乙型肝炎表面抗原定量检测临床研究进展

正乙型病毒性肝炎(简称乙肝)是危害人类生命健康的主要传染病之一。全球约20亿人感染过乙型肝炎病毒(HBV),约3.5亿人进展为慢性感染;每年约100万人死于HBV感染所致肝硬化、原发性肝癌等相关疾病~([1])。中国是乙肝高发国家,乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带率为8%~10%,携带者约占全世界1/3左右,50%~70%的慢性HBV感染者存在病毒复     

罗氏电化学发光检测系统检测泌乳素的方法学评价及参考范围建立

目的按美国病理家协会（CAP）对实验室的要求,对罗氏电化学发光系统检测泌乳素（PRL）的方法进行评估和建立本实验室的参考区间。方法取中、低值患者混合血清,分别进行批内20次和连续20 d检测,统计分析批内变异系数（CV）和日间CV;用不同浓度低值血清连续检测10 d,统计分析检测功能灵敏度;将高、低值血清按一定比例混合,检测PRL,回归分析确定测量范围;将中值血清按一定比例稀释后检测PRL,分析稀释后样本和原始样本结果的符合程度,得出临床可报告范围（CRR）;取292名健康人群样本检测PRL,统计分析建立参考范围。结果中、低值批内CV分别为0.95%、1.16%,日间CV分别为2.39%、3.14%;功能灵敏度为0.065μg/L;分析测量范围（AMR）为0.105-452.88μg/L;CRR为0.065-4 528.80μg/L;本实验室的参考区间男性为3.86-22.80μg/L,女性为4.61-30.74μg/L。结论本系统检测性能符合CAP要求,参考区间上限略高于厂家提供的参数,说明厂家提供的参考区间不可直接引用。     

罗氏电化学发光检测系统检测泌乳素的方法学评价及参考范围建立

目的按美国病理家协会(CAP)对实验室的要求,对罗氏电化学发光系统检测泌乳素(PRL)的方法进行评估和建立本实验室的参考区间。方法取中、低值患者混合血清,分别进行批内20次和连续20 d检测,统计分析批内变异系数(CV)和日间CV;用不同浓度低值血清连续检测10 d,统计分析检测功能灵敏度;将高、低值血清按一定比例混合,检测PRL,回归分析确定测量范围;将中值血清按一定比例稀释后检测PRL,分析稀释后样本和原始样本结果的符合程度,得出临床可报告范围(CRR);取292名健康人群样本检测PRL,统计分析建立参考范围。结果中、低值批内CV分别为0.95%、1.16%,日间CV分别为2.39%、3.14%;功能灵敏度为0.065μg/L;分析测量范围(AMR)为0.105~452.88μg/L;CRR为0.065~4 528.80μg/L;本实验室的参考区间男性为3.86~22.80μg/L,女性为4.61~30.74μg/L。结论本系统检测性能符合CAP要求,参考区间上限略高于厂家提供的参数,说明厂家提供的参考区间不可直接引用。     

罗氏e601型电化学发光分析仪测定癌胚抗原的方法学性能评价

目的通过对罗氏e601型电化学发光分析仪测定癌胚抗原的方法学性能评价,探讨临床免疫学定量检测的方法学性能验证评价方案和实验方法。方法按照CLSI推荐的方法测定癌胚抗原的精密度、正确度、线性范围和可报告范围、分析灵敏度（最低检测限）、生物参考区间的验证、携带污染率指标进行验证。结果癌胚抗原的方法学评价结果在厂家提供的范围之内,癌胚抗原的生物参考区间范围不受地区和人群等因素的影响。结论罗氏e601型电化学发光分析仪检测系统性能能满足临床要求,评价方案科学可靠,厂家提供的数据必须经验证后才能引用。     

人降钙素原定量检测方法学评价

目的评价深圳市晋百慧生物有限公司生产的人降钙素原(PCT)定量检测系统(简称晋百慧PCT定量检测系统)的检测性能。方法以罗氏PCT检测系统为参比系统,晋百慧PCT定量检测系统为待评系统。在待评系统连续测定两浓度质控品(0.5 ng/ml,10 ng/ml)20次计算其变异系数(CV)评价其重复性,连续测定20个工作日计算其CV评价其天间不精密度;根据EP6-A文件配置不同标本浓度(0,0.5,1,2,5,10,20,50 ng/ml)计算其线性范围。收集200例患者血清标本,根据EP9-A3文件在待评系统与参比系统进行比对试验判断两者的可比性。结果待评系统重复性为不同浓度质控品的CV分别为3.59%,1.57%,天间不精密度分别为7.02%,3.82%;在0～50 ng/ml范围为线性。比对试验线性决定系数R2=0.968 6(Pearson相关分析α=0.05,P<0.001),在有医学意义浓度0.5 ng/ml处相对偏差为9%。结论晋百慧PCT定量检测系统精密度好,检测范围宽,与参比系统具有可比性,能满足临床检测要求。     

