乙型肝炎病毒前C区变异与慢性乙型肝炎病理改变的相关性

目的 探讨慢性乙型肝炎中乙型肝炎病毒（HBV）前C区1896突变与肝组织病理的关系。方法 对173例慢性乙型肝炎患者进行肝活检,观察肝组织病理分级（G）和分期（S）情况,同时检测乙型肝炎病毒的e系统状态和HBV前c区1896阳性患者（20％）;随着肝组织炎症活动度和纤维化程度的进展,变异株检出率似乎有增加趋势,但无统计学意义（P＝0．98和P=0．052)。结论 HBV前C区变异在HBeAg阴性组高于HBeAg阳性组;未发现HBV前C1896变异与慢性乙型肝炎的炎症分级和纤维化分期有相关关系。     

慢性乙型肝炎肝肾阴虚证HBV基因突变点的分布规律

目的:研究慢性乙型肝炎肝肾阴虚证HBV基因突变点的分布规律。方法:基因芯片方法检测慢性乙型肝炎肝肾阴虚证患者HBV前C区基因变异。结果:慢性乙型肝炎肝肾阴虚证患者HBV前C区变异可见于多个位点,1896位点变异率为31.37%,1764位点变异率为25.49%,1762位点变异率为24.51%,1899位点变异率为12.75%,1862位点变异率为5.88%。1762、1764、1896和1899点的突变株信号值高于野生株信号值;1862点野生株信号值高于突变株信号值,差异有显著性意义(P<0.01)。结论:揭示慢性乙型肝炎肝肾阴虚证患者HBV基因突变点的分布规律,有利于进一步探讨中医药抑制HBV突变株复制的方法。     

慢性乙型肝炎前C区G1896A基因变异对HBV复制及疾病严重程度的影响

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)前C区G1896A变异对乙型肝炎病毒复制及疾病严重程度的影响。方法选取43例慢性乙型肝炎及49例乙型肝炎肝硬化患者为研究对象。采用PCR技术检测HBV前C区G1896A位点变异及乙型肝炎基因分型。同时检测HBeAg、HBV DNA定量、肝功能血清生化指标。结果(1)发生HBV前C区G1896A变异患者的年龄大于野生株感染者(P0.01),发生肝硬化的可能性更大(P0.01)。(2)随着变异株感染率的增加,HBeAg阴性率较野生株组增加(P0.01),基因C型较野生株组增加(P0.05),HBV DNA水平降低差异意义(P0.05)。结论 HBV前C区G1896A变异与HBeAg的状态,HBV DNA的复制及疾病严重程度相关。     

乙型肝炎病毒前C区和核心启动子区突变与慢性乙型肝炎病情的关系

乙型肝炎病毒（HBV）感染能导致急、慢性肝病，其中全球慢性乙型肝炎感染者近4亿。每年由于HBV慢性感染引起的肝硬化，肝细胞癌死亡患者超过47万人。而由于HBV病毒复制过程缺乏校对机制，在慢性感染的过程中发生基因突变的概率很高，相关研究最多的HBV突变株主要有：发生在翻译水平的前C区突变（G1896A）；发生在核心启动子（BCP）区，即A1762T和G1764A的联合突变；发生在HBV DNA聚合酶区的变异包括P区528、552位点的突变。研究表明，HBV前C区1896位突变以及BCP区突变普遍存在于CHB患者中，     

HBV前C区1896点突变株与野生株感染患者临床特点分析

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)前C区1896位点突变株感染的临床特点及其对干扰素治疗的反应差异。方法采用PCR法检测HBV感染者HBV前C区1896点突变,同时检测HBV M和血生化指标。结果HBV前C区1896位点突变株感染病人和野生株感染病人ALT水平分别为268.42±243.76U/L和186.78±142.75U/L,AST为279.66±241.11U/L和172.33±157.27U/L,SB为164.36±114.28μmol/L和82.83±64.39μmol/L,ALB为36.04±5.36g/L和43.27±6.17g/L(P<0.05);HBeAb阳性者和HBeAg阳性者中突变株感染占77.2%和11.3%(P<0.05);慢性重型肝炎组、肝硬化组突变株检出率分别为68.57%和44.23%,明显高于慢性肝炎轻中度组和慢性乙型肝炎重度组的25.47%和40.29%(P<0.01)。HBeAg阳性组和HBeAb阳性组突变株感染对干扰素治疗应答率分别为28.6%和20.8%,明显低于野生株感染者的44.0%和37.5%(P<0.05)。结论HBV前C区1896位点突变株感染普遍存在,突变株...     

