复合诱变选育星形孢菌素产生菌

目的提高蛋白激酶C抑制剂星形孢菌素产生菌株的发酵效价。方法以海洋来源的链霉菌Strepto-myces fradiae 007、S.arenaeZ4007和S.rubrolavendulae T H W-12为出发菌株,采用紫外线照射和亚硝基胍复合诱变,结合HPLC进行筛选。结果从菌株Streptomyces fradiae 007中得到一株高产突变株,发酵效价由原来的1.02μg.mL-1提高到9.06μg.mL-1,提高了8倍,突变株性状稳定。结论复合诱变是一种简便有效的提高菌株发酵效价的方法。     

褐产色小单孢菌——一株新的西索米星产生菌

从云南省大理县分得的一株褐产色小单孢菌,孢子层呈橄榄绿色,在酪氨酸琼脂上能产生褐色素,孢子表面有棘刺状突起,分类学鉴别它为小单孢菌属的一株新种。其主要发酵产物经提取、精制和微生物、理化特性、耐药谱及波谱学研究证明为西索米星。     

西索米星产生菌小单孢菌的诱变育种研究

用常规诱变育种方法对西索米星小单孢菌进行诱变育种，获得ＮＳ８－３０菌株，结合发酵条件研究，发酵效价比原始菌株提高１７倍以上，并在中试生产中应用。获得１株阻断型突变株７－２５，其代谢产物经光谱学分析鉴定为ＪＩ－２０Ａ，并对其代谢途径进行了讨论。     

透明质酸产生菌的诱变选育

分别以微波、超声波及微波-超声波复合诱变选育透明质酸产生菌,结果获得1株高产突变株,其透明质酸的产量较出发菌株提高了60%。经5次传代后,该菌株遗传性状稳定。     

一株L－脯氨酸产生菌的选育

以天津短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｉａｎｊｉｎｃｅｓｅ）Ｔ_（６～１３）为出发菌株，采用紫外线连续诱变处理，获得一株抗磺胺胍和利福平的Ｌ－异亮氨酸营养缺陷型ＳＦ２８菌株，该菌株摇瓶发酵产Ｌ－脯氨酸２８．５ｇ／Ｌ，经过培养基成分考查，该菌株在３２℃培养７２ｈ可产Ｌ－脯氨酸３７．８ｇ／Ｌ。     

一株L－脯氨酸产生菌的选育

以天津短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｉａｎｊｉｎｃｅｓｅ）Ｔ_（６～１３）为出发菌株，采用紫外线连续诱变处理，获得一株抗磺胺胍和利福平的Ｌ－异亮氨酸营养缺陷型ＳＦ２８菌株，该菌株摇瓶发酵产Ｌ－脯氨酸２８．５ｇ／Ｌ，经过培养基成分考查，该菌株在３２℃培养７２ｈ可产Ｌ－脯氨酸３７．８ｇ／Ｌ。     

阿弗菌素产生菌SIPI-AV-99081的选育

阿弗菌素链霉菌SIPI-AV-99081采用UV和NTG进行诱变处理。选育得到一高产菌株和几个典型的突变株。高产菌株AV-h-360的阿弗菌素B1的生产能力较出发菌株提高了3倍，AV-m-486和AV-m-796为阿弗菌素合成阻断突变株，它们都不能产生天然的阿弗菌素。     

妥布霉素产生菌诱变选育

妥布霉素产生菌——黑暗链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｔｅｎｅｂｒａｒｉｕｓ），用Ｃｏ６０辐射，再结合化学因子５－溴尿嘧啶处理，筛选到６株正变株及１株主要分泌安普霉素的突变株     

从牛胃中分离、鉴定一株新的琥珀酸产生菌

从牛胃中分离到一株新的琥珀酸产生菌。该株菌不游动 ,不形成孢子 ,嗜中温和二氧化碳的棒状或球状革兰阴性菌。依据 16 S RNA序列和生理分析的系统发育分析表明该株菌属于最近重新分类的属 (Mannheimia作为一个新的种 ) ,并被命名为 Mannheimia succiniciproducens MBEL 5 5 E。在 10 0 % CO2 的条件下 ,该株菌在 p H6 .0～ 7.5的范围内能很好生长 ,并以 2∶ 1∶ 1的恒定比例产生琥珀酸、乙酸和甲酸。当该菌在含有 2 0 g/L 葡萄糖的培养基中厌氧培养时 ,能产生 13.5 g/L 的琥珀酸。从牛胃中分离、鉴定一株新的琥珀酸产生菌@孙伟…     

多杀菌素产生菌的高通量诱变选育

目的 利用高通量筛选方法进行刺糖多孢菌诱变选育获得多杀菌素高产菌株.方法 以ASAGF73为出发菌株,通过亚硝基胍(NTG)诱变,并利用96孔板发酵培养结合快速生物测定进行高通量筛选.结果 诱变剂量为2mg/mL,诱变时间50min时突变株多杀菌素产量有较大幅度提高.通过3轮复筛验证最终获得8株产量分别比出发菌株提高了43.94％、33.76％、29.41％、28.61％、27.40％、26.42％、25.59％和20.40％的突变株.结论 利用高通量筛选方法可以快速获得多杀菌素高产菌株.     