乙型肝炎表面抗原酶联免疫法检测试剂的性能评价

目的对我室使用国产乙型肝炎表面抗原酶联免疫法（ELISA）检测试剂进行性能评价。方法用ELISA法使用国产试剂检测国家参考品（n=33）、临床科研血清盘（n=40）及临床标本（n=270）,判断其是否符合国家检定标准,并分析其真实性、可靠性和收益指标。结果检测国家参考品的阴性符合率为100%（20/20）,阳性符合率为100%（3/3）,三种亚型的最低检出量均为0.5ng/mL;其真实性指标：灵敏度、特异性、粗一致性和约登指数（Youden）分别为96.88%、99.45%、98.39%和0.96;可靠性指标：变异系数（CV）和Kappa值分别为5.2%和0.96;收益指标：阳性预测值与阴性预测值分别为99.20%和97.84%。结论国产试剂性能评价结果优质,适用于临床标本检测。     

不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果的评价

目的对不同方法学检测乙型肝炎血清标志物结果进行评价。方法随机选取收治的100例乙型肝炎患者,依据检测方式的不同,分为研究组、观察组、对照组。给予对照组酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,观察组应用时间分辨免疫荧光法(TRFIA)检测,研究组应用化学发光法(CLIA)检测,分析三种血清标志物检测结果,评价不同方法学检测的有效性。结果不同检测方法测定乙型肝炎血清标志物灵敏度不相同,研究组化学发光法(CLIA)检测灵敏度、精密度较高,与其它两组对比,差异有统计意义(P<0.05)。结论在临床检测乙型肝炎中,不同方法学检测血清标志物在灵敏度与精密度方面存在差异性,应用化学发光法检测乙型肝炎血清标志物,检测灵敏度高、检出精密度高,可将其作为临床检测乙型肝炎阳性的最优选择,具有实际的应用价值。     

罗氏全自动电化学发光免疫分析仪检测白细胞介素-6的方法学评价

目的 评价罗氏Cobas E602全自动电化学发光免疫分析仪模块定量检测白细胞介素-6(IL-6)的分析性能。方法 对罗氏全自动电化学发光免疫分析仪定量检测IL-6的准确度、精密度和线性进行验证,并进行交叉污染率评估实验。结果 经不同批次校准品检测,测定值与靶值的相对偏差为-3.01%～3.84%。批内变异系数(CV)为1.84%～2.80%,批间CV为0.67%～1.43%,检测的准确度和精密度均符合性能标准。IL-6检测回归分析呈一次线性,线性回归方程为y=1.008 1x-1.000 9(R²=0.999 96,P<0.05)。IL-6检测的交叉污染率为0.077%。结论 罗氏Cobas E602全自动电化学发光免疫分析仪对IL-6检测性能的验证结果与仪器生产厂家提供的说明基本一致,符合临床实验室检验的要求,可用于临床标本测定。     

电化学发光法检测血清CA72-4的方法学性能评价

目的 对电化学发光法检测血清糖链抗原72-4（CA72-4）进行方法学验证.方法 参考美国临床实验室标准化协会（CLSI）系列文件和相关文献,设计验证方案,对CA72-4项目的 精密度、准确度、线性范围、分析灵敏度、生物参考区间和温度稳定性进行验证.结果 实验结果显示,CA72-4批内总不精密度小于3%,批间不精密度小于4%,准确度在±4%以内,线性范围为0.37～291.30 U/mL,参考区间为0.0～8.2 U/mL,分析灵敏度小于0.2 U/mL,均与厂商提供的参数接近.血清标本CA72-4常温可稳定24 h,4 ℃保存可稳定1个月以上.结论 电化学发光法检测CA72-4各项参数与厂商声明基本一致,符合相关质量要求,可应用于临床标本检测.     

