miR-409-3p靶向调控RRM2抑制鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭

目的:探究微小RNA-409-3p(miR-409-3p)对鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制.方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测人永生化鼻咽上皮细胞(NP69)、鼻咽癌细胞5-8F、6-10B中miR-409-3p、核糖核苷酸还原酶M2(...     

VEGF信号通路及结直肠癌抗VEGF/VEGFR靶向治疗

化疗联合靶向药物是晚期结直肠癌的主要治疗手段。VEGF信号通路在结直肠癌发生发展中地位特殊,且针对VEGF信号通路的靶向药物临床应用广泛、疗效好。本文就VEGF信号通路及结直肠癌抗VEGF/VEGFR靶向药物作一综述。     

lncRNA DLEU2/miR-455-3p/OTUD7B轴通过PI3K/AKT信号通路促进宫颈癌恶性发展

目的:探讨长链非编码RNA DLEU2(lncRNA DLEU2,DLEU2)对宫颈癌恶性发展的影响。方法:利用TCGA数据库和qRT-PCR分析DLEU2在宫颈癌组织和细胞系中的表达。采用CCK-8、Western blotting、免疫荧光、细胞划痕、Transwell和TUNEL实验检测干扰DLEU2(sh-DLEU2)对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。生物信息学和双荧光素酶报告基因实验分析DLEU2和miR-455-3p的靶基因,评估miR-455-3p inhibitor/mimic对宫颈癌细胞生长和PI3K/AKT信号通路的影响。裸鼠荷瘤实验检测干扰DLEU2后对瘤体体内生长的影响。结果:宫颈癌组织和细胞系中DLEU2表达显著上调（P＜0.01）。sh-DLEU2可抑制Hela和SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭（P＜0.01）,促进细胞凋亡（P＜0.001）。DLEU2与miR-455-3p相结合,OTUD7B为miR-455-3p的靶基因。miR-455-3p inhibitor促进细胞恶性发展并激活PI3K/AKT信号通路,而sh-DLEU2可逆转其作用（P＜0.01）;miR-455-3p mimic也可部分逆转Oe-OTUD7B对细胞的作用（P＜0.01）。此外,sh-DLEU2抑制了裸鼠荷瘤组织的生长（P＜0.01）。结论:DLEU2通过miR-455-3p/OTUD7B轴激活PI3K/AKT信号通路促进宫颈癌的恶性发展。     

基于β-catenin/TCF4信号通路探究miR-455-3p对人结肠癌细胞增殖、凋亡及糖酵解的影响

目的 基于β-catenin/TCF4信号通路探究mi R-455-3p对人结肠癌细胞增殖、凋亡及糖酵解的影响。方法HCT116细胞转染mi R-455-3p mimics为mi R-455-3p转染组,HCT116细胞转染mi R-455-3p NC为mi R-NC组,HCT116细胞不转染任何质粒为空白组。MTT法检测各组HCT116细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;检测各组细胞糖酵解葡萄糖摄取量和乳酸生成量; Western blotting检测各组细胞中HK2、β-catenin、TCF4蛋白水平。结果 空白组和mi R-NC组细胞中mi R-455-3p表达量分别为0.99±0.09和1.01±0.10,均低于mi R-455-3p转染组的1.82±0.12,差异具有统计学意义(P<0.05)。空白组和mi R-NC组48 h吸光值(A)分别为0.75±0.05和0.78±0.06,均高于mi R-455-3p转染组的0.32±0.02,差异具有统计学意义(P<0.05)。空白组和mi R-NC组细胞凋亡率分别为(2.35±0.6)%和(2.46±0.5)...     

