微纤维蛋白-1和Ⅰ型胶原在儿童风湿性主动脉瓣病变中的表达及意义

目的检测微纤维蛋白-1(Fibrillin-1)、Ⅰ型胶原在正常主动脉瓣膜组织和风湿性心脏病(RHD)的主动脉瓣组织中的含量,探讨Fibrillin-1和Ⅰ型胶原在儿童风湿性心瓣膜病发病中的作用。方法实验组标本是18例RHD患儿的主动脉瓣膜,均由华中科技大学同济医学院同济医院提供,对照组标本为8例意外死亡、无心血管系统疾病患儿的正常主动脉瓣膜,收集标本时间为2003-01—2005-12。标本经HE染色,观察两组之间的组织学变化,经免疫组织化学SABC法检测两组主动脉瓣Fibrillin-1、Ⅰ型胶原的表达情况。结果HE染色显示实验组瓣膜结构不清,纤维组织增生,胶原纤维玻璃样变性、钙化等改变。实验组主动脉瓣的Fibrillin-1表达均明显高于正常对照组(P<0.05),Ⅰ型胶原在实验组的含量也明显高于对照组(P<0.05)。结论RHD时主动脉瓣Fibrillin-1、Ⅰ型胶原表达增加,细胞外基质重构,在RHD的发病过程中起重要作用。     

基质金属蛋白酶-2与-9在先天性二叶型主动脉瓣中的表达及意义

目的检测基质金属蛋白酶(MMPs)MMP-2、MMP-9在先天性二叶型主动脉瓣中的表达,探讨MMP-2、MMP-9在先天性二叶型主动脉瓣病变中的作用。方法选取因先天性二叶型主动脉瓣伴主动脉瓣狭窄(AS)和(或)主动脉瓣关闭不全(AI)行主动脉瓣置换术切取的儿童二叶型主动脉瓣瓣膜为研究组(n=12,男11例,女1例,年龄10～18岁,平均16.7岁,单纯AS3例、单纯AI8例、AS-AI1例),病例来源为2003-01—2005-12华中科技大学同济医学院同济医院住院患儿;以同期性别、年龄相近,无心血管系统及胶原系统疾病、意外死亡患儿的正常三叶型主动脉瓣(n=8,男6例,女2例,年龄在1～17岁之间,平均年龄9.1岁)为对照组,采用HE染色和免疫组织化学方法,观察先天性二叶型主动脉瓣组织学变化,对MMP-2、MMP-9蛋白质表达行半定量分析。结果正常主动脉瓣可见MMP-2、MMP-9低水平表达,MMPs在先天性二叶型主动脉瓣组、对照组表达的平均灰度值:MMP-2分别为(68.31±6.91)、(107.31±23.39),(P<0.05);MMP-9分别为(64.47±3.98)、(116.28±6.99),(P<0.05);先天性二叶型主动脉瓣组MMP-2、MMP-9表达较正常对照组显著性增强。结论先天性二叶型主动脉瓣中MMP-2、MMP-9表达水平增高,MMP-2、MMP-9可能参与先天性二叶型主动脉瓣细胞外基质(ECM)降解、重构,导致主动脉瓣结构和功能障碍,在先天性二叶型主动脉瓣病变的发生发展中起重要作用。     

IgA肾病患者肾组织单核细胞趋化蛋白-1表达的意义

目的 探讨原发性IgA肾病(IgAN)患者肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达变化.方法 选择经皮肾组织穿刺活检确诊为IgAN的患者40例.根据肾脏病理Lee氏分级(Ⅰ～Ⅴ级)将纳入研究的患者分为2组:A组20例,病理分级为Ⅰ～Ⅲ级;B组20例,病理分级为Ⅳ～Ⅴ级.对照组20例标本选取手术切除的肾肿瘤、肾囊肿患者远离病变组织的正常肾组织.同时将肾组织的肾小管和肾间质按照Katafuchi标准分为无间质病变组21例,轻度间质病变组8例,中度间质病变组19例和重度间质病变组12例.均采用免疫组织化学方法测定其肾组织中MCP-1的表达(以灰度值反映),观察其肾组织切片的染色强度及染色透光度,灰度值大则MCP-1表达少,反之则表达多.结果 根据肾脏病理Lee分级分组,各组灰度值比较:B组灰度值(68.08±2.37)与A组灰度值(74.50±3.27)比较、B组与对照组灰度值(81.98±3.21)比较、A 组与对照组比较,差异均有统计学意义(Pa<0.01);根据Katafuchi标准分组,无间质病变组、轻度间质病变组、中度间质病变组及重度间质病变组灰度值分别为82.03±3.13、76.44±2.01、71.49±1.69、66.54±1.23,各组比较差异均有统计学意义(Pa<0.01).结论 MCP-1可反映原发性IgAN患者肾组织的病理损害程度,且表达水平与肾组织损害程度有关.     

