人血清载脂蛋白CⅡ单向免疫扩散测定法

A radial immunodiffusion assay (RID) for quantitation of human serum apolipoprotein CII (apoCII) was developed. Antiserum to apoCII was raised in goats with purified apoCII. The antibody-gel plate was prepared with 1% agarose. 5 microliters of each sample or standard serum was added in a well. Diffusion was performed at 25 degrees C or 37 degrees C for 48 h. The standard curve with a working range of 0.8-4.5 mg/dl was plotted. The minimum measurable concentration of apoCII was 40 ng. The intra-assay and inter-assay CV were 1.4-3.5% and 1.3-3.6% respectively. The recovery of the assay was 92.38-104.35%. The concentrations of apoCII for healthy adults and patients with hyperlipidemia were 3.9 +/- 1.7 mg/dl (M +/- SD, n = 67) and 5.9 +/- 2.5 mg/dl (n = 43) respectively.     

人血清载脂蛋白AⅡ免疫圆周扩散测定法研究

本文介绍人血清载脂蛋白AⅡ(apoAⅡ)免疫圆周扩散法。用纯化的人apoAⅡ免疫山羊制备抗血清。琼脂糖抗apoAⅡ抗体凝胶板,每孔加待测或稀释参考标准血清5μl,25℃扩散48小时,测量免疫反应沉淀环直径。结果:最小检测量58ng,测定范围17.3～69.0mg/dl,板内及板间重复的变异系数分别为1.5～4.6％和5.6％,样品回收率为96.6±4.3％。用本法测得我国成都地区成人apoAⅡ含量为:男26.7±4.4mg/dl(n=45),女26.6±4.6mg/dl(n=31)。     

单向免疫扩散法测定人血清载脂蛋白B含量及临床应用

本文报道用自制低密度脂蛋白免疫家兔,制得载脂蛋白B(ApoB)抗血清,并采用单向免疫扩散法测定了83例正常人血清ApoB值为:59.2±17.9mg/dl;83例高脂血症病人ApoB值为:93.5±20.1mg/dl。两组比较有高度显著性差异(P<0.01)。本法具有标准曲线线性好,重复性强及操作简便的特点。     

单向免疫扩散检测血清结核抗体试验法及临床应用

应用旧结核菌素（ＯＴ）或结素蛋白衍生物（ＰＰＯ）皮内试验，测试人体有无结核分枝菌感染，虽已得到公认，但缺乏灵敏度与特异性。此外，结核菌素皮内试验可能产生有害的全身反应与病灶反应，不可预料或难以避免［１］。单向免疫扩散检测血清结核抗体试验［２］，是根据...     

成都地区437例健康男性中老年人血清载脂蛋白CⅡ,CⅢ及E水平分析

Apolipoprotein (apo) C II, C III and E levels of 437 male healthy subjects aged 40-70 [with fasting serum triglyceride (TG levels < 2.26 mmol/L, total cholesterol (TC) levels < 6.21 mmol/L and plasma glucose levels < 6.10 mmol/L] in Changdu area were determined by radial immunodiffusion assay (RID). The results showed that the concentrations of apoC II, C III and E were 41.6 +/- 13.1, 112.8 +/- 31.0 and 38.7 +/- 8.2 mg/L (mean +/- s) respectively. No difference in the serum levels of apoC II, C III and E was noted between the men of different ages. The results of the linear correlation showed that there was a positive correlation of apoC II, C III, E with TG, TC, LDL-C; of apoC II, C III with BMI; and of apoE with ages.     

人血清载脂蛋白E火箭电泳测定法

Apo E was purified from the very low density lipoprotein (VLDL) of normal and hypertriglyceridemic subjects by Sephadex G-75, heparin-Sepharose 4B affinity chromatography, and preparative SDS polyacrylamide gel electrophoresis. The antisera were produced by injecting apo E into goats. With apo E antisera, Rocket immuno-electrophoretic method was developed to quantitate apo E levels in normal and hypertriglyceridemic human serum. The detection limit was 5.5 ng apo E. The coefficients of variation of intra- and interassay were 2.6% and 5.2%, respectively. The serum apo E level of 50 normal lipodemic subjects in Chengdu area was 4.7 +/- 1.2 mg/dl.     

单向免疫扩散试验的安全模拟方法

单向免疫扩散试验是医学检验专业学生必须做的一个验证性实验,单向免疫扩散试验是用已知抗体测定未知量的相应抗原,使待测的抗原从局部向琼脂内自由扩散,在一定区域内形成肉眼可见的沉淀环,从而根据沉淀环的直径与面积对抗原量作出计算.     

