2000年冬-2006年春北京地区急性呼吸道感染患儿中呼吸道合胞病毒的监测

目的 对北京急性呼吸道感染患儿进行呼吸道合胞病毒（RSV）的监测并进行亚型分析,探讨其流行规律。方法 2000年11月-2006年3月,于首都儿科研究所附属儿童医院采集因急性呼吸道感染就诊的门诊及住院的患儿咽拭子或鼻咽分泌物标本10048份,接种于Hep-2细胞进行病毒分离,同时用免疫荧光法对鼻咽分泌物标本进行呼吸道病毒抗原的快速检测,对部分RSV阳性的标本用RT-PCR进行了亚型鉴定。结果 （1）在10048份标本中,有2286份为RSV阳性,阳性检出率为22．8％。其中病房标本7176份,RSV阳性2153份,阳性检出率为30．0％;门诊标本2872份,RSV阳性133份,阳性检出率为4．6％。（2）2000～2001年冬春、2002-2003年冬春、2004-2005年冬春RSV的阳性检出率分别为14．0％、18．2％和20．4％,而2001—2002年冬春、2003—2004年冬春和2005-2006年冬春RSV的阳性检出率分别为42．3％、41．0％和40．5％。（3）对938份RSV阳性标本的亚型监测结果：A亚型691份,占73．7％,B亚型247份,占26．3％,2000-2001、2004-2005年冬春季RSV感染以B亚型为主;而2001-2002、2002-2003、2003-2004年冬春季以A亚型为主;2005—2006年为A、B亚型同时流行。结论 RSV是冬春季婴幼儿下呼吸道感染的主要病毒病原,RSV呈现出隔年高峰的流行趋势,RSVA、B亚型是交替出现的,并且有时以相近的比例同时出现。     

急性下呼吸道感染患儿呼吸道合胞病毒及其亚型的检测及分析

目的　总结呼吸道合胞病毒(RSV)在其流行季节的亚型分布情况;探讨RSV亚型和临床疾病严重程度的相关性。方法　采用RT PCR 酶联夹心杂交法检测了2 0 0 2年1 0月至2 0 0 3年3月和2 0 0 3年1 0月至2 0 0 4年3月连续两年冬春季期间就诊于温州医学院附属儿童医院的2 0 2例急性下呼吸道感染的婴幼儿鼻咽部分泌物中RSV及其亚型;结合临床资料,对临床症状和体征进行疾病严重程度评分。结果　2 0 2例标本中RSV阳性共1 2 3例,阳性检出率为60 . 9% ;两个冬春季都以RSVA亚型为主,2 0 0 2～2 0 0 3年冬春季A亚型占RSV阳性标本中76 7% ,2 0 0 3～2 0 0 4年占82. 0 % ;通过对97例A亚型和2 6例B亚型病例临床资料的评估,发现B亚型引起的临床症状和体征更重(P <0. 0 5)。结论　RSV是引起冬春季婴幼儿急性下呼吸道感染的最主要的病原体;以A亚型为主,但B亚型引起的临床表现更严重。     

北京地区住院急性呼吸道感染患儿的病毒病原检测分析

目的了解北京地区住院急性呼吸道感染(ARI)患儿的病毒病原情况。方法取1260例年龄14岁以下住院ARI患儿的鼻咽深部分泌物,用间接免疫荧光及病毒分离法检测呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒A、B型、副流感病毒1、2、3型及腺病毒等7种常见呼吸道病毒。用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法对其中490例患儿标本进行肠道病毒(EV)检测。结果1.ARI1260例中,43.33%检测到了病毒病原,7种常见呼吸道病毒检出率36.19%,RSV阳性率最高(23.97%),以冬春季为著,88.08%的RSV阳性为3岁以下小儿。2.EV阳性率16.33%。3.19例存在2种病毒混合感染,均出现在冬春季,16例为RSV并EV感染。4.入选的510例急性呼气性喘息患儿中,3岁以下RSV阳性率最高(43.20%),3岁以上EV阳性率最高(36.11%)。结论1.RSV是北京地区冬春季婴幼儿ARI的主要病原。2.冬春季EV可并RSV等其他呼吸道病毒感染。3.RSV及EV是引起小儿急性喘息性疾病的主要病毒病原。     

