贯叶金丝桃愈伤组织的诱导及其有效成分的定性

目的 :诱导出贯叶金丝桃的愈伤组织 ,并确定其中含有金丝桃素。方法 :在不同条件下采用组织培养技术 ,进行贯叶金丝桃的愈伤组织诱导研究 ,用HPLC方法确定其中含有的金丝桃素。结果和结论 :最佳诱导条件是MS基本培养基加入生长调节物质2 ,4-D(4μg·L^-1)和 6-BA(0.2μg·L^-1)。叶腋等分生组织较多的部位易于诱导愈伤组织。诱导出的愈伤组织 ,经HPLC方法确定其含金丝桃素。     

贯叶金丝桃愈伤组织的诱导及其有效成分的定性

目的 :诱导出贯叶金丝桃的愈伤组织 ,并确定其中含有金丝桃素。方法 :在不同条件下采用组织培养技术 ,进行贯叶金丝桃的愈伤组织诱导研究 ,用HPLC方法确定其中含有的金丝桃素。结果和结论 :最佳诱导条件是MS基本培养基加入生长调节物质 2 ,4 D(4μg·L- 1 )和 6 BA(0 .2 μg·L- 1 )。叶腋等分生组织较多的部位易于诱导愈伤组织。诱导出的愈伤组织 ,经HPLC方法确定其含金丝桃素     

高效液相色谱法测定贯叶金丝桃药材及无菌苗中金丝桃素的含量

目的 :建立贯叶金丝桃药材中金丝桃素含量测定方法 ,并对不同产地贯叶金丝桃药材和无菌苗中金丝桃素的含量进行测定。方法 :样品用甲醇 吡啶 (9∶1)超声提取 ,液相条件为HypersilyODS2 柱 (4.6mm× 150mm ,5μm) ;流动相甲醇 1.56%磷酸二氢钠缓冲液 (用磷酸调pH值为 2.1) 醋酸乙酯 (4∶1.9∶1) ;流速 1mL·min^-1;柱温 35℃ ;检测波长 590nm。结果 :金丝桃素与杂质分离效果较好 ,在0.0 524～ 0.2620μg内 ,进样量与峰面积呈线性 (r=0.9998) ,加样回收率为 97.50 %。结论 :贯叶金丝药材中金丝桃素含量与药材的遗传因素、环境因素、生长期以及干燥方式有关 ,同时该方法可作为贯叶金丝桃药材的质量控制方法.     

聚酰胺树脂吸附纯化贯叶金丝桃中金丝桃苷的研究

目的:研究聚酰胺树脂纯化贯叶金丝桃中金丝桃苷的工艺条件。方法:采用HPLC法测定金丝桃苷的含量;单因素法考察聚酰胺树脂对金丝桃苷的吸附性能以及洗脱参数。结果:聚酰胺树脂对提取液中金丝桃苷的最佳分离条件为:上柱液浓度为1.2mg·mL^-1、流速为3.6BV·h^-1,金丝桃苷比吸附量达2.33mg·g^-1,金丝桃苷纯度可达28.96%。结论:聚酰胺树脂可用于贯叶金丝桃中金丝桃苷的分离富集。     

贯叶金丝桃的细胞培养

从贯叶金丝桃叶的嫩茎诱导愈伤组织的过程,探讨了悬浮培养和平板培养的方法,以及细胞悬浮培养时间、培养方法和接种密集度对贯叶金丝桃单细胞平板培养植板率的影响。在所实验的ＭＳ、Ｂ５、Ｗｈｉｔｅ３种培养基中,以ＭＳ培养基较好,其中ＭＳ＋２,４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ １ ｍｇ／ｌ培养基愈伤组织诱导率为９２．８６％。细胞悬浮培养以Ｂ５培养基较好。普通单细胞平板培养法培养贯叶金丝桃单细胞的植板率很低,而以悬浮     

