谷氨酰胺对应激大鼠学习记忆的影响及其机制的研究

目的　观察谷氨酰胺 (Gln)对应激大鼠学习记忆的影响 ,并对其机制进行探讨。方法　Wistar大鼠 30只 ,随机分为三组 : 组为对照组 , 组为应激组 , 组为应激 +Gln组。其中 、 组饲以普通饲料 , 组给予补充 2 % Gln的饲料。以光电刺激作为应激条件 ,在 组和 组大鼠建立应激模型 ,用 Y-迷宫法对大鼠的学习记忆能力进行测定 ,并分别用放射性配基结合法、放射免疫法、荧光分光光度计法测定大鼠小脑中 γ-氨基丁酸 (GABA)受体、脑中胆囊收缩素 (CCK)、还原型谷胱甘肽 (GSH)的含量。结果　与 组相比 , 组大鼠在 Y-迷宫实验中的逃避时间延长 ,而 组与 组则无显著差异 ; 组大鼠小脑中 GABA受体水平、CCK含量均升高 ,而 GSH含量则降低 ,给予 Gln后可从一定程度上逆转上述改变。结论　心理应激可影响大鼠的学习记忆能力 ,而 Gln则有一定的改善作用 ,其机制可能是通过减轻应激所致的脑中GABA受体水平、CCK和 GSH含量的异常改变而发挥此作用     

鱼藤酮对大鼠纹状体谷氨酸-谷氨酰胺环路的影响

[目的]观察鱼藤酮（rotenone）对大鼠纹状体谷氨酸一谷氨酰胺环路代谢的影响。[方法]将24只SD大鼠随机分为正常对照组、溶剂对照组、2.0mg／kg和4.0mg／ks鱼藤酮染毒组。采用高效液相色谱法（HPLC）检测鱼藤酮染毒大鼠纹状体谷氨酸（glutamate,Glu）和谷氨酰胺（glutamine,Gin）含量;使用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法观察谷氨酰胺合成酶（glutamine synthetase,GS）基因表达的变化;采用分光光度法检测谷氨酰胺酶（phosphate activated glutaminase,PAG）与GS活性。[结果]与正常对照组比较,4.0mg／kg染毒组大鼠纹状体Glu含量明显升高（P〈0.01）,而Gin含量明显降低（P〈0.01）;4.0mg／kg染毒组GSmRNA表达明显增强（P〈0.05）;4.0mg／kg染毒组Gs活性却明显降低,PAG活性明显升高（P〈0.01）。[结论]鱼藤酮诱导大鼠纹状体Glu含量明显升高,可能是导致中脑神经元兴奋性损伤的的主要原因之一。     

慢性苯并[a]芘暴露对大鼠学习记忆及谷氨酸受体影响

目的 探讨慢性苯并[a]芘暴露对大鼠学习记忆损伤及代谢性谷氨酸受体的影响.方法 将40只SD大鼠按照体重随机分为对照组、苯并[a]芘低、中、高剂量组(1.0、2.5、6.25mg/kg),每组8只,腹腔注射染毒13周;用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,免疫印迹法(Western-blot)检测大鼠脑组织海马代谢性谷氨酸受体(mGluR1、mGluR2、mGluR3)表达.结果 与对照组比较,苯并[a]芘中、高剂量组大鼠平均潜伏期[(18.34±7.09)、(24.0±12.76)s]明显延长(P＜0.05),高剂量组目标象限停留时间[(29.00±3.64)s]与穿越平台次数[(4.11±1.36)次]明显减少(P＜0.01),随着染毒剂量增加,大鼠海马组织mGluR1、mGluR2蛋白表达增高,高剂量组大鼠海马组织mGluR1、mGluR2蛋白表达[(1.09±0.29)、(0.85±0.14)]明显高于对照组[(0.56±0.13)、(0.54±0.15)],差异均有统计学意义(P＜0.05),mGluR3蛋白表达在各组之间差异不明显.结论 慢性苯并[a]芘暴露可导致大鼠大脑海马组织代谢性谷氨酸受体表达增高,这可能是引发学习记忆能力受损的机制之一.     