人血清ApoAI的单向免疫扩散测定法

建立单向免疫扩散法测定人血清Apo AI,并对测定条件、抗原展开剂、抗原保存等问题作了讨论。本法的批内、批间变异系数分别为3.4%和4.2%。用本法测得80名正常人和66名冠心病患者血清Apo AI含量分别为1.1440±0.2076g/L和0.9303±0.1331g/L,两者间差异极显著(P<0.001)。     

成都地区437例健康男性中老年人血清载脂蛋白CⅡ、CⅢ及E水平分析

为探讨我国健康男性中老年人血清载脂蛋白（ａｐｏ）ＣⅡ、ＣⅢ及Ｅ的正常参考值，采用单向免疫扩散测定法对成都地区４３７例４０～７０岁健康男性空腹血清ａｐｏＣⅡ、ＣⅢ及Ｅ的含量进行了分析。结果显示：成都地区健康男性中老年人空腹血清ａｐｏＣⅡ、ＣⅢ及Ｅ的含量分别为４１．６±１３．１、１１２．８±３１．０和３８．７±８．２ｍｇ／Ｌ，而且不同年龄组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。血清ａｐｏＣⅡ、ＣⅢ及Ｅ的水平与ＴＧ、ＴＣ及ＬＤＬ－Ｃ水平呈正相关（ｒ＝０．１２９５～０．５５５４，Ｐ＜０．０１），血清ａｐｏＣⅡ及ＣⅢ水平与体重指数呈正相关（ｒ＝０．１２４８～０．２０７９，Ｐ＜０．０１），ａｐｏＥ水平与年龄呈正相关（ｒ＝０．１４４８，Ｐ＜０．０１）。     

人血清载脂蛋白E火箭电泳测定法

本文报道一种简便、灵敏、特异的人血清载脂蛋白E(apoE)的火箭免疫电泳测定法。本法用自制的羊抗人apoE血清及1.5％的琼脂糖凝胶制成抗体凝胶板,血清apoE含量在1.1～8.9mg/dl范围内,在一定条件下电泳,其火箭峰高与抗原浓度成比例。最低检测量为5.5ng,板内及板间变异系数分别为2.6％和5.2％;回收率为94.0±3.9％(n=6);用此法测得成都地区血脂正常的成年人血清apoE的含量为4.7±1.2mg/dl(n=50)。     

成都地区438例男性中老年人血清载脂蛋白AⅠ及AⅡ含量分析

采用该室建立的免疫浊度测定法（ａｐｏＡⅠ）及免疫扩散测定法（ａｐｏＡⅡ）对成都地区４３８例４０～７０岁男性空腹１２小时血清的ａｐｏＡⅠ及ａｐｏＡⅡ进行了分析。结果表明成都地区４０～７０岁男性中老年人血清ａｐｏＡⅠ含量为１３０．１±２２．０ｍｇ／ｄｌ（ｎ＝４３８，ｘ±ｓ），ａｐｏＡⅡ含量为２９．９±４．９０ｍｇ／ｄｌ（ｎ＝４３７，ｘ±ｓ）。ａｐｏＡⅡ含量基本呈正态分布，ａｐｏＡⅡ含量呈正偏态分布，与年龄增长无关。     

人血清载脂蛋白E酶联免疫测定法的研究

本文报道一种简便、灵敏、特异的人血清载脂蛋白E(apoE)的双抗体夹心酶联免疫测定法。采用羊抗人apoE—IgG 包被的聚苯乙烯板及过碘酸钠法交联的辣根过氧化物酶—羊抗人 apoE IgG交联物。载脂蛋白CⅠ、CⅡ、CⅢ、AⅠ、B及人血清白蛋白不干扰测定。最低检测量为 11ng,测定范围0.45～29mg/dl,板内及板间重复的CV分别为7.4％和6.7～14.9％;回收率为108±5.5％(n=8);测得成都地区血脂正常的成年人血清apoE含量为3.57±1.24mg/dl(n=42)。     

人血清载脂蛋白AI免疫圆周扩散测定法的研究

介绍一种人血清apoAⅠ免疫圆周扩散测定法。用纯化人apoAⅠ免疫山羊制备抗血清。制成0.8％琼?糖抗体凝胶板,点样5μl,25℃扩散48h测量结果。方法简便可靠,特异性、重复性好,无需特殊仪器。最小检测量125ng, 测定范围27.5～220.0mg/dl,板内及板间重复的变异系数分别为2.2～4.8％和6.3％,样品回收率98.9～110.0％,测得血脂正常的成年人血清apoAⅠ含量为男120.8±17.6mg/dl(n=40),女123.6±15.9mg/dl(n=19)。     

