安徽省中北部淡色库蚊对多种杀虫剂抗性及其kdr基因突变研究

目的 目的 了解安徽省中北部地区淡色库蚊对多种杀虫剂的抗药性现状及其kdr基因突变情况。方法 方法 2014年 6-9月在淮北市、 蚌埠市和滁州市3地采集淡色库蚊幼虫, 带回实验室饲养至成虫, 采用WHO成蚊接触筒药膜滤纸接触 法对其进行0.05%溴氰菊酯、 5%马拉硫磷、 0.1%噁虫威、 4%DDT抗性生物测定。以PCR扩增经溴氰菊酯抗性测定的库蚊 抗性相关kdr基因并进行测序, 统计L1014位点突变情况。结果 结果 上述3个地区淡色库蚊对溴氰菊酯、 马拉硫磷、 噁虫 威、 DDT 4种杀虫剂都产生了不同程度的抗药性, 对DDT产生的抗性较高; 虽然3地淡色库蚊接触DDT后的死亡率差异 无统计学意义 （F = 1.027,P > 0.05）; 但接触溴氰菊酯、 马拉硫磷、 噁虫威后的死亡率差异均有统计学意义 （F = 23.823、 33.955、 128.841, P均< 0.01）。3地淡色库蚊种群的kdr基因1014位点均存在L1014F、 L1014S 这2种非同义突变; L1014F 突变频率与溴氰菊酯抗性水平呈正相关 （r 2 = 0.718, P < 0.01）。结论 结论 安徽省中北部地区淡色库蚊对溴氰菊酯、 马拉硫 磷、 噁虫威、 DDT均产生了较强的抗性, kdr基因L1014F突变频率与溴氰菊酯抗性水平呈正相关; 各地区卫生部门需加强 对媒介蚊虫抗性的动态监测。     

成都市主要媒介蚊种对常用杀虫剂抗药性监测结果

本文报告了用区分剂量法、半数致死浓度法连续5年监测成都市主要媒介蚊种对化学杀虫剂（溴氰菊酯、氯菊酯、马拉硫磷、DDT）抗药性。致倦库蚊对所测杀虫剂均有明显抗药性；三带喙库蚊对马拉硫磷的抗药性明显，对溴氰菊酯和DDT存在初级抗性；中华按蚊对溴氰菊酯抗药性波动较大，但敏感性处于回升趋势，对马拉硫磷是相当敏感的，而对DDT有明显抗药性；嗜人按蚊对溴氰菊酯和DDT均敏感。     

鲁西南地区淡色库蚊抗药性评价

目的　掌握鲁西南地区现场淡色库蚊对常用化学杀虫剂的抗药性,为制定合理有效的蚊虫防治措施提供参考。方法　采用WHO生物测试法与药物复配法,2018年6-9月测试山东省西南地区济宁市、菏泽市、枣庄市淡色库蚊幼虫对氯氰菊酯、溴氰菊酯、敌敌畏（DDVP）、残杀威、三氯杀虫酯5种化学杀虫剂的抗性,以及杀虫剂混合后的共毒系数。结果　3个地区淡色库蚊对氯氰菊酯、溴氰菊酯、DDVP、残杀威、三氯杀虫酯的抗性倍数分别为144.43～557.54、118.17～445.33、6.44～19.00、2.37～8.10、0.88～2.98,除济宁与菏泽地区淡色库蚊对DDVP的抗性差异无统计学意义（P > 0.05）外, 其他差异均有统计学意义（P均 < 0.05）。氯氰菊酯 + DDVP、氯氰菊酯 + 残杀威、DDVP + 三氯杀虫酯、残杀威 + 三氯杀虫酯复配后共毒系数分别为199.58～456.95、190.56～292.37、123.32～319.24、192.31～367.32,DDVP + 残杀威复配效果不佳（共毒系数：99.87～108.36）。结论　经过几十年的化学防治,鲁西南地区淡色库蚊对常用化学杀虫剂均表现出不同程度的抗性;应采取综合防治措施控制蚊虫孳生,以延缓抗药性的发展。     