急性呼吸道感染儿童两亚型呼吸道合胞病毒检测分析

目的 了解2006-2007年度重庆地区住院急性呼吸道感染(ARTIs)儿童两亚型呼吸道合胞病毒(RSV)的感染特点及流行规律.方法 收集2006年4月至2007年3月全年在重庆医科大学附属儿童医院呼吸科住院的部分ARTIs患儿的鼻咽深部吸取物390份,针对RSV G基因保守区序列设计分型引物,采用RT-PCR方法检测标本中RSV的基因组RNA.结果 390例标本中RSV阳性例数为133例(133/390,阳性率为34.10%).阳性标本中A亚型阳性129例,B亚型阳性4例.RSV阳性患儿中,84.9%为2岁以下小儿.2006年11月～2007年1月为RSV高发季节,RSV检测阳性率为55.6%～62.3%,2006年12月RSV检测阳性率最高.B亚型出现于本地区RSV感染低发季节(4、5、6月).RSV感染的临床表现主要为发热(56.4%)、咳嗽(98.5%)、喘息(63.9%)、气促(76.7%)、紫绀(84.9%).临床诊断依次为毛细支气管炎(33.1%),支气管肺炎(27.8%),间质性肺炎(18.1%),重症肺炎伴呼吸衰竭(10.5%),喘息性支气管炎(5.3%),支气管哮喘(4.5%).结论 本研究初步阐明了重庆地区两亚型RSV感染的流行病学特点,证实RSV是重庆地区冬春季婴幼儿ARI的重要病原,2006-2007年度以A亚型RSV流行为主.今后的研究将纳入门诊及社区惠儿并进行多年度连续监测以进一步阐明重庆地区两亚型RSV流行规律及病毒进化特点.     

应用实时聚合酶链反应技术检测儿童呼吸道标本中的呼吸道合胞病毒

目的建立实时聚合酶链式反应（PCR）技术检测儿科呼吸道标本中呼吸道合胞病毒（RSV）的方法.方法（1）根据RSV N基因序列设计合成分别用于扩增RSV A亚型和B亚型的TaqMan探针和引物,建立实时PCR方法,进行灵敏度和特异性检测.（2）采用实时PCR检测61例RSV检测阳性的冻存标本和103例新收集的呼吸道标本,并与病毒分离、间接免疫荧光、巢式PCR结果相比较.结果（1）实时PCR对A亚型RSV检测的灵敏度为5.25 pfu,B亚型为3.75 pfu,与巢式PCR相同.（2）实时PCR检测其他呼吸道病毒阳性标本,结果均为阴性;A亚型和B亚型之间无交叉.（3）实时PCR检测其他方法检测过的RSV阳性的冻存标本61例,A亚型（30例）阳性为27例（90%）,B亚型（31）阳性为27例（87.1%）.（4）103例新鲜标本中,实时PCR检出RSV 35例（A亚型7,B亚型28）,阳性率34.0%,其中巢式PCR阳性31例,阳性率30.1%;间接免疫荧光阳性22例,阳性率21.4%;病毒分离阳性9例,阳性率8.7%.实时PCR阴性的68例,其他方法均为阴性.实时PCR与三种方法的一致性检验,一致率在74.76%～96.12%（P均＜0.01）;差异性检验结果说明,实时PCR阳性检出高于间接免疫荧光和病毒分离（P均＜0.01）,而与巢式PCR差异无统计学意义（P＞0.05）.结论实时PCR检测儿科鼻咽分泌物标本中RSV的方法,敏感性、特异性和可重复性好,可用于急性呼吸道感染患儿标本中的RSV检测.     

