青海地区汉族冠心病患者氯吡格雷代谢关键酶CYP2C19基因多态性分析

目的 通过分析青海地区汉族冠心病患者氯吡格雷代谢关键酶CYP2C19基因多态性，为临床抗血小板药物的个体化精准治疗提供参考。方法 选取青海地区汉族冠心病患者403例，采集患者静脉血，实时荧光定量PCR法分析CYP2C19基因序列，根据PCR结果判定CYP2C19基因型及代谢表型，Hardy-weinberg平衡检验分析数据的群体代表性，比较相关文献中不同地区间CYP2C19代谢表型。结果 403例汉族CHD患者CYP2C19*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3、CYP2C19*17等位基因频率分别为60.55%、30.77%、5.70%、2.98%;CYP2C19*1/*1、CYP2C19*1/*2、CYP2C19*1/*3、CYP2C19*2/*2、CYP2C19*2/*3、CYP2C19*3/*3、CYP2C19*1/*17、CYP2C19*2/*17、CYP2C19*3/*17、CYP2C19*17/*17基因型频率分别为40.2%、30.8%、6.7%、12.2%、4.0%、0.2%、3.2%、2.5%、0.2%。Hardy-Weinberg平衡检验显示，青海地区汉族C...     

嗜人按蚊溴氰菊酯抗性分子机理研究：Ⅲ嗜人按蚊基P450因mRNA荧光半定量RT-PCR分析

目的 探讨嗜人按蚊CYP6、CYP4基因与溴氰菊酯抗性的关系。方法 采用荧光定量RT—PCR方法，对嗜人按蚊体内CYP6和CYP4基因的mRNA进行半定量检测分析。结果 嗜人按蚊抗性品系中CYP6基因mRNA的含量约为敏感品系的1．39倍。抗性品系中CYP4基因mRNA的含量约为敏感品系的3．63倍。结论 嗜人按蚊抗性品系体内的CYP6和CYP4的mRNA量高于其敏感品系，提示嗜人按蚊溴氰菊酯产生抗性机理可能与其细胞色素P450表达量增高有关。     

淡色库蚊抗溴氰菊酯品系CYP4家族新成员基因克隆及序列分析

目的获取淡色库蚊CYP4家族新基因。方法根据CYP4氨基酸保守序列设计一对简并引物，采用RT-PCR的方法，从淡色库蚊抗溴氰菊酯品系四龄幼虫总RNA中扩增出与设计相符的基因片段。利用T／A克隆方法，将获得的基因片段克隆入pGEM-Teasy载体，经PCR鉴定重组成功，测序并进行比对。结果共克隆出36个阳性克隆，将其中9个随机挑取的阳性克隆测序及同源性分析，表明为CYP4家族中9个新的cDNA序列，由GeneBank登录上网；经国际细胞色素P450命名委员会鉴定，属CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。为进一步研究细胞色素P450的多样性及其与抗药性的关系打下基础。结论克隆9个淡色库蚊基因部分序列，被鉴定属于CYP4家族CYP4H、CYP4J亚家族。     

甲氰咪呱对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

目的研究甲氰咪呱对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响。方法通过高脂饮食制作非酒精性指肪性肝炎（NASH）动物模型，给予甲氰咪呱灌胃治疗，观察肝组织病理形态变化，进行炎症活动计分，同时测定细胞色素P450（CYP450）和细胞色素2E1（CYP2EI）含量及ALT、AST，并与对照组比较。结果与正常组比较，模型组大鼠ALT、AST及CYP450和CYP2EI含量明显升高；与模型组比较，甲氰咪呱治疗组CYP450和CYP2EI含量均明显下降，（P〈0．05），ALT、AST及炎症活动计分明显低于模型组（P〈0．05）。结论甲氰咪呱能显著改善NASH大鼠肝脏功能及形态损伤，可能通过抑制肝细胞微粒体CYP450和同功酶CYP2EI的表达发挥作用。     

