沉默T-cadherin对ox-LDL诱导人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo生物学行为的影响

目的 探讨沉默T-钙黏蛋白（T-cadherin）对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo生物学行为的影响。方法 将人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo分为空白对照组、ox-LDL组、Tcadherin小干扰RNA(siRNA)阴性对照组、T-cadherin siRNA组。各组细胞转染后,实时荧光定量PCR检测各组Tcadherin mRNA水平;MTT法检测HTR-8/SVneo细胞增殖情况;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Transwell小室实验、划痕实验分别检测细胞侵袭、迁移能力;蛋白免疫印迹实验检测细胞胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达水平。结果 与空白对照组相比,ox-LDL组和T-cadherin siRNA阴性对照组T-cadherin mRNA、细胞增殖抑制率、凋亡率、Caspase-3、Bax蛋白表达水平升高,克隆形成率、侵袭细胞数、划痕愈合率、Bcl-2、MMP-2、...     

PTEN/mTOR通路在高糖诱导的人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo凋亡中的作用机制探讨 #br#

目的 探讨高糖诱导人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo凋亡的相关机制。方法 体外培养人绒毛膜滋 养层细胞HTR-8/SVneo,分为空白对照组、高糖组、NC组（阴性对照组）、第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同 源物基因（PTEN）-siRNA 组（抑制 PTEN 表达组）及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路抑制剂（GDC-0349）组。 四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测HTR-8/SVneo细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法检测凋 亡相关蛋白及PTEN/mTOR通路相关蛋白表达情况。结果 与空白对照组比较,高糖组HTR-8/SVneo细胞增殖抑制 率、凋亡率及Bcl-2相关X蛋白（Bax）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved caspase-3）、PTEN蛋白表 达水平均显著升高（P＜0.05）,B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶（p-PI3K）/PI3K、磷酸化蛋白激酶B （p-AKT）/AKT、磷酸化 mTOR（p-mTOR）/mTOR 蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）;与高糖组、NC 组比较,PTENsiRNA组HTR-8/SVneo细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax、cleaved caspase-3、PTEN蛋白表达水平均显著降低,Bcl-2、pPI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR 蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）;与 PTEN-siRNA 组比较,GDC-0349 组 HTR-8/SVneo细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平均显著升高,Bcl-2、p-PI3K/PI3K、pAKT/AKT、p-mTOR/mTOR 蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）。结论 高糖可抑制人绒毛膜滋养层细胞 HTR-8/ SVneo增殖能力,诱导其凋亡,可能是通过上调PTEN表达、抑制PI3K/AKT/mTOR通路活化实现的。     

PGN刺激对低氧诱导RASF表达VEGF的影响

目的 观察TLR2配体肽聚糖（PGN）刺激对低氧诱导类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RASF）表达低氧诱导因子1 α（HIF-1 α）和血管内皮生长因子（VEGF）的影响.方法 分离RASF 6例,建立体外培养体系,将RASF分为对照组、CoCl2组、PGN组和CoCl2＋PGN组,qRT-PCR检测HIF-1 α表达,ELISA检测VEGF表达,siHIF-1 α后ELISA检测VEGF表达.结果 CoCl2组RASF表达HIF-1 α和VEGF水平高于对照组（P＜0.05）,PGN刺激能明显增强CoGl2诱导RASF表达HIF-1 α和VEGF的水平（P＜0.05）,干扰HIF-1 α后明显下调PGN协同CoCl2诱导RASF产生VEGF的效应（P＜0.05）.结论 TLR2信号激活能明显增强低氧诱导RASF产生VEGF的能力,干扰HIF-1 α是RA治疗的有效策略.     