急性下呼吸道感染患儿病毒病原学分析

目的了解昆明地区小儿急性下呼吸道感染(ALRI)患儿病毒病原谱及病毒病原学流行特点。方法对昆明市儿童医院内科2005-10—2006-09,临床诊断为急性下呼吸道感染712例住院患儿鼻咽分泌物,应用直接免疫荧光法进行呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒(IVA、B型)、副流感病毒(PIV1、2、3型)7种病毒抗原检测,并对呼吸道病毒流行特点进行分析。结果712例ALRI患儿中检出阳性病例206例,阳性率28.93%。新生儿、婴儿占阳性病例的77.18%。阳性标本中检出RSV177株,占阳性标本的85.92%(177/206),其次为PIV2、ADV各9株分别占4.37%(9/206),检出PIV35株占2.43%(5/206)、IVA、PIV1各3株占1.46%(3/206),一年中未检出IVB病毒株。206例阳性患儿中新生儿、婴儿、幼儿RSV感染阳性率分别为27.18%、42.23%、16.51%,年龄组间RSV阳性率比较,差异存在统计学意义。婴儿组中检出混合感染阳性病例3例,其中RSV合并ADV感染2例,PIV2合并ADV感染1例。RSV高峰流行季节在每年7月至次年2月,流行季节持续近8个月,3～6月病毒感染阳性率呈下降趋势,呼吸道病毒感染流行具有明显季节性。结论RSV是昆明地区婴儿ALRI的主要病原,呼吸道病毒类型及病原流行季节存在地区差异。     

2000年秋冬至 2002年夏北京地区急性呼吸道感染病毒病原学研究

为了解北京地区婴幼儿急性呼吸道感染的病毒病原。对2000年秋冬至2002年夏收集的1402份临床标本进行了病原分析。所有标本接种Hep-2和MDCK细胞进行病毒分离；鼻咽洗液脱落细胞涂片后经间接免疫荧光检测7种呼吸道病毒。RT-PCR鉴定RSV亚型；血凝及血凝抑制试验鉴定流感病毒型别；nested-PCR检测肠道病毒。1402份标本中672份咽拭子标本取自门诊患儿，730份鼻咽洗液标本取自住院患儿，结果：共有614份标本为病毒阳性，阳性率为43.8%。病毒阳性标本中呼吸道合胞病毒（RSV）占66.1%。并以A亚型为主；RSV阳性标本中91.4%来自诊断为毛细支气管炎的住院患儿。2001-2002年冬春季RSV感染比2000-2001年同期高25.1%。流感病毒阳性标本占总阳性标本的24.4%，其中89.3%来自门诊患儿；2000-2001年以乙型流感病毒为主，2001-2002年以甲3型为主，在冬春季还可检测到腺病毒和副流感病毒，夏季检测不到以上几种呼吸道病毒，利用nested-PCR方法检测2002年夏季收集的标本，发现7月份肠道病毒感染率相当高。提示RSV是北京地区冬春季婴幼儿急性下呼吸道感染首要病毒病原。流感病毒是婴幼儿急性上呼吸道感染首要病毒病原，肠道病毒是夏季婴幼儿呼吸道感染主要病毒病原，病毒分离，免疫荧光和PCR等方法的并用提高了病毒检出率，病毒病原的诊断可为临床诊断和治疗提供可靠依据。     

小儿呼吸道合胞病毒感染流行特点分析

目的探讨小儿呼吸道合胞感染病毒感染的流行特点及影响RSV流行的气候因素。方法对2001年1月至2006年12月因下呼吸道感染在浙江大学医学院附属儿童医院住院的39597例患儿取鼻咽分泌物标本进行呼吸道合胞病毒(RSV)抗原检测。结果39597例患儿中RSV检测阳性患儿共8657例(21.86%),<1岁者6804例(30.99%),1～3岁者1576例(14.84%),～13岁者277例(3.95%),各年龄组间检出率有统计学意义(P<0.01)。男性5783例(22.76%)高于女性2873例(20.24%),有统计学意义(P<0.01)。RSV检出率与气温之间存在直线负相关,气温每升高1℃,下呼吸道感染患儿中RSV的检出率下降1.8%。冬季是RSV流行高峰,其次是春季和秋季,夏季RSV感染率最低,全年都有RSV的散发流行。结论RSV是冬春季节引起小儿下呼吸道感染的主要病毒,年龄越小RSV感染率越高,男性较女性易感RSV。气温越低,RSV的检出率越高,低气温是杭州地区RSV流行的重要因素之一。     