靶向VEGF/VEGFR通路治疗胃癌的研究进展

胃癌是目前全球最常见的恶性肿瘤之一,早期诊断率低,预后差,手术及放化疗对进展期胃癌的疗效有限。自1971年Folkman首先提出实体肿瘤的发展和转移离不开新生血管后,抗血管新生方面的研究就一直是肿瘤学的热点。血管内皮生长因子（VEGF）是已知的被多种实体肿瘤分泌的、最强的血管调控生长因子和信号传递因子,VEGF高表达是胃癌的特征之一。VEGF及其受体VEGFR在胃癌的发生、发展中发挥了重要作用。因此,靶向VEGF/VEGFR信号通路的治疗有望在胃癌的综合治疗方面取得重大突破。本文就VEGF/VEGFR信号转导路径及胃癌抗血管治疗的最新研究进展作一简要综述。     

miR-4728-3p通过PI3K/AKT信号通路调控DOT1L基因抑制乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探讨miR-4728-3p通过调控类端粒沉默干扰体-1(disruptor of telomeric silencing 1-like,DOT1L)基因对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:使用乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231及人正常乳腺细胞MCF-10A。转染MCF-7和MDA-MB-231细胞随机分为NC组(转染miR-4728-3p-NC)和敲低组(转染miR-4728-3p-inhibitor)。利用RT-qPCR技术检测不同的细胞中miR-4728-3p和DOT1L的表达量改变情况。集落克隆形成实验和EDU实验可以同时检测体内各个细胞异常增殖的情况;TUNEL荧光标记检测法和流式细胞术实验可以同时检测不同组癌细胞的凋亡变化;划痕实验和Transwell实验可以同时检测到在各个细胞内因不同处理而可能产生的细胞迁移率和侵袭力的改变;Western blot检测与细胞凋亡状态相关细胞蛋白以及与细胞通路凋亡相关细胞蛋白p-AKT和p-PI3K相对表达的含量。结果:在乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231以及SKBR3中发现miR-4728-3p和DOT1L的表达高于人正常乳腺细胞MCF-10A(P＜0.05)。转染细胞miR-4728-3p后,与NC组细胞进行实验比较,发现敲低组细胞中miR-4728-3p和DOT1L的表达量明显降低,且敲低组细胞的增殖能力明显减弱,细胞凋亡率明显升高,细胞迁移能力大大降低。敲低组的细胞凋亡活性蛋白相对表达明显发生变化。其中p-AKT与p-PI3K蛋白均被抑制激活。RT-qPCR和Western blot实验验证DOT1L是miR-4728-3p的下游靶向基因。结论:敲低miR-4728-3p可以下调DOT1L的表达从而促进乳腺癌细胞凋亡,抑制乳腺癌细胞增殖,同时使乳腺癌细胞侵袭和迁移能力减弱。     

miR-130a-3p通过HGF/MET信号通路抑制乳腺癌细胞MCF-7 侵袭

目的：探究miR-130a-3p 通过HGF/MET信号通路调控上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）影响乳腺癌细胞侵袭转移的分子机制。方法：收集承德医学院附属医院2018 年1 月至10 月收治的22 例乳腺癌患者癌组织和配对癌旁组织标本,乳腺癌细胞系（MCF-7、MDA-MB-231 和MDA-MB-453）和正常乳腺上皮细胞MCF10A来自承德医学院基础研究所,然后采用qPCR检测组织和细胞系中miR-130a-3p 的表达情况;将实验分为对照组、miR-130a-3p mimics 组、miR-130a-3p inhibitor组、PHA665752（MET小分子抑制剂）转染组及共转PHA665752+miR-130a-3p inhibitor 组,然后采用CCK-8 法和Transwell 实验分别检测MCF-7 细胞增殖活力、侵袭和迁移能力;WB实验检测MCF-7 细胞EMT和HGF/MET信号通路相关蛋白的表达情况;此外,采用双荧光素酶报告基因检测miR-130a-3p 与MET之间的靶向关系。结果：miR-130a-3p 在乳腺癌组织和细胞系中呈低表达;过表达miR-130a-3p 可抑制MCF-7 细胞增殖、侵袭、迁移和EMT;而抑制miR-130a-3p 出现相反的结果。双荧光素酶报告基因结果证实miR-130a-3p 靶向下调MET的表达水平,且miR-130a-3p 负调控HGF/MET信号通路的表达;进一步实验证明,miR-130a-3p 通过阻断HGF/MET信号通路抑制MCF-7 细胞增殖、侵袭、迁移和EMT。结论：miR-130a-3p 通过阻断HGF/MET信号通路抑制MCF-7 细胞EMT过程,进而抑制MCF-7 细胞侵袭转移。     