元宝草金丝桃素含量的分析

目的 :了解元宝草中不同部位金丝桃素含量。方法 :建立了用HPLC法测定元宝草和贯叶连翘不同部位中金丝桃素含量的方法。NovapakC1 8柱 ;流动相 :甲醇∶乙醇∶0 .1mmol·L - 1NaH2 SO4 (2 0 0∶30 0∶1 0 0 ) ;流速 1 .0mL·min- 1 ;柱温 30°C ;检测波长 588nm。结果 :元宝草有花植株和花中金丝桃素的含量与贯叶连翘基本相近。结论 :有可能从之宝草中筛选出金丝桃素含量更高的植株     

几种金丝桃属药用植物的金丝桃苷含量测定

目的:比较金丝桃属药用植物中金丝桃苷含量,为筛选新的药用品种以及为定量评价提供参考依据.方法:采用HPLC法测定金丝桃属3组5种1亚种金丝桃苷的含量.结果:金丝桃苷的进样量在0.101～2.023μg范围内峰面积值与进样量之间线性关系良好,平均回收率为96.527%.贯叶连翘的含量最高1.257%,其次是川滇金丝桃0.461%,含量最低是元宝草0.137%.结论:本方法的稳定性和重现性较好,可作为药材的品质评价方法之一.贯叶连翘、川滇金丝桃等金丝桃属药用植物有进一步研究、开发价值.     

贯叶金丝桃滴丸的提取工艺优选

目的:优选贯叶金丝桃滴丸的提取工艺,为该制剂的剂型改制提供参考。方法:利用药效学试验比较贯叶金丝桃滴丸水提物和醇提物对小鼠感染病毒肺指数的影响,筛选提取方式。以金丝桃苷、绵马贯众素及黄芩苷提取量的综合评分为指标,采用正交试验考察乙醇体积分数、溶剂用量、提取时间及提取次数对贯叶金丝桃滴丸提取工艺的影响。采用HPLC测定金丝桃苷、绵马贯众素及黄芩苷含量,流动相乙腈-0.2%磷酸水溶液(15∶85),检测波长280 nm。结果:最佳提取工艺为加8倍量70%乙醇回流提取3次,每次1.5 h。金丝桃苷、绵马贯众素及黄芩苷提取量分别为1.50,74.57,167.23 mg·g-1。结论:优选的提取工艺稳定可行,适用于贯叶金丝桃滴丸的工业化生产。     

091 单次量或多次口服含贯叶金丝桃提取物的片剂后，金丝桃素等5种成分生物利用度的Ⅰ期临床观察

作者进行了2项开放性临床观察，研究了单次量或多次口服含贯叶金丝桃提取物（STW-3，Lair600）的片剂后，金丝桃素、伪金丝桃素、贯叶金丝桃素、槲皮素和异鼠李素等5种成分的生物利用度。     

贯叶金丝桃黄酮醇类成分研究

贯叶金丝桃 Hypericum perforatum L.为藤黄科金丝桃属植物。具有止血消肿 ,清热解毒的功效 [1] 。在国外贯叶金丝桃的研究主要集中在抗抑郁作用及抑制 HIV的作用。一直以来认为金丝桃素(hypericin)是贯叶金丝桃抗抑郁的主要活性成分 ,但近期有报道其黄酮类成分也显示有抗抑郁的活性 [2 ] 。在贯叶金丝桃中黄酮类成分高达 9.2 5% [3] ,而且黄酮类比金丝桃素类成分要稳定得多 ,因此具有好的开发前景。我们对贯叶金丝桃化学成分进行了研究 ,从丙酮部分经硅胶柱层析分离得到 4个黄酮醇类化合物 ,经光谱鉴定为蓄苷 (avicularin,quercetin- 3…     

聚合物纳米微球制备金丝桃素

目的：利用聚合物纳米微球材料分离纯化金丝桃素。方法：采用PEK微球对金丝桃素提取物进行富集,运用PDCX微球纯化,通过ODS柱制备高纯度金丝桃素,通过单因素试验优选纯化工艺。采用HPLC测定金丝桃素含量,流动相甲醇-0.006 mol·L^-1 Na₂HPO₄（7：1,加H₃PO₄调pH 6.5）,检测波长590 nm。结果：PEK微球对金丝桃素的静态饱和吸附量8.5 mg·g^-1,解析率89.6%,经PEK微球动态柱富集的金丝桃素样品纯度3.2%,回收率89.9%;经PDCX微球纯化后,金丝桃素纯度33.0%,回收率80.1%;经ODS柱制备的金丝桃素纯度达91.6%,回收率86.7%。结论：该制备工艺高效、环保、经济,适用于金丝桃素等不稳定性成分的分离纯化。     