淡色库蚊细胞色素P450 CYP4E2r6基因的克隆、表达及鉴定

目的克隆并表达鉴定淡色库蚊细胞色素P450(CYP4E2r6)基因。方法根据昆虫细胞色素P450氨基酸保守序列设计一对简并引物，采用RT—PCR，从淡色库蚊四龄幼虫mRNA中扩增出目的基因片段。产物经T—A克隆、测序、比对，在抗性品系高表达的CYP4E2r6亚克隆入原核表达载体pGEX-6P1，在大肠杆菌BL21中进行原核表达。将细菌总蛋白进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果14个阳性克隆中9个为CYP4新序列，由GenBank登录上网(GenBank／NCBI CB074944—51、CB270837，2003年)；经鉴定属CYP4家族CYP4H、CYP4E、CYP4J亚家族；CYP4E2r6基因已成功表达。结论获得的CYP4E2r6融合表达蛋白为进一步研究CYP4基因与抗药性之间的关系奠定基础。     

比索洛尔对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶含量及其不同亚型活性的影响

目的探讨比索洛尔对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶(CYP450)含量及CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4活性的影响。方法生理盐水为对照,大鼠灌胃给予0.9 mg·kg~(-1)·d~(-1)的比索洛尔,连续7 d,然后测定其肝微体中CYP450含量及CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4活性。结果与对照组比较,比索洛尔组CYP450含量和CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4活性的差异无统计学意义(P>0.05)。结论比索洛尔对CYP450含量和CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4活性无影响。     

细胞色素P450 2C19基因多态性与原发性肝细胞癌的相关性研究

细胞色素P450（CYP）2C19代谢美芬妥英的酶活性在人群中呈快代谢型和慢代谢型二态分布。突变型等位基因是CYP2C19基因多态性的分子生物学基础。目的：对原发性肝细胞癌（HCC）患者的CYP2C19等位基因进行基因分型．探讨CYP2C19基因多态性与原发性HCC的关系。方法：纳入48例原发性HCC患者和88名健康对照者。设计相应引物，以聚合酶链反应．限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测CYP2C19ml和CYP2C19m2突变型等位基因．对两组基因多态性进行分析比较。结果：HCC组CYP2C19慢代谢型（ml／m1和ml／m2）发生率为25．0％（12例）．与健康对照组的11．4％（10例）相比差异有统计学意义（P〈0．05，OR=3116，95％CI：1140—7113）。结论：CYP2C19慢代谢型与原发性HCC之间存在相关性，可能增加人群对HCC的易感性。     

醛固酮合成酶基因CYPllB2在肝储脂细胞中的表达

目的：检测醛固酮合成酶基因CYP11B2在肝储脂细胞中的表达。方法：异硫氰酸肛法提取RNA，逆转录扩增CYP11B2，原位杂交检测肝组织CYP11B2的表达。结果：CYP11B2的表达定位于肝储脂细胞。结论：肝储脂细胞能表达CYP11B2。     

“健脾和胃祛湿方”对大鼠肝组织CYP450酶作用和初步机制

目的从分子水平探讨"健脾和胃祛湿方"对药物代谢酶CYP450的作用.方法采用液质联用分析、Western blot及RTPCR方法测定大鼠肝微粒体及肝脏组织中CYP450酶系6种亚型(CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A4)的活性、蛋白及mRNA表达水平的影响.结果"健脾和胃祛湿方"对CYP450亚型CYP2C19、CYP2C9、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4的酶活性,蛋白及mRNA表达水平没有显著性影响;而呈剂量依赖性地降低CYP1A2酶活性,蛋白及mRNA表达水平.结论"健脾和胃祛湿方"作用于药物代谢酶CYP450亚型CYP1A2酶活性、蛋白及mRNA表达水平,对CYP450酶其他亚型没有影响.     

褪黑素对大鼠肝微粒体细胞色素P450含量及CYP1A2、CYP2C19活性的影响

目的 观察褪黑素对大鼠肝微粒体内细胞色素P450(CYP450)含量及CYP1A2、CYP2C19活性的影响.方法 生理盐水为对照,大鼠灌胃0.54 mg·kg-1·d-1的褪黑素,连续7 d,然后测定其肝微体中CYP450含量及CYP1A2、CYP2C19活性.结果 与对照组比较,褪黑家组CYP450含量和CYP1A2、CYP2C19活性无变化(P>0.05).结论 褪黑素对CYP450含量和CYP1A2、CYP2C19活性无影响.     