先天性巨结肠免疫组织化学的表达

目的探讨蛋白基因产物(PGP 9.5)、组织蛋白酶D(CAD)和S100蛋白(S100)在先天性巨结肠(HD)中的表达及其意义。方法采用PGP 9.5、CAD及S100对35例正常结肠和30例HD狭窄段结肠行免疫组织化学染色。利用图文分析系统观察染色表达情况。结果1.对照组结肠中,CAD对神经节细胞特异性表达。其他神经组织包括神经胶质细胞、雪旺细胞与神经纤维都不表达CAD,但对PGP 9.5和S100均阳性表达。PGP 9.5对神经节细胞强阳性着色,表现为棕褐色细胞状团块。S100对神经节细胞阴性表达,在神经丛中形成细胞状空白区。2.HD狭窄段组结肠中,免疫组织化学表达情况与对照组明显不同。CAD对肠神经组织表达缺失。PGP 9.5染色中棕褐色的细胞状团块及S100染色中的细胞状空白区均未观察到。扭曲增生的神经纤维对PGP 9.5与S100强阳性着色。S100染色的神经纤维着色强度[(146.70±10.87)灰度值]及直径(57.81±14.99)μm与对照组神经纤维的着色强度[(169.25±9.53)灰度值]及直径(23.15±5.56)μm比较,差异显著(P均<0.01)。结论PGP 9.5、CAD、S100在HD狭窄段的异常表达证实肠神经组织发育异常是HD主要病理改变。3种抗体的免疫组织化学染色标记肠神经组织对HD的诊断有重要帮助。     

乙烯硫脲致畸胎鼠直肠末端Sonic hedgehog基因的表达

目的 探讨乙烯硫脲(ETU)致畸胎鼠直肠末端Sonic hedgehog(Shh)基因在胎鼠直肠肛门及其畸形发生过程中的表达和作用.方法 妊娠SD大鼠30只按受孕时间配对分为2组,实验组(n=15)在孕10 d予10 g/LETU(125 mg/kg)胃管注入,正常对照组(n=15)予等量蒸馏水.2组分别于孕13、14、15、16和17 d剖宫取胎鼠直肠末端1 cm提取RNA和组织蛋白,采用RT-PCR法和Western blot法检测Shh基因mRNA和蛋白表达情况.结果 在后肠发育的关键时期,实验组直肠末端Shh基因mRNA水平明显低于正常对照组,第14天实验组直肠末端的mRNA相对灰度值为0.29±0.22,正常对照组为2.23±0.54(t=5.72 P<0.05);第15天实验组直肠末端的mRNA相对灰度值为0.39±0.12,正常对照组为1.30±0.49(t=3.08 P<0.05).实验组Shh蛋白表达明显下降,胚胎第14天实验组直肠末端Shh基因蛋白相对灰度值为1.04±0.46,正常对照组为2.09±0.04(t=4.55 P<0.05);第15天,实验组直肠末端Shh基因蛋白相对灰度值为0.59±0.21,而正常对照组为0.95±0.16(t=26.0 P<0.05).结论 Shh的表达情况与直肠发育呈时间依赖性改变.Shh基因表达在肛门直肠及其畸形发生过程中发挥重要作用,ETU可能影响Shh信号转导系统和肛门直肠畸形发生.     

胸膜核因子-κB表达与胸膜纤维化相关性研究

目的 探讨胸膜核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的表达与胸膜纤维化形成的相关性.方法 对27例胸腔积液患儿进行胸腔镜手术治疗,术中取病理,通过HE染色分组,进行NF-κB免疫组织化学检测.结果 无胸膜纤维化组NF-κB免疫组织化学中只有少数类上皮细胞染色,阳性细胞数低于20%,而胸膜纤维化组NF-κB免疫组织化学染色细胞数大于40%,呈强阳性表达,明显高于无胸膜纤维化组(χ2=16.67,P<0.05).胸膜表达NF-κB同纤维化相关检测Gamma值为0.75,呈正相关.结论 胸膜纤维化与NF-κB存在相关性.     