时间分辨免疫荧光法和电化学发光法检测HBsAg的对比分析

目的用电化学发光法作为标准,探讨时间分辨免疫荧光法在检测HBsAg上的应用。方法对临床348份血清标本、一份HBsAg高值梯度稀释血清及生物制品检定所标准血清分别用电化学发光法和时间分辨免疫荧光法分别检测,比较两种方法检测结果的阴阳性符合率、灵敏性、特异性、准确性、线性范围以及阳性标本的定量相关性等。结果对临床348份血清检测结果阴阳性符合率为98.26%;阳性标本的定量相关性为γ=0.9641(P<0.001);两种方法的线性范围,时间分辨免疫荧光分析法约为1:2～1:2048(0.21～223.07ng/ml),电化学发光约为1:2～1:4096(0.15～223ng/ml)。结论时间分辨免疫荧光法与电化学发光法在HBsAg的定量检测上的灵敏性、准确性和线性范围都基本相当。     

HBcAb单项或HBcAb与HBeAb二项阳性时HBsAg定量检测分析

目的用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒(HBV)标志物,若乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)单项或HBcAb与乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)二项阳性,再进行乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)定量和HBV载量测定,了解HBV携带及病毒复制情况。方法 ELISA检测HBV标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,选取1 098例HBcAb阳性、966例HBeAb和HBcAb二项阳性样本及832例HBV标志物全阴性标本为对照,用化学发光法定量复检HBsAg,并用PCR的方法检测HBV载量。结果 1 098例HBcAb单项阳性检测出HBsAg定量436例(39.7%)、PCR-DNA230例(20.9%);966例HBeAb、HBcAb二项阳性的标本分别定量检测出HBsAg定量387例(40.1%)、PCR-DNA 212例(21.9%),HBV标志物全阴性的HBsAg定量和PCR-DNA比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ELISA法检测HBV标志物时,若只HBcAb阳性或HBcAb与HBeAb二项阳性,仍可检出表面抗原和病毒的复制,需做进一步的检测,以免漏检,造成医疗风险。     

金标法检测乙肝表面抗原漏检原因分析

目的：分析金标法检测乙肝表面抗原（HBsAg ）的漏检原因。方法采用金标法和酶联免疫吸附法（ELISA）对10335例献血者血液标本进行HBsAg检测,计算阳性率、漏检率。采用金标法和ELISA检测 HBsAg质控品,分析检测灵敏度。结果金标法检测阳性率为0．33％,ELISA为1．14％,金标法检测阳性率低于 ELISA （χ2＝46．76,P＜0．05）。金标法漏检率为71．19％。金标法反应时间为5、10、15 min时,漏检率为94．92％、88．98％、71．19％,比较差异有统计学意义（χ2＝38．27,P＜0．05）。金标法不能检出浓度为0．5 ng/mL的 HBsAg质控品。结论金标法检测灵敏度较ELISA低,并且受人为因素影响较大,适用于献血前初筛。     

GICA法检测HBsAg的探讨

目的　对3种胶体金免疫层析测定(GICA)试条检测 HBsAg的性能、结果等技术参数进行初步探讨,为各实验室的选用提供参考。方法　采用 GICA法和酶联免疫吸附法(ELISA)对定值的HBsAg质控品和1 322份血清标本同时测定,并结合有关实验,对3种 GICA试条的敏感性、特异性、渗透性、固相膜均匀性等结果进行初步评价。结果　3 种 GICA试条对 HBsAg的最小检出量为1~5ng/ml;与ELISA法比较,检出率为97.37%~99.57%,一般不出现假阳性,未发现前带反应。结论　GICA适用于急诊检验,其敏感性低于 ELISA法,成本高;特殊情况下,还必须与 ELISA法并用,实行双检。     

磁珠浓缩法在低浓度HBsAg检测中的应用

目的:建立一种以磁珠为介质的标本浓缩方法(磁珠浓缩法),提高HBsAg的检测灵敏度和阳性检出率,用于低浓度HBsAg的测定。方法:BCA蛋白检测法检测磁珠吸附前后和洗脱液中HBsAg蛋白含量,判断吸附HBsAg的能力。磁珠浓缩法浓缩HBsAg阳性、HBsAg阴性、已标定HBsAg浓度的血清系列稀释品和低浓度HBsAg的血清标本,比较浓缩前后的S/CO值。结果:在一定的浓度范围内,磁珠吸附HBsAg随着HBsAg浓度的增高而增多,磁珠吸附HBsAg纯品后,10mmol/LNaOH洗脱HBsAg的洗脱率是(71.02±3.24)%。磁珠浓缩后,S/CO值高于浓缩前(P<0.01),不会增加检测HBsAg的非特异性(P>0.05),S/CO值与HBsAg浓度具有良好的线性(r=0.998),最低检测限是0.1IU/mL,对低浓度HBsAg的阳性检出率是80.8%,与浓缩前比较,差异具有统计学意义(χ2=18.513,P<0.01)。结论:磁珠浓缩法可明显提高ELISA检测HBsAg的灵敏度和阳性检出率,具有一定的研究意义。     