miR-143-3p靶向KRAS阻滞PI3K/Akt信号通路抑制分化型甲状腺癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探讨miR-143-3p对分化型甲状腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制.方法:采用qRT-PCR检测miR-143-3p在30例分化型甲状腺癌组织和对应的癌旁组织,以及人分化型甲状腺癌细胞(TCP-1、FTC-133、SW579、BCPAP)和甲状腺滤泡上皮正常细胞(Nthy-ori3-1)中的表达水平....     

miR-485-3p通过调控ATR信号通路增强MGC803细胞放射敏感性研究

目的 研究miR-485-3p对胃癌细胞MGC803放射敏感性影响及其可能作用机制。方法 将miR-485-3p mimic或ATR siRNA转染MGC803细胞后X线照射,MTT、克隆形成实验和凋亡实验观察细胞生物效应(表达检测照射6 Gy,克隆形成实验0、2、4、6、8、10 Gy)。分别用RT-PCR和蛋白印迹法检测miR-485-3p和ATR表达水平,DIANA、TargetScan和miRanda软件预测和双荧光素酶实验验证miR-485-3p对ATR靶向作用。结果 MGC803细胞放射后miR-485-3p表达下调。miR-485-3p过表达降低了细胞增殖和存活分数,增加了细胞凋亡率。经靶基因预测软件发现ATR可能是miR-485-3p靶基因,双荧光素酶实验进一步验证了ATR是miR-485-3p直接靶点。miR-485-3p负调控ATR表达,转染ATR siRNA抑制ATR信号通路后放射敏感性升高。结论 miR-485-3p可能靶向ATR,通过抑制ATR信号通路活性调节MGC803细胞放射敏感性。     

miR-409-3p在肿瘤中的研究进展

microRNA是一类内源性非编码小RNA,它通过与靶基因的3′端非翻译区(3′UTR)结合,在转录后上调其靶基因的表达,进而调控多种生物学过程。miR-409-3p属于microRNA家族的一员,随着研究的深入,越来越多的证据表明肿瘤中存在异常表达的miR-409-3p,其与肿瘤的发生发展及预后密切相关,在肿瘤细胞增殖、凋亡、血管生成、迁移、侵袭和耐药等过程中发挥重要作用而受到了广泛的关注,近年来其可能作为新的循环标志物而成为研究的热点。本文就miR-409-3p在肿瘤中的研究进展进行综述。     

miR-194-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制探讨

目的:分析miR-194-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响并探讨其机制。方法:采用生物信息学方法对miR-194-3p的表达情况以及预后信息进行统计分析。采用荧光定量PCR检测胃癌细胞系中miR-194-3p的表达情况;采用CCK-8实验、克隆形成实验和流式细胞技术检测miR-194-3p对胃癌细胞增殖和凋亡能力的影响;Western blot检测过表达miR-194-3p后Caspase3的表达情况。结果:与癌旁组织相比,miR-194-3p在胃癌组织中显著高表达。TCGA预后分析显示,miR-194-3p的高表达与良好的预后相关。与GES-1相比,miR-194-3p在6种胃癌细胞系中均显著低表达。CCK-8和克隆形成实验结果显示,与空载组相比,慢病毒转染过表达miR-194-3p后显著抑制胃癌细胞增殖。流式细胞术显示,miR-194-3p可显著促进胃癌细胞凋亡。Western blot结果显示,Caspase3的表达在miR-194-3p过表达的胃癌细胞中显著增加。结论:miR-194-3p在胃癌细胞中低表达,miR-194-3p的过表达可显著抑制胃癌细胞的增殖,并促进细胞凋亡。其中miR-194-3p促进凋亡的机制可能是通过Caspase3的凋亡相关通路发挥作用。     

