基于肿瘤免疫微环境的弥漫大Ｂ细胞淋巴瘤预后分析

目的∶本研究探讨弥漫大B细胞淋巴瘤（difise Lrge B-ellmphama,DLBCL）免疫相关信号通路的活化及免疫细胞浸润模式,分析肿瘤免疫微环境与DLBCL.预后的关系。方法∶基于GEO数据库提取 DLBCL相关数据集的基因表达数据,分析16条免疫相关信号通路富集水平及27种免疫细胞浸润水平与患者预后的关系,并比较ABC亚型和GCB亚型DLBCL通路富集水平和免疫细胞浸润水平的差异。结果;数据集生存分析结果显示,适应性免疫系统通路、淋巴细胞活化通路、MHC Ⅱ类抗原呈递信号通路、I型干扰素信号通路、Ⅱ型干扰素信号通路、T17细胞分化信号通路、T细胞受体信号通路以及细胞黏附信号通路富集分数高的患者预后较好,其中I型干扰素信号通路在 GCB 亚型中显著富集。CD4+T淋巴细胞、CD4+效应记忆T细胞、CD4+记忆T细胞、CD8+T淋巴细胞、Thl细胞、活化树突状细胞在所有数据集中均表现为细胞浸润程度高者预后较好,嗜酸性粒细胞、M2 型巨噬细胞、中性粒细胞、Th2 细胞浸润程度高者则预后不良;中性粒细胞浸润程度在ABC 亚型中显著高于 CCB 亚型。结论∶DIBCL肿瘤微环境中的免疫细胞亚群和免疫相关信号通路与预后密切相关,此结果或可为将来基于免疫微环境的 DIBCL分型提供理论基础。     

肿瘤微环境对NK细胞功能调节的研究进展

自然杀伤(natural killer,NK)细胞作为固有免疫细胞成员之一,不仅能够通过细胞毒作用直接杀伤肿瘤细胞,还可通过释放细胞因子(如趋化因子)调节多种免疫细胞的功能,支持机体后续的适应性免疫应答.然而肿瘤细胞会通过多种机制成功规避NK细胞的识别,肿瘤微环境还能诱导多种免疫细胞功能异常,如髓系来源的抑制细胞(myeloid derived suppressorcells,MDSCs)、M2型肿瘤相关巨噬细胞(M2-tumor-associated macrophage,M2-TAM)、树突状细胞(dendritic cells,DCs)和调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)等,通过干扰NK细胞活化相关信号通路或者受体表达,抑制NK细胞的活化和抗肿瘤活性,造成肿瘤免疫逃逸.本文从NK细胞的视角,在讨论NK细胞功能的转录调控机制同时,重点综述肿瘤微环境中多种类型细胞对NK细胞功能调节的最新研究进展.     

靶向骨髓造血微环境治疗急性髓系白血病的研究进展

急性髓系白血病(AML)是造血系统的髓系原始细胞克隆性恶性增殖性疾病。尽管进行积极的联合化疗和造血干细胞移植能改善AML患者的生存, 但预后仍不理想。以往研究表明骨髓造血微环境(BMM)对白血病干细胞的异常调节是AML难以完全治愈及复发的重要因素之一。关于AML分子生物学及BMM的研究日益增多, 深入探讨急性白血病微环境的改变, 靶向干预异常的BMM有望在AML的靶向治疗及改善患者预后方面取得进展。     

间充质干细胞在骨髓增生异常综合征发生发展中的作用

骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)是以骨髓无效造血并伴有向急性髓系白血病转化风险为特点的一组造血系统肿瘤性疾病.肿瘤细胞的识别并清除,不仅需要肿瘤特异性T细胞的产生,还需要免疫细胞能够在肿瘤微环境中增殖以增加免疫细胞的数量从而控制肿瘤细胞.肿瘤细胞免于T细胞的清除说明MDS肿瘤细胞周围存在免疫抑制性微环境,其中,间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)促进MDS免疫抑制性微环境的形成,若能克服MSC对T细胞的抑制,将能促进免疫治疗改善MDS的治疗效果.笔者对近年来MSC(MDS-MSC)抑制T细胞在骨髓微环境中的增殖和效应功能、促进调节T细胞分化的研究进展进行回顾.     