缺血预适应对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马 CA1 区低氧诱导因子-1α、 血管内皮生长因子表达的影响#br#

目的 观察缺血预适应后局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血侧海马 CA1 区低氧诱导因子（HIF） -1α、 血管内皮生长因子（VEGF）表达的变化, 探讨缺血预适应的脑保护机制。方法 雄性 SD 大鼠随机分为 3 组： 假手术（SO）组、 脑缺血（MCAO）组和缺血预适应（BIP）组, 后两组按缺血后再灌注时间不同分为再灌注 2、 6、 12、 24、 48、 72 h 6 个亚组。制备大鼠局灶性脑缺血预适应模型, 采用免疫组织化学法与 Western blot 法观察脑缺血后再灌注各个时间点海马 CA1 区 HIF-1α和 VEGF 的表达变化。结果 SO 组未见神经功能缺损症状, 与 MCAO 组相比, BIP 组再灌注各时间点神经功能缺损评分低 （P＜0.05）。MCAO 组、 BIP 组 HIF-1α、 VEGF 阳性细胞及蛋白表达均于再灌注 2 h 开始增多, 6～12 h 表达递增, 24 h 表达至高峰, 随后表达减少, 72 h 表达仍高于 SO 组。两组各时间点 HIF-1α和 VEGF阳性细胞及蛋白表达均高于 SO 组 （P＜0.05）。除再灌注 2 h、 6 h MCAO 组与 BIP 组 HIF-1α的阳性细胞表达差异无统计学意义外, 2 组各时间点 VEGF 阳性细胞表达、 HIF-1α、 VEGF 蛋白表达均是 BIP 组高于 MCAO 组（P＜0.05）。结论 脑缺血预适应可能通过上调 HIF-1α、 VEGF 的表达, 发挥脑保护作用。     

缺氧诱导因子-1α对结直肠癌细胞上皮间质转化及 侵袭迁移的影响

摘要： 目的 探讨缺氧是否能促进不同分化程度结直肠癌细胞上皮间质转化 （EMT）, 并分析缺氧对结直肠癌细 胞侵袭、 迁移的影响。方法 分别选取 HCT116（低度分化）和 HT-29（高度分化）结直肠腺癌细胞。观察 0、 10、 25、 50、 100 及 150 mg/L 氯化钴 （CoCl2） 诱导 2 种细胞 48 h 后的形态变化。分析 0、 10、 25、 50 及 100 mg/L CoCl2 处理 48 h 后缺氧诱导因子 （HIF） -1α蛋白表达变化, 筛选出 CoCl2诱导细胞缺氧的最适合浓度。MTT 实验检测不同时间点 （0 、 24 、 48 、 72 及 96 h） CoCl2诱导 2 种结直肠癌细胞的增殖情况, 筛选出 CoCl2诱导缺氧的最佳时间。最佳浓度和时间 条件下, 对 HCT116 和 HT-29 细胞分别进行缺氧 （缺氧组） 和常氧 （常氧组） 处理, Transwell 侵袭和划痕实验检测 2 组 2 种细胞的侵袭、 迁移情况; Western blot 实验和 RT-PCR 实验检测 2 组 HIF-1α、 E-cadherin 及 Vimentin 的蛋白及 mRNA 表达水平。结果 50 mg/L CoCl2作用 48 h 时 2 种细胞均出现明显的形态改变。2 组 HCT116、 HT-29 细胞的 HIF-1α蛋白表达水平随 CoCl2浓度增加均呈先增后减趋势, 50 mg/L 为最适宜浓度 （P < 0.05）。0~96 h 时 2 种细胞不 论有无缺氧, 细胞增殖能力均呈先增后减趋势 （P＜0.05）, 48 h 为最佳作用时间。HCT116 和 HT-29 细胞系中缺氧组 穿膜细胞数和细胞迁移率均明显高于常氧组 （P＜0.05）。HCT116、 HT-29 细胞系中缺氧组 HIF-1α、 Vimentin 的蛋白 和 mRNA 表达水平均高于常氧组, 而 E-cadherin 的蛋白和 mRNA 表达水平低于常氧组（均 P＜0.05）。结论 缺氧 能诱导不同分化程度结直肠癌细胞均发生 EMT, 并能增强 2 种结直肠癌细胞的侵袭、 迁移能力。     

