免疫组化法检测解脲脲原体的研究

目的　建立检测解脲脲原体 (UU)的实验方法。方法　应用亲和素 生物素 酶复合物技术 (ABC法 )观察UU感染者 ,并与培养法和PCR法相比较。结果　ABC法对 75例临床标本的检出率为 5 2 % ,与培养法和PCR法比较 ,在统计学上差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　ABC法可作为诊断UU感染的快速检测方法 ,在临床应用中有一定实用价值。     

解脲脲原体感染的检测与体外耐药性分析

目的探讨本地区解脲脲原体(Uu)感染及耐药情况,指导临床合理用药。方法对临床送检的531份标本进行Uu培养、计数、鉴定和药敏试验;对775份标本进行荧光定量PCR(FQ-PCR)法和培养法检测Uu。结果FQ-PCR法检出Uu阳性339例,阳性率43.74%。培养法检出Uu206例,阳性率38.79%。Uu对9种抗菌药物的耐药率最高为环丙沙星(CIP)80.10%,最低为交沙霉素(JOS)0.00%,敏感率最高为原始霉素(PRI)98.54%。结论Uu用两种方法检测均可有效检出。培养法能提供药敏结果,更有利于临床治疗。药敏结果提示本地区Uu感染经验用药可选择交沙霉素和强力霉素。     

128例原发性不育患者精液解脲脲原体的检测

采用解脲脲原体检测试剂对１２８例原发性不育患者的精液进行解脲脲原体病原学诊断，阳性率为３１．２５％（４０／１２８）。本文结果提示在山西省大同地区，解脲脲原体感染可能是引起男性原发性不育的重要原因之一。     

解脲脲原体套式（Nested）PCR检测研究

本文报告解脲脲原体（ＵＵ）的套式（ＮＥＳＴＥＤ）ＰＣＲ检测方法。经方法学考核表明，本法的特异性、灵敏度以及试剂的稳定性和对临检标本的顺应性均较好。９３份各种生殖道炎症患者之宫颈拭子标本套式ＰＣＲ检出２１份阳性（阳性率２２．６％），而市售ＰＣＲ试剂盒仅检出１份阳性（阳性率１．１％）。前者阳性检出率明显高于后者（Ｐ＜０．０１）。     

输卵管妊娠患者宫颈拭子解脲脲原体套式PCR检测

近年来，有关解脲脲原体（ＵＵ）感染与盆腔炎症性疾病（ＰＩＤ）的关系报道较多。但生殖道ＵＵ感染与输卵管妊娠的关系研究报道甚少。为此，我们应用更为灵敏、特异的套式ＰＣＲ技术检测了１７例输卵管妊娠患者的宫颈拭子ＵＵ－ＤＮＡ，并以同期５３６例非输卵管妊娠妇科住院病人宫颈拭子为对照组。     

PCR法解脲脲原体分群和四环素耐药检测

目的 建立解脲脲原体(Ureaplasma urealyxicum，Uu)的分群和四环素耐药PCR检测方法。方法 1．根据Uu的多带抗原(multi—banded antigen，MBA)基因序列自行设计引物(P15′-ATT，TGC，AAT，CTT，TAT，ATG，TT；P25′-TTC，AGC，TGA，TGT，AAG，TGC，AGC，ATT，AAA，T)，并建立分群PCR反应体系。2．根据TetM基因序列自行设计引物(P15′-TTA，TCA，ACG，GTT，TAT，CAG，G；P25′-GCT，ATA，TAT，GCA，AGA，CG)，并建立四环素耐药反应体系。结果 1．MBA基因PCR能将Uul4个血清型正确分为二个生物群，其中生物一群(1、3、6、14等4个血清型)出现404bp的产物带，生物二群(2、4、5、7、8、9、10、11、12、13等10个血清型)出现448bp的产物带。60株Uu临床分离株经MBA基因PCR检测，生物一群53例、生物二群6例、生物一／二群同时存在1例。2.Uu典型株14个血清型，TetM基因PcR扩增的不能出现任何条带；60株Uu临床分离株经TetM基因PCR检测41例出现目的条带。结论 PCR法进行Uu生物分群和四环素耐药检测简单、快速，为相关研究提供了手段。     