花生四烯酸的CYP代谢途径与心肌缺血再灌注损伤

花生四烯酸（AA）主要由环氧化酶（COX）、脂加氧酶（LOX）及细胞色素P450（CYP）途径代谢。近年来发现，AA的CYP代谢途径与心肌缺血再灌注（MIR）损伤的关系密切。本文就AA的CYP代谢酶在心脏中的表达、CYP代谢途径对MIR的影响及作用机制做一综述。     

淡色库蚊细胞色素P450基因的克隆、序列分析及表达差异的鉴定

目的克隆淡色库蚊细胞色素P450（CYP6F1）基因并进行表达差异的鉴定。方法采用RT—PCR技术和RACE策略，从淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系4龄幼虫中克隆细胞色素P450基因（CYP6F1），用相应的软件进行生物信息学分析，并用实时定量PCR和RT—PCR分析敏感、抗性品系蚊的CYP6F1表达水平及对蚊各期CYP6F1进行表达鉴定。结果成功克隆出CYP6F1基因，基因全长1639bp，开放阅读框为1527bp，编码508个氨基酸（GenBank登录号：AY662654）。序列分析显示该基因与已克隆的日本致倦库蚊细胞色素P450基因（AB001324）有99％的同源性，并具有所有的细胞色素P450基因的保守性特征，1个膜锚定信号、2个还原酶结合位点、1个典型的血红素蛋白结合位点和ETLR基序等。实时定量PCR和半定量RT—PCR结果表明，CYP6F1在淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系中表达水平高于敏感品系，且CYP6F1基因在淡色库蚊各个发育阶段有不同的表达。结论CYP6F1基因可能与杀虫剂抗药性相关，并且在淡色库蚊各个发育阶段有不同的表达。     

褪黑素对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶亚型CYP2C9、CYP2D6、CYP3A4活性的影响

目的 观察褪黑素对大鼠肝微粒体内细胞色素P450 (CYP450) 酶亚型CYP2C9、CYP2D6、CYP3A4活性的影响.方法 以生理盐水为对照,大鼠灌胃0.54 mg·kg-1·d-1的褪黑素,连续7 d,然后测定其肝微体中CYP2C9、CYP2D6、CYP3A4活性.结果 与对照组比较,褪黑素组CYP2C9、CYP2D6、CYP3A4的活性无变化(P>0.05).结论 褪黑素对CYP450酶 CYP2C9、CYP2D6、CYP3A4活性无影响.     

O-去甲基文拉法辛对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶亚型CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19活性的影响

目的研究O-去甲基文拉法辛(ODV)对大鼠肝微粒体内细胞色素P450酶CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19活性的影响。方法以生理盐水为对照,大鼠每日灌胃给予22.90 mg/kg的O-去甲基文拉法辛琥珀酸盐水合物,连续7 d,然后测定其肝微体CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19的活性。结果与生理盐水对照组比较,ODV组CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19活性无变化(P>0.05)。结论 ODV对大鼠CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19活性无影响。     

O-去甲基文拉法辛对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶含量及CYP2D6、CYP3A4活性的影响

目的研究O-去甲基文拉法辛对大鼠肝微粒体内细胞色素P450(CYP450)含量及CYP2D6、CYP3A4活性的影响。方法生理盐水为对照,大鼠灌胃22.90mg.kg-1.d-1的O-去甲基文拉法辛琥珀酸盐一水合物,连续7d,然后测定其肝微体中CYP450含量及CYP2D6、CYP3A4活性。结果与生理盐水组比较,ODV组CYP450含量和CYP3A4活性无变化(P>0.05),CYP2D6活性明显被抑制(P<0.01)。结论ODV对CYP450含量和CYP3A4活性无影响,但对CYP2D6活性有抑制作用。     

花生四烯酸细胞色素P450代谢途径在高血压中作用的研究进展

花生四烯酸是人体必须脂肪酸之一，其代谢产物具有较强生物学活性并在众多生理病理过程中发挥着重要调节作用。其在人体内主要通过环氧化酶、脂氧化酶、细胞色素P450（CYP）三大途径进行代谢。其中，越来越多的研究表明，CYP代谢途径中其关键基因CYP通过调控经ω-羟化酶、表氧化酶作用的下游产物20羟-二十烷四烯酸及表氧一二十碳三烯酸的质／量，从而影响高血压的发生发展，并且对其分子生物学机制及遗传学的研究亦成为当前的研究焦点。本文主要对CYP途径在高血压中的作用简要做一综述。     