虾青素对过氧化氢诱导胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo的影响

目的观察虾青素通过烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶/活性氧(ROS)信号通路对过氧化氢(H2O2)诱导人胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo的影响。方法实验分为空白组、模型组和实验组,每组8个复孔;实验组HTR-8/SVneo细胞预先以10 nmol·L^-1虾青素处理24 h,之后实验组和模型组细胞均以250μmol·L-1H2O2作用24 h;空白组未进行任何药物干预。以噻唑蓝(MTT)法检测各组HTR-8/SVneo细胞增殖情况,以DCF-DA荧光染色检测各组HTR-8/SVneo细胞内ROS水平,检测各组HTR-8/SVneo细胞培养上清中乳酸(LDH)及氧化应激指标含量,以蛋白质印迹法检测各组细胞NADPH氧化酶4(NOX4)、p22phox蛋白表达情况。结果干预后24 h,空白组、模型组及实验组HTR-8/SVneo细胞内ROS荧光强度值分别为2.76±0.43,34.15±2.34,15.61±1.85,LDH分别为(756.24±31.05),(1785.46±34.69),(1235.26±26.75)U·L^-1,超氧化物歧化酶(SOD)分别为(23.56±2.24),(10.04±2.02),(15.16±3.08)U·mg^-1,丙二醛(MDA)分别为(0.46±0.14),(0.96±0.21),(0.68±0.13)U·mg^-1,Nox4蛋白相对表达量分别为0.32±0.04,0.89±0.06,0.64±0.03,p22phox蛋白相对表达量分别为0.15±0.03,0.75±0.04,0.49±0.02,模型组分别与空白组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论虾青素对H2O2诱导人胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo氧化应激损伤具有保护作用,可能与干扰NADPH氧化酶/ROS信号通路活性有关。     

五味子乙素对HK-2细胞缺氧损伤的保护作用

卢爱龙 1, 谭小月 2, 张勉之 3△, 吴银娜摘要： 目的 探讨五味子乙素 （Sch B） 对氯化钴 （CoCl2） 诱导的人类近端肾小管上皮 （HK-2） 细胞缺氧损伤的保护作用及其可能机制。方法 取离体培养 HK-2 细胞, 随机分为 4 组。对照 （C） 组： 细胞未经任何处理。CoCl2组 （化学乏氧组）： 加入 600 μmol/L 的 CoCl2 处理 24 h。Sch B 预保护（CoCl2+ Sch B）组： 分别加入终浓度为 1 μmol/L 和 10 μmol/L Sch B 预处理 2 h 后, 其余操作同 CoCl2 组。Sch B 组： 分别加入终浓度 1 μmol/L 和 10 μmol/L Sch B 处理 2 h。CCK-8 试剂盒检测各组细胞活性; AnnexinV-FITC/PI 双标记流式细胞仪检测各组细胞凋亡率; Western Blot 检测各组缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白表达; RT-PCR 检测各组 HIF-1α和诱导型一氧化氮合酶（iNOS） mRNA 表达。结果 与对照组相比, CoCl2组细胞活性明显降低, 细胞凋亡率、 HIF-1α蛋白表达量和 iNOS mRNA 表达量显著增加, HIF-1α mRNA 表达量差异无统计学意义; Sch B 预保护组较 CoCl2组细胞活性显著增加, 细胞凋亡率、 HIF-1α蛋白表达量、 HIF-1α及 iNOS mRNA 表达量均显著减少; Sch B 组与对照组细胞活性、 细胞凋亡率差异无统计学意义, Sch B 组几乎不表达 HIF-1α蛋白。结论 Sch B 可能通过抑制 HIF-1α蛋白和 iNOS mRNA 的表达减少 HK-2 细胞的凋亡, 从而对 HK-2 细胞缺氧损伤起保护作用。     

MTA1、MMP-9和TIMP-1蛋白与神经母细胞瘤侵袭转移相关性研究

目的探讨MTA1、MMP-9和TIMP-1蛋白与小儿神经母细胞瘤生物学行为之间的关系。方法运用免疫组化S—P法检测56例神经母细胞瘤组织中MTA1、MMP-9、TIMP—1蛋白的表达。结果56例神经母细胞瘤组织中37例MTA1阳性表达,阳性率为66．1％,MTA1高表达与神经母细胞瘤临床分期和转移关系密切（P〈0．05）;39例MMP-9蛋白阳性表达,阳性率为69．6％,MMP-9高表达与神经母细胞瘤临床分期和转移关系密切（P〈0．05）;27例TIMP—1蛋白阳性表达,阳性率为48．2％,TIMP-1低表达与神经母细胞瘤临床分期和转移关系密切（P〈0．05）;神经母细胞瘤组织中MMP-9,TIMP-1蛋白表达呈负相关（P〈0．05）。结论MTA1、MMP-9和TIMP-1蛋白表达与神经母细胞瘤恶性程度、转移和预后关系密切,可作为判断预后的指标,并有望为肿瘤靶向治疗提供理论依据。     