重庆地区急性下呼吸道感染住院患儿人偏肺病毒感染的流行病学研究

目的了解重庆地区急性下呼吸道感染(ALRTI)住院患儿人偏肺病毒(hMPV)感染的流行病学特点和临床特征。方法收集2006年4月至2008年3月重庆医科大学附属儿童医院呼吸科病房每周一、三、五因ALRTI住院患儿住院当日白天的鼻咽吸取物(NPA),采用荧光定量PCR方法检测hMPV基因组RNA,阳性标本采用传统PCR方法扩增F基因,进一步确定是否存在hMPV感染,扩增G基因用于遗传进化分析。同时采用传统PCR方法检测呼吸道合胞病毒(RSV)和冠状病毒NL-63(HCoV-NL63),直接免疫荧光法(DFA)检测流感病毒A、B亚型,副流感病毒1、2、3型和腺病毒。分析hMPV感染的流行病学特点和临床特征。结果研究期间共收集878份标本,占同期ALRTI入院病例的13.9%(878/6296例)。hMPV阳性227/878例(25.9%)。男∶女为1.9∶1。hMPV阳性227例中,6个月119例(52.4%),～2岁72例(31.7%),～6岁34例(15.0%),6岁2例(0.9%)。hMPV流行特点为全年散发,好发季节为冬春季。hMPV阳性率2006年4月至2007年3月为18.5%(72/390例),2007年4月至2008年3月为31.8%(155/488例)。227例hMPV阳性患儿临床诊断以肺炎(148例,65.2%)和毛细支气管炎(65例,28.6%)为主。hMPV可与常见呼吸道病毒协同感染,其中与RSV协同感染率最高(41.9%,95/227例)。遗传进化分析显示,研究期间重庆地区hMPVA和B基因型均流行,以A2亚型为优势株。结论 hMPV是重庆地区ALRTI住院患儿重要的呼吸道病毒病原之一,以6个月婴儿为主要感染人群。     

苏州地区住院儿童呼吸道合胞病毒流行特点分析

目的监测儿童呼吸道合胞病毒（RSV）,探讨其流行规律。方法应用直接免疫荧光法检测2007年1月-2011年12月间收集的28871份急性呼吸道感染住院患儿鼻咽分泌物标本的RSV病毒抗原;同时分析RSV阳性检出率与同期月平均气温等气象资料的相关性。结果2007-2010年苏州地区RSV感染主要集中在冬春季,而2011年从7月起即现高发趋势;2007-2008年、2008-2009年、2009-2010年、2010-2011年冬春RSV阳性检出率分别为38.57%、19.86%、29.73%、30.79%,差异有统计学意义（χ2=176.85,P<0.001）;2011年7-9月份阳性检出率分别为5.74%、21.09%和31.15%,与前4年同期的差异也有统计学意义（χ2=8.06~405.43,P均<0.05）;RSV检出率与月平均气温、月雨量、月日照时间及风速呈负相关（r=-0.799~-0.214,P均<0.05）。经多元逐步回归分析,仅气温对RSV检出率影响有统计学意义（P=0.001）。结论 RSV仍是苏州地区冬春季婴幼儿下呼吸道感染主要病毒病原,RSV检出率与该地区气候因素有关。     

Eleven consecutive years of respiratory syncytial virus outbreaks in Croatia

Background:  Respiratory syncytial virus (RSV) is the most common cause of severe lower respiratory tract infections (LRTI) in infants. The aim of the present study was to analyze the epidemiologic characteristics of RSV outbreaks in Croatian children.
Methods:  Over a period of 11 consecutive years (1994–2005), 3435 inpatients with acute respiratory infections (ARI) aged from birth to 10 years and were residing in Zagreb County were tested for infection with RSV and other respiratory viruses at the Virology Department, Croatian National Institute of Public Health. RSV was identified in nasopharyngeal secretions by isolation on cell culture and/or detection with monoclonal antibodies using a direct fluorescence assay.
Results:  RSV was the most common causative agent of ARI (42.2%; 658/1559) for the infants 0–6 months of age. It was also the etiologic agent of LRTI in 49% (495/1010) of infants of similar age. RSV was demonstrated in 56.5% (382/676) of infants with bronchiolitis, and in 36.5% (49/134) of those with pneumonia in this age group.
Conclusion:  The overall prevalence of RSV infection in Croatian children with acute respiratory illness, and its occurrence in various age groups, has remained stable over the past decade. RSV was found to be the most common cause of bronchiolitis occurring throughout childhood (52.7%; 482/913).     