注意缺陷多动障碍模型大鼠谷氨酸和谷氨酰胺检测结果分析

目的:观察ADHD模型大鼠血清和脑内谷氨酸、谷氨酰胺含量变化,为研究ADHD的发病机制提供依据。方法:采用丹酰氯柱前衍生化-高效液相色谱法测定自发性高血压大鼠和正常大鼠血清和脑内谷氨酸、谷氨酰胺含量。结果:模型组血清谷氨酸低于对照组(P0.05),模型组脑组织谷氨酸显著高于对照组(P0.05),谷氨酰胺显著低于对照组(P0.05)。结论:谷氨酸、谷氨酰胺在ADHD的发病中可能起到一定的作用。     

亚慢性砷暴露对小鼠脑谷氨酸—谷氨酰胺循环通路的影响

目的 探讨亚慢性饮水砷暴露对小鼠脑谷氨酸-谷氨酰胺循环通路的影响及其可能的机制.方法 将32只健康雌性昆明种小鼠随机分为4组,每组8只.3个染砷组以自由饮水方式分别暴露于水砷浓度为25、50和100 mg/L的亚砷酸钠水溶液,连续染砷6周.对照组饮蒸馏水.分别检测小鼠血和脑中无机砷(inorganic arsenic,iAs)、一甲基胂(monomethylarsonic acid,MMA)和二甲基胂(dimethylarsenic acid,DMA)的含量及脑中谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS)、谷氨酰胺酶(phosphate activated glutaminase,PAG)和超氧化物歧化酶(superoxide dimutase,SOD)的活力与谷氨酸(glutamate,Glu)和脂质过氧化物(lipidperoxide,LPO)的含量.结果 小鼠血和脑中iAs、MMA和DMA含量均随染砷剂量的增加而升高.各染砷组小鼠脑中GS和PAG活力及Glu含量与对照组比较均升高,50 mg/L染砷组GS活力、25和50mg/L染砷组PAG活力及100mg/L染砷组Glu含量与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),25mg/L染砷组PAG活力与100mg/L染砷组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).各染砷组小鼠脑中SOD活力与对照组比较也升高,且50mg/L染砷组的SOD活力与对照组和25 mg/L染砷组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).各染砷组的LPO含量与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 血中的各形态砷化物均可透过成年鼠的血脑屏障进入脑组织.血和脑中的砷形态构成均以有机砷为主,但与血中砷形态的构成不同,脑中砷形态构成以DMA为主,iAs次之,MMA极少.砷暴露可引起脑中谷氨酸-谷氨酰胺循环通路中两个关键代谢酶GS和PAG活力的异常,并导致Glu代谢的异常.另外,本研究结果提示,砷暴露可引起超氧阴离子的含量升高,并导致了SOD活力的代偿性升高.     

海马代谢型谷氨酸受体与学习记忆的关系研究进展

海马是学习记忆的关键部位.海马部位突触传递效能长时程增强的发现及其形成机理的探讨,使学习记忆的研究提高到细胞和分子水平.以往研究多认为海马离子型谷氨酸受体与长时程增强的诱导有关,而海马代谢型谷氨酸受体在学习记忆中的作用较少被研究和提及.作者总结了近年来国内外该领域研究的最新进展,以探讨海马代谢型谷氨酸受体参与学习记忆的神经机制.     