胰岛素样生长因子-1对氯化钴诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用

目的 探讨胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对氯化钴（CoCl2）诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12细胞凋亡的作 用及机制。方法 取对数生长期的 PC12细胞,分别以 10、20、40、80 μmol/L的 CoCl2溶液和 100、200、400 μg/L的 IGF- 1溶液处理细胞,CCK-8法检测细胞活力,得出 CoCl2和 IGF-1最佳干预浓度。根据选定的实验条件,应用 CoCl2处理 PC12细胞建立 HIE细胞模型,实验分为对照组、CoCl2处理组、IGF-1+CoCl2处理组。分组处理 24 h后采用 CCK-8法 检测细胞存活率;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞 Bax、Bcl-2及 Caspase-3的蛋白的表达 水平。最后在上述实验的基础上,设 CoCl2处理组、CoCl2+IGF-1处理组、HIF-1α抑制剂 2-甲氧雌二醇（2-MeOE2）+ CoCl 2组和 CoCl2+2-MeOE2+IGF-1组,Western blot观察 IGF-1、2-MeOE2及两者共用对 PC12细胞 HIF-1α及 Bax的表 达水平的影响。结果 CCK-8检测结果显示,40 μmol/L CoCl2和 200 μg/L IGF-1为最佳干预浓度。利用以上浓度分 组干预细胞 24 h后,与 CoCl2组相比,IGF-1+CoCl2处理组细胞存活率明显提升,TUNEL阳性细胞数和细胞比例降低, 同时抗凋亡蛋白 Bcl-2表达上调,促凋亡蛋白 Bax、Caspase-3,HIF-1α表达下调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。 应用 2-MeOE2对细胞进行预处理后,CoCl2+2-MeOE2组与 2-MeOE2+IFG-1组 HIF-1α和 Bax蛋白表达差异无统计 学意义,但均较 CoCl2+IGF-1组明显下调（P＜0.01）。结论 IGF-1可抑制 CoCl2诱导的 PC12细胞凋亡,其保护作用 可能与 HIF-1α表达下调有关。     

三七总皂苷对TNF-α诱导的肾小球系膜细胞增殖及MMPs/TIMPs表达的影响

目的 观察三七总皂苷（Panax notoginseng saponins,PNS）对TNF-α诱导的小鼠肾小球系膜细胞SV40 MES 13增殖及基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制物（MMPs/TIMPs）表达的影响。方法 采用肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)诱导SV40 MES 13细胞增殖,xCELLigence RTCA DP实时细胞分析系统记录120h细胞指数（CI）,实时荧光定量PCR法检测96hSV40 MES 13细胞MMP-2、TIMP-2mRNA表达,ELISA法检测96hSV40 MES 13细胞上清MMP-9、TIMP-1表达。结果 PNS三个剂量组均能抑制TNF-α诱导的SV40 MES 13增殖,其中96h效果最明显;PNS高、中剂量组能提高MMP-2/ TIMP-2比值和MMP-9/ TIMP-1比值,与TNF-α组比较差异显著（P<0.05）。结论 PNS能减轻TNF-α诱导的系膜细胞增殖,其机制可能与改善MMP-2/ TIMP-2、MMP-9/ TIMP-1平衡有关。     