微山湖区韩庄镇淡色库蚊抗药性现状监测报告

采用WHO生物测试法,测定了微山湖区韩庄镇淡色库蚊幼虫对常用杀虫剂的抗性水平。结果显示韩庄镇淡色库蚊幼虫对残杀威、DDVP、三氯杀虫酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯等5种常用杀虫剂的LC50分别为0.4741、1.4012、0.2420、0.0034和0.0041mg·L-1,以菊酯类杀虫剂抗性最高。     

用微量板法测定淡色库蚊非特异性酯酶判别抗药性

抗药性检测是抗性治理工作的基础 ,是预防抗性产生和发展的前提[1] 。我们根据抗性产生的生化机制 ,利用微量滴定板法对实验室和现场淡色库蚊进行了单个蚊虫非特异性酯酶测定 ,以判断其抗性。材料与方法1　供试蚊虫敏感 (Ｓ)品系 :室内常规饲养的淡色库蚊。抗性品系 :在室内分别用ＤＤＶＰ、残杀威、氯氰菊酯逐代汰选的抗ＤＤＶＰ(Ｒｄ)、抗残杀威 (Ｒｐ)、抗氯氰菊酯 (Ｒｃ)品系淡色库蚊。Ｒｄ降解品系 :Ｒｄ品系淡色库蚊连续 2 0代未用药物选育 ,进行常规饲养 ,其抗性自然减退的种群。现场种群 :分别在济宁市的李营、唐口、长沟三地采集的…     

陕西省三带喙库蚊对常用杀虫剂的敏感性

目的了解陕西省三带喙库蚊对常用杀虫剂的敏感性。方法用浸渍法测定8种杀虫剂对5个地区三带喙库蚊的LC50。结果DDT、敌敌畏、氯菊酯、溴氰菊酯和双硫磷等5种杀虫剂汉滨区三带喙库蚊敏感性最高;氯氰菊酯和高效氯氰菊酯南郑县三带喙库蚊敏感性最高;残杀威陇县三带喙库蚊敏感性最高。结论敏感性测定结果可作为基础数据用于资料积累;连续开展敏感性监测,了解蚊虫抗药性趋势,有利于指导蚊虫防制。     

2020年江苏省伊蚊监测结果分析

目的 了解2020年江苏省伊蚊种群密度季节消长及对常用杀虫剂的抗药性,为虫媒传染病防治提供依据。方法2020年5—10月,在江苏省南部常州市新北区和苏州市张家港市、中部南通市海安市和盐城市盐都区、北部徐州市睢宁县和宿迁市泗洪县各选取1个自然村作为监测点,在6个监测点各选1处定点小型积水容器,每月上、下旬分别采用吸管采集伊蚊幼虫1次。所采集幼虫在实验室内饲养至成蚊后进行种群鉴定。此外,在6个监测点各选择30户居民家庭,检查室内外所有小型积水容器幼虫孳生情况,并采用布雷图指数(BI)法计算幼虫密度。在常州市金坛区翠园新村周围采集白纹伊蚊幼虫,在实验室饲养至子1代,采用成蚊接触筒强迫接触法测定雌性成蚊对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、马拉硫磷、残杀威等4种常用杀虫剂的敏感性。结果 2020年在江苏省6个监测点定点小型积水容器内共捕获伊蚊幼虫1 165条,羽化后经鉴定均为白纹伊蚊,7月捕获伊蚊幼虫数量最多。在6个监测点累计调查1 152户居民家庭,5—10月伊蚊幼虫平均BI值分别为9.58、13.20、13.71、13.20、12.18和5.58;常州市新北区伊蚊传播风险较高,其BI值高于睢宁县(H=...     

