）.结论 肾透明细胞癌中HIF-1α和survivin表达增加且与分期相关;二者表达呈正相关（r=1.000.0.655,P〈0.05）.     

HIF-1α在结肠癌中的表达与临床意义

目的：探讨缺氧诱导因子-1α（ HIF-1α）结肠癌中的表达和临床意义。方法应用免疫组织化学方法，检测60例结肠癌及近端肠管距癌灶5cm、10cm的肠管组织中HIF-1α。结果结肠癌组中 HIF -1α阳性表达率为76．67％，距癌灶5cm、10cm 的肠管组织中 HIF -1α的表达率分别为21．67％、3．33％，前者与后二者相比较差异有统计学意义（P＜0．05），后二者相比较差异无统计学意义（P＞0．05）。 HIF-1α在结肠癌中不同临床分期、分化程度、淋巴结转移的阳性表达率差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论 HIF-1α的表达参与了结肠癌癌细胞分化及发展，可作为评估结肠癌发展、治疗及预后的重要参考指标。     

葡萄糖转运蛋白1、缺氧诱导因子-1α和Ki-67在肝细胞癌中的表达及其相关性研究

目的探讨葡萄糖转运蛋白1（Glutl）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和Ki-67在肝细胞癌中的表达及其相关性。方法运用组织芯片技术,通过免疫组织化学Envision法检测171例肝细胞癌组织、55例癌旁组织、22例正常肝组织中Glutl、HIF-1α和Ki-67的表达情况,并结合临床病理因素进行分析。结果Glutl、HIF-1α和Ki-67在171例肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为15．2％、19．9％和66．1％,明显高于其在癌旁肝组织（1．8％、1．8％和5．5％）和正常肝组织（均阴性）中的表达率（P〈0．05）。Glutl和HIF-1α表达与肝细胞癌分化程度和TNM分期有关（P〈0．01,P〈0．05）;Ki-67表达与肝细胞癌分化程度有关（P〈0．01）。肝细胞癌组织中Glutl与HIF-1α的表达呈正相关（r1=0．553,P〈0．05）;Glutl、HIF-1α与Ki-67均呈正相关（r2=0．560,r3=0．613,P〈0．05）。结论Glutl、HIF-1α和Ki-67在肝细胞癌的发生发展中起着不同程度的作用,联合检测Glutl、HIF-1α和Ki-67可能有助于判断肝细胞癌的恶性程度、转移潜能及预后分析。     

姜黄素抑制人肝癌细胞BEL-7402中VEGF和HIF-1α表达通过PI3K／AKT／FRAP信号传导通路

目的探讨MAPK和PI3K信号传导通路在姜黄素调节VEGF和HIF-1α表达中的作用。方法分别加入LY29400225μmol／L、50μmol／L，U012610μmol／L、20μmol／L，rapamycin 5ng／ml、10ng／ml处理人肝癌细胞BEL-7402，30min后加入姜黄素10μmol／L，对照组单独加入0、10μmol／L姜黄素，缺氧环境中培养6h后，行RT—PCR和Western Blot检测VEGF蛋白、mRNA和HIF-1α蛋白表达；分别加入不同浓度的的姜黄素以及LY294002 25 μmol／L处理人肝癌细胞BEL-7402，缺氧环境中培养6h后，行Western Blot检测磷酸化AKT和总AKT蛋白表达。结果姜黄素10μmol／L＋LY29400225μmol／L组、姜黄素10μmol／L＋LY294002 50 μmol／L组、姜黄素10μmol／L＋rapamycin 5 ng／ml组、姜黄素10μmol／L＋rapamycin 10 ng／na组HIF-1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10μmol／L组相比降低，差异有统计学意义（P〈0．01）；而姜黄素10μmol／L＋U012610μmol／L组、姜黄素10μmol／L＋U0126 20 μmol／L组HIF—1α蛋白、VEGF蛋白、mRNA表达分别与姜黄素10μmol／L组相比差异无统计学意义（P〉0.05）；不同浓度的姜黄素、LY294002 25 μmol／L处理的人肝癌细胞BEL-7402缺氧6h后磷酸化AKT蛋白表达逐渐降低，LY294002 25 μmol／L可以基本阻断磷酸化AKT蛋白的表达，而对总AKT蛋白表达无明显变化。结论姜黄素对人肝癌细胞BEL-7402中HIF-1α蛋白和VEGF的表达通过P13K／AKT／FRAP信号传导通路。     

