固醇调节元件结合蛋白-1c基因54G/C多态性对高糖低脂膳食诱导的健康青年人血脂比值的影响

目的 探讨固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element-binding protein-1c,SREBP-1c)基因54G/C多态性对健康青年血脂比值的影响及在高糖低脂(high-carbohydrate/low-fat,HC/LF)膳食诱导的变化中的作用.方法 对56名健康志愿者,给予7 d平衡膳食和6 d HC/LF膳食,平衡膳食蛋白、脂肪、碳水化合物含量分别为15%,31%,54%,HC/LF膳食分别为15%,15%,70%.于第1 d,第8 d及第14 d抽取空腹12 h静脉血,测定血脂及血糖水平,计算血脂比值.分离血基因组DNA,聚合酶链反应-限制性酶切法分析SREBP-1c基因54G/C多态性.分析不同基因型间血脂比值及血糖的差异.结果 不同基因型受试者血脂比值及血糖基础值差异无统计学意义.平衡膳食后,无论是在受试人群整体还是将男女分组分析,不同基因型之间血脂比值及血糖均无统计学意义.HC/LF膳食后,女性C等位基因携带者低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比值(loW density lipoprotein cholesterol/high density lipoprotein cholesterol,LDL-C/HDL-C)较GG纯合子显著升高(P＜0.05).与HC/LF膳食前相比,在受试人群整体,总胆固醇(total cholesterol,TC)/HDL-C比值和LDL-C/HDL-C在各基因型中均显著降低(P＜0.05).男女分组分析发现,HC/LF膳食后甘油三酯triglyceride(TG)/HDL-C比值和血浆致动脉硬化指数log(TG/HDL-C)在女性GG基因型受试者较膳食前显著升高(P＜0.05);而TC/HDL-C、LDL-C/HDL-C在HC/LF膳食后显著下降(P＜0.05),且不受性别和SREBP-1c基因54G/C位点多态性影响.结论 SREBP-1c基因54G/C多态性影响HC/LF膳食诱导的健康青年女性TG/HDL-C、log(TG/HDL-C)改变.C等位基因可能是一个对防止女性HC/LF膳食诱导的甘油三酯升高的保护性因素.     

固醇调节元件结合蛋白-1c基因54G/C多态性对高糖低脂膳食诱导的健康青年人血脂比值的影响

Objective To investigate the effects of 54G/C polymorphism of sterol regulatory elementbinding protein-1c gene (SREBP-1c)on serum lipid ratios and their response to high-carbohydrate/low-fat(HC/LF) diet in healthy youth. Methods After a regular diet for 7 days of wash-out, 56 healthy youth (22.89±1.80 yrs) were given HC/LF diet for 6 days. The regular diet contained 54% carbohydrate, 15%protein, and 31% fat of the total energy. The HC/LF diet contained 70% carbohydrate, 15% protein, and 15% fat of the total energy. The serum lipids and glucose were measured on the 1st, 8th and 14th days.The ratios of TG/HDL-C, log (TG/HDL-C), TC/HDL-C, and LDL-C/HDL-C were calculated. The 54G/C polymorphism of SREBP-1c gene was analyzed by PCR-RFLP method. Results No significant difference was found in lipid ratios and glucose at baseline and after regular diet in subjects with different genotypes in either the whole studied population or in males or females only. However, after HC/LF diet, LDL-C/HDL-C was significantly lower in females carrying the C allele than those of GG homozygotes (P＜ 0.05).Compared with those before HC/LF diet, TC/HDL-C and LDL-C/HDL-C were significantly decreased in all the subjects (P＜0.05). When gender was taken into account, significant increase of TG/HDL-C and log(TG/HDL-C) was found only in females with GG genotype (P＜0.05). All the subjects experienced significant decrease of TC/HDL-C and LDL-C/HDL-C regardless of their genders and genotypes (P＜0.05). Conclusion The 54G/C polymorphism of SREBP-1c gene can influence the response of TG/HDL-C and log(TG/HDL-C) to HC/LF diet in females. The C allele may be a protective factor to prevent the increase of TG induced by HC/LF diet in females.     