淡色库蚊敌敌畏抗性和氯氰菊酯抗性品系对常用化学杀虫剂的交互抗性

目的了解淡色库蚊对6种常用化学杀虫剂的交互抗性,为科学使用化学杀虫剂提供依据。方法采用WHO生物测定方法检测淡色库蚊敏感品系、敌敌畏抗性品系和氯氰菊酯抗性品系Ⅳ龄幼虫对三氯杀虫酯、敌敌畏、马拉硫磷、残杀威、氯氰菊酯和溴氰菊酯等6种常用化学杀虫剂的敏感性,每次测定设置7个浓度,每个浓度设2组,每组25个幼虫,24h后统计幼虫死亡数据,计算致死中浓度(median lethal concentration,LC_(50))、回归方程和抗性指数。结果淡色库蚊敌敌畏抗性品系对三氯杀虫酯、敌敌畏、马拉硫磷、残杀威、氯氰菊酯和溴氰菊醑的LC_(50)分别为1.9623mg/L、1.1607mg/L、0.7359mmg/L、0.9002mg/L、0.0220mg/L和0.000 1 mg/L,回归方程分别为Y=3.5287+5.0254X、Y=4.6962+4.693 7X、Y=5.5051+3.853 6X、Y=5.2350+5.1476X、Y=10.4995+3.3184X和Y=13.2977+2.1683X,抗性指数分别为9.25、12.17、9.14、7.93、183.47和0.71;淡色库蚊氯氰菊酯抗性品系对三氯杀虫酯、敌敌畏、马拉硫磷、残杀威、氯氰菊酯和溴氰菊酯的LC_(50)分别为5.572 8mg/L、0.2464mg/L、0.0892mg/L、0.202 7mg/L、0.064 1 mg/L和0.008 5mg/L,回归方程分别为Y=2.7728+2.9852X、Y=7.2054+3.6260X、Y=9.475 1+4.2635X、Y=6.8106+2.6125X、Y=8.7404+3.1352X和Y=14.6951+4.6853X,抗性指数分别为26.27、2.58、1.10、1.79、534.31和40.60。结论长期使用一种化学杀虫剂会导致蚊虫产生抗药性,并对其他化学杀虫剂产生不同的交互抗性,应采取合理选择杀虫剂品种和确定使用剂量等有效措施以避免蚊虫抗药性的产生。     

2021年宁波市白纹伊蚊监测结果分析

目的 分析2021年宁波市白纹伊蚊密度、分布和杀虫剂抗性,为制定登革热防控策略提供科学依据。方法2021年4—11月,于宁波市各县(市、区)均随机选取4个行政村入户调查伊蚊幼虫种群密度,计算布雷图指数(Breteau Index,BI);于各县(市、区)分别选择居民区、公园/竹林、旧轮胎堆放地/废品站/工地等3类生境开展成蚊种群密度调查。2021年6月,于2018年宁波市登革热疫点采集自然品系白纹伊蚊幼虫,经实验室饲养后,分别选取幼虫和未吸血雌蚊开展抗药性实验,对照组蚊虫为白纹伊蚊杀虫剂敏感品系。其中幼虫以浸渍法测定对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、残杀威、双硫磷和敌敌畏抗药性,计算半数致死浓度(medium lethal concentration,LC₅₀)和抗性倍数(resistance ratio,RR);成虫以接触筒法测定对高效氯氰菊酯、氯菊酯、溴氰菊酯、残杀威和马拉硫磷抗药性,计算死亡率。结果 2021年宁波市累计调查9 935户10 072个小型积水容器,其中伊蚊幼虫阳性容器1 276个,平均BI为12.89;共布帐1422顶,捕获雌性白纹伊蚊954只,平均...     

淡色库蚊对3种化学杀虫剂交互抗性的实验研究

目的 目的 了解淡色库蚊对常用化学杀虫剂的交互抗性, 为合理使用化学杀虫剂提供依据。方法 方法 采用WHO生物 测定方法, 检测淡色库蚊敏感品系和抗敌敌畏、 抗残杀威、 抗氯氰菊酯3种抗性品系IV龄幼虫分别对敌敌畏、 残杀威和氯 氰菊酯3种化学杀虫剂的抗性。 结果 结果 淡色库蚊抗敌敌畏品系对敌敌畏、 残杀威和氯氰菊酯3种化学杀虫剂的抗性系 数分别为14.47、 8.96和207.27, 抗残杀威品系对上述3种杀虫剂的抗性系数分别为3.27、 6.93和8.65, 抗氯氰菊酯品系对 3种杀虫剂的抗性系数分别为2.93、 1.61和501.11。 结论 结论 长期使用一种化学杀虫剂易产生抗性, 并对其他化学杀虫剂 产生不同程度的交互抗性。使用杀虫剂时应注意选择药物品种和剂量, 以避免和延缓蚊虫抗药性的产生。     