冬凌草细胞悬浮培养技术研究

目的:建立冬凌草细胞悬浮培养体系。方法:采用冬凌草愈伤组织为原材料,以MS培养基为基础培养基,分别对激素种类及浓度、愈伤组织接种量、继代培养起始密度以及最佳继代时间进行考察,绘制悬浮细胞生长曲线。结果:冬凌草细胞悬浮培养最佳培养基配方为MS、0.5mg·L~(-1)NAA、0.5 mg·L~(-1)2,4-D、0.5 mg·L~(-1)6-BA,愈伤组织接种量为60 g·L~(-1),继代培养起始密度为液体培养基量的四分之一,最佳继代时间为8天。结论:冬凌草细胞悬浮体系的建立,原材料愈伤组织至关重要,只有获得较为疏松长势良好的颗粒状愈伤组织才能用以建立细胞悬浮培养体系,因此在对愈伤组织的继代培养过程中,如何降低愈伤组织褐化率,促进愈伤组织生长有待于进一步探索。     

Cytotoxic activity of Hypericum perforatum L. on K562 erythroleukemic cells: differential effects between methanolic extract and hypericin

The influence of a methanolic extract of Hypericum perforatum L. and of purified hypericin has been comparatively tested on the growth of a human erythroleukemic cell line (K562). After 1 h exposure to increasing concentrations (as hypericin content) of both agents in the dark, leukemic cells were grown for 24 h and 48 h. The effects on cell growth were determined by viable cell count, flow cytometry analysis and fluorescence microscopy. Our data show that purified hypericin has only a weak inhibitory effect on cell growth and no effect in inducing apoptotic cell death. In contrast, the Hypericum flower extract shows a significant concentration-dependent and long-lasting inhibition of cell growth, and induces apoptotic cell death. This work con fi rms the interesting role of Hypericum perforatum L. in cancer therapy and strongly supports the hypothesis that agents, other than hypericin, present in the total extract can impair tumor cell growth acting separately or in a combined manner.     

响应面法优化贯叶连翘中金丝桃素超声提取工艺

目的:以贯叶连翘为原料,应用响应面法探求超声提取金丝桃素的最优工艺。方法:在对影响金丝桃素提取率的单因素系统考察的基础上,采用部分析因设计分析筛选以上因素,并应用响应面法对其显著因素进行研究和优化。结果:建立了超声提取贯叶连翘中金丝桃素的工艺数学模型。超声提取金丝桃素的最佳工艺条件为超声提取时间36.15 min,丙酮/乙醇混合提取溶剂中丙酮体积分数为68.14%,液料比为11.87 mL.g-1,此时金丝桃素提取率理论值可达到1.454%。经验证,提取率为1.44%,与理论值相符。主效应关系为超声提取时间>丙酮体积分数>液料比。结论:通过以上试验得到的提取工艺条件可靠,金丝桃素提取率远高于常规提取方法,可为金丝桃素的工业化放大生产提供了一定的理论依据。     

植物生长物质对红景天愈伤组织诱导和培养的影响

目的:考察植物生长物质对四裂红景天愈伤组织诱导和培养的影响并分析愈伤组织中红景天苷含量。方法:运用正交设计实验,在MS固体培养基中添加不同种类、不同含量的植物生长物质,进行愈伤组织的诱导和培养,并用HPLC检测愈伤组织中红景天苷的含量。结果:培养基中含有2,4-D1mg·L^-1,NAA2mg·L^-1,6-BA0.5mg·L^-1,KT0.1mg·L^-1时,愈伤组织诱导效果最好,诱导率为83.3%。当生长物质配比为2,4-D1mg·L^-1,6-BA0.1mg·L^-1和KT0.5mg·L^-1时,最适于愈伤组织的培养,培养30d后干重达11.77g·L^-1,红景天苷的含量为干重的0.28%。结论:红景天愈伤组织在诱导和培养2个阶段所需的生长物质种类和含量有很大差异;诱导的愈伤组织能够合成红景天苷。     