Analysis of biennial outbreak pattern of respiratory syncytial virus according to subtype (A and B) in the Zagreb region

Background: The epidemic pattern of respiratory syncytial virus (RSV) in Croatia is biennial. In order to determine if the circulation of different RSV subtypes affects the outbreak cycle, the aim of the present study was to analyze the epidemic pattern of RSV in children in Croatia (Zagreb region) over a period of 3 consecutive years. Methods: The study group consisted of 696 inpatients, aged 0–5 years, who were hospitalized with acute respiratory tract infections caused by RSV, in Zagreb, in the period 1 January 2006–31 December 2008. The virus was identified in nasopharyngeal secretions using direct immunofluorescence. The virus subtype was determined on real‐time polymerase chain reaction. Results: Of 696 RSV infections identified in children, subtype A virus caused 374 infections, and subtype B, 318. Four patients had a dual RSV infection (subtypes A and B). The period of study was characterized by four epidemic waves of RSV infections: the first, smaller, in the spring of 2006; the second, larger, in December 2006/January 2007; the third in spring 2008, followed by a fourth outbreak beginning in November of 2008. The biennial virus cycles were persistent although the predominant RSV subtype in the first two epidemic waves was subtype B, and in the second two it was subtype A. Conclusion: Over a 3 year period of observation, the biennial RSV cycle in Croatia cannot be explained by a difference in the predominant circulating subtype of RSV. Other unknown factors account for the biennial cycle of RSV epidemics in Croatia.     

5150例急性下呼吸道感染儿童呼吸道病毒检测结果分析

目的 了解急性下呼吸道感染(ALRTI)住院患儿咽拭子呼吸道病毒的分布情况。方法 采用直接免疫荧光法,对该院2014 年3 月至2015 年2 月5 150 例ALRTI 住院患儿咽拭子标本进行流感病毒A 型(FA)、流感病毒B 型(FB)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)及副流感病毒1、2、3 型(PIV-1、2、3)检测,了解ALRTI 患儿中呼吸道病毒的分布情况。结果 5 150 例住院患儿的咽拭子样本中病毒检测阳性2 155 例(41.84%),其中RSV、 PIV-3 、FA 是检出率最高的前3 位病毒,分别为1 338 例(25.98%)、439 例(8.52%)、166 例(3.22%),并有29 例为2 种病毒混合感染。随年龄增加病毒检出率呈下降趋势(χ²=279.623,P<0.01)。RSV 检测阳性率自9 月开始呈增高趋势,11 月最高,达60.09%,6 月最低,仅为1.51%。PIV-3 检测阳性率5 月最高(21.38%),11 月最低(1.77%)。结论 ALRTI 患儿的病毒流行分布随年龄、季节而不同,秋冬季以RSV 流行为主,春夏季以PIV-3 流行为主。RSV 是ALRTI 住院儿童的最常见病毒。     

6岁以下儿童急性下呼吸道感染的病毒病原及临床研究

目的　了解北京地区 6岁以下儿童中急性下呼吸道感染 (ALRI)患儿的病毒感染状况 ;探讨人类偏肺病毒 (hMPV)感染在儿童ALRI中的作用及所致支气管肺炎的临床特征。方法　 (1)采集 2 0 0 1年 2月至 2 0 0 3年 3月就诊于首都儿科研究所 4 4 6例年龄 1个月至 5岁的ALRI住院患儿的鼻咽分泌物 ,同时应用间接免疫荧光 (IFA)及病毒分离方法进行人类呼吸道合胞病毒 (hRSV)、流感病毒 (甲、乙型 )、副流感病毒 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型 )及腺病毒等 7种常见呼吸道病毒的病原检测。 (2 )采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)方法对 2 0 0 2年 11月至 2 0 0 3年 3月住我院内科的ALRI患儿中经 7种呼吸道常见病毒病原检测阴性的 2 16份鼻咽洗液 ,进行了hMPV基因检测 ,并分析hMPV感染患儿的临床资料。结果　 (1) 4 4 6例患儿中 7种常见呼吸道病毒总阳性例数为 2 0 9例 (46 86 % ) ,hRSV阳性者最多为 16 3例 (36 5 5 % )。 (2 )在 2 16份上述 7种呼吸道病原检测阴性的标本中 6 9份测到hMPV阳性扩增产物 (31 9% ) ,占同期送检标本的 19 17%。结论　 (1)hRSV是北京地区冬春季节婴幼儿ALRI的主要病原。 (2 )2 0 0 2年 11月至 2 0 0 3年 3月我院ALRI住院患儿中有 19 17%与hMPV感染有关     