大鼠心肌缺血再灌注损伤组织中MMP-2、9/TIMP-1、2mRNA表达比值的变化及意义

目的探讨心肌缺血再灌注损伤(MIRI)组织中基质金属蛋白酶-2、9(MMP-2、9)和组织金属蛋白酶抑制因子-1、2(TIMP-1、2)基因mRNA表达的变化规律及其临床意义。方法建立大鼠MIRI模型,采用HE、RTPCR、免疫组化、酶谱分析等方法,检测MIRI不同时相中MMP-2、9和TIMP-1、2 mRNA表达变化。结果在MIRI过程中MMP-2、9的mRNA和蛋白相对表达量呈升高趋势,二者在MIRI 8 h时表达量达高峰,与对照组(sham组)相比具有非常显著性差异(P<0.01)。TIMP-1、2的mRNA相对表达量在整个再灌注过程中增高,与sham组相比有显著性差异(P<0.05),而蛋白水平的相对表达量与sham组相比无统计学差异(P>0.05)。MMP-2、9/TIMP-1、2 mRNA表达比值趋于失衡。酶活性MMP-2在MIRI 4 h达高峰(16832.67±727.40),MMP-9在MIRI 12 h达高峰(6534.85±421.50),与sham组和MIRI 30 min组相比,二者均有非常显著性差异(P<0.01)。结论 MMP-2、9/TIMP-1、2mRNA表达比值失衡是MIRI的重要指标之一。     

miR-34a靶向MMP2对TNF-α诱导人绒毛膜滋养层细胞 HTR-8/SVneo迁移及侵袭的影响

目的 探讨微小RNA（miR）-34a靶向基质金属蛋白酶（MMP）2对肿瘤坏死因子（TNF）-α诱导人绒毛膜滋 养层细胞 HTR-8/SVneo 迁移和侵袭的影响。方法 体外培养人绒毛膜滋养层细胞 HTR-8/SVneo,利用 0.5 μg/L TNF-α刺激细胞;将细胞分为对照组、TNF-α诱导组、NC组、miR-34a mimics组、iNC组、miR-34a inhibitor组;实时荧 光定量PCR（qPCR）检测各组细胞中miR-34a、MMP2 mRNA的表达;CCK-8法、Transwell法和划痕实验分别检测各组 细胞增殖、侵袭和迁移情况;蛋白免疫印迹法检测MMP2蛋白的表达;双荧光素酶报告实验证明miR-34a和MMP2的 靶向关系。结果 与对照组比较,TNF-α 诱导组细胞 miR-34a 表达水平、细胞增殖抑制率显著升高（P＜0.05）, MMP2 mRNA和蛋白表达水平、细胞侵袭数目、细胞迁移率显著降低（P＜0.05）;与TNF-α诱导组和NC组比较,miR- 34a mimics组细胞miR-34a表达水平、细胞增殖抑制率显著升高（P＜0.05）,MMP2 mRNA和蛋白表达水平、细胞侵袭 数目、细胞迁移率显著降低（P＜0.05）;与TNF-α诱导组和iNC组比较,miR-34a inhibitor组细胞miR-34a表达水平、 细胞增殖抑制率显著降低（P＜0.05）,MMP2 mRNA和蛋白表达水平、细胞侵袭数目、细胞迁移率显著升高（P＜0.05）; miR-34a与MMP2具有靶向关系。结论 miR-34a可能通过负调控MMP2的表达抑制TNF-α诱导的人绒毛膜滋养 层细胞HTR-8/SVneo迁移和侵袭。     

三叶青提取物对人结肠癌细胞系PKO细胞VEGF和HIF—1α蛋白表达的影响

目的观察三叶青提取物对人结肠癌细胞系RKO细胞VEGF和HIF-1α蛋白表达的影响,初步探讨其可能的机制。方法采用体外细胞培养技术,用西部印迹法和免疫组化法观察三叶青提取物对RKO细胞的VEGF和HIF-1α蛋白表达改变。结果三叶青提取物能在CoCl2（150μM）模拟低氧时显著上调RKO细胞HIF-1α蛋白表达,并上调HIF-1的主要靶基因VEGF的蛋白表达水平。结论三叶青提取物对人结肠癌细胞系RKO细胞有抑制肿瘤血管形成的抗增殖作用。     

阿司匹林通过STAT3通路减轻缺氧诱导人滋养细胞HTR-8/SVneo的损伤

目的研究信号转导子和转录激活子3(STAT3)信号通路在阿司匹林减轻缺氧诱导人滋养细胞HTR-8/SVneo损伤中的作用。方法培养人滋养细胞HTR-8/SVneo并分组。对照组进行常规处理;缺氧组进行缺氧处理;阿司匹林高、低剂量组在缺氧的基础上分别给予不同剂量的阿司匹林处理。检测细胞的增殖活力、侵袭活力及增殖基因[细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、生存素(survivin)]、侵袭基因[基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)]和磷酸化信号转导子和转录激活子3(p-STAT3)的蛋白表达量。结果与对照组比较,缺氧组细胞的增殖活力的吸光度值(A₄₉₀)、侵袭细胞数量及细胞中cyclinD1、survivin、MMP-2、MMP-9和p-STAT3的蛋白表达量均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与缺氧组比较,阿司匹林高、低剂量组细胞的增殖活力A₄₉₀值、侵袭细胞数量及细胞中cyclinD1、survivin、MMP-2、MMP-9和p-STAT3的蛋白表达量均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05...     