重型乙型肝炎e抗原阴性患者前C变异株及其体外翻译

目的：探讨HBeAg阴性的慢性重型乙型肝炎患者HBV前C区变异及前C区T1862突变体对e抗原合成和分泌影响,方法：选取9例重型乙型重病毒性肝炎患者,用PCR方法扩增血清中HBV前C／C基因区,并克隆后测序和序列分析,构建HBV前C区T1862位点突变体表达质粒pGEMT,经体外翻译比较野毒株和变异株的表达产硪,结果：HBV前C区有3个位点异使氨其酸序列改变,A1896,A1899和T1862,A1899并不单独出现,前C区T1862突变并不阻止HBVe前体外合成,同时,有2例并未检测到前C区的变异,结论：部分重型肝炎HBeAg阳性原因降了T1896变异外,还存在T1862变异,前C1862突变对HBVe抗原前体蛋白合成并无影响,可能e抗原前在分泌过程中受阻。     

乙型肝炎病毒基本核心启动子和前C区突变与肝硬化肝细胞癌和非肝硬化肝细胞癌发生的关系

目的 研究慢性HBV感染者抗病毒治疗前HBV基本核心启动子(BCP)和前C区突变与肝细胞癌发生的关系.方法 收集2003年1月至2010年12月浙江省上虞市人民医院感染疾病科门诊和住院收治的慢性HBV感染患者,其中慢性乙型肝炎166例(对照),肝硬化肝细胞癌患者158例和非肝硬化肝细胞癌患者57例,采用PCR扩增后直接测序法检测HBV BCP和前C区突变,同时确定基因型.数据采用x2检验及Logistic回归分析.结果 患者以HBV基因B型为主,其中慢性乙型肝炎有124例,肝硬化肝细胞癌有126例,非肝硬化肝细胞癌有50例.以慢性乙型肝炎患者作为对照组,在单变量分析中BCP V1753突变(x2=7.927,P=0.005)、BCP T1762/A1764双突变(x2=12.796,P＜0.01)、前C区A1896突变(x2=6.890,P=0.009)和前C区A1899突变(x2=11.850,P=0.001)与肝硬化肝细胞癌的发生有关;前C区A1896突变(x2 =27.310,P＜0.01)和前C区A1899突变(x2=7.575,P=0.006)与非肝硬化肝细胞癌的发生有关.多因素Logistic回归分析发现,在HBeAg阳性患者中,BCP T1762/A1764双突变(wald=6.180,P=0.016,OR=8.883)和前C区A1899突变(wald=10.279,P=0.001,OR=7.475)是肝硬化肝细胞癌发生的危险因素;前C区A1896突变(wald=4.324,P=0.038,OR=4.439)和前C区A1899突变(wald=4.850,P=0.028,OR=6.010)是非肝硬化肝细胞癌发生的危险因素.在HBeAg阴性患者中,仅前C区A1896突变(wald=15.448,P＜0.01,OR=12.128)是非肝硬化肝细胞癌发生的危险因素.结论 BCP T1762/A1764双突变与HBeAg阳性患者的肝硬化肝细胞癌发生有关,前C区A1896突变与HBeAg阳性和阴性患者的非肝硬化肝细胞癌发生有关,前C区A1899突变与HBeAg阳性患者的肝硬化肝细胞癌和非肝硬化肝细胞癌发生有关.     