Clinical Manifestations of Respiratory Tract Infections due to Respiratory Syncytial Virus and Rhinoviruses in Hospitalized Children

ABSTRACT. From September 1984 to May 1986, nasopharyngeal secretions were obtained from 519 children with some form of respiratory tract infection. The nasal secretions were screened for respiratory syncytial virus (RSV), rhinoviruses, adenoviruses, parainfluenza virus types 1, 2,3, influenza virus types A and B, and enteroviruses by tissue culture virus isolation technique and/or enzyme-linked immunosorbent assay. A uniform questionnaire gave information about age, sex, individual signs and symptoms, findings of the physical examination and clinical diagnosis of the patients. RSV was detected in 119 (23%) specimens and was thus the most frequent causative agent of respiratory infections. After RSV, rhinoviruses were the most frequently recovered pathogens accounting for 60 (12%) cases of acute respiratory disease. A comparison of the individual signs and symptoms, the findings of the physical examination and the clinical diagnosis of RSV and rhinovirus infected children revealed that there was no characteristic clinical pattern associated with either of the two viral respiratory pathogens. According to our results, rhinovirus infections were a major cause of lower respiratory tract infections in hospitalized children ≤3 years old.     

苏州地区急性呼吸道感染住院患儿病毒病原学分析

目的：了解苏州地区急性呼吸道感染（ARI）住院患儿的病毒病原学情况。方法：采集1 668例7岁以下ARI住院患儿鼻咽分泌物,直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒（RSV）,流感病毒A,B型（IV A,B）,副流感病毒1,2,3型（PIV 1,2,3）及腺病毒A(ADA)等7种常见呼吸道病毒,用RT-PCR法检测人类偏肺病毒（hMPV）N基因。结果：① 1 668例患儿中,病毒检测阳性597例（35.8%）。单项病毒感染561例（33.6%）,其中7种常见呼吸道病毒检出率为23.1%,以RSV为主（17.6%）,好发于冬春季,主要见于1岁以下婴幼儿;② hMPV阳性率为10.6%,3~5月份为检出高峰期。③ 36例混合感染中,22例为RSV合并hMPV感染,主要见于1岁以下婴幼儿。结论：RSV是该地区ARI的主要病毒病原,RSV感染好发于冬春季,多见于1岁以下婴幼儿,hMPV是3~5月份ARI患儿的主要病毒病原,混合感染多见于1岁以下婴幼儿。［中国当代儿科杂志,2009,11（7）：529-531］     

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目的探讨急性下呼吸道感染住院患儿病毒病原学情况,及其与年龄、呼吸道疾病的关系。方法选择温州医学院附属育英儿童医院2003年1月～2005年1月因急性下呼吸道感染住院治疗的儿童2073例,取其鼻咽分泌物,采用直接荧光免疫法检测7项呼吸道病毒抗原,分析其结果。结果2073例患儿送检标本,阳性1006份,阳性率48.5%。阳性标本中呼吸道合胞病毒(RSV)798例(79.3%),副流感病毒Ⅲ型(PIVⅢ)106例(10.5%),腺病毒(ADV)31例(3.0%),流感病毒A型(IVA)26例(2.6%),流感病毒B型(IVB)6例(0.6%),副流感病毒Ⅰ型(PIVⅠ)15例(1.5%)、RSV和IVA混合感染18例(1.8%),RSV和PIVⅢ混合感染3例(0.3%),RSV和PIVⅠ混合感染3例(0.3%),PIVⅡ未检测到。结论温州地区急性下呼吸道感染以RSV为主要病原,婴幼儿(尤其<6个月)病毒感染率较高,好发于冬春季节,以急性毛细支气管炎的检出率最高(61.3%)。