胰腺癌细胞在低氧状态中HIF-1、VEGF蛋白的表达及可溶性VEGF水平变化的生物学意义

目的研究胰腺癌细胞在缺氧条件下HIF-1α、VEGF蛋白的表达以及可溶性VEGF的表达水平。方法利用CoCl2造成化学性缺氧,采用S-P免疫组织化学法,检测胰腺癌细胞株Patu8988、Sw1990在缺氧条件下,HIF-1α、VEGF蛋白的表达情况;应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测实验组及对照组可溶性VEGF的水平。结果实验组中可溶VEGF的水平与与缺氧时间成正相关,随缺氧时间的延长,可溶VEGF水平明显升高;缺氧9h,HIF-1α、VEGF蛋白表达明显增强。结论在缺氧条件下,HIF-1α蛋白表达与VEGF蛋白表达及可溶性VEGF分泌的升高有密切关系;HIF-1α蛋白的表达可能是肿瘤细胞适应缺氧环境、促进肿瘤性血管形成的重要因子。     

MMP-9、TIMP-1和VEGF与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系研究

目的：探讨血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和选择性抑制剂-1（TIMP-1）、血管内皮生长因子（VEGF）与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系。方法收集颈动脉粥样硬化患者360例,根据颈动脉彩色多普勒超声结果,分为易损斑块组（ n ＝122）、稳定性斑块组（ n ＝118）、无斑块组（ n ＝120）。采用酶联免疫法检测所有入组人员的血清MMP-9、TIMP-1水平、VEGF,分析血清MMP-9、TIMP-1、VEGF水平与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系。结果易损斑块组血清MMP-9、VEGF水平明显高于稳定斑块组及无斑块组,TIMP-1水平明显低于稳定斑块组及无斑块组差异有统计学意义（ P﹤0.01）;稳定斑块组血清MMP-9、VEGF水平高于无斑块组,TIMP-1水平低于无斑块组,但二者之间差异无统计学意义（ P ﹥0.05）。结论血清MMP-9、TIMP-1、VEGF水平与颈动脉粥样硬化斑块稳定性相关。     

MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2在宫颈癌中的表达

目的分析基质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9及其抑制因子1（TIMP-1）和TIMP-2在宫颈癌不同位置中的表达情况及其临床意义。方法选取经病理证实的宫颈浸润癌患者118例（ICC组）、宫颈上皮内瘤样病变患者75例（CIN组）,取病变中心组织和边缘组织;选取正常官颈组织标本45例为对照组。采用SABC法行免疫组化检测各组中MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2因子表达阳性率、染色强度和表达强度。比较各组相关因子表达情况差异。结果ICC组中MMP-2和MMP-9的阳性率、染色强度和表达强度显著高于CIN组和对照组,TIMP-1和TIMP-2的阳性率、染色强度和表达强度显著低于CIN组和对照组（P〈0．05）。在ICC组,边缘癌组织的MMP-2与MMP-9的阳性率、染色强度和表达强度明显高于中心癌组织,而TIMP-1与TIMP-2的阳性率、染色强度和表达强度明显低于中心癌组织（P〈0．05）。结论MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2与宫颈癌的发生、发展密切相关,可能在宫颈癌的侵袭与转移中发挥着重要作用。     