乙型肝炎病毒前C区、C启动子区、前S2区基因突变与慢性肝病的相关性

近年研究发现，乙型肝炎病毒（HBV）前C区nt1896位G→A、C启动子区（CP）nt1762、nt1764双突变、以及前S区基因突变与慢性肝炎患者病情活动和慢性化、疾病严重程度有一定关系。为此，我们分别检测无症状HBV携带者、慢性乙型肝炎患者、肝硬化患者血清HBV DNA基因序列，对前C、CP、前S2区域的突变情况与HBV不同感染状态的关系作一探讨。     

清热利湿法对慢性乙型肝炎HBV基因突变株复制的影响

目的:研究清热利湿法对慢性乙型肝炎(CHB)患者HBV前C区基因突变株复制的影响。方法:采用基因芯片技术定量检测CHB肝胆湿热/湿热中阻证患者治疗(清热利湿法)前后的HBV前C基因变异。结果:治疗前的HBV前C区1762、1764、1896位点变异率明显高于1899位点变异率,差异有显著性意义(P<0.01);治疗后各位点变异率下降,其中治疗组1764、1896位点变异率显著下降(P<0.05)。治疗前不同位点变异株信号强度1896>1764>1762>1899,差异具有显著性意义(P<0.05);治疗后1762、1764、1896位点变异株信号强度下降,其中1896位点信号强度显著下降(P<0.05)。结论:清热利湿法在改善CHB肝胆湿热/湿热中阻证患者临床证候的同时,可在一定程度上抑制HBV前C区突变株的复制。     

慢性乙型肝炎患者HBV前C区G1896A、核心启动子1762/1764变异与乙型肝炎自然史、血清HBsAg定量及疾病程度的相关性

目的研究HBV前C区G1896A、核心启动子1762/1764变异与HBV自然史、血清HBsAg水平间的相关性及对疾病严重程度的影响。方法分别各选取40例HBV野生株、前C区G1896A或核心启动子1762/1764变异以及两者联合变异的慢性乙型肝炎感染者为研究对象。采用PCR反向点杂交技术检测HBV前C区G1896A位点、核心启动子1762/1764变异及HBV基因分型。同时检测HBsAg定量、HBeAg、HBV DNA定量、肝脏生化指标等。结果(1)HBV前C区G1896A、核心启动子1762/1764变异患者的年龄、ALT高于野生株感染者(P0.001),Alb低于野生株感染者(P0.001)。(2)HBV自然史免疫耐受期以野生株感染为主(P0.001),免疫清除期、低(非)复制期野生株及PC G1896A或/和BCP1762/1764变异株差异无统计学意义(P0.05),再活动期以PC G1896A或/和BCP1762/1764变异株为主(P0.001)。(3)PC G1896A或/和BCP1762/1764变异株的HBsAg水平(lgIu/mL)、HBeAg阳性率较野生株组降低(P0.001),基因C型、HBV DNA水平(≥6 lg拷贝/mL)较野生株组差异无统计学意义(P0.05)。(4)HBV PC G1896A或/和BCP1762/1764变异中肝硬化患者多于野生株(P0.05)。结论慢性HBV感染者前C区G1896A、核心启动子1762/1764变异与乙型肝炎自然史、HBsAg水平、HBeAg的状态及疾病严重程度相关。     

家系感染乙型肝炎病毒基因变异与HLA-Ⅱ类等位基因的关系

目的研究家系内慢性乙型肝炎病毒基因变异特征及与HLA-II类分子基因多态性的关系。方法采用PCR扩增和产物测序检测HBV前C区1896位及BCP区1762/1764位变异,分析家系内慢性HBV感染者121例（实验组）病毒变异特征及与非家系慢性乙肝患者83例（对照组）病毒变异频率差异;用PCR/SSP对家系内慢性HBV感染者的HLA-DQA1和DQB1等位基因多态性进行测定;分析HLA-II类分子基因多态性与家系内慢性乙型肝炎病毒基因变异的关系。结果实验组前C区1896位变异、BCP区1762/1764位双变异及联合变异率均高于对照组;HLA-DQA1＊0501和DQB1＊0301等位基因频率和家系慢性HBV感染者前C区1896位、BCP区1762/1764位及联合变异有关;母亲为第一代的感染家系中,子女的前C区1896位及BCP区1762/1764位变异与母亲是否有该位点变异差异无显著性。结论家系感染HBV患者中,HBV前C区1896位、BCP区1762/1764位双突变及联合变异频率明显高于无家系感染的慢性乙型肝炎患者;家系内感染HBV前C区1896位、BCP区1762和1764位变异并非都是由上一代遗传或传播而来,而主要是与个体的免疫状况有关。     