解脲脲原体生物膜胞外多糖的检测

目的 研究解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)4个型别标准株在体外形成的生物膜之胞外多糖的分布及结构成分.方法 将Uu标准株Parvo群中4、8血清型和T960群中3、14血清型进行体外生物膜培养后,扫描电镜下观察生物膜组成及结构,并在FITC-ConA/PI及ECA/PI双荧光染色后进行激光共聚焦显微镜观察及测定平均荧光强度.秩和检验及t检验分别比较两种荧光标记物、两生物群的总体平均荧光强度的差异.结果 4个型别Uu标准株均可在体外形成生物膜,生物膜结构主要呈网格状,胞外物质占大部分比例.在激光共聚焦显微镜下,Uu生物膜胞外多糖均可被FITC-ConA和ECA染色,FTTC-ConA呈网格状分布,ECA小片状聚集分布.FITC-ConA的总体平均荧光强度较ECA高,差异有统计学意义(P＜0.001).结论 Uu体外培养生物膜主要呈网格状结构,胞外多糖中含有葡萄糖、甘露糖、半乳糖、N-乙酰葡聚糖残基,并以葡萄糖、甘露糖残基为主.     

妇科疾病中的解脲脲原体、沙眼衣原体Nesed-PCR检测

目的探讨UU、CT在本地区妇科疾病中的发病率及其致病作用,方法收集535例妇科阴道炎、不孕症、宫颈炎、附件炎等疾病患者的阴道分泌物,应用nested PCR(nPCR)技术检测解脲脲原体(UU)及沙眼衣原体(CT)核酸.结果393人检测解脲脲原体(UU),UU-DNA阳性192例(48.8%);142人检测沙眼衣原体(CT),CT-DNA阳性32例(22.5%).结论解脲脲原体(UU-DNA)、沙眼衣原体(CT-DNA)与妇科疾病的发生关系密切,特别是阴道炎的妇科患者.     

大同地区输卵管性不孕妇女解脲脲原体与沙眼衣原体的检测报告

输卵管性不孕在不孕症中占首位。 70年代以来 ,性传播疾病与输卵管性不孕的关系逐渐被重视。近来的研究表明 ,性传播疾病中的病原体淋病双球菌、某些衣原体和支原体对妊娠结局尤为重要。本研究通过对不孕患者的宫颈分泌物进行沙眼衣原体 (ＣＴ)和解脲脲原体 (ＵＵ)检测 ,现将结果报道如下。资料与方法1.研究对象 :1997年 5月至 2 0 0 0年 10月在我院不孕症门诊就求诊的原发不孕和继发不孕患者 2 86例 ,作输卵管造影 ,输卵管通畅 113例 ,输卵管梗阻 173例。年龄 2 6岁至 4 3岁 (平均 2 8岁 ) ,不孕时间 1年至 8年 (平均 4 5年 )。2 .方法 :(…     

抗解脲脲原体单克隆抗体的制备

作者用提纯的解脲脲原体抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞FO融合,获得3株稳定分泌抗解脲脲原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备了小鼠腹水抗体,并对杂交瘤细胞株进行了鉴定。用ELISA法测定该抗体腹水效价为1:64000～1:2048000,1F9、2B2抗体的Ig类型为IgG1,5H1为IgG2b。建立的3株能稳定分泌抗解脲脲原体的McAb杂交瘤细胞林,经液氮冻存后复苏,其分泌抗体能力不受影响。     

抗解脲脲原体单克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备抗解脲脲原体(Uu)的单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法:用灭活的Uu免疫BALB/c小鼠,采用常规的细胞融合技术制备抗Uu的mAb。以ELISA和免疫组织化学染色法对mAb的亚类、效价及特异性进行鉴定。结果:获得3株抗Uu的mAb,均为IgG2b亚类。3株mAb的腹水ELISA效价为10-4~10-5。有2株只与Uu产生反应而不与肺炎支原体、淋球菌(gonococcus/GC)及豚鼠气单胞菌(A.cariae)等病原体发生交叉反应。免疫组化结果表明,mAb能和解脲脲原体特异性结合。结论:制备了3株具有较高的特异性和效价的抗UumAb,为Uu的免疫学检测及相关研究提供重要的制剂。     