髓系/自然杀伤细胞祖细胞急性白血病(附1例报道并文献复习)

目的：提高对髓系／自然杀伤细胞祖细胞(myeloid／Datural killer cell precursor,M／NKP)急性白血病的认识。方法：报告1例M／NKP急性白血病并复习相关文献。结果：M／NKP急性白血病起源于髓系和NK细胞共同的祖细胞。白血病细胞形态学特征类似急性淋巴细胞白血病L型．胞体大小不等,核圆或不规则,核仁明显,胞质苍白,无嗜天青颗粒,髓过氧化物酶(MPO)染色阴性,免疫表型特征为表达CD7,CD33,CD34,CD56和HLA-DR,其他NK细胞及T、B细胞分化抗原阴性。临床特征为髓外浸润较常见,急性髓系白血病化疗方案疗效相对较好,但预后差。结论：M／NKP急性白血病具有独特的临床和实验室特征,是有别于其他NK细胞及髓系细胞恶性疾病的一类独立疾病。     

14例老年人急性淋巴细胞白血病临床分析

对１４例老年人急性淋巴细胞白血病进行了临床观察分析，结果显示，老年人急性淋巴细胞白血病较非老年人急性淋巴细胞白血病患者起病隐匿，有白血病前期病史者多，髓外浸润较重，骨髓增生程度较低，Ｌ３型及Ｂ－ＡＬＬ多见，Ｔ－ＡＬＬ少见，治疗缓解率低，生存短，预后差。     

头颈部鳞状细胞癌中免疫细胞浸润模式与预后的相关性分析

目的:研究免疫细胞浸润模式在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的特点,探讨肿瘤浸润性免疫细胞与肿瘤预后的关系。方法:通过CIBERSORT软件计算分析肿瘤样本的基因表达谱数据,利用Kaplan-Meier方法计算浸润性免疫细胞水平与总生存期之间的关系。结果:从TCGA数据库下载HNSCC组织403例、正常样品31例的数据,经过CIBERSORT软件分析获得免疫细胞占比,经过校正后得到345例HNSCC肿瘤组织和6例正常样品的免疫细胞组成矩阵,通过Kaplan-Meier方法分析显示:嗜酸性粒细胞构成比高的患者生存期短;γδT细胞和调节性T细胞构成比高的患者生存期更长。结论:对于不同分期和分级的HNSCC患者,浸润性免疫细胞的组成存在较大的差异;嗜酸性粒细胞、γδT细胞和调节性T细胞的含量高低可以作为HNSCC的重要预后因素。     

急性白血病伴CD56阳性的临床意义

目的：探讨CD56在急性白血病中的表达及其临床意义。方法：就近2年来应用流式细胞仪检测了CD56的92例急性白血患者中发现的CD56阳性病例,分析细胞形态学、免疫表型和临床特点。结果：92例急性白血病中15例（16．3％）表达CD56,其中1例急性前髓系／NK细胞白血病（Myeloid/NK cell precursor acute leukemia),1例原始NK细胞白血病（Blastic NK cell leukemia),1例NK样T细胞淋巴瘤／白血病（NK－like T-cell lymphoma/leukemia),12例急性髓细胞白血病伴NK细胞抗原表达或急性髓系／NK细胞白血病。结论：伴CD56阳性急性白血病,其细胞形态学、免疫表型及临床表现各有特点,见于M2、M5、L2,髓外浸润多见,多预后不良。     

杂合性急性白血病7例报告

目的 :观察急性杂合性白血病的免疫标志抗原及患者的临床特点、疗效、预后 ,以探讨合适的化疗方案。方法 :1骨髓的细胞形态学 ;2白血病细胞免疫表型标记 ( APAAP)技术。结果 :急性杂合性白血病主要以淋系表达为主 ,其中 4例表达 T淋巴细胞抗原 ;急性杂合性白血病患者临床髓外浸润明显 ,且化疗效果差。结论 :急性杂合性白血病患者临床治疗效果差 ,生存期短 ,预后差 ,合适的化疗方案还有待进一步探索     