沃尔巴克氏体与淡色库蚊溴氰菊酯抗性关系初步研究

目的 目的 探讨沃尔巴克氏体与淡色库蚊溴氰菊酯抗性间的相关性。 方法 方法 以PCR鉴定本实验室饲养的淡色库 蚊体内的沃尔巴克氏体, 采用实时定量PCR技术 （qRT?PCR） 测定并比较淡色库蚊溴氰菊酯抗性和敏感品系中沃尔巴克 氏体表达差异。 结果 结果 本实验室饲养的淡色库蚊体内含有沃尔巴克氏体。淡色库蚊溴氰菊酯抗性品系卵、 一龄蚊、 二 龄蚊、 三龄蚊、 四龄蚊、 雌蚊、 雄蚊体内沃尔巴克氏体表达水平分别是敏感品系的18.42、 3.69、 4.43、 3.96、 6.31、 1.55、 3.76 倍, 差异均有统计学意义 （P均< 0.05）, 而抗性品系和敏感品系蛹中沃尔巴克氏体表达水平差异无统计学意义 （P > 0.05）。南京江心洲溴氰菊酯抗性雌蚊体内沃尔巴克氏体表达水平是敏感雌蚊的2.64倍。 结论 结论 沃尔巴克氏体可能与 淡色库蚊对溴氰菊酯产生抗性有关。     

南京市2013年蚊虫密度、种群及季节消长情况分析

目的了解南京市2013年蚊虫密度、种群及季节消长情况。方法按照《全国病媒生物监测方案（试行）》要求,采用诱蚊灯法在南京市开展蚊虫监测。结果 2013年南京市共捕蚊3 268只,蚊密度为0.57只/（h·灯）,捕获的蚊虫隶属2亚科4属5种,优势蚊种为淡色库蚊和三带喙库蚊,分别约占58.05%和17.59%,季节消长呈7月和10月双高峰曲线。结论南京市蚊虫具有种群多样性,淡色库蚊和三带喙库蚊为优势蚊种,每年7月和10月为密度高峰季节,可供当地蚊虫防制措施的指定提供参考。同时要关注蚊虫孳生地情况及气象因素对蚊虫密度的影响。     

盐城国家级珍禽自然保护区蚊虫密度调查与分析

目的 调查江苏省射阳县新洋港滩涂湿地盐城国家级珍禽自然保护区内外蚊虫密度及蚊种组成。 方法 2004年5～10月每两周用紫外诱蚊灯采集蚊虫1次, 鉴定蚊种、 统计数量， 记录气温、 湿度和降雨量等。 结果 自然保护区捕获蚊虫37 618只, 其中中华按蚊22 814只(占60.6%), 淡色库蚊13 970 只(占37.1%), 三带喙库蚊834 只 (占2.2%)。居民区捕获蚊虫3 294只, 其中淡色库蚊2 508只(占76.1%), 中华按蚊668只 (占20.3%), 三带喙库蚊114只 (占3.5%), 骚扰阿蚊4 只 (占0.12%)。自然保护区蚊虫总量占总采集量的92% (37 618/40 912), 居民区采集蚊虫总量占8.0% (3 294/40 912)。保护区优势蚊种为中华按蚊, 居民区为淡色库蚊。 保护区7月中、 下旬和9月中旬为蚊虫密度高峰, 蚊虫密度与气温变化呈正相关 (r=0.765, P=0.005)。 结论 滩涂湿地是中华按蚊和淡色库蚊的适宜孳生地, 7月中下旬和9月中旬为蚊虫密度高峰期。应当重视蚊媒对有关重要病原传播潜能的监测研究。     