慢性铅中毒对大鼠学习记忆的影响

[目的]研究不同浓度醋酸铅染毒对大鼠学习记忆的影响,探讨其可能作用机制。[方法]40只Wistar大鼠随机分为4组:正常组(双蒸水,A组),高铅浓度组(0.2%,B组),中铅浓度组(0.1%,C组),低铅浓度组(0.05%,D组),各组大鼠分别自由饮用不同浓度的醋酸铅水溶液2个月;分光光度法检测脑组织匀浆液中乙酰胆碱酯酶(AchE)的活性;Morris水迷宫法研究铅中毒对大鼠学习记忆的影响。[结果]与A组大鼠比较,随染铅剂量增加B、C、D组大鼠脑组织中AchE活性显著下降(P﹤0.01、P﹤0.05),水迷宫实验结果提示,B、C组大鼠在Morris水迷宫内寻找隐蔽平台所需的时间(潜伏期)比A组大鼠明显延长(P﹤0.01、P﹤0.05),D组大鼠具有延长趋势但与A组大鼠比较差异无统计学意义(P﹥0.05)。[结论]铅中毒能破坏记忆性神经递质乙酰胆碱的关键酶,损伤大鼠的学习记忆能力。     

慢性铅接触对大鼠学习和记忆的影响

目的　观察长期低铅暴露对大鼠学习及记忆功能的影响并探讨其可能的机理。方法　选择刚断乳的Wistar大鼠 2 0只 ,随机分为实验组 (n =13)和对照组 (n =7) ,分别饮用 0 0 5%醋酸铅水溶液和蒸馏水。饲养10 0～ 110d后用Y迷宫检测分辨学习及记忆能力 ,然后取血和脑行铅、钙含量的测定。结果　慢性低铅接触后大鼠的学习能力 (2 0 2 3± 5 52 )和记忆保持百分数 (6 4 17± 9 92 )均显著低于正常对照组 (分别为 13 86± 1 95,86 6 7± 5 16 ) ,(P <0 0 1,t =2 95,2 98)。染铅大鼠血铅 (0 399± 0 82 ) μg/ml、脑铅 (2 189± 0 818) μg/g湿重 ,浓度均显著高于对照组 (0 0 4 93± 0 0 12 μg/ml,0 6 9± 0 0 8μg/g湿重 ) ,(P <0 0 1,t =10 94和 4 4 1) ;而两组间血钙和脑钙差异无显著性。学习记忆能力与血铅、脑铅含量有关。结论　慢性铅接触可损害大鼠的学习记忆功能 ,铅通过血脑屏障沉积于大脑并与钙离子拮抗 ,干扰了细胞内的钙稳态 ,是造成脑损害的机制之一。     

锌对大鼠学习记忆影响的研究

通过行为观察、脑内电活动记录和海马组织结构观察，研究生物体内缺锌及过量锌对学习记忆影响。结果表明，低锌和锌过量组大鼠穿梭箱主动回避反应（ＡＡＲ）习得率、海马突触电位效应均差于常锌组。电镜提示，（１）低锌组表现为突触内突触小泡减少；（２）过量锌组表现为神经元、胶质细胞和突触呈不同程度变性。提示，生物体内缺锌及过量补锌均可导致学习记忆障碍。     

亲代谢型谷氨酸受体5在Homer 1a RNA干扰大鼠学习记忆障碍中的作用

目的 Homer 1a RNA干扰(RNA interference,RNAi)后的Sprague Dawley (SD)大鼠在Morris水迷宫中表现学习记忆能力障碍,本研究旨在通过检测Homer 1a RNAi后大鼠不同脑区亲代谢型谷氨酸受体5(metabotropic glutamate receptor 5,mGluR 5)的表达情况,来初步探讨Homer 1a RNAi致大鼠学习记忆障碍的分子机制。方法 将24只SD大鼠随机分为两组: Homer 1a RNAi组(RNAi组,n=12)和对照组(Nc组,n=12),运用侧脑室注射技术,分别向两组大鼠的侧脑室注射针对Homer 1a 的RNAi慢病毒和无义病毒,等待病毒起效时间7 d,完成相应的行为学检测(Morris水迷宫)后,利用荧光定量PCR 和Western blot 技术检测不同脑组织(前额叶、纹状体、海马)mGluR5 mRNA 和蛋白表达情况。 结果 RNAi组大鼠纹状体和海马mGluR5 mRNA和蛋白表达均较对照组显著降低(纹状体:mRNA t=6.67,蛋白t=3.10;海马:mRNA t=3.08;蛋白t=2.89,P值均<0.05或<0.01),前额叶mGluR5 mRNA和蛋白表达较对照组差异无统计学意义(mRNA t=1.58,蛋白t=1.66,P值均>0.05)。 结论 Homer 1a RNAi后大鼠脑组织Homer 1a相关基因mGluR5表达下调,提示mGluR5可能作为Homer 1a的下游基因,参与Homer 1a RNAi后大鼠学习记忆的损伤过程。     