RhoA和CDC42在急性白血病的表达异常及其意义

目的 检测急性白血病(AL)患者骨髓单个核细胞中RhoA和CDC42蛋白的表达水平,探讨Rho GTP酶相关的骨髓微环境与造血干细胞相互作用异常在白血病细胞恶性行为中的作用.方法 分离并制备54例AL患者及22名正常供者的骨髓单个核细胞的细胞裂解液,应用Western blotting方法,检测其中RhoA和CDC42蛋白的相对表达量,非配对t检验分析RhoA和CDC42蛋白在AL患者和正常供者中表达的差异,Spearman分析患者RhoA和CDC42基因的蛋白表达量与临床资料的相关性.结果 初治AL患者骨髓中RhoA和CDC42的蛋白表达水平显著高于健康人,其中急性髓系白血病M2、M3,及M5亚型患者的RhoA蛋白表达升高尤为显著,M3亚型患者的CDC42蛋白表达量升高最为显著.结论 初治AL患者骨髓中RhoA和CDC42表达显著上调,提示Rho GTP酶介导的白血病细胞迁移活跃导致骨髓微环境相互作用异常在白血病发生中起作用.     

Immune infiltration in renal cell carcinoma

Immune infiltration of tumors is closely associated with clinical outcome in renal cell carcinoma (RCC). Tumor‐infiltrating immune cells (TIICs) regulate cancer progression and are appealing therapeutic targets. The purpose of this study was to determine the composition of TIICs in RCC and further reveal the independent prognostic values of TIICs. CIBERSORT, an established algorithm, was applied to estimate the proportions of 22 immune cell types based on gene expression profiles of 891 tumors. Cox regression was used to evaluate the association of TIICs and immune checkpoint modulators with overall survival (OS). We found that CD8+ T cells were associated with prolonged OS (hazard ratio [HR] = 0.09, 95% confidence interval [CI].01‐.53; P = 0.03) in chromophobe carcinoma (KICH). A higher proportion of regulatory T cells was associated with a worse outcome (HR = 1.59, 95% CI 1.23‐.06; P < 0.01) in renal clear cell carcinoma (KIRC). In renal papillary cell carcinoma (KIRP), M1 macrophages were associated with a favorable outcome (HR = .43, 95% CI .25‐.72; P < 0.01), while M2 macrophages indicated a worse outcome (HR = 2.55, 95% CI 1.45‐4.47; P < 0.01). Moreover, the immunomodulator molecules CTLA4 and LAG3 were associated with a poor prognosis in KIRC, and IDO1 and PD‐L2 were associated with a poor prognosis in KIRP. This study indicates TIICs are important determinants of prognosis in RCC meanwhile reveals potential targets and biomarkers for immunotherapy development.     

SAMHD1基因在初诊急性髓细胞白血病患者中的表达及其临床意义

目的:探讨SAMHD1基因在初诊急性髓细胞白血病（AML)患者中的表达及其临床意义。方法:实时定量PCR方法检测13例成人初诊AML患者与7例非恶性血液病患者SAMHD1 mRNA的表达,分析其临床意义。利用SPSS统计学方法分析SAMHD1基因表达高低与初诊白血病患者临床和实验室特征之间的相关性,采用Kaplan-Meier法以及COX回归模型进行多因素生存分析。结果:SAMHD1基因在AML患者中的表达低于非恶性血液病患者（P＜0.05）,且SAMHD1基因表达高低与患者性别、年龄、初诊时WBC、HGB、PLT、骨髓原始细胞百分比分布差异均无统计学意义;SAMHD1表达高低在预后良好与预后不良组间差异比较有统计学意义（P＜0.05),其中低表达组的OS低于高表达组。结论:SAMHD1基因在AML与非恶性血液病患者中表达差异具有统计学意义,且其可作为影响初诊AML患者OS的独立预后因素。     