淡色库蚊kdr等位基因突变及抗药性检测方法的研究

目的 了解山东省不同地区的淡色库蚊成蚊对溴氰菊酯的抗药性水平及其kdr等位基因的突变与抗药性水平间的关联情况,并探索建立蚊虫抗药性的现场检测方法。方法 采用RT-PCR和AS-PCR技术,使用特异性引物克隆不同地区野生淡色库蚊成蚊kdr基因序列,并进行基因测序。利用线性回归分析判断其突变情况与抗药性的关联情况。结果 成功克隆出kdr等位基因, 通过基因序列分析发现在淡色库蚊钠通道第II结构域S6节段1014位点上存在2种突变,即L1014F：TTA突变为TTT,相应的亮氨酸(L)被苯丙氨酸(F)取代,L1014S：TTA突变为TCA,相应的亮氨酸(L)被丝氨酸(S)取代。Kdr基因L1014F突变 和L1014S突变与淡色库蚊对溴氰菊酯的抗性表型呈正相关。RT-PCR和AS-PCR技术对蚊虫抗药性现场检测的结果一致。结论 淡色库蚊kdr基因突变与溴氰菊酯抗药性表型呈正相关,RT-PCR和AS-PCR技术都可以应用于蚊虫抗药性的现场检测。     

基于核糖体 DNA 第二内转录间隔区基因的 9 种蚊虫分子鉴定

目的 分析常见 9 种蚊虫核糖体 DNA 第二内转录间隔区( rDNA-ITS2 )基因序列特征,为蚊虫种类分 子鉴定方法探讨提供依据。 方法 在山东省济宁市采集淡色库蚊、三带喙库蚊、二带喙库蚊、白纹伊蚊、刺扰伊蚊、中 华按蚊、骚扰阿蚊、常型曼蚊和黄色柯蚊成蚊,形态学种类鉴定后,提取上述 9 种蚊虫 DNA,PCR 扩增 rDNA-ITS2 基 因并测序;在 GenBank 中进行同源性比对,采用 Bioedit 7. 0 软件及 DNAMAN 软件对测序结果进行比对分析,通过 DNASTAR、ClustalX 1. 81 和 Mega6 软件分析列特征并构建系统进化树探讨系统发生关系。 结果 9 种蚊虫的 rDNA- ITS2 长度在 343 bp 与 577 bp 之间,共有 59 个保守位点、449 个变异位点、235 个简约信息位点和 191 个单态位点,9 种蚊虫种间序列同源性为 28. 21% ~ 53. 76%;所有蚊虫的 rDNA-ITS2 基因分子鉴定与形态学鉴定吻合率 100%,库 蚊属的淡色库蚊、三带喙库蚊和二带喙库蚊聚成一类,伊纹属的白纹伊蚊和刺扰伊蚊聚成一类,不同种蚊虫为独立 分支。 结论 核糖体 DNA 第二内转录间隔( rDNA-ITS2 )基因可用于蚊虫属和种的鉴定。     

Vectors of Japanese encephalitis virus (JEV): species complexes of the vectors

The vectors of JEV are Cx. tritaeniorhynchus, Cx. vishnui, Cx. pseudovishnui, Cx. gelidus, Cx. fuscocephala, Cx. quinquefasciatus, Cx. pipiens pallens, Cx. bitaeniorhynchus, Cx. annulirostris, Aedes togoi, Ae. japonicus, Ae. vexans nipponii, Anopheles annularis and An. vagus. Cx. tritaeniorhynchus is in the tritaeniorhynchus complex, breeds in rice fields, ground pools in vast areas. Two types of mating behavior, eurygamy and moderate stenogamy were detected. In the case of the eurygamy type, the mosquitoes were from Southern Thailand and hilly areas near Kanchanaburi, Thailand. Female mosquitoes are usually dark in color, the cibarial armature has rod teeth and the posterior end of the cibarial armature is bowl shaped with a typical rim. The rim of the bowl is everted. The moderate stenogamy type were mosquitoes from the plain areas such as Bangkok, Ayutthaya, Suphan Buri and Saraburi. The posterior end of the cibarial armature is bowl shaped with a stout rim. The larvae were characteristic in their siphon index, antennal index, hair O of prothoracic segment, and comb scale number and arrangement. Cx. tritaeniorhynchus summorosus from Japan, Los Banos and Luzon, Philippines, differed from Cx. tritaeniorhynchus in that on the lateral plate of the phallosome tritaeniorhynchus teeth are somewhat weakly developed and only gently curved whereas in tritaeniorhynchus summorosus they are strongly developed, considerably longer, and sharply recurved. The siphons of larvae are short, the sides parallel and the apex truncate in tritaeniorhynchus whereas in tritaeniorhynchus summorosus they are long and slender. Cx. tritaeniorhynchus var. siamensis is possibly present. Colonies have been maintained in the Department of Medical Entomology for 31 generations. The characteristics are in hair O (short, less than 20 branches, and without secondary branching and the larval siphon (short and broad where the others are long). Cx. vishnui and Cx. pseudovishnui are in the vishnui complex. Cx. quinquefasciatus and Cx. pipiens pallens are in the Cx. pipiens complex comprising: (1) Cx. pipiens; (2) Cx. quinquefasciatus Say; (3) Cx. molestus Forskal; (4) Cx. pipiens pallens; (5) Cx. australicus; (6) Cx. globocoxitus. Anopheles annularis is a species complex evidenced by two types of polytene chromosomes.     