固醇调节元件结合蛋白-1基因多态性与冠心病的关系

目的:探讨固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)基因多态性与冠心病(CHD)之间的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和基因测序技术对湖北汉族101例CHD患者(CHD组)和122例健康人(对照组)SREBP-1基因18号外显子54G/C(简称18c)、SREBP-1a基因18号内含子20C/G(简称18a)基因多态性进行检测分析,同时结合糖代谢水平、血脂水平来探讨二者之间的关系。结果:18c基因多态性在对照组与CHD组中的基因型频率和等位基因分布差异均有统计学意义(P<0.05);剔除CHD组中的2型糖尿病(T2DM)病例后,对照组与CHD组中的基因型频率分布差异无统计学意义(P>0.05);湖北汉族人群中不存在18a基因多态性。结论:18c基因多态性与湖北汉族人群冠脉病变的发生有关;C等位基因可能通过影响糖代谢水平而与CHD的发生间接相关。     

固醇调节元件结合蛋白1c基因多态性rs2297508、rs11868035与甘肃汉族、东乡族人群2型糖尿病的相关性

目的 探讨固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein-lc,SREBP-lc)基因多态性rs2297508、rs11868035在甘肃汉族、东乡族人群中的分布及其与2型糖尿病(type 2diabetes mellitus,T2DM)的相关性.方法 选择汉族2型糖尿病患者342例以及正常对照343人,东乡族2型糖尿病患者218例以及正常对照238人,采用聚合酶链反应-变性高效液相色谱法检测SREBP-1c基因型,采用氧化酶法或放免法测定血糖、胰岛素及血脂水平.采用卡方检验进行统计学分析.结果 SREBP-lc基因多态位点rs2297508、rs11868035在汉族和东乡族正常对照者中的基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义(P＞0.05).上述位点在汉族、东乡族人群2型糖尿病患者C等位基因和CC基因型频率均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01).在汉族对照组中,rs2297508的C等位基因携带者的低密度脂蛋白胆固醇水平明显高于GG者,其差异有统计学意义(P＜o.05).在东乡族对照组中,CC基因型的低密度脂蛋白胆固醇水平明显高于GG者,其差异有统计学意义(P＜0.05).结论 SREBP-lc基因多态性rs2297508、rs11868035在甘肃汉族和东乡族人群中均与2型糖尿病发病存在关联.C等位基因可能是罹患2型糖尿病的危险因素之一.上述多态性在汉族和东乡族人群中的分布并无差异.SREBP-le基因多态性rs2297508可能与低密度脂蛋白胆固醇升高有关.     

T0901317对apoE基因敲除小鼠肝脂质蓄积及肝固醇调节元件结合蛋白-1c表达的影响

目的本文研究肝X受体(LXR)激动剂T0901317对apoE基因敲除小鼠肝脏脂质蓄积及肝脏固醇调节元件结合蛋白1-c(SREBP-1c)表达的影响。方法52只雄性apoE基因敲除小鼠被随机分成4组:基础组(n=10)对照组(n=14)、LXR激动剂治疗组(n=14)、d.LXR激动剂预防组(n=14)。各组小鼠均被给予高脂/高胆固醇饲料喂养;基础组小鼠被赋形剂灌胃处理8周;对照组小鼠被赋形剂灌胃处理14周;LXR激动剂治疗组小鼠在前8周被赋形剂灌胃处理,后6周被T0901317灌胃处理;LXR激动剂预防组小鼠被T0901317灌胃处理14周。使用HE和油红O染色方法观察小鼠肝脏脂质蓄积情况;采用实时定量PCR和蛋白质印迹方法分别检测肝脏SREBP-1cmRNA和蛋白质的表达。结果实验结果显示LXR激动剂治疗组和预防组小鼠肝脏脂质滴较对照组明显增多,组织结构排列逐渐紊乱(P<0.05);LXR激动剂治疗组和预防组小鼠肝脏SREBP-1cmRNA和蛋白质表达上调(P<0.05)。结论LXR激动剂T0901317能增加高脂高胆固醇饲料喂养的apoE基因敲除小鼠肝脏脂质蓄积并上调SREBP-1c表达。     