EGR1在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的:探究早期生长反应基因1（early growth response 1,EGR1）在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法:下载并提取TCGA数据库中EGR1的表达数据;购买乳腺癌组织芯片（HBreD090CS01）,并采用免疫组织化学法检测EGR1在乳腺癌中的表达;利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析EGR1在乳腺癌中的预后价值;利用TIMER数据库分析乳腺癌中EGR1表达与免疫细胞浸润的关系。结果:相较于癌旁组织,EGR1 mRNA在乳腺癌中的表达显著下调（P＜0.001）;EGR1蛋白在45例乳腺癌组织中有18例呈低表达,27例呈高表达,在45例癌旁组织中有9例呈低表达,36例呈高表达,差异具有统计学意义（P=0.038）;EGR1表达与乳腺癌分化程度相关（P=0.003）,与患者年龄、肿瘤大小、N分期、临床分期等无关（P＞0.05）;EGR1低表达的乳腺癌患者,其无复发生存率显著低于EGR1高表达的患者（P＜0.001）,但EGR1表达与乳腺癌患者的总生存率无明显相关性（P＞0.05）;乳腺癌组织中EGR1表达与B细胞浸润水平呈负相关（P＜0.001）,与CD8+T细胞、CD4+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞浸润水平呈正相关（P＜0.001）。结论:EGR1在乳腺癌组织中的表达较癌旁组织低,且与肿瘤分化程度、预后及免疫浸润有关,有望成为乳腺癌预后评估的分子标志物及治疗的潜在靶点。     

胃癌中MET的表达及与克唑替尼敏感性的关系

目的:研究间质表皮转化生长因子受体(MET)的表达与胃癌患者的临床病理特征、生存期、靶向药物克唑替尼的敏感性的关系。方法:采用免疫组化法（IHC）检测118例经手术切除的胃癌组织MET的表达，通过三维微组织块培养法（HDRA）进行克唑替尼的体外敏感性实验。结果:35.6%的胃癌患者高表达MET。MET的表达与年龄（P=0.442）、性别（P=0.237）、肿瘤部位（P=0.101）、疾病分期（P=0.229）及组织学分级（P=0.811）无关，与Lauren分型有显著相关性（P=0.000）。MET表达水平与克唑替尼的敏感性呈正相关（P=0.009）。MET高表达者和低表达者的总生存期分别为17.3月和18.1月，两者无显著性差异（P=0.989）。结论:MET表达水平与胃癌的Lauren分型相型相关，也是预测胃癌组织对克唑替尼敏感性的潜在指标。     

急性髓系白血病中SMC3基因的表达及意义

目的:探讨急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）患者中SMC3基因表达的临床意义。方法:收集本院急性髓系白血病患者49例、缺铁性贫血（iron deficiency anemia,IDA）患者20例。应用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)法检测骨髓细胞中SMC3(structural maintenance of chromosome 3)mRNA表达,将患者分为高表达组和低表达组,分析SMC3表达水平与患者临床特征和预后分组之间的关系。结果:49例AML患者骨髓细胞标本SMC3 mRNA相对表达量高于对照组,SMC3基因表达与ELN（European Leukemia Net）AML遗传学预后分组相关（P=0.011）,高表达组中位生存时间4个月,低表达组中位生存时间为19个月,结果具有统计学显著性差异（P=0.000）。SMC3表达与年龄、性别、FAB分型、骨髓原始细胞、白细胞、血红蛋白、血小板计数均无统计学差异(P>0.05)。结论:SMC3 mRNA高表达与AML不良预后相关,作为可供筛选候补预后指标,其预后价值有待于在大样本研究中进一步验证。     

Reprograming the tumor immunologic microenvironment using neoadjuvant chemotherapy in osteosarcoma

Tumor‐infiltrating immune cells play a crucial role in tumor progression and response to treatment. However, the limited studies on infiltrating immune cells have shown inconsistent and even controversial results for osteosarcoma (OS). In addition, the dynamic changes of infiltrating immune cells after neoadjuvant chemotherapy are largely unknown. We downloaded the RNA expression matrix and clinical information of 80 OS patients from the TARGET database. CIBERSORT was used to evaluate the proportion of 22 immune cell types in patients based on gene expression data. M2 macrophages were found to be the most abundant immune cell type and were associated with improved survival in OS. Another cohort of pretreated OS samples was evaluated by immunohistochemistry to validate the results from CIBERSORT analysis. Matched biopsy and surgical samples from 27 patients were collected to investigate the dynamic change of immune cells and factors before and after neoadjuvant chemotherapy. Neoadjuvant chemotherapy was associated with increased densities of CD3+ T cells, CD8+ T cells, Ki67 + CD8+ T cells and PD‐L1+ immune cells. Moreover, HLA‐DR‐CD33+ myeloid‐derived suppressive cells (MDSC) were decreased after treatment. We determined that the application of chemotherapy may activate the local immune status and convert OS into an immune “hot” tumor. These findings provide rationale for investigating the schedule of immunotherapy treatment in OS patients in future clinical trials.     