砷对仔代大鼠神经行为和学习记忆功能影响

目的研究饮水砷暴露对大鼠仔鼠神经行为发育和学习记忆功能的影响.方法雌性大鼠于受孕后第6d开始以自由饮水方式分别暴露于10,50和100mg/L的NaAsO2水溶液,连续染毒直到仔鼠出生后第42d.观察砷对仔代大鼠生理发育、神经行为发育及学习记忆能力的影响.结果 100mg/L砷剂量组仔鼠从出生后第12d起身长、体重明显低于对照组,但张耳、开眼、长毛、出牙、抬头、爬行、站立和行走等生理发育指标与对照组相比差异无统计学意义.在神经行为测试中,100mg/L砷剂量组仔鼠尾部悬挂、听觉惊愕和视觉定位等指标阳性率显著低于对照组,出现神经行为发育迟缓.方位水迷宫实验中,各砷暴露组仔鼠在记忆获得测试和记忆保留测试中能正确寻找隐蔽平台所需训练次数显著多于对照组,说明砷对仔鼠短时记忆和长时记忆均有一定影响.结论饮水砷暴露可对仔鼠神经行为和学习记忆产生毒性作用.     

氯化锂对大鼠体重及学习记忆的影响

目的探讨锂对大鼠脑发育、体重及学习记忆能力的影响。方法将大鼠随机分为对照组和4个不同剂量氯化锂(LiCl)组,分别给予普通饲料和含LiCl(3,30,300,3000mg/kg)的饲料,喂养60d。测量大鼠体重和进行Y-迷宫实验及还原型辅酶Ⅱ(NADPH)-d组织化学染色方法,观察各组大鼠之间体重增量,学习记忆能力和大脑皮层一氧化氮合酶(NOS)阳性细胞数的差别。结果3及30mg/kgLiCl组大鼠体重增量和Y-迷宫实验成绩均明显好于正常对照组(P<0.01),300及3000mg/kgLiCl组大鼠则明显差于对照组(P<0.05)。30及300mg/kgLiCl组大鼠大脑皮层NOS活性较对照组增强,3000mg/kgLiCl组则明显减少(P<0.05)。结论较低浓度的锂能促进大鼠体格发育,提高学习记忆能力,而高浓度锂会产生负面影响。     

大豆异黄酮对缺氧大鼠学习记忆能力影响

目的观察大豆异黄酮对急性低压缺氧大鼠学习记忆能力影响,初步探究其作用机制。方法低压氧舱建立大鼠缺氧模型,分别给予高、中、低剂量大豆异黄酮,Morris水迷宫观察大鼠学习记忆能力,生化法检测大鼠海马匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平,免疫组化法观察海马细胞Bcl-2与caspase-3蛋白表达。结果模型组大鼠海马SOD活力与 MDA含量分别为(76.04±16.57)U/mL、(0.87±0.15)nmol/mL,Bcl-2、caspase-3蛋白表达分别为(0.84±0.15)、(0.64±0.10),与对照组比较,大鼠学习记忆能力明显降低,海马SOD 水平与Bcl-2表达量均降低(P<0.01),MDA水平与caspase-3表达量均增加(P<0.01);高剂量大豆异黄酮组大鼠海马SOD与MDA分别为(109.43±23.73)U/mL、(0.75±0.11)nmol/mL,Bcl-2、caspase-3分别为(0.99±0.17)、(0.49±0.08),与模型组比较,SOD水平与Bcl-2表达量有增加趋势,MDA含量与caspase-3表达量有降低趋势。结论大豆异黄酮可增强低压缺氧大鼠学习记忆能力,其机制与增加缺氧大鼠海马组织抗氧化能力,调节凋亡通路蛋白表达有关。     