氯吡格雷药物代谢相关基因CYP2C19多态性对冠心病PCI术后患者主要心血管不良事件的影响

【摘要】目的：探讨氯吡格雷药物代谢相关基因CYP2C19多态性对冠心病PCI术后患者主要心血管不良事件（MACE）的影响。 方法：选取我院2012年8月至2015年8月经冠状动脉造影诊断为冠心病且成功行经皮冠状动脉介入治疗（PCI术）的患者282例，术后均对患者随访12个月，并根据是否发生MACE分为MACE发生组（试验组，n=82）和未发生组（对照组，n=200）。所有患者于PCI术前采用聚合酶链反应和基因测序法检测CYP2C19多态性。对两组患者基本临床资料、实验室指标、CYP2C19基因分布及用药情况进行分析。 结果 两组患者在基本临床资料比较中仅糖尿病病史差异有统计学意义（P＜0.05）。实验室指标及药物使用情况比较差异无统计学意义（P >0.05），具有可比性。两组患者CYP2C19基因多态性分布（正常代谢型、中间代谢型及弱代谢型）比较差异有统计学意义（P＜0.05），且MACE组患者CYP2C19*2或CYP2C19*3携带频数明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。Logistic回归分析显示PCI术后MACE的发生与糖尿病病史、CYP2C19基因均有相关性（P＜0.05），且二者均为危险因素。结论 携带CYP2C19*2或CYP2C19*3基因的冠心病PCI术后患者MACE的发生率增加。     

不同细胞色素P4502C19基因型肝病合并消化性溃疡患者泮托拉唑钠血药浓度测定

细胞色素P4502C19（CYP2C19）基因多态性对第一代质子泵抑制剂（PPI）的代谢有直接影响。CYP2C19的表达具有肝脏特异性。目的：观察不同CYP2C19基因型肝病合并消化性溃疡患者泮托拉唑钠代谢的差异，探讨肝脏病变对CYP2C19活性的影响。方法：合并消化性溃疡的2l例原发性肝癌患者和22例脂肪肝患者纳入研究，25名健康志愿者作为对照。受试者口服泮托拉唑钠40mg／d一周，分别于服药ld和7d后采血，以反相高效液相色谱法测定血浆泮托拉唑钠浓度。结果：服药7d后，健康对照组、脂肪肝组和原发性肝癌组CYP2C19强代谢者的血浆泮托拉唑钠浓度均显著低于弱代谢者（P〈0．05）。无论是强代谢者还是弱代谢者，服药7d后血浆泮托拉唑钠浓度均表现为原发性肝癌组〉脂肪肝组〉健康对照组（P〈O．05）。结论：CYP2C19活性与肝病严重程度呈负相关。终末期肝病患者泮托拉唑钠血药浓度明显升高，尤其是CYP2C19弱代谢者。     

O-去甲基文拉法辛对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶亚型CYPlA2、CYP2C9、CYP2C19活性的影响

目的 研究O-去甲基文拉法辛(ODV)对大鼠肝微粒体内细胞色素P450酶CYP1A2、CYP2C9 、CYP2C19活性的影响.方法 以生理盐水为对照,大鼠每日灌胃给予22.90 mg/kg的O-去甲基文拉法辛琥珀酸盐水合物,连续7d,然后测定其肝徽体CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19的活性.结果 与生理盐水对照组比较,ODV组CYPlA2、CYP2C9、CYP2C19活性无变化(P＞0.05).结论 ODV对大鼠CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19活性无影响.     

活血化痰基础方对大鼠非酒精性脂肪肝模型CYP2E1活性的影响

目的：观察活血化瘀基础方对大鼠非酒精性脂肪肝模型肝细胞色素酶CYP2E1活性的影响。通过以方测证探讨活血与化痰法在非酒精性脂肪肝治疗中的作用机制及治疗规律。方法：制备大鼠非酒精性脂肪肝模型。用二陈汤、桃红四物汤及其合方分别治疗。实验结束后，检测肝细胞微粒体蛋白含量以及CYP2E1活性。结果：脂肪肝大鼠存在明显的肝细胞微粒体蛋白降低以及CYP2E1活性增强。二陈汤对脂肪肝大鼠肝细胞微粒体蛋白具有明显升高作用；而对CYP2E1活性则具有明显降低作用。从均数上看，其他两组也有一定的治疗作用，桃红四物汤组略优于二陈汤合桃红四物汤组。结论：化痰方具有明显地降低脂肪肝大鼠CYP2E1活性的作用；活血方以及活血化痰方虽有一定的作用，但趋势不明显。