High expression of bcl-2 mRNA as a determinant of poor prognosis in acute myeloid leukemia

Background: The bcl-2 oncoprotein is suggested to be directly involved in the emergence of drug resistance by disrupting or delaying the apoptotic program and promoting tumor survival.Patients and methods: In order to define the clinical relevance of the bcl-2 mRNA expression in acute myeloid leukemia (AML) and its correlation to therapy outcome and prognosis, we analyzed 219 AML bone marrow (BM) samples, including 119 patients with de novo AML at presentation, 37 with AML following myelodysplastic syndrome (MDS), as well as 42 BM samples of AML in relapse and 21 in complete remission (CR) using RT-PCR. For performing quantitative measurements of bcl-2 mRNA, we developed a quantitative RT-PCR.Results: Bcl-2 mRNA was detectable in 133 of 156 (84%) patients at diagnosis and 40 of 42 (95%) at relapse. AML patients with high bcl-2 mRNA expression achieved lower CR rates than those with no or low expression. Concerning the long-term outcome, the overall (OS) and disease-free survival (DFS) was significantly worse in AML patients with high expression levels of bcl-2 mRNA. The three-year OS for all newly diagnosed AML patients was 49% and 10% (P = 0.028), respectively, and 71% and 15% (P = 0.0004) for patients <60 years. Comparable significant differences were observed for the DFS.In AML following MDS and patients >60 years, the bcl-2 expression was not associated with remission rate or survival.Conclusions: The expression of bcl-2 mRNA may serve as a prognostic factor predicting remission outcome and long-term prognosis in AML.     

髓系来源的抑制性细胞在小鼠H22原位种植性肝癌中的表达及其意义

目的:比较小鼠H22原位种植性肝癌模型中髓系来源的抑制性细胞（MDSCs）和调节性T细胞（Tregs）的表达，确定主要的免疫抑制性细胞。并探讨主要免疫抑制性细胞在小鼠H22原位种植性肝癌模型中的意义。方法:建立小鼠H22原位种植性肝癌模型，用流式细胞术的方法比较外周血、脾脏、肿瘤组织中MDSCs、Tregs的比例。分析MDSCs与CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、NKT细胞的相关性。通过脾脏切除的方法下调MDSCs的表达，观察对肿瘤存活的影响。结果:MDSCs的比例无论在外周血、脾脏还是肿瘤组织中都显著高于Tregs。MDSCs的比例与CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、NKT细胞呈负相关。下调MDSCs的比例可以显著延长小鼠存活期。结论:小鼠H22原位种植性肝癌中主要的免疫抑制性细胞是MDSCs。MDSCs的高表达预示着不良的小鼠存活期。     

基于Oncomine和GEO数据库荟萃分析HMGA1在卵巢癌中的表达及其与预后的相关性

目的:探讨HMGA1在卵巢癌中的表达及其临床意义。方法:对Oncomine和GEO数据库进行检索有关HMGA1的相关信息,并对所获取的信息进行二次分析,并荟萃分析HMGA1在卵巢癌表达中的作用,最后利用GEO数据库中的Kaplan-Meier Plotter进行患者生存周期分析。结果:Oncomine数据库中共收集了449项不同类型的关于HMGA1的研究结果,在肿瘤组织与正常对照组中表达差异具有统计学意义的研究结果共54项,其中HMGA1高表达有48项,低表达有6项。进一步分析发现卵巢癌中HMGA1高表达有8项,低表达0项。这8项研究涉及HMGA1 在卵巢癌组织和正常卵巢组织中的表达,共计355例样本。通过对这8项数据集进行比较分析,发现在卵巢癌组织中HMGA1的表达量较正常卵巢组织显著升高(P<0.05)。通过进一步挖掘GEO 数据库进行Kaplan-Meier分析,我们发现卵巢癌患者HMGA1 的表达水平与卵巢癌和卵巢子宫内膜样腺癌的总生存率(OS)无显著相关性(P>0．05)。结论:我们通过对Oncomine以及GEO基因芯片数据库中肿瘤相关基因信息的深入挖掘,提出HMGA1在卵巢癌组织中高表达,但HMGA1表达量与卵巢癌预后无显著相关性。