氯化钴低氧对黑色素瘤细胞系迁移能力及FSTL1表达分泌的影响

目的 探讨氯化钴（CoCl2）化学模拟低氧对黑色素瘤细胞系B16F10迁移的影响,以及Follistatin-like 1（FSTL1）蛋白在此过程中的转录、表达和分泌情况。方法 CoCl2模拟低氧作用于小鼠B16F10细胞,实验分为3组：0 μmol/L CoCl2对照组、50 μmol/L和100 μmol/L CoCl2处理组。用MTT法测定细胞活力;用Transwell法测定细胞迁移能力;qRT-PCR检测Fstl1 mRNA表达;Western blot检测细胞内外FSTL1蛋白表达。结果 CoCl2模拟低氧可以导致B16F10细胞存活率显著下降,并呈浓度和时间依赖性;50 μmol/L CoCl2处理组（0.158±0.006）、100 μmol/LCoCl2处理组（0.203±0.002）B16F10细胞迁移能力均明显高于对照组（0.107±0.001,均P<0.05）;50 μmol/L CoCl2处理组（1.573±0.114）、100 μmol /L CoCl2处理组（2.219±0.085）Fstl1 mRNA表达均显著高于对照组（0.962±0.054,均P<0.05）,而胞内FSTL1蛋白表达与Fstl1 mRNA表达趋势一致。同时也发现,CoCl2处理组细胞外FSTL1蛋白表达均低于对照组,且100 μmol/L CoCl2处理组几乎检测不到FSTL1表达。结论 CoCl2模拟低氧促进黑色素瘤细胞迁移,可能与FSTL1的表达和分泌有关,但其功能和作用机制还需进一步探讨。     

MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1联合检测对宫颈癌浸润转移潜能的预测价值

目的 分析基质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9及其抑制因子2（TIMP-2）和TIMP-1联合检测对宫颈癌浸润转移潜能的预测价值.方法 选取经病理证实的宫颈浸润癌患者112例（ICC组）、宫颈上皮内瘤样病变患者56例（CIN组）;同时,选取正常宫颈组织标本30例为对照组.采用SABC法行免疫组织化学检测MMP-2、MMP-9 、TIMP-2和TIMP-1的表达情况.比较3组相关因子阳性表达率的差异,并分析ICC组各因子阳性表达率与临床病理参数的关系.结果 ICC组MMP-2和MMP-9的阳性表达率显著高于CIN组和对照组,TIMP-2和TIMP-1的阳性表达率显著低于CIN组和对照组（P＜0.05）.ICC组中,MMP-2、MMP-9、TIMP-2和TIMP-1的阳性表达率与国际妇产科联盟（FIGO）分期、组织学分级、分化程度、脉管浸润和淋巴结转移有关（P＜0.05）.结论 MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-2、TIMP-1可能与宫颈癌的发生、发展有关,其可作为评估宫颈癌侵袭转移潜能的重要指标.     

ACE-siRNA对人脐静脉内皮细胞MMP-9/TIMP-1及ET-1/NO表达的影响

目的：观察血管紧张素转化酶-小分子干扰RNA( ACE-siRNA)对原代培养人脐静脉内皮细胞( HU-VECs)基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、一氧化氮(NO)、血管收缩因子内皮素-1(ET-1)表达的影响。方法培养原代HUVECs,脂质体转染ACE-siRNA入细胞,观察其对ACE mRNA和蛋白表达的影响。内皮细胞分为正常对照组,血管紧张素2刺激组( AngⅡ组)及AngⅡ刺激联合ACE-siRNA转染组( AngⅡ+siRNA组),采用半定量反转录聚合酶链反应( RT-PCR)法检测各组MMP-9及TIMP-1 mRNA表达变化,蛋白免疫印迹( West-ern blot)法检测各组MMP-9及TIMP蛋白表达;硝酸还原酶法检测NO浓度,酶联免疫吸附试验检测ET-1浓度。结果ACE-siRNA转染后48 h有效抑制ACE mRNA和蛋白表达(P<0．05)。与正常对照组比较,AngⅡ组MMP-9 mRNA、蛋白表达、MMP-9/TIMP-1比例和ET-1浓度增加,NO浓度降低(P<0．05);与AngⅡ组比较,AngⅡ+siRNA组MMP-9 mRNA、蛋白表达、MMP-9/TIMP-1比例和ET-1浓度下降,NO表达增加(P<0．05)。结论特异性ACE-siRNA可有效沉默ACE表达,增加NO释放,减少ET-1表达,下调MMP-9/TIMP-1比例。