不同妊娠期振动对SD大鼠子代空间学习记忆的影响

目的 探讨不同妊娠期振动对大鼠子代空间学习记忆的影响。方法 分别在SD大鼠妊娠的1~7 d、8~14 d、15~21 d施加强弱交替的振动刺激,在子鼠60 d使用Barnes 迷宫测试其空间学习记忆能力,比较各组间空间学习记忆的差异。结果 学习过程:1)探索路程:妊娠早期振动组在第4天,妊娠中期在第1天,妊娠晚期在第1天高于对照组,妊娠晚期在第2、3天低于对照组(P＜0.05);2)探索平均速度:妊娠早期在第2天,妊娠中期在第1、2天,妊娠晚期在第1、2、3、7、8天均低于对照组(P＜0.05);3)错误探索时间:妊娠早期在第1、3、4、7、8天,妊娠中期在第3、4、5、8天高于对照组,妊娠晚期在第2、6天低于对照组(P＜0.05);4)首次探索目标洞潜伏期:妊娠中期在第5天高于对照组(P＜0.05)。记忆过程:妊娠早期振动组的错误探索时间明显高于对照组(Mann-Whitney U=43.00,P=0.000),妊娠晚期振动组的探索路程(Mann-Whitney U=150.00)、平均速度(Mann-Whitney U=150.00)和错误探索时间(Mann-Whitney U=164.50)明显低于对照组(P<0.05或<0.01)。结论 妊娠早期振动损害子代的空间学习记忆能力,妊娠晚期振动可能促进子代的空间学习记忆能力,而妊娠中期仅损害子代的空间学习能力。     

间歇性重度低氧对大鼠学习记忆影响

目的 建立不同暴露时间点大鼠间歇重度低氧模型,探讨间歇重度低氧对大鼠学习记忆功能的影响.方法 成年雄性W istar大鼠48只分为对照组和间歇性低氧组;采用低氧舱模拟5%间歇低氧环境.在间歇低氧2、4、6、8周采用Morris水迷宫检测学习记忆功能,苏木精-伊红(HE)染色观察海马区神经细胞形态变化.结果 与对照组比较,间歇性低氧组中神经细胞形态结构损伤明显,存活神经元密度(13.18±2.18)随低氧时间延长降低(P<0.05);低氧2、4、6、8周大鼠逃避潜伏期时间分别为(49.17±8.87)、(58.47±6.98)、(65.15±7.44)和(68.42±7.91)s,随低氧时间延长动物逃避潜伏期时间延长(P<0.5).结论 间歇性低氧可造成神经细胞损伤、学习记忆功能障碍,且随间歇性低氧时间延长而加重.     

纳洛酮对反复热性惊厥大鼠学习记忆的影响

目的 探讨纳洛酮对反复热性惊厥大鼠近期学习记忆的影响及可能神经机制。方法 采用热水浴诱导大鼠惊厥模型, 诱导21 d SD大鼠每天惊厥1次, 连续10次, 纳洛酮干预组(NT组, n=14)每次惊厥发作后立即腹腔注射纳洛酮(1mg/kg), 惊厥对照组(FS组, n=14)腹腔注射等体积的生理盐水, 正常对照组(NC组, n=12)置于37℃水浴中5 min后腹腔注射等体积生理盐水。观察惊厥发作潜伏期、级别和持续时间的差异;采用跳台和避暗试验测试近期学习记忆能力;HE染色观察海马神经元形态学改变;Timm染色观察海马苔藓纤维发芽状况。结果 1)NT组较FS组惊厥持续时间明显缩短(P<0.05), 级别显著降低(P<0.01), 而发作潜伏期两组差异无统计学意义(P>0.05);2) 跳台及避暗实验, FS组错误次数明显增多(P<0.01), 而NC组与NT组相比差异无统计学意义(P>0.05);24 h记忆成绩, FS组跳台及步入潜伏期明显缩短(P<0.05), 而NC组与NT组相比差异无统计学意义(P>0.05);3)HE染色显示NT组较FS组脑损伤的程度轻;4)Timm染色显示FS组DG区及海马CA3区Timm染色颗粒明显增加(P<0.01);NT组与FS组相比Timm染色颗粒明显减少(DG区P<0.01, CA3区P<0.05), 而NC组与NT组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 纳洛酮可减轻惊厥性脑损伤;可改善多次FS发作后的近期学习记忆能力减退, 降低海马苔藓纤维发芽程度, 这可能是纳洛酮改善反复FS后认知功能障碍的神经机制之一。     