慢性乙型肝炎患者HBV C基因启动子变异的临床意义

目的:探讨慢性乙型肝炎中C基因启动子(BCP)变异的临床意义。方法:采用错配PCR与限制性长度片段多态性分析(RFLP)相结合,检测35例慢性乙型肝炎患者BCP区核苷酸(nt)1762碱基A→T和1764G→A联合突变及前C区nt1896G→A终止变异。结果:在35例慢性乙型肝炎中检出BCP区T1762A1764变异8例(23％),其中6例血清HBeAg( ),2例抗HBe( ),而7例前C区A1896变异中HBeAg( )2例,抗HBe( )5例,未见T1762A1764变异和A1896变异同时出现者。结论:提示HBV毒株BCP区T1762A1764变异可能与前C区A1896变异不同,它的出现不足以导致HBeAg(—)型的慢性肝炎。     

乙型肝炎病毒前核心区及基本启动子变异对干扰素抗病毒治疗应答的影响

乙型肝炎病毒(HBV)在慢性感染过程中具有适应性和变异性的倾向,在内源性(宿主免疫清除)和外源性(疫苗、抗病毒药物)选择压力下更易产生免疫逃逸的变异株.HBV变异常出现某些特定位点,如前核心区(前C区nt1896)及启动子(BCP,nt1762/1764)变异.在HBeAg阳性患者极大多数是野生株,而HBeAg阴性患者极大多数是变异株.我们采用微流基因芯片检测280例慢性乙型肝炎患者血清前C区nt1896及BCP变异,其中94患者予干扰素α2b抗病毒治疗,进一步探讨其对慢性乙型肝炎抗病毒治疗的影响.     

慢性乙型肝炎HBV前C区基因突变与中医虚实证的关系

目的:探讨慢性乙型肝炎HBV前C区基因突变与中医虚证和实证的关系。方法:采用聚合酶链反应-单链构象多态分析(PCR-SSCP)银染技术,对91例慢性乙型肝炎患者HBV前C区基因突变进行了研究。结果:53例慢性乙型肝炎实证患者,HBV DNA阳性36例,其中前C区基因突变26例,突变率为72.2％;38例虚证患者,HBV DNA阳性16例,其中前C区基因突变6例,突变率为37.5％。两组比较有显著性差异,P<0.01。实证突变组肝功能ALT、AST和SB水平显著高于虚证突变组及未突变组,P<0.01。结论:HBV前C区基因突变与中医虚证和实证有一定的关系,实证突变率高于虚证,且实证突变组的炎症活动较虚证组剧烈。     

HBV前C区突变及干扰素抗体对干扰素疗效的影响

目的：探讨干扰素治疗与乙型肝炎病毒前C区突变（1896位点C→A点突变）及干扰素抗体的关系。方法：分别以PCR法及酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测86例慢性HBV感染患者血清中HBV前C区突变株及干扰素抗体。结果：CHB重度组检出率明显高于慢性携带者及CHB轻度组,P＜0．005;38例CHB接受干扰素治疗,突变株组和野生株组对干扰素素近期应答率相似,但突变株组复发率为70．0％,显著高于野生株组的23．1％;干扰素抗体阳性组的近期应答率38．5％,显著低于阴性组的72．0％。结论：突变感染与肝病严重程度有关,HBV前C区突变和干扰素抗体可影响干扰素的抗病毒疗效。     