HBsAg金标法初筛10 246名无偿献血者的漏检原因分析

为了解 HBs Ag金标法试纸的应用效果 ,分析 HBs Ag漏检的原因 ,以便更好地开展无偿献血工作 ,对广西血液中心 2 0 0 1年 1～ 6月金标法初筛 HBs Ag合格的 1 0 2 46份无偿献血者血样应用 ELISA法复查结果进行统计分析 ,并对部分 ELISA法判断为 HBs Ag阳性的血样进行金标法跟踪复查 ,结果报告如下。材料与方法1　标本来源　HBs Ag金标法初筛合格的无偿献血者血样1 0 2 46份 ,其中街头流动献血者血样 5 85 2份 ;学校、厂矿等单位无偿献血者血样 43 94份。2　HBs Ag胶体金试纸　灵敏度≤ 1 μg/ml,由北京万泰生物药业有限公司生产 ,…     

电化学发光免疫分析法检测血清雌二醇的性能验证

目的 评估电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测血清雌二醇(E2)的性能.方法 应用相关标准评价ECLIA检测E2的正确度、精密度、分析测量范围、临床可报告范围、功能灵敏度及生物参考区间.结果 5个批号质控品实测值与靶值的相对偏移均在可接受范围内(≤±25％),正确度验证通过.低水平质控品批内和批间变异系数(CV)分别...     

ARCHITECT i2000全自动免疫分析仪检测HBsAg的性能评估

目的对ARCHITECT i2000全自动免疫分析仪进行使用前的性能评估。方法以ARCHITECT i2000全自动免疫分析仪的定量检测项目HBsAg进行精密度、符合率、检出限、携带污染率检测。结果 HBsAg批内精密度、批间精密度均小于5.1%,精密度、符合率、检出限及携带污染率均符合ARCHITECT i2000全自动免疫分析仪的性能要求。结论 ARCHITECT i2000全自动免疫分析仪HBsAg的精密度、符合率、检出限及携带污染率均达到性能要求,同时能满足临床实验室检测要求。     

金免疫层析试验检测HBsAg等项目结果分析

目的 比较金免疫层析试验(GICA)与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的结果符合率,以了解GICA的特异性与敏感度.方法 用GICA和ELISA平行检测受检者血清标本HBsAg.结果 通过1 205份血清样本的分析,发现GICA和ELISA检测HBsAg的结果符合率为99.09%,GICA检测HBsAg存在漏检(即假阴性).结论 GICA较ELISA敏感度低,用GICA检测HBsAg等项目存在一定程度的漏检率,GICA只能筛查HBsAg,检测HBsAg低含量的血清标本不宜使用.GICA快速诊断法可用来大规模普查人群HBsAg的感染情况,也适用于临床急症标本等快速检测的需要.     

罗氏 Cobas e601与雅培 Architect i2000检测乙肝表面抗原的比较

目的：比较罗氏电化学发光检测仪Cobas e601与雅培化学发光微粒子免疫分析仪Architect i2000检测乙肝表面抗原的结果。方法选取在雅培 i2000检测仪上检测乙肝表面抗原结果为有反应性,且定量结果小于250 IU/mL 的标本,同时在罗氏 e601进行检测,分析比较检测结果间的差别,并进行直线相关和回归分析。结果共检测46份临床标本,剔除1份两台仪器上检测结果反应性不符的标本外,其余结果具有很好的相关性。其中雅培检测值为0．05～1．00 IU/mL 的15份,两者的直线回归方程为Y ＝17．49X ＋0．843,相关系数 r＝0．979;1．1～10．00 IU/mL 的15份,两者的直线回归方程为Y ＝15．72X ＋21．06,相关系数 r＝0．952;11～250 IU/mL 的15份,两者的直线回归方程为Y ＝29．17X -129,相关系数 r＝1．000。结论两种方法的检测结果具有很好的相关性,并可以通过公式进行相互换算。