固醇调节元件结合蛋白-1c基因多态性与冠状动脉粥样硬化的关系

目的:探讨固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)基因18号外显子54G/C多态性与湖北汉族人冠状动脉粥样硬化(ACD)的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法和基因测序技术,对166例ACD患者(ACD组)和122例健康人(对照组)SREBP-1c基因18号外显子54G/C位点进行分析,并测定血脂水平。结果:SREBP-1c基因18号外显子54G/C在ACD组和对照组中基因型频率分别为CC型6.63%和4.92%,GC型39.76%和28.69%,GG型53.61%和66.39%,差异无显著性意义(P>0.05);ACD组C等位基因频率高于对照组(26.51%vs19.26%,P<0.05)。不同基因型间血脂水平差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:等位基因C可能增加ACD发生的风险。     

固醇调节元件结合蛋白-2在软骨细胞退变过程中的表达及意义

目的 比较固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)在正常软骨、骨关节炎(OA)软骨中表达,探讨SREBP-2在软骨退变过程中的表达变化.方法 正常软骨、OA膝关节软骨组织行番红素O染色、Mankin评分和抗SREBP-2免疫组化染色;正常软骨细胞随机分为对照组和白细胞介素(IL)-1β刺激组,四氮唑法(WST-1)法检测其增殖活力,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测目的基因SREBP-2、SREBPs裂解激活蛋白(SCAP)、蛋白聚糖(aggrecan)和Ⅱ型胶原(collagenⅡ)mRNA表达.结果 番红素O染色显示OA软骨组织表层粗糙,层次紊乱,染色变淡.OA组Mankin评分高于正常组(P＜0.01).正常软骨抗SREBP-2免疫组化染色为阴性,而OA组为阳性.正常P2代软骨细胞collagenⅡ染色阳性、抗SREBP-2染色阴性;而经IL-1β刺激后X型胶原和SREBP-2染色阳性.WST-1检测IL-1β刺激组吸光度A值较对照组明显降低(P＜0.05).PCR结果表明,各IL-1β组SREBP-2与SCAP mRNA的表达量均高于空白对照组,且随时间延长而升高,其中24 h组为(2.115±0.671)、(1.767 ±0.711);48 h组为(2.367±0.530)、(2.910±0.398);72 h组为(3.184 ±0.224)、(2.830±0.512) (P ＜0.05),差异均有统计学意义.相反,各组中aggrecan、collagenⅡmRNA表达量随时间延长而降低,24 h组为(0.812±0.467)、(0.784±0.774);48 h组为(0.529±0.439)、(0.626±1.100);72 h组为(0.336±0.563)、(0.175±0.834) (P ＜0.05),差异均具有统计学意义.结论 IL-1β能抑制正常软骨细胞增殖和软骨细胞基质成分的表达,并诱导其出现退行性改变.在诱导退变的过程中,SREBP-2的表达与软骨关键基因的表达呈负向变化关系.     