基因芯片法检测HBV前C区/BCP区基因突变的意义

病毒变异是慢性乙型肝炎的重要发病机制之一，乙肝病毒(HBV)的前C区／BCP区与HBeAg生成和分泌密切相关，从而使HBV逃避机体的免疫杀伤作用。2002年6月至2003年11月，我们采用PCR技术及芯片杂交原理，对68例慢性乙型肝炎患者进行HBV前C区及BCP区A1896、A1899及nt1762／     

234例慢性乙型肝炎患者HBV前C/BCP区突变分析

目的调查慢性乙型肝炎患者血清HBV前C/基本核心启动子（BCP）区的突变情况,分析各种突变对HBeAg表达的影响。方法抽提患者血清DNA,采用改进的巢式PCR技术,扩增HBV前C/BCP区基因,对PCR产物进行DNA测序。用NTI软件比对结果,根据文献报道,选取1753、1762、1764、1862、1896和1899共6个位点进行突变分析,并重点分析不同突变对患者血清HBeAg阳性率和病情的影响。结果在234例中6个位点均无突变者为74例（31.6%）,其血清HBeAg阳性率为74.3%（55/74）。在234例中6个位点检出至少1种突变的病例为160例（68.4%）,突变形式包括4种单一位点突变和21种组合形式的突变;检出G1896A突变73例（31.2%）,其中36例检出有共存未突变序列,37例仅检出突变序列,后者血清HBeAg的阳性率为18.9%（7/37）。检出G1896A以外其他形式突变的有87例,HBeAg阳性率为63.2%（55/87）;其中以A1762T＋G1764A最为常见,HBeAg阳性率为69.4%（34/49）。在1753、1862位点上检出4种特殊碱基突变,前C区有基因片段插入或缺失的有2例。结论多数慢性乙型肝炎患者在HBV前C/BCP区可检出突变,突变形式多样,其中G1896A突变样本血清HBeAg阳性率显著下降,而其他突变对其影响较小。应用DNA序列测定法分析HBV前C/BCP区基因突变,获得的信息全面,对临床评估病情进展和实施抗病毒治疗有参考价值。     

微流芯片检测HBV前C区nt1896/BCP区nt1762基因突变的临床意义

目的探讨HBV前C区nt1896/BCPnt1762基因突变的临床意义。方法在418例血清HBeAg阴性/抗-HBe阳性的慢性乙型肝炎患者,采用微流基因芯片检测HBV前C区nt1896/BCPnt1762基因突变。同时观察血清ALT患者、HBV DNA水平和临床表现。结果nt1896变异195例(46.7%),1762变异192例(45.9%),ALT>正常上限值198例(47.4%),HBV DNA>1×105copiel/ml150例(35.8%),乏力,纳差,肝区胀痛213例(50.9%)。结论HBV前C区nt1896/BCP1762基因突变与HBeAg阴性患者ALT异常,HBV DNA升高及其临床表现具有相关性。     

乙型肝炎病毒相关慢性肝病前C区/BCP区基因突变的临床意义

实验采用PCR技术及芯片杂交原理，对65例乙型肝炎病毒(HBV)相关性慢性肝病患者进行前C区及BCP区A1896、A1899及nt1762／nt1764联合突变检测，探讨HBV相关性慢性肝病前C区／BCP区基因突变的临床意义。     

HBV前C区基因变异与中医证候的相关性研究

研究慢性乙型肝炎患者HBV前C区基因变异的变化规律与中医证候的相关机制。基因芯片检测慢性乙型肝炎不同证候的HBV前C区基因变异。不同位点变异率(%)与证候相关,肝肾阴虚1764(38%),1896(68%),1899(38%);瘀血阻络1762(93%),1764(90%),1899(50%)。不同证候变异株信号强度差异显著,1762、1764;瘀血阻络>肝肾阴虚>肝郁脾虚;1862:肝肾阴虚>肝郁脾虚;>1896:肝肾阴虚>瘀血阻络>湿热中阻>肝郁脾虚;1899:瘀血阻络>肝肾阴虚>湿热中阻>肝郁脾虚。慢性乙型肝炎HBV前C区基因变异与中医证候相关,为分子证候辨证提供了一定实验依据和研究基础。