微波诱变在药源微生物菌株选育中的应用

微波诱变是一种较新兴非电离电磁辐射物理诱变育种技术,已开始应用于农作物、植物以及微生物育种研究中,并在药源微生物产能提高以及拓展活性菌株新资源相关研究中展露出很好的应用发展前景。本文结合本课题组新近研究进展,综述了微波的生物效应与诱变机制、诱变实验方法与影响诱变效果的因素、微波诱变技术在药源微生物菌株选育研究中的应用进展等,并对微生物微波诱变育种研究现状、优势和不足以及应用发展前景进行了讨论。     

雄烯二酮高产菌的复合诱变选育

以一株雄烯二酮产生菌RADy17-22为出发菌株,先用常温室压等离子(ARTP)处理90s,再用紫外(UV)照射50s,其致死率为98.6%,正突变率为62.3%。最终选育出3株雄烯二酮高产突变株RAD17-35、RAD17-56和RAD17-79,其产雄烯二酮的能力分别较出发菌株提高了45.3%、60.9%和67.2%,经斜面接种连续传代5次,遗传性状稳定。ARTP和UV复合诱变是一种有效的育种方法。     

氨甲酰妥布霉素高产菌株的诱变选育

目的筛选氨甲酰妥布霉素高产菌株。方法通过诱变剂和诱变条件的考察,确定最佳选育手段,从而筛选到效价高、组分好的优良生产菌株。结果UV、NTG等诱变方法处理后得一稳定高产菌株,效价为2 182 U.mL-1,为出发菌株的1.3倍。结论UV、NTG诱变可明显提高菌株产量。     

1株甲基杆菌的鉴定

目的：鉴定1株在生物制品生产车间采集的菌株 wh01的种属。方法观察该菌株的形态,并用细菌鉴定仪进行检定。采用 PCR 法扩增菌株的16S rDNA 和甲醇脱氢酶大亚基的 mxaF 基因,用生物信息学软件进行分析。结果该菌株经细菌鉴定仪检定为沙门菌属,但其形态与沙门菌有很大差别,其16S rDNA 和 mxaF基因序列与甲基杆菌属序列的相似性高达99％。结论该菌株属于甲基杆菌属。     

青霉素高产菌种的推理选育

以青霉素生产菌株 2 0 #为出发菌株 ,经紫外线照射诱变处理 ,再分别用含有缬氨酸、6 -氨基青霉烷酸、苯乙酸的培养基定向筛选 ,得到高产突变菌株 4 31#。该菌株遗传特性稳定 ,代谢特性优于出发菌株 ,经生产验证 ,其发酵效价和总产量分别比对照菌株提高 7%和 7.6 %。     

青霉素产生菌的诱变育种

本试验通过用化学诱变剂对现有青霉素生产菌株232^#进行诱变育种,筛选高产菌株。试验结果表明,筛选得到的239^#茵株是优于232^#菌株的高产、稳定菌株。     

单组分茴香霉素C突变株的获得

目的对茴香霉素产生菌进行诱变,选育茴香霉素高产菌株。方法通过紫外线诱变的方式对不吸水链霉菌梧州亚种突变株112(Streptomyces ahygroscopicus subsp. Wuzhouensis 112)进行菌种选育,并使用白色念珠菌作为生物活性检定菌筛选高产突变株。结果对高产菌株的发酵产物进行分析,经TLC鉴定,茴香霉素的组分发生改变。使用乙酸乙酯和pH 3.0的酸水提取发酵液中的活性成分。再经硅胶柱层析分离,在乙酸乙酯-甲醇(体积比为10∶1)的条件下洗脱出活性成分,通过HPLC-MS分析,确定活性物质为茴香霉素C,相对分子质量为293,其对白色念珠菌的抑制作用比茴香霉素A高。结论 经筛选得到一株具有高抑菌活性的突变株。     

新型噻唑肽类抗生素产生菌SIIA-A6351的鉴定

目的 新型噻唑肽类抗生素产生菌SIIA-A6351的分类鉴定.方法 采用形态观察、生理生化、细胞壁化学类型、16S rDNA基因测序等多相特征来鉴定该菌株.结果与结论 鉴定菌株SIIA-A6351为四川游动放线菌(Actinoplanes sichuanensis),为噻唑肽类抗生素的新产生菌.     

康乐霉素C产生菌的诱变育种及其发酵的研究

康乐霉素Ｃ（简称Ｋ－Ｃ）是一个新的免疫抑制剂,但它在发酵液中含量很低,仅为０．１ｍｌ／Ｌ。为了满足药效学、毒理学试验和药代动力学所需的样品,就必须提高Ｋ－Ｃ的产量。Ｋ－Ｃ的产生菌为Ｎｏｃａｒｄｉａ ｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｉ ｖａｒ．Ｋａｎｇｌｅｎｓｉｓ １７４７－６４,用本所的自然突变株ＳＴ－９１为出发菌株（下称出发菌株）,采用紫外线诱变和自然分离纯化的方法,筛选出１株Ｋ－Ｃ的产量明显地高于出发菌     

纳他霉素产生菌基因组重排育种

Streptomyces gilvosporeus SG-1原生质体经紫外线诱变并筛选链霉素抗性菌株，获得纳他霉素高产菌株。在上述高产突变株中选择4株作为亲本进行基因组重排育种，筛选得到了高产重排菌株，其中一株重排菌株S．gilvosporeus GS-74的纳他霉素产量为3574mg／L。为产量最高的亲本菌株的153％，比原始出发菌株SG-1提高1.17倍。