低氧诱导因子-1α和环氧合酶-2及血管生成素-2蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床病理意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、环氧合酶-2（Cox-2）与血管生成素-2（Ang-2）蛋白表达的相关性及临床病理意义。方法免疫组化SP法检测NSCLC中HIF-1α、Cox-2、Ang-2表达情况。结果46例NSCLC组织中HIF-1α、COX-2、Ang-2的阳性表达率明显高于癌旁肺组织（P〈0．05），与患者的年龄、性别、吸烟史、分化程度及组织学类型无明显关系（P〉0．05）；HIF-1α和Ang-2表达与淋巴结转移无明显关系（P〉0．05），但COX-2的表达与淋巴结转移有关（P〈0．05）；HIF-1α的表达与COX-2、Ang-2的表达呈正相关。结论HIF-1α、Cox-2、Ang-2在NSCLC中呈过表达，HIF-1α的表达与COX-2、Ang-2的表达呈正相关，HIF-1α可能通过调控Cox-2、Ang-2的表达，与NSCLC肿瘤血管的生成及预后有关。     

同期放化疗及辅助化疗综合治疗中晚期鼻咽癌的临床研究

目的本文对100例中晚期鼻咽癌作放疗加化疗综合治疗疗效前瞻性临床研究。方法100例Ⅲ、Ⅳa期鼻咽癌（92分期）随机分为单纯放疗组50例和放疗加化疗综合治疗组50例，放疗均采用常规放疗：鼻咽原发癌灶DT68～75Gy；颈部预防照射DT50Gy，转移灶DT65～80Gy。放疗加化疗综合治疗组加顺铂（DDP）及氟脲嘧啶（5-FU）化疗4疗程：第一疗程在放疗第1周，第二疗程在放疗第4周，第三、四疗程在放疗结束后1-2月内完成。结果一、三、五年生存率：放疗加化疗组为88．0％、72．0％、42．0％，单纯放疗组为80．0％、50．2％、32．0％，两组比较有显著性差异（P〈0．05），一、三、五年局部控制率：放疗加化疗组为80．0％、68．0、40．0％，单纯放疗组为70．0％、38．0％、28．0％，两组比较有显著性差异（P〈0．05）。放疗加化疗组的远处转移率（22．0％）较单纯放疗组（56．0％）低，出现远处转移的平均时间放疗加化疗组为19．9个月，单纯放疗组为7．1个月，两组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论放疗加顺铂（DDP）及氟脲嘧啶（5-FU）化疗综合治疗中晚期鼻咽癌可以提高生存率、局控率、降低远处转移率。     

妊娠高血压疾病患者 HIF在胎盘滋养细胞中的表达与临床价值评价

目的 分析缺氧诱导因子（ HIF）在妊娠高血压疾病患者胎盘滋养细胞中的表达差异,评价其临床价值。方法 选取重庆市沙坪坝区人民医院2013年1月至2013年12月分娩孕妇170例,分为正常对照组50例,妊娠高血压疾病组85例,轻度子痫前期组22例,重度子痫前期组13例。应用免疫组织化学方法及Western blot法,比较各组胎盘组织HIF-1α的表达和HIF-1α／β-actin的相对吸光度比值;免疫组织化学方法比较各组胎盘组织中HIF-2蛋白的表达,采用RT-PCR方法检测HIF-2αmRNA水平。结果 妊娠高血压疾病组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组的HIF-1α和HIF-1α／β-actin的相对吸光度比值均显著高于正常组（ t值分别为11．776、17．216、21．168、9．979、13．171、21．406,均P＜0．01）。重度子痫前期组的HIF-1α和HIF-1α／β-actin的相对吸光度比值显著高于轻度子痫前期组和妊娠高血压疾病组（t值分别为7．372、7．449、11．623、23．338,均P＜0．01）。妊娠高血压疾病组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组的HIF-2αmRNA及蛋白均显著高于正常组（ t值分别为17．344、29．253、34．833、39．388、41．850、38．567,均P＜0．01）;重度子痫组的HIF-2αmRNA及蛋白显著高于轻度子痫前期组和妊娠高血压疾病组（ t值分别为6．557、6．348、30．263、19．314,均P＜0．01）。 HIF-1α在妊娠高血压疾病组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组中的表达率均显著高于正常组（χ^2分别为8．434、9．680、4．225,均P＜0．05）,HIF-1α在轻度子痫前期组的表达率显著高于妊娠高血压疾病组（χ^2=4．919,P＜0．05）,HIF-1α在轻度子痫前期组的表达率和重度子痫前期组无显著差异（χ^2=0．000,P＞0．05）。结论 缺氧诱导因子HIF-1α和HIF-2α在妊娠期高血压疾病中具有重要意义。