PTPN6通过抑制SP1/p38 MAPK信号通路促进前列腺癌细胞的化疗敏感性

目的:研究PTPN6对前列腺癌细胞PC3的作用及其作用机制。方法:RT-PCR和Western blot实验检测前列腺癌组织和细胞以及癌旁组织和人前列腺上皮细胞中PTPN6的表达量;CCK-8和EDU染色实验检测PTPN6对前列腺癌细胞PC3增殖的影响;Western blot实验检测耐药相关蛋白P-gp和MRP-1的蛋白表达水平。结果:RT-PCR和Western blot结果显示,PTPN6在前列腺癌组织和细胞中的表达量显著低于癌旁组织和人前列腺上皮细胞中的表达量;过表达PTPN6显著抑制前列腺癌PC3细胞的增殖,并降低PC3细胞的耐药性;进一步的研究结果表明PTPN6可通过抑制SP1,并抑制p38 MAPK通路抑制PC3细胞的增殖和耐药。结论:PTPN6能够抑制前列腺癌细胞PC3的增殖和耐药,提高其化疗敏感性,作用机制是通过调控SP1/p38 MAPK信号通路来实现的,这一结果能够为临床上前列腺癌的诊断和治疗提供分子基础。     

滋肾固髓汤通过调控p38MAPK/p53信号通路诱导结直肠癌HCT-116细胞凋亡

目的:探讨滋肾固髓汤对结直肠癌HCT-116细胞凋亡的影响及其分子机制。方法:制备滋肾固髓汤含药血清,首先采用不同体积分数滋肾固髓汤含药血清处理HCT-116细胞,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性;再将HCT-116细胞分为空白组、滋肾固髓汤低、中、高剂量组、SB203580(p38MAPK抑制剂)组和高剂量滋肾固髓汤+SB203580组,分别加入相应药物进行干预后,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡的形态学变化;Annexin V-FITC流式细胞术检测细胞的凋亡水平;Western blot检测细胞中p38MAPK、磷酸化(p)-p38MAPK(Thr180/Tyr182)、鼠双微染色体2(MDM2)、p53、Cleaved caspase-3、Bax和Bcl-2等蛋白表达水平。结果:滋肾固髓汤可抑制HCT-116细胞增殖活性,并呈时间和浓度依赖性。不同浓度滋肾固髓汤处理可诱导HCT-116细胞呈现核聚集、皱缩或碎裂等凋亡形态变化,促进细胞凋亡,上调p-p38MAPK、p53、Bax和Cleaved caspase-3等蛋白表达水平,下调MDM2和Bcl-2蛋白表达水平。S...     