固醇调节元件结合蛋白2在软骨细胞退变过程中的表达

背景：近期研究证实了固醇调节元件结合蛋白2基因在骨关节炎发生过程中起重要作用,但其具体发病机制尚未完全清楚。 目的：通过白细胞介素1β体外诱导关节软骨细胞退变,观察固醇调节元件结合蛋白2在软骨细胞退变过程中的表达变化。 方法：体外分离培养C57BL/6J小鼠关节软骨细胞,将第2代软骨细胞随机分为4组：对照组、白细胞介素1β 24,48,     72 h组。后3组细胞分别以10 μg/L白细胞介素1β干预细胞。 结果与结论：软骨细胞经白细胞介素1β刺激后呈肥大化表现,软骨细胞活性随白细胞介素1β刺激时间的延长而逐渐降低。与对照组相比,白细胞介素1β 24,48,72 h组软骨细胞中固醇调节元件结合蛋白2与固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白 mRNA表达水平增加,而蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mRNA表达水平降低。提示白细胞介素1β能抑制软骨细胞增殖和细胞重要基质成分表达,诱导其出现肥大化退行性改变,且在退变的过程中,固醇调节元件结合蛋白2表达逐渐上调,与软骨关键基因的表达呈负向变化关系。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

SREBP1c/cm对PERK启动子转录活性及表达的差异性调控

目的探讨转录因子固醇调节元件结合蛋白(SREBP1c)及其活性形式(SREBP1cm)对人蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)的调控作用。方法构建人PERK启动子截短体报告基因载体,与内参质粒pRL-SV40共转入人胚肾细胞HEK293检测荧光素酶活性;用pc DNA3.1(-)-SREBP1c、pc DNA3.1(-)-SREBP1cm与PERK启动子转录活性核心区域共转293T细胞,双荧光素酶报告基因分析SREBP1c及活性形式SREBP1cm对PERK启动子转录活性的调控;RT-PCR和免疫印迹法检测SREBP1c、SREBP1cm对PERK mRNA和蛋白表达的影响。结果成功构建PERK启动子截短体报告基因载体,确定了PERK启动子转录活性核心区域;双荧光素酶报告基因分析结果显示SREBP1c抑制PERK启动子的转录活性,而SREBP1cm促进PERK启动子的转录活性。SREBP1c抑制PERK mRNA和蛋白的表达(P0.05),SREBP1cm促进PERK mRNA和蛋白的表达(P0.05)。结论 SREBP1c和SREBP1cm对PERK启动子转录活性及其表达具有相反的调控作用。     

中国人内源性高甘油三酯血症患者胆固醇酯转运蛋白基因Taq IB和-629C/A多态性

目的研究胆固醇酯转运蛋白（cholesterol ester transfer protein，CETP）基因多态性是否与中国人内源性高甘油三酯血症（hypertriglyceridemia，HTG）有关联，为探讨本病的分子遗传基础提供依据。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法，对成都地区汉族214名正常人及135例HTG患者CETP基因Taq IB和-629C／A多态性位点进行分析。结果中国人CETP基因Taq IB多态位点B2等位基因频率为0．418，-629C／A多态位点A等位基因频率为0．479。HTG组和对照组Taq IB位点和-629C／A之间等位基因的频率差异无统计学意义（0．382 vs 0．418，P〉0．05；0．489 vs 0．479，P〉0．05）。两位点连锁关系分析提示其存在强的连锁不平衡（D＇=0．881）。对照组Taq IB位点B2B2基因型携带者其血清高密度脂蛋白水平较B1B1携带者高（P〈0．05），而低密度脂蛋白较B1B2者显著降低，按性别划分为亚组后，差异仅在对照组男性存在（P〈0．05）；对照组-629C／A位点CC基因型携带者其血清低密度脂蛋白水平较AC基因型者显著降低（P〈0．01），而载脂蛋白AⅡ则显著升高（P〈0．05）。两位点联合基因型的分析显示，对照组B2B2CC基因型携带者血清高密度脂蛋白较B1B1CC型者显著升高（P〈0．05），B2B2CC型者与B1B1CC型者比较，甘油三酯水平显著降低（P〈0．05）。结论中国成都地区汉族人CETP基因Taq IB多态性与血清高密度脂蛋白、低密度脂蛋白含量有一定关联，-629C／A多态性与血清低密度脂蛋白和载脂蛋白AⅡ有一定关联，但未见这些位点与内源性高甘油三酯血症有关。