夏枯草愈伤组织诱导和植株再生技术的研究

目的:探讨夏枯草愈伤组织诱导和植株再生条件。方法:采用正交试验法研究不同外植体、蔗糖、植物生长物质及其配比对夏枯草愈伤组织诱导和分化的影响。结果和结论:以叶片为外植体诱导愈伤效果最好,茎段次之,叶柄不能诱导出愈伤组织;6-BA是影响夏枯草愈伤组织形成的主要因素;诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+6-BA 3.0 mg.L-1+NAA 0.1mg.L-1+2,4-D 0.5 mg.L-1+蔗糖3%;宜于愈伤组织分化的培养基为1/2 MS+6-BA 3.25 mg.L-1+NAA1.25 mg.L-1+蔗糖2%;最佳生根培养基:MS+IBA 1.0 mg.L-1+蔗糖3%。     

喜树愈伤组织的诱导与培养

目的：研究喜树叶片、茎段和带芽茎段的愈伤组织诱导效果以及愈伤组织继代培养条件。方法：以MS为基本培养基,附加不同质量浓度6-BA,NAA和2,4-D,通过正交试验研究愈伤组织继代培养的适宜条件。结果与结论：MS+6-BA 2 mg·L^-1+NAA 2 mg·L^{-1+2,4-D 2 mg·L-1的诱导效果较好,容易诱导出愈伤组织,其中叶片的诱导率可达80%以上。愈伤组织在MS+６-BA 1 mg·L-1+2,4-D 1 mg·L-1培养基上继代培养生长快速,疏松易分散,适合用于细胞培养。}     

不同光照强度对虎杖愈伤组织的影响

目的：研究光照强度对虎杖愈伤组织的诱导形成及其白藜芦醇含量的影响。方法：分别以虎杖茎段、叶片为外植体,在不同光照强度下诱导和培养愈伤组织,对愈伤组织生长状况进行观察统计,HPLC测定其中白藜芦醇的含量。结果：光强为1 340～1 560 lx条件下诱导的茎段愈伤组织诱导形成较早,生长速度适宜,维持时间长,且其白藜芦醇质量分数最高,鲜茎中为18.350 μg·g^-1,干茎中为140.074 μg·g^-1,高于同期野生品。结论：不同光照强度下,虎杖愈伤组织的诱导和形态有差别,适当的光照强度能促进虎杖愈伤组织中白藜芦醇的合成。     

培养基中碳源和氮源对甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物合成的影响

目的：研究碳源和氮源对甘草愈伤组织生物量积累和黄酮类化合物形成的影响。方法：在培养基中添加不同质量分数的蔗糖和果糖以及不同比例的NH⁺₄和NO^-₃,进行甘草愈伤组织的诱导和培养,并用HPLC检测愈伤组织中黄酮类化合物的含量。结果：2种碳源中,甘草愈伤组织生物量积累和黄酮类化合物合成均以果糖为碳源时高。在用2%果糖作为碳源时,培养物中5种黄酮类化合物的含量总和是3%蔗糖作为碳源的2倍。果糖作为碳源,在2%～6%时,随着质量分数的增加,培养物中5种黄酮类化合物的含量总和呈下降趋势,但其中甘草查尔酮的含量却增加5倍以上。硝态氮有利于甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物的积累。当NH⁺₄/NO^-₃浓度比例为1/2时,甘草愈伤组织中5种黄酮类化合物含量的总和达最大值,为151.47 μg·g^-1。铵态氮抑制甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物的形成。结论：果糖作为碳源最有利于甘草愈伤组织生物量积累和黄酮类化合物的生物合成。硝态氮有利于甘草愈伤组织生长和黄酮类化合物的积累。