miR-26a抑制ST3GAL6基因介导mTOR信号通路对小鼠Lewis肺癌细胞增殖凋亡的作用机制

目的:探究miR-26a靶向调控ST3GAL6基因介导mTOR信号通路对小鼠Lewis肺癌细胞增殖凋亡的作用机制。方法:构建肺癌小鼠模型,将小鼠分为正常组和模型组;免疫组化检测ST3GAL6在肺组织中的表达情况,qRT-PCR法检测miR-26a在组织中的表达;细胞分为空白组、阴性对照组、miR-26a mimic组、miR-26a inhibitor组、si-ST3GAL6组、miR-26a inhibitor+si-ST3GAL6组和miR-26a mimic+RAD001（mTOR抑制剂）组;qRT-PCR法检测细胞中miR-26a和ST3GAL6 mRNA的表达情况;MTT法和流式细胞术分别检测各组细胞的增殖和凋亡情况;Western blot法测定各组细胞ST3GAL6、p-mTOR、Akt蛋白相对表达量。结果:miR-26a和ST3GAL6在肺癌小鼠肺癌组织中均高表达（均P<0.05）。与空白组相比,miR-26a mimic组ST3GAL6 mRNA及蛋白表达上升,Akt、p-mTOR蛋白表达上升,细胞增殖率上升、凋亡率下降（均P<0.05）;而miR-26a inhibitor组、si-ST3GAL6组和miR-26a inhibitor+si-ST3GAL6组ST3GAL6 mRNA及蛋白表达下调,Akt、p-mTOR蛋白表达下降,细胞增殖率下降、凋亡率上升（均P<0.05）。同时,miR-26a表达在miR-26a mimic组和miR-26a mimic+RAD001组中上升,miR-26a inhibitor组和miR-26a inhibitor+si-ST3GAL6组中下降（均P<0.05）。结论:miR-26a下调ST3GAL6基因,抑制mTOR信号通路活化,抑制肺癌细胞增殖及促进细胞的凋亡。     

雷公藤内酯醇通过调控miR-142-3p/HSP70通路抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移

目的：探究雷公藤内酯醇（TP）通过miR-142-3p/HSP70信号通路对人乳腺癌MCF-7细胞恶性生物学行为的影响。方法：常规培养MCF-7细胞,将其分为6组：对照组、TP组、miR-142-3p inhibitor组、TP+inhibitor组、miR-142-3p mimic组和TP+mimic组,用转染试剂将相应的核酸或质粒转染MCF-7细胞。qPCR法、EdU细胞增殖实验、Transwell小室实验、细胞划痕实验、WB法分别检测转染后各组MCF-7细胞中miR-142-3p和HSP70 mRNA的表达,MCF-7细胞的增殖、侵袭、迁移能力和HSP70蛋白表达水平。结果：TP或miR-142-3p过表达能显著促进MCF-7细胞中miR-142-3p和HSP70的表达,敲减miR-142-3p则可明显抑制MCF-7细胞中miR-142-3p和HSP70的表达,TP可逆转由敲减miR-142-3p对MCF-7细胞中miR-142-3p和HSP70表达的影响;TP、过表达miR-142-3p均可明显抑制MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力（均P<0.05）,敲减miR-142...     

miR-142-5p对人上皮性卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨miR-142-5p靶向PTEN-PI3K/Akt信号调控人上皮性卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的具体机制。方法:Real-time PCR检测miR-142-5p在人卵巢癌组织及各卵巢癌细胞系中的表达情况。利用MTT、细胞克隆形成实验观察miR-142-5p对SKOV3细胞增殖活力的影响;Caspase-3活力检测miR-142-5p对SKOV3细胞凋亡情况;信号通路抑制剂处理及Western blot检测miR-142-5p、PTEN与PI3K/Akt信号通路的关系及PI3K/Akt信号下游基因Akt、FOXO1、cyclin D1等的表达情况;Luciferase实验验证miR-142-5p和PTEN 3' UTR的结合。结果:人上皮性卵巢癌组织及其细胞系中miR-142-5p表达显著增加（P<0.05)。与对照组相比,SKOV3细胞转染miR-142-5p mimics后活细胞数量显著增加,增殖能力显著上升,细胞凋亡下降（P<0.05);与之相反的,转染miR-142-5p inhibitor后SKOV3细胞增殖能力下调,凋亡增加。信号通路抑制剂处理显示miR-142-5p过表达激活PI3K/Akt信号通路。Luciferase实验显示miR-142-5p与PTEN 3' UTR直接结合。与对照组相比,miR-142-5p mimics组PTEN表达显著降低,p-Akt蛋白表达则显著上调（P<0.05）,同时过表达PTEN后p-Akt表达则显著降低（P<0.05）。结论:miR-142-5p通过抑制PTEN基因表达活化PI3K/Akt信号通路,促进人上皮性卵巢癌组织及SKOV3细胞增殖存活,抑制细胞凋亡。