实时荧光定量PCR检测泌尿生殖道患者尿液解脲脲原体

目的应用实时荧光核酸恒温扩增检测技术（SAT）检测泌尿生殖道患者尿液解脲脲原体（UU）,并评价其敏感性和特异性。方法对140例疑似泌尿生殖道感染患者的拭子和尿液样本,分别采用培养法、SAT进行解脲脲原体检测,检测结果有差异的标本用实时荧光定量PCR法对拭子进行复测,根据实验结果评估SAT检测尿液UU的敏感性和特异性。结果 140例疑似患者试子培养和尿液SAT检测阳性率均为60%,两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）,其中16例培养结果与SAT检测结果不一致,8例培养法阳性、SAT阴性的拭子PCR结果复测阳性;8例培养法阴性、SAT阳性的拭子标本PCR结果 4例阴性、4例阳性,结合培养法结果和PCR结果作为＂扩大金标准＂,得出SAT对尿液检测的敏感性为95.5%、特异性为100%。结论 SAT检测泌尿生殖道患者尿液UU具有取样方便,检测快速、准确等优点,适用于临床实验室泌尿生殖道UU的检测。     

生殖支原体及解脲脲原体对妊娠的影响研究

目的：进一步探讨生殖支原体（Mg)及解脲脲原体（Uu)对妊娠的影响。方法：应用灵敏、特异的套式PCR（nPCR）技术对219例胎盘组织进行Mg、Uu检测,并对Mg、Uu nPCR阳性产物各1例进行了DNA序列测定以验证。结果：早产、胎膜早破者的Mg、Uu,胎儿窘迫者的Mg之阳性检出率均明显高于正常妊娠者（P均小于0．01）;另外,上胎流产、死胎者和本次妊娠3．00以上,呈强关联。结论：Mg与Uu一样,围产期感染可致不良妊娠结局。     

广州地区新生儿解脲脲原体感染及高危因素调查

对１４１例新生儿做鼻咽部及尿道口分泌物的解脲脲原体（ＵＵ）培养，结果显示：无症状正常组的新生儿（ＵＵ的阳性率为２０％，患病组的新生儿ＵＵ的阳性率为４５％，两者差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。新生儿出生前其母有胎膜早破的，其ＵＵ阳性率为２５％，出生前其母无胎膜早破的新生儿ＵＵ阳性率为１９％，两者差异显著（Ｐ＜０．０５）。本文认为ＵＵ是引起新生儿感染的重要病原体之一。     

RAPD基因指纹图谱在解脲脲原体分型研究中的应用…

采用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术，以美国Ｏｐｅｒｏｎ公司生产的ＯＰＬ１￣２０十本脱氧寡核苷酸为引物，对解脲脲原体８和１０血清型标准株基因指纹图谱进行了构建。通过比较发现，两型解脲脲原体ＤＮＡ间存在同源性和多态性。初步研究结果表明，ＲＡＰＤ可用于解脲脲原体分型。     

解脲脲原体培养法与荧光定量PCR检测结果对比研究

目的对解脲脲原体液体培养法与荧光定量PCR进行方法学评估. 方法 322例病人标本进行液体微量培养与荧光定量PCR平行检测,采用UU-荧光定量PCR试剂盒,以PE 5700全自动分析仪进行检测和分析. 结果 UU-荧光定量PCR法与液体培养法的一致性系数Kappa=0.6825,χ2=3.843,p<0.05.液体培养法敏感性为0.874,特异性为0.815,准确性为0.841. 结论以荧光定量PCR检测解脲脲原体其敏感性、特异性、准确性均优于液体培养法.采用培养法应考虑恰当标本处理,选择优质的商品培养基以减少假阳性和假阴性的机会.     

解脲脲原体与男性不育及生殖道炎症关系的探讨

本文对218例男性精液解脲脲原体(ureaplasma Urealyticum,UU)分离培养,发现不育症组UU检出率56.8%,生殖道炎症组检出率45.0%,正常对照组检出率22.0%,不育组和炎症组与正常组之间存在非常显著性差异(P<0.01),分析结果,亦证明UU是导致男性不育及生殖道炎症的病因之一.     

解脲脲原体感染研究进展

解脲脲原体属于支原体科中的脲原体属,与男女性生殖道炎症、HIV感染、不孕不育、不良妊娠结局以及新生儿疾病等有关。该文从以上几个方面就解脲脲原体与人类健康的关系进行阐述。