人血清载脂蛋白AⅡ酶联免疫测定法研究

本文介绍测定人血清载脂蛋白ＡⅡ（ａｐｏＡⅡ）的酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）。特异抗人ａｐｏＡⅡ血清由免疫山羊获得，按过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶羊抗人ａｐｏＡⅡγ球蛋白交联物。用羊抗人ａｐｏＡⅡγ球蛋白（２０μｇ／ｍｌ）包被聚苯乙烯酶标板。结果表明：ａｐｏＡⅡ抗血清与ａｐｏＡⅠ、ａｐｏＣｓ，ａｎｏＢ１００（ＬＤＬ）以及人血清白蛋白无交叉反应，最小检测量为５０Ｏｎｇ，标准曲线工作范围为０．２５～８．００ｍｇ／ｄｌ，板内及板间变异系数分别为５．０％～９．２％及６．８％～１１．７％，回收率１０６．０±２．１％（ｎ＝４）。应用本法测得４１例血脂正常者ａｐｏＡⅡ含量为２４．４±５．９ｍｇ／ｄｌ，与用ＲＩＤ法测得的结果２６．７±４．６ｍｇ／ｄｌ相比（ｒ＝０．８０００，Ｐ＜０．００１），无显著性差异。本法特异性强，灵敏度高，简便快速。     

人载脂蛋白CⅡ成熟肽编码基因的克隆

目的：克隆人载脂蛋白CⅡ（ApoCⅡ）成熟肽编码基因。方法：以人基因组DNA为模板，利用聚合酶链反应（PCR）分别扩增ApoCⅡ成熟肽的编码基因外显子3和外显子4，继而采用外显子拼接法。以两种扩增产物为模板再次进行PCR，得到246bp的人ApoCⅡ基因编码片段。将ApoCⅡ基因编码片段重组入载体pUC18，并进行序列测定。结果：PCR扩增得到ApoCⅡ基因编码片段．经测序证实重组人载体pUC18中的ApoCⅡ编码片段的序列与Genbank中所检索到的编码序列完全一致。结论：利用外显子拼接法完成人ApoCⅡ成熟肽基因编码片段的克隆，为基因工程研制有生物活性蛋白提供了可行的技术手段。     

妊娠特异性β1糖蛋白单向免疫扩散法的临床应用

评价妊娠特异性β１糖蛋白的临床应用价值。方法将１６３例３７－４４周孕妇分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ５组,Ａ组为妊娠３７－４０周＾＋６的正常妊娠５０例,Ｂ组为妊娠４１－４１周＾＋６的延期妊娠６１例,Ｃ组为过期妊娠３２例,Ｄ组为轻度妊娠高血压综合征６例,Ｅ组为重度妊娠高血压综合征１４例。以单向免疫扩散法测定血ＳＰ１含量。结果足月妊娠后,随着妊娠时间增加,血ＳＰ１含量降低的孕妇比例及胎儿并发症增多;重度妊高征     

单向免疫扩散法测定人血清Apo AⅡ水平

我们在国内初次建立了测定人血清载脂蛋白AⅡ的单向免疫扩散法,该法具有简便、精确、重复性好的优点。批内变异4.1％,批间变异6.7％。20～59岁正常血脂的男性Apo AⅡ水平为35.5±6.4mg/dl;20～49岁正常血脂的女性Apo AⅡ水平为34.2±4.6mg/dl。Apo AⅡ水平与HDL-ch,HDL_3-ch正相关,而与HDL_2-ch无相关。     

成都地区625例健康成人血清载脂蛋白AI含量的测定

作者用圆周免疫扩散法,测定成都地区625例健康成人血清apoAⅠ的含量。观察到健康成人血清apoAⅠ含量呈正态分布,与年龄增长无明显关系,女性略高于男性,男性 307例,均数为122.1±13.7mg/dl,女性318例,均数为125.5±15.9mg/dl。确定正常参考值男性为95～150mg/dl,女性为90～160mg/dl。     

人血清载脂蛋白B100免疫浊度测定法

本文报道一种人血清载脂蛋白B100免疫浊度测定法。本法灵敏、特异,最小检测量为350ng,标准曲线测定范围为21～170mg/dl;批内和批间重复变异系数分别为4.0％和5.7％;回收率为97.6±6.1％。测定36例正常人血清载脂蛋白B100为87.5±16.8mg/dl,与免疫扩散法比较其相关系数为0.7065,P<0.001。