Vector competence of five common mosquito species in the People's Republic of China for Western equine encephalitis virus

Two strains of the Western equine encephalitis virus (WEEV) were first detected and isolated in China in 2001. The maintenance and transmission cycles of WEEV in China are currently not well understood, and the mosquito vectors involved in these cycles are unknown. To understand the ability of the local mosquitoes in China to transmit WEEV, the vector competence of five mosquito species, namely, Culex pipiens pallens Coquillett, Cx. p. quinquefasciatus Say, Aedes (Stegomyia) albopictus Skuse, Ae. (Stegomyia) aegypti Linnaeus, and C. tritaeniorhynchus Giles, for WEEV were evaluated. Infection rates for Cx. p. pallens, Cx. p. quinquefasciatus, Cx. tritaeniorhynchus, Ae. Albopictus, and Ae. aegypti were 46%, 60%, 80%, 37%, and 25%, respectively. Dissemination rates for the same species were 60%, 61%, 75%, 55%, and 50%, respectively. Transmission rates were 41%, 53%, 57%, and 45% for Cx. p. pallens, Cx. p. quinquefasciatus, Ae. Albopictus, and Ae. Aegypti, respectively. Infection rates were significantly different between species, but the difference between dissemination and transmission rates were nonsignificant. These results suggest that several local mosquito species in China are competent laboratory vectors for WEEV.     

基于mtDNA?COⅠ基因的山东省蚊种群遗传多样性分析

目的　探讨山东省不同地理株及实验室不同抗性品系淡色库蚊及5种常见蚊种的线粒体DNA细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（mtDNA?COⅠ）基因序列特征,分析其遗传多样性。方法　采用山东省济南、济宁、青岛等地现场采集及实验室选育的淡色库蚊成蚊,以济宁市现场采集的5种蚊（淡色库蚊、三带喙库蚊、中华按蚊、白纹伊蚊、骚扰阿蚊）作为样本,PCR扩增mtDNA?COⅠ基因并测序,分析序列特征并构建系统进化树。结果　PCR特异扩增8个不同地理株及4个实验室抗性品系的淡色库蚊mtDNA?COⅠ区域,获得长度均为528 bp的扩增片段,A+T含量为67.4%,存在两个变异位点。不同地理株淡色库蚊mtDNA?COⅠ基因同源性为99.95%,不同抗性品系淡色库蚊基因序列相同,所有蚊虫COⅠ基因具有高度保守性。5种常见蚊虫的mtDNA?COⅠ基因片段长度均为528 bp,有408个保守位点,120个变异位点,42个简约信息位点,78个单态位点,A+T含量为65.7%～68.0%,同源性分析发现蚊种间基因同源性为86.17%～92.05%,所有蚊虫的COⅠ基因分子鉴定与其形态学相吻合。系统进化关系显示,同种和同属之间呈明显的聚集,但阿蚊属成单独的分支,与其他蚊种亲缘关系较远。结论　线粒体COⅠ作为不同地理株及实验室不同品系淡色库蚊的遗传进化分子标记不够理想,但该基因具有种间和属间特异性,可用于蚊虫属和种的区分。