地卓西平和牛磺酸对染锰大鼠纹状体Glu-Gln环路的影响

目的观察MK-801和牛磺酸对锰引起的纹状体谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酰胺酶(PAG)的活性变化和纹状体谷氨酸能神经元含量的影响。方法大鼠按体重随机分成4组,每组10只,第1组为对照组,皮下注射0.9%的氯化钠;第2组为单纯染锰组,皮下注射0.9%的氯化钠;第3、4组为预处理干预组,分别皮下注射0.3μmol/kg的MK-801和1mmol/kg的牛磺酸。皮下注射2h后,第1组腹腔注射0.9%的氯化钠,第2~4组腹腔注射200μmol/kg的氯化锰,染锰25天,MK-801和牛磺酸隔日注射一次,共预处理13次。最后一次染毒后24h,每组取4只,将大鼠用乙醚麻醉,经左心室灌流固定后采集脑组织,用SABC免疫组织化学法测定纹状体谷氨酸能神经元含量。将每组另外6只大鼠直接处死,切取脑纹状体,测定GS和PAG的活性。结果单纯染锰组与对照组比较,纹状体Aa(%)和IOD明显升高,P<0.01;纹状体GS活性降低,PAG的活性升高;MK-801预处理干预组与单纯染锰组比较,纹状体Aa(%)和IOD明显降低,GS活性明显升高,PAG活性降低;牛磺酸预处理干预组纹状体Aa(%)和IOD降低,GS活性明显升高。结论MK-801和牛磺酸对锰致大鼠Glu-Gln环路紊乱均有不同程度的拮抗作用。     

氟、砷染毒对大鼠空间学习记忆影响及机制

目的 探讨氟、砷及氟砷联合染毒对大鼠空间学习记忆及大脑皮质氧化损伤的影响.方法 初断乳SPF级雄性SD大鼠随机分4组,对照组(自由饮用蒸馏水),氟、砷处理组和氟砷联合染毒组(分别自由饮用120 mg/L氟化钠、70 mg/L亚砷酸钠、120 mg/L氟化钠+70 mg/L亚砷酸钠水溶液),染毒3个月;采用Morris水迷宫测试空间学习记忆能力,检测大鼠血清和大脑皮质总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力.结果 氟、砷处理组和联合染毒组第4d逃避潜伏期分别为[(10.34±1.18)、(11.76±1.23)、(13.78 ±3.49)s],均高于对照组的(5.85±1.98) s(P ＜0.01);与对照组比较,染毒组大鼠首次到达平台时间明显延长,目标象限停留时间和穿越次数明显降低(P＜0.05);氟、砷处理组和联合染毒组大脑皮质T-AOC水平与GSH-Px活力分别为[(1.02 ±0.25)、(1.18 ±0.54)、(0.99±0.28) U/mgprot]和[(5.34±0.70)、(4.34±1.49)、(5.34±0.88) U/gprot],均低于对照组的(1.75±0.66)U/mgprot和(6.82±0.85) U/gprot;与对照组、氟处理组和联合染毒组比较,砷处理组大鼠大脑皮质SOD酶活力较低(P＜0.05);氟处理组和联合染毒组大脑皮质MDA含量均高于对照组(P＜0.05).结论 氟、砷及其联合作用可损害大鼠的空间学习记忆能力,其机制可能与大脑皮质氧化损伤有关.