瘤体内注射糖皮质激素对婴幼儿血管瘤组织中血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨糖皮质激素瘤体内注射对婴幼儿增生期血管瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及意义。方法选取拟手术治疗的增生期血管瘤患儿20例,分别于术前3d、6d、9d、2周注射曲安奈德1次(1mg/cm2),各5例;对照组为消退期血管瘤5例和增生期血管瘤5例,均不予用药。手术切除后瘤体标本,立即予40g/L甲醛固定,常规石蜡包埋,切片,HE染色,光镜下观察组织学变化,采用兔抗人VEGF多克隆抗体,第2代通用型二步免疫组织化学法染色,测定每张图片的平均吸光度(A)值,每张切片随机选取5个高倍镜视野。结果HE染色切片光镜下观察,各用药组与未用药组组织学比较均无显著性差异。免疫组织化学染色切片见VEGF表达在增生期血管瘤组织已出现血管腔的内皮细胞胞质中和尚未出现血管腔的内皮细胞胞质或胞膜中,在增生期未用药组中可见棕褐色颗粒,呈强阳性表达,随着激素影响时间的延长,1周后其表达强度渐下降,染色深度渐变浅,阳性细胞渐减少。测定其免疫反应阳性颗粒积分A值,未用药组与术前6d、9d、2周和消退期血管瘤组行样本均数的两两比较有统计学差异(F=17.9191P<0.01),糖皮质激素影响时间和血管瘤VEGF的表达呈显著负相关(r=-0.5922P<0.01)。结论应用曲安奈德瘤体内注射治疗婴幼儿增生期血管瘤,能明显下调VEGF表达,促进血管瘤消退。     

热性惊厥大鼠海马区c-Fos蛋白表达及苔藓纤维发芽特征

目的探讨热性惊厥(FS)大鼠海马区c-Fos蛋白表达及苔藓纤维发芽(MFS)特征。方法21日龄雄性SD大鼠36只分为热性惊厥(FS)组、发热对照(FG)组及正常对照(NG)组,每组12只。采用热水浴法建立FS模型,应用免疫组织化学和Timm′s染色方法对海马CA1、CA3区的c-Fos蛋白表达和MFS进行观察。结果FS组大鼠海马CA1区有c-Fos蛋白过度表达,FS组c-Fos蛋白面积百分比[(2.26±0.23)%]较FG组[(1.08±0.19)%]和NG组[(0.71±0.14)%]高,FS组与其他两组的差异有显著意义(χ2=10.48 P<0.01);FS、FG、NG组c-Fos蛋白平均灰度值依次为(139.43±3.64)(、159.26±3.66)、(170.88±3.58),3组差异有显著意义(F=12.31 P<0.01)。NG组海马CA3区未见MFS,FS、FG组的MFS评分依次为(4.30±0.80)、(1.45±0.68)分,两组差异有显著意义(t=12.14 P<0.001),提示FS组海马CA3区出现显著的MFS;FS组大鼠惊厥2、6、10次后MFS的平均宽度及面积百分比依次为[(19.71±4.68)μm、(21.53±6.87)%]、[(28.57±5.19)μm、(38.22±7.15)%]及[(43.16±5.65)μm、(54.42±7.69)%],不同惊厥次数间的差异有显著意义(F=22.47 P<0.01;χ2=18.77 P<0.01)。结论FS发作可引起大鼠海马CA1区c-Fos蛋白过度表达,并促使CA3区异常苔藓纤维发芽。FS可导致近期及远期海马结构病变。     

低氧新生鼠肺组织中内皮素转化酶-1的表达

目的探讨低氧对新生鼠肺组织内皮素转化酶-1(ECE-1)表达的影响。方法日龄5～7天的Wistar新生鼠30只,随机分为对照组和缺氧组各15只。对照组置室温空气中,缺氧组给予低氧干预(氧浓度5%～6%)6h,开胸取肺,观察肺大体改变,切片行HE染色观察病理学改变,采用免疫组织化学染色检测肺组织中ECE-1的表达。结果对照组肺外观无明显改变,缺氧组呈现肺水肿改变;光镜下缺氧组可见肺泡间隔增厚,间质水肿,毛细血管轻度充血;免疫组织化学染色显示ECE-1在缺氧组表达增强(0.404±0.029),与对照组(0.310±0.031)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论低氧可使新生鼠肺组织ECE-1表达增强,ECE-1可通过促进内皮素-1加快转化参与低氧所致肺组织损伤的形成过程。     

雷公藤甲素对实验性肺动脉高压肺脏基质金属蛋白酶MMP2和MMP9的影响

目的：雷公藤甲素能缓解实验性大鼠肺动脉高压,该实验观察雷公藤甲素对肺动脉高压血管重构模型的影响并探讨与基质金属蛋白酶的关系。方法：60只SD大鼠随机分为6组：①正常对照组;②模型组;③连续治疗组;④连续治疗组的安慰剂对照组;⑤延迟治疗组;⑥延迟治疗组的安慰剂对照组。术后5周通过心导管术测得血液动力学指标,并用弹力纤维染色观察肺小动脉的病理学变化。用免疫组织化学染色显示MMP2 和MMP9在肺血管上的阳性分布和半定量,荧光定量PCR（FS-PCR）行肺组织MMP2和MMP9的定量。结果:平均肺动脉压(m PAP） 为38.10±1.20 vs 16.70±1.16 mmHg和心室重量变化［RV/(LV+S)%］为（62.45±5.28）% vs （22.76±3.01）%及血管阻塞积分(VOS） 1.736±0.080 vs 0.000±0.000,②组较①组明显增高(P<0.01);MMP2和MMP9的表达量在肺血管壁(MMP2为 1.48±0.35 vs 0.00±0.00; MMP9 1.95±0.22 vs 0.00±0.00)和肺组织(MMP2 0.85±0.67 vs 5.50±0.67. MMP9 0.85±0.67 vs 4.95±0.69)均显示②组较①组明显增高（P<0.05）;雷公藤甲素连续治疗组和延迟治疗组各指标均较模型组和各自的安慰剂组减低,且连续治疗效果更好（mPAP 20.80±1.03 vs 26.20±1.03 mmHg,P<0.05）。结论: 雷公藤甲素能延缓大鼠左肺切除加野百合碱注射诱导的肺动脉高压和右心室肥厚,并能抑制新生内膜形成,可能与抑制MMPs的活性增高有关。［中国当代儿科杂志,2007,9（5）：479-483］     

基质金属蛋白酶与颅内感染

基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌钙依赖性蛋白水解酶家族,是分解细胞外基质的蛋白酶类中最重要的一类。近年来研究发现,MMPs广泛参与颅内感染的病理过程,在颅内感染中MMPs表达增加, 降解细胞外基质和脑血管基底膜,损伤血脑屏障,提高血管通透性,引起血管源性脑水肿,参与中枢神经系统免疫反应,促进感染的病理生理过程。该文就MMPs及其在颅内感染中的作用进行综述。     

基质金属蛋白酶与心力衰竭

心力衰竭是儿科重要死亡原因之一。近年来研究发现细胞外基质合成与降解的失衡与心肌重塑、心力衰竭的发生密切相关。而细胞外基质合成与降解的平衡又取决于基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制物的平衡。研究发现心力衰竭时MMPs的表达和活性增高,及其组织抑制物的比例失调。     

基质金属蛋白酶与颅内感染

基质金属蛋白酶（MMPs）是一组锌钙依赖性蛋白水解酶家族,是分解细胞外基质的蛋白酶类中最重要的一类.近年来研究发现,MMPs广泛参与颅内感染的病理过程,在颅内感染中MMPs表达增加,降解细胞外基质和脑血管基底膜,损伤血脑屏障,提高血管通透性,引起血管源性脑水肿,参与中枢神经系统免疫反应,促进感染的病理生理过程.该文就MMPs及其在颅内感染中的作用进行综述.     

Matrix metalloproteinases in infants with posthemorrhagic hydrocephalus

The cerebrospinal fluid matrix metalloproteinase (MMP) activities were measured in infants with posthemorrhagic hydrocephalus to elucidate the intrinsic mechanism for the resolution of ventricular dilation. Increased MMP-9 activities were observed in the patients who escaped a shunt operation, suggesting its potential contribution to the resolution of ventricular dilation.     

基质金属蛋白酶与小儿心血管疾病

基质金属蛋白酶(MMP)是一组锌依赖性的蛋白水解酶家族,是降解细胞外基质的重要物质。在多种心血管疾病中均伴有MMP表达及活性的增高或MMP/TIMP比例失衡,造成心肌细胞收缩、舒张功能和组织顺应性的改变。应用MMP抑制剂可阻止或缓解此改变的发生。该文就MMP的生物学特性及在小儿心血管疾病中的作用作一综述。     

Matrix testing for urothelial tissue engineering.

INTRODUCTION: Surgical reconstruction of the bladder is associated with many well-known complications. Tissue engineering is under discussion as a potential therapeutic strategy and many of the proposed benefits are of special interest for children. Biomaterials play a key role in tissue engineering. Many materials have been proposed for the experimental reconstruction of the bladder and urethra. They determine the biological and mechanical characteristics of the reconstructed tissues. Most publications focus on a single material. In order to identify the most suitable biomaterial it was the aim of this study to compare biological and mechanical features of different biomaterials seeded with urothelial cells in vitro. MATERIALS AND METHODS: Commercially available biomaterials (Biogide, Ethisorb, Lyoplant, SIS, Vicryl, Xenoderm) of biologic or synthetic origin were seeded with urothelial cells. Cell-matrix constructs were cultured and investigated by scanning electron microscopy for surface structure and cell morphology. They were also subjected to extension until failure and the force required was reported as f (max). Values obtained and curve shape were compared to specimens of bladder mucosa and submucosa. RESULTS: Cell adhesion and morphology showed marked differences between materials. Cell shape varied from single spherical cells to confluent layers of flat urothelium. f (max) ranged from 0.02 N to 48.86 N for tested materials and 1.19 N for native bladder mucosa/submucosa. DISCUSSION: The materials showed marked differences in biological and mechanical features in vitro. Cells cultured on biogenic matrices were more similar to native urothelium. Most of the tested materials showed different curve shapes and higher f (max) values than native bladder mucosa.     

基质金属蛋白酶与早产儿慢性肺疾病

早产儿慢性肺疾病(chrcmic lung disease,CLD)或支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)是婴儿时期最常见的慢性肺疾患。近10余年随着医学科学的发展,早产低体重儿的存活率增加,CLD的发生有逐渐上升趋势。因目前尚无理想的预防和治疗CLD的方法,已严重影响存活早产儿的生活质量,并给家庭和社会带来了负担。     

吸入糖皮质激素对支气管哮喘患儿血清基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶抑制物1的影响

目的 观察吸入糖皮质激素对支气管哮喘(哮喘)患儿血清基质金属蛋白酶9( MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制物1( TIMP-1)的影响,探讨糖皮质激素降低呼吸道重塑的机制.方法 哮喘患儿50例.给予糖皮质激素信必可都保(布地奈德/福莫特罗粉吸入剂),每吸含布地奈德80 μg、福莫特罗4.5 μg,每日2次,疗程12周,采用ELISA法测定布地奈德/福莫特罗粉吸入剂吸入前后,血清MMP-9、TIMP-1水平及肺功能指标[第1秒最大呼气量(FEV1)、最大呼气流速峰值(PEF)]的变化,并对二者进行相关性分析.结果 使用吸入糖皮质激素布地奈德/福莫特罗粉剂后,哮喘患儿血清MMP-9水平由吸入前的(43.25±13.26) μg?L-1下降至(29.62±12.47) μ.g? L-1,TIMP-1由吸入前的(119.88±32.56)μg?L-1上升至(143.15±45.36) μg?L-1,差异均有统计学意义(Pa＜0.01).PEF及FEV1变异占预计值百分比分别由吸入前的(76.15±3.26)％,(73.12±4.63)％,上升至(85.42±4.73)％,(86.49±3.72)％,PEF及FEV1变异占预计值百分比与MMP-9/TIMP-1比率均呈负相关(r=-0.402、-0.364,Pa＜0.05).结论 糖皮质激素可通过调节MMP-9/TIMP-1的平衡,降低胶原沉积,从